目的:研究三氧化矿物凝聚体(MTA)、iRoot BP Plus(iRooT)以及氢氧化钙(Ca(OH)2)三种材料在年轻恒牙活髓切断术中的临床疗效.方法:将60例需要接受年轻恒牙活髓切断术的患者(60颗患牙)按照使用材料不同随机分为三组:MTA组、iRooT组和Ca(OH)2组,每组20例(20颗患牙),比较三组患者术后3个月和6个月手术成功率、牙本质桥形成和牙齿变色发生率、牙根管壁厚度、牙齿功能和美观度、以及血清基质金属蛋白酶-3(MMP-3)和白细胞介素-8(IL-8)水平.结果:(1)三组患者仅术后6个月临床治疗成功率存在显著差异(P＜).05);(2)Ca(OH)2组术后牙本质桥形成率显著低于其他两组(P＜0.05),而牙齿变色发生率显著低于MTA组(P＜0.05)和显著高于iRooT组(P＜0.05).(3)三组患者治疗后牙根管壁厚度均较治疗前显著增加,且治疗后Ca(OH)2组患牙根管壁厚度增加显著低于MTA组和iRooT组(P＜0.05).(4)Ca(OH)2组患者术后6个月牙齿舒适功能、固定功能和咀嚼功能评分均显著低于MTA组和iRooT组(P＜0.05),而牙齿美观度评分显著低于iRooT组(P＜0.05)和显著高于MTA组(P＜0.05).(5)三组患者术后6个月血清MMP-3和IL-8均显著低于术前(P＜0.05),并且MTA组患者血清MMP-3和IL-8水平显著高于iRooT组(P＜0.05)和显著低于CaOH组(P＜0.05).结论:iRoot BP Plus和MTA材料应用于年轻恒牙活髓切断术均具有较高的远期成功率,但MTA材料远期牙齿变色率较高因而影响牙齿美观度.

目的 研究丙型肝炎病毒(HCV)核心蛋白活化内源性大麻素系统诱导不完全线粒体自噬的机制.方法 HepG2细胞或表达HCV核心蛋白的HepG2细胞与肝星状细胞(LX-2细胞)共培养.共培养后高效液相色谱-质谱联用技术检测2-AG水平,分光光度法测定检测线粒体呼吸链酶复合体活性,流式细胞仪检测细胞活性氧(ROS)水平,激光共聚焦显微镜检测Ca2+浓度和线粒体膜电位,试剂盒检测线粒体丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)含量,蛋白质免疫检测大麻素受体1(CB1R)、蛋白激酶B(Akt)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、微管相关蛋白1轻链3-Ⅱ(LC3-Ⅱ)和p62蛋白表达.计量资料采用t检验.结果 与LX-2细胞和HepG2细胞共培养组相比,LX-2细胞和表达HCV核心蛋白HepG2细胞共培养组,2-AG水平增加,线粒体呼吸链酶复合体活性下降,ROS水平和Ca2+浓度升高,线粒体膜电位下降,MDA升高而SOD下降,CB1R水平升高,p-Akt和p-mTOR表达下降,LC3-Ⅱ表达增加,而p62蛋白表达无明显差异.结论 HCV核心蛋白增加2-AG水平,上调CB1R表达;增加线粒体ROS水平和Ca2+浓度,降低线粒体膜电位;下调Akt和mTOR活性引起不完全线粒体自噬.

μ阿片受体(MOR)的激动剂吗啡是治疗急性痛和慢性痛主要的镇痛药物.吗啡的镇痛作用主要是由表达在背根神经节(DRG)和三叉神经节初级感觉神经元上的MOR介导.研究表明,G蛋白偶联受体(GPCRs)与MOR形成的异聚复合体,可以作为新的治疗疼痛靶点且具有较少的副作用.而MrgC作为GPCRs相关的一种亚型C,大多数表达于DRG的小直径神经元上,当激活MrgC时可以发挥镇痛作用.研究者探讨MrgC11通过调节MOR增强吗啡镇痛作用的机制.研究发现:(1)MrgC11和MOR在DRG神经元中大量共表达,并形成异源复合物.MrgC11通过其C端结构域(CTD)与MOR发生相互作用.在细胞水平进一步证明,人体中存在的与MrgC具有同源性的MrgX1和MOR也能形成异聚体复合物.(2)采用BAM8-22激活MrgC11,可以诱导MrgC11和MOR的共同内吞作用,并促进MrgC11和MOR进入循环通路,重新插入到质膜上.(3)MOR通过抑制cAMP信号通路产生镇痛作用.而活化MrgC11可增强急性吗啡对cAMP的抑制作用,进而加强镇痛作用;同时,可减少慢性长期使用吗啡治疗后cAMP的过度活化.(4)在体实验证明,当鞘内注射MrgC激动剂BAM8-22并联合使用MOR激动剂吗啡时,可增强低剂量吗啡的镇痛作用且减少了吗啡产生的副作用;同时,钙成像实验表明,当二者联合使用时,可以显著抑制DRG中辣椒素引起的胞内Ca2+浓度增加;当仅使用MrgC11-MOR的激动剂BAM22时,同样可以有很好的镇痛效果.(5)在Mrg敲除的小鼠中,无论是神经病理痛还是炎性痛,当鞘内给予吗啡时,镇痛效果均减弱.钙成像实验表明,在Mrg敲除小鼠的DRG神经元中,吗啡对Ca2+的抑制作用显著降低.综上所述,感觉神经元中MrgC11和μ阿片受体的寡聚化增强吗啡的镇痛效果.

目的:探究基于SHED聚合体的治疗大鼠脊髓损伤的有效疗法.方法:建立大鼠脊髓全横断损伤模型(n=28),分为4组:SHED聚合体组(SHED-CA,n=8),SHED聚合体联合SHED悬液注射组(SHED-CA+ SHED,n=8)仅去除T8、T9椎板组(SHAM,n=6),建模不治疗组(SCI,n=6).观察12周分别从大鼠后肢行为学恢复、组织学及神经营养因子分泌等方面进行疗效比较.结果:BBB评分显示SHED-CA +SHED组高于SHED-CA组;免疫荧光染色结果显示SHED-CA+ SHED组脊髓损伤区瘢痕组织更少,且再生出更多的神经纤维及髓鞘细胞,并出现SHED向髓鞘细胞的分化;ELISA检测结果提示,联合SHED悬液注射可分泌更多的神经营养因子.结论:联合SHED悬液注射可提高SHED聚合体治疗大鼠脊髓损伤的疗效,可能通过增加神经营养因子分泌及SHED定向分化为髓鞘细胞而发挥作用.

背景 研究表明,Na+-K+-ATP酶活性药物具有抑制哮喘的作用,但具体机制尚不清楚.目的 探究钠钾泵Scr复合体对幼年哮喘大鼠气道炎症和气道重塑的影响及其机制.方法 本实验时间为2019年7月—2020年8月.将120只8周龄SD雄性大鼠分为对照组(腹腔注射5％磷酸盐缓冲液)、哮喘组〔腹膜注射乳化的卵清蛋白(OVA,Ⅴ级)致敏,造模成功后腹膜注射二甲亚砜〕及治疗组(腹膜注射乳化的OVA致敏,造模成功后腹膜注射钠钾泵Scr复合体药物),每组40只.采用实用荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)检测肺组织Na+-K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶相对表达量,采用蛋白质免疫印迹法检测肺组织Scr、层粘连蛋白α4(LAMα4)相对表达量,通过苏木素-伊红(HE)染色检测气道炎性细胞浸润情况,通过高碘酸-席夫(PAS)染色检测杯状细胞,采用免疫组织化学法(IHC)检测转化生长因子β1(TGF-β1)和血管内皮生长因子(VEGF)表达量,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测肺组织白介素13(IL-13)和内皮素1(ET-1)含量.结果 哮喘组和治疗组大鼠肺组织Na+-K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶、Scr相对表达量低于对照组,LAMα4相对表达量高于对照组(P<0.05);治疗组大鼠肺组织Na+-K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶、Scr相对表达量高于哮喘组,肺组织LAMα4相对表达量低于哮喘组(P<0.05).哮喘组和治疗组大鼠肺组织炎症评分高于对照组,PAS阳性面积占比大于对照组(P<0.05);治疗组大鼠肺组织炎症评分低于哮喘组,PAS阳性面积占比小于哮喘组(P<0.05).哮喘组和治疗组大鼠肺组织TGF-β1和VEGF表达高于对照组,治疗组大鼠肺组织TGF-β1和VEGF表达低于哮喘组(P<0.05).哮喘组和治疗组大鼠肺组织IL-13和ET-1高于对照组,治疗组大鼠肺组织IL-13和ET-1低于哮喘组(P<0.05).结论 钠钾泵Scr复合体可抑制幼年哮喘大鼠气道炎症及气道重塑,其机制可能与调控LAMα4表达及抑制TGF-β1、VEGF、IL-13和ET-1的释放有关.

目的 应用生物信息数据库分析和分子生物学方法检测乙型肝炎病毒(HBV)对微小RNA(miR-10b)表达的影响,以及生物信息学方法探讨HBV影响的miR-10b异常表达在肝脏疾病中的作用.方法 以GEO2R分析miRNA表达芯片GSE19980中miR-10b的表达水平,荧光定量聚合酶链反应(PCR)验证分析结果.Targetscan、miRTarBase、miRDB和DIANA TOOLS分析miR-10b的靶基因并用韦恩图进行筛选.应用DAVID数据库对miR-10b靶基因数据集进行基因本体(GO)功能富集分析.采用STRING分析软件进行KEGG信号通路分析.GEO2R分析HBV诱导的肝细胞癌及其邻近正常组织的差异表达基因,并与miR-10b靶基因进行韦恩图筛选以获得交集靶基因,然后用STRING分析蛋白质的相互作用,得到miR-10b靶基因的核心蛋白基因.结果 miR-10b在稳定表达HBV的HepG2.2.15细胞中表达明显上调,差异有统计学意义(P<0.05);miR-10b靶基因主要富集在转录调控、转录因子活性、参与转录因子复合体等相关蛋白基因;miR-10b的靶基因富集在蛋白多糖、miRNA、cAMP信号通路;miR-10b靶基因编码蛋白的相互关系分析获得CREB1、NCOA6、NCOR2、PIK3CA、GATA3、MAPRE1、TIAM1等核心蛋白,其功能涉及糖稳态调节、炎症、肿瘤发生和发展.结论 HBV上调miR-10b表达,高表达的miR-10b对其靶基因的沉默可能在HBV感染的肝脏疾病中发挥着重要作用.

背景:课题组前期通过冷冻干燥方法制备的矿化胶原/Mg-Ca合金复合体结构松散,使用聚甲基丙烯酸甲酯骨水泥作为外层加强层对其进行改良可增强复合材料的结构稳定性.目的:探讨聚甲基丙烯酸甲酯/矿化胶原/Mg-Ca合金复合材料对MC3T3-E1细胞成骨分化的影响.方法:分别制备聚甲基丙烯酸甲酯/矿化胶原/Mg-Ca合金、聚甲基丙烯酸甲酯/矿化胶原复合材料.将MC3T3-E1细胞分别接种于聚甲基丙烯酸甲酯/矿化胶原/Mg-Ca合金(A组)、聚甲基丙烯酸甲酯/矿化胶原复合材料(B组)及Mg-Ca合金材料(C组)上,以单独培养的细胞为空白对照(D组),扫描电镜下观察材料表面的细胞黏附形态,通过CCK-8、碱性磷酸酶活性、酶联免疫吸附实验、RT-PCR与Western blot检测分析3种材料对MC3T3-E1细胞增殖及成骨分化的影响.结果 与结论:①扫描电镜下可见,MC3T3-E1细胞在A组复合材料表面黏附数量最多,生长状态良好,细胞拉伸明显,伪足伸出较多,细胞相互连接成网状结构;②CCK-8实验显示,与D组相比,3种材料均可促进MC3T3-E1细胞的增殖(P<0.05),其中以A组复合材料促增殖效果最显著(P<0.05);③与D组相比,3种材料均可提升MC3T3-E1细胞中的碱性磷酸酶活性(P<0.05),其中以A组提升最显著(P<0.05);④酶联免疫吸附实验显示,3种材料均可促进MC3T3-E1细胞分泌骨钙素与I型胶原,其中以A组促进作用最显著(P<0.05);⑤RT-PCR检测显示,3种材料均可提高MC3T3-E1细胞内RUNX2、OSX、碱性磷酸酶、骨钙素的mRNA表达,其中以A组提高最显著(P<0.05);⑥Western blot检测显示,3种材料均可提高MC3T3-E1细胞内RUNX2、OSX、碱性磷酸酶、骨钙素的蛋白表达,其中以A组提高最显著(P<0.05);⑦结果表明,聚甲基丙烯酸甲酯/矿化胶原/Mg-Ca合金复合材料可促进MC3T3-E1细胞成骨分化相关蛋白与基因的表达,对其成骨分化起积极作用.