目的:评估Nd：YAG钬激光下经尿道膀胱肿瘤整块切除术(ERBT)合红色诺卡菌细胞壁骨架注射液(N-CWS)膀胱灌注治疗非肌层浸润性膀胱癌(NMIBC)的临床疗效。方法:回顾性分析2015年2月至2019年3月于本院行Nd：YAG钬激光ERBT联合N-CWS膀胱灌注治疗的48例NMIBC患者的临床资料。结果:所有患者均顺利完成手术，手术时间为(17.0±9.5)min，留置导尿管时间为(6.7±1.7)d，病理报告显示肌层检出率为81.3%(39/48)，随访时间为9~58个月，失访3例，1例因其他疾病死亡。术后行N-CWS膀胱灌注治疗，灌注次数为(16±5)次。7例复发，总复发率为15.9%；术后无严重并发症。结论:应用Nd：YAG钬激光ERBT联合N-CWS膀胱灌注治疗NMIBC具有切割精确、创伤小、出血少、术后恢复快，术后复发率不高于常规疗法。

目的:评估外用红色诺卡菌细胞壁骨架（Nr-CWS）治疗子宫颈高危型人乳头状瘤病毒（HPV）持续感染的有效性及安全性。方法:本研究为前瞻性、随机、双盲、多中心临床试验。征集2017年12月至2020年12月于全国13家医院门诊确诊为常见14种高危型HPV亚型持续感染的患者共688例。将临床及病理确诊为子宫颈高危型HPV感染的患者，分为3个亚组，（1）第一亚组：单纯性高危型HPV感染持续12个月及以上者；（2）第二亚组：子宫颈上皮内瘤变（CIN）Ⅰ伴高危型HPV感染持续12个月及以上者；（3）第三亚组：CINⅡ或CIN Ⅲ（CINⅡ/Ⅲ）手术后高危型HPV阳性亚型与术前相同，且经阴道镜和子宫颈活检确诊为非CINⅡ及以上病变（CINⅡ +）者。3个亚组以2∶1随机分入试验组与对照组，试验组受试者于子宫颈局部使用Nr-CWS冻干粉，对照组使用不含Nr-CWS的安慰剂冻干粉。分别于治疗后的1、4、8、12个月进行治疗后疗效包括消除HPV的有效率及各型高危型HPV（主要为HPV 16、18、52、58型）转阴率的评估，并比较治疗前、后安全性指标的差异。 结果:（1）本研究共纳入子宫颈高危型HPV感染患者555例（试验组368例、对照组187例），其年龄为（44.1±10.0）岁。两组受试者的基线特征包括年龄、汉族占比、体重、高危型HPV亚型构成、各亚组占比分别比较，差异均无统计学意义（ P均>0.05）。（2）治疗后12个月，试验组和对照组受试者消除HPV的有效率分别为91.0%（335/368）和44.9%（84/187），两组比较，差异有统计学意义（ χ2=142.520， P<0.001）。治疗后12个月，试验组受试者HPV16、18、52、58型感染的转阴率分别为79.2%（84/106）、73.3%（22/30）、83.1%（54/65）、77.4%（48/62），对照组分别为21.6%（11/51）、1/9、35.1%（13/37）、20.0%（8/40），两组分别比较，差异均有统计学意义（ P均<0.001）。（3）试验组与对照组受试者在治疗前及治疗后1、4、8、12个月的生命体征（体重、体温、呼吸、心率、收缩压、舒张压等）、实验室常规指标（血、尿常规检查）分别比较，差异均无统计学意义（ P均>0.05）；两组受试者与试验药物相关的不良反应发生率比较，差异无统计学意义［分别为8.7%（32/368）、8.0%（15/187）； χ2=0.073， P=0.787］。 结论:外用Nr-CWS治疗子宫颈高危型HPV持续感染具有良好的疗效和安全性。

目的:探讨红色诺卡菌细胞壁骨架（Nr-CWS）对人中性粒细胞生物学功能的调节作用及其机制。方法:采用实验研究方法。2022年5―10月招募于苏州市体检中心体检的成年健康志愿者15名（男7名、女8名，年龄24~45岁），采集外周静脉血，采用免疫磁珠分选法提取中性粒细胞。将细胞分为不进行任何处理的正常对照组、仅用终质量浓度为60 ng/mL Nr-CWS处理的单纯Nr-CWS组、仅用终质量浓度1 μg/mL内毒素/脂多糖（LPS）刺激的单纯LPS组、用同前LPS刺激后再用Nr-CWS处理的LPS+Nr-CWS组。培养1 h，采用改良后的琼脂糖趋化模型检测中性粒细胞的趋化距离、趋化细胞百分比、趋化指数、最大趋化速度、趋化功能评分；采用流式细胞术检测发生吞噬的细胞占比与荧光强度，活性氧水平，颗粒蛋白CD35、CD66b、CD63的蛋白表达水平，以及细胞培养上清液中炎症因子白细胞介素2（IL-2）、IL-4、IL-6、IL-10、IL-17A、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、γ干扰素浓度。以上实验各组样本数均为15。对数据行析因设计方差分析与独立样本 t检验。 结果:培养1 h，正常对照组、单纯Nr-CWS组、单纯LPS组、LPS+Nr-CWS组细胞趋化功能评分分别为15.0、（14.5±0.5）、（1.5±0.5）、（12.0±1.5）分；与正常对照组比较，单纯LPS组与LPS+Nr-CWS组细胞趋化距离、趋化细胞百分比、趋化指数、最大趋化速度与趋化功能评分均显著降低（ t值分别为18.36、18.88、54.28、18.36、46.77，10.58、14.74、6.84、10.58、4.24， P<0.05）；与单纯LPS组比较，LPS+Nr-CWS组细胞上述5项趋化功能指标均显著升高（ t值分别为11.47、14.65、11.62、11.47、13.75， P<0.05）。培养1 h，与正常对照组比较，单纯Nr-CWS组发生吞噬的细胞占比与荧光强度均显著升高（ t值分别为6.86、6.73， P<0.05），单纯LPS组（ t值分别为7.35、22.72， P<0.05）与LPS+Nr-CWS组（ t值分别为21.37、13.10， P<0.05）发生吞噬的细胞占比与荧光强度均明显降低。培养1 h，与正常对照组比较，单纯LPS组细胞活性氧水平显著升高（ t=6.64， P<0.05）；与单纯LPS组比较，LPS+Nr-CWS组细胞活性氧水平明显降低（ t=5.46， P<0.05）。培养1 h，与正常对照组比较，单纯LPS组与LPS+Nr-CWS组细胞CD35、CD66b、CD63蛋白表达均显著升高（ t值分别为16.75、17.45、10.82，5.70、19.35、15.37， P<0.05）；与单纯LPS组比较，LPS+Nr-CWS组细胞CD35、CD66b、CD63蛋白表达均明显下降（ t值分别为4.92、5.72、3.18， P<0.05）。培养1 h，与正常对照组比较，单纯LPS组细胞培养上清液中IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IL-17A、TNF-α、γ干扰素浓度均显著升高（ t值分别为22.10、9.50、7.21、10.22、24.88、8.43、47.48， P<0.05），LPS+Nr-CWS组细胞培养上清液中IL-6、IL-10、IL-17A、TNF-α、γ干扰素浓度均显著上升（ t值分别为4.68、5.12、8.02、5.58、7.13， P<0.05）；与单纯LPS组比较，LPS+Nr-CWS组细胞培养上清液中IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IL-17A、TNF-α、γ干扰素浓度均显著降低（ t值分别为5.39、2.83、5.79、2.90、5.87、4.88、39.64， P<0.05）。 结论:Nr-CWS能够提高正常状态下人中性粒细胞的吞噬能力，改善感染状态下人中性粒细胞的趋化功能及活性氧、脱颗粒蛋白、炎症因子水平，在先天免疫层面通过调控人中性粒细胞生物学行为，提高抗感染能力。

高危型人乳头状瘤病毒（HR-HPV）持续感染是唯一明确的子宫颈癌致病因素，并且与子宫颈上皮内瘤变（CIN）的发生密切相关。外用免疫调节剂（如外用红色诺卡菌细胞壁骨架）的出现有望改变子宫颈HR-HPV持续感染的治疗现状。本共识专家组由全国27位妇科临床专家、病毒学专家及流行病学专家组成，基于国内外研究证据和专家经验，经讨论就外用免疫调节剂的临床应用达成共识，推荐用于子宫颈单纯性HR-HPV持续感染、低级别鳞状上皮内病变［LSIL（CINⅠ）］合并HR-HPV持续感染以及高级别鳞状上皮内病变［HSIL（CIN Ⅱ/Ⅲ）］术后合并HR-HPV持续感染。

目的:探讨外用红色诺卡氏菌细胞壁骨架(Nr-CWS)治疗子宫颈锥切术后高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)持续感染的临床疗效.方法:选择2019 年1 月至2021 年1 月因HR-HPV感染引起子宫颈高级别上皮内病变(HSIL),于青岛大学附属青岛妇女儿童医院行子宫颈冷刀锥切术,术后6个月复查HR-HPV持续感染的69 例患者为研究对象,并随机分为治疗组(Nr-CWS治疗 1 个疗程,36 例)和对照组(仅观察,33 例).统计患者治疗有效率、阴道微生态变化及副反应发生的情况.结果:①69 例患者中,治疗组治疗有效率(80.56%)明显高于对照组(39.39%),差异有统计学意义(P<0.05).②治疗组乳杆菌患者的比率较对照组增加明显(77.78%vs.45.45%,P<0.05);治疗组pH值≥4.6、白细胞酯酶(LE)阳性患者的比率较对照组及治疗前均有明显降低,差异有统计学意义(P<0.05).③治疗组 36 例患者中发热 5 例,下腹坠胀感 5 例,腹泻 1 例,皮疹 1 例.结论:Nr-CWS治疗子宫颈锥切术后持续HR-HPV感染疗效较好,阴道微生态环境指标(乳杆菌、LE、pH值≥4.6)改善明显,且无严重副反应发生,但仍需从卫生经济学角度出发,根据患者情况综合考虑.

目的 探讨药物治疗高危人乳头瘤病毒( high-risk human papillomavirus,HR-HPV)感染的临床疗效及阴道局部免疫功能的变化.方法 选取2015～2017年在华北理工大学附属医院就诊的78例HR-HPV感染并经活检病理确诊为低级别鳞状上皮内病变或炎症的患者为研究对象.按照随机数字表法分为3组,第1组患者(28)例不使用任何药物治疗;第2组患者(30例)给予抗HPV生物蛋白敷料治疗;第3组患者(20例)给予红色诺卡氏菌细胞壁骨架治疗.所有患者入组后第3个月复查HPV及液基细胞学检查,观察患者HPV转归情况,且取患者在治疗前及治疗后的阴道灌洗液,行白细胞介素( interleukin, IL)-4的测定,观察患者阴道免疫功能的变化.结果 3组患者治疗3个月后,各组清除HPV感染有效率(17. 86 %、73. 33 %、45 %)比较,差异有统计学意义(P＜0. 05).治疗前后IL-4的OD差值[(5. 89 ± 11. 107)pg/mL、(21. 03 ± 19. 477)pg/mL、(15. 87 ±17. 427)pg/mL],第1组OD值与其它两组比较差异有统计学意义(P＜0. 05),第2组与第3组比较差异无统计学意义(P＞0. 05).结论 药物治疗对HR-HPV感染临床有效,在随访3个月时抗HPV生物蛋白敷料效果更明显.药物治疗可以改善阴道微环境,提高机体局部免疫力.

环境中普遍存在的腐生丝状真菌烟曲霉Aspergillus fumigatus在免疫功能低下或缺陷的人群中可引起多种急慢性疾病,包括致死率很高的侵袭性曲霉病.细胞壁作为真菌的细胞外骨架结构不仅起维持细胞形状、保护细胞抵抗外界压力等作用,在病原真菌极性生长、入侵新的生态域、启动宿主免疫反应中也起重要作用.细胞壁组分还是真菌感染的分子诊断基础和开发抗真菌药物的理想靶标.近几十年来烟曲霉细胞壁的遗传、生物化学及免疫学方向的研究使其成为研究真菌细胞壁的模式真菌.本文主要概述烟曲霉细胞壁的组分、分子组装机制及其在真菌生存和感染中的作用,并对未来研究方向提出了展望.

目的 探讨红色诺卡菌细胞壁骨架(N-CWS)对小鼠皮肤创伤愈合的影响.方法 建立小鼠背部皮肤创伤模型,观察小鼠伤口愈合时间和愈合率,HE染色观察创面组织学的变化,免疫组织化学染色法检测血管内皮生长因子(VEGF)和血小板源性生长因子(PDGF)的变化.结果 与空白组比较,N-CWS能明显提高小鼠创伤愈合速度和愈合率(P＜0.05或P＜0.01).HE染色显示N-CWS组毛细血管和胶原纤维增生明显,表皮再生完全.免疫组织化学染色显示,5d时N-CWS组VEGF表达水平明显高于空白组(P＜0.05),与对照组差异无统计学意义(P＞0.05);7d时N-CWS组PDGF表达水平明显高于空白组(P＜0.05),低于对照组的表达水平.结论 N-CWS在创伤修复愈合过程中起明显促进作用,可能与适度调节VEGF和PDGF生长因子表达有关.

在TiN涂覆的Ti-6Al-4V表面分别注入一定剂量的Cu2+或Ag+, 研究并对比所注入表面的抑菌性和细胞相容性.将L929细胞分别接种于4种材料上:空白对照组——Ti-6Al-4V (钛合金组), 阴性对照组——TiN涂覆的Ti-6Al-4V (TiN组), 阳性对照组——TiN涂覆的Ti-6Al-4V表面注Ag (注Ag组), 实验组——TiN涂覆的Ti-6Al-4V表面注Cu (注Cu组) .通过激光共聚焦观察细胞的骨架形态, 通过扫描电镜观察细胞铺展黏附, 通过CCK-8检测细胞增殖.将金黄色葡萄球菌液滴到各组样品表面, 24 h后通过活菌铺板计数法观察材料表面活菌的菌落数目, 用激光共聚焦、扫描电镜观察细菌黏附、形态.接触角检测材料亲水性, XPS检测材料表面元素组成, ICP-MS检测材料目标元素离子析出量.激光共聚焦和扫描电镜:注Ag组和注Cu组细胞较为密集, 黏附、铺展充分, 可见板状伪足与丝状伪足.CCK-8:接种1、3、5天后, 注Ag组和注Cu组细胞与钛合金组以及TiN组相比增殖明显, 证明这两组材料没有明显毒性.活菌铺板计数:注Cu组和注Ag组菌落少, 抑菌率分别为91％±2％和87％±2％.激光共聚焦和扫描电镜:注Cu组和注Ag组的细菌比钛合金组和TiN组的金黄色葡萄球菌黏附少.细胞壁完整性被破坏, 部分细菌破碎.研究表明, TiN涂覆Ti-6Al-4V表面注Cu和注Ag均具有较好的细胞相容性和抑菌性.

果胶裂解酶基因(Pectate lyase,PL)是调控果实软化的重要靶点.本研究测定了红颜草莓果实在发育过程中果胶裂解酶活性变化和硬度变化规律,并通过人工小干扰RNA(artificial micro-interfering RNA interference,amiRNA)技术,以拟南芥miR390a前体序列作为沉默PL基因的骨架,在番茄果实特异性启动子P119的驱动下,通过农杆菌介导转入草莓果实中瞬时表达,通过RT-PCR分析草莓瞬时转染后PL基因的表达量,并检测了PL沉默对果实硬度的影响.结果 表明,随着草莓果实发育的推进,果胶裂解酶活性呈逐渐上升趋势,与果实硬度呈负相关;构建了基于拟南芥miR390a为骨架的amiRNA靶向栽培草莓中的PL基因;在番茄果实特异性启动子P119驱动下,miRNA前体可以在草莓果实中瞬时表达;草莓果实中总PL基因表达量下降达34.5％;基因沉默组果实硬度比对照组更高,且沉默对果实颜色发育进程无明显影响.该结果表明:果胶裂解酶主要在果实发育后期调节细胞壁的解离,采用amiRNA沉默PL基因可以延缓草莓果实软化进程.