他克莫司(tacrolimus，FK506)是用于预防器官移植排斥反应的一线免疫抑制剂，其给药方式通常是口服给药途径，但患者临床移植术后的初始阶段或自身临床状况不适用于口服给药方式时，通常采用静脉注射等非口服给药途径。临床遗传药理学实施联盟(Clinical Pharmacogenetics Implementation Consortium，CPIC)发布细胞色素P4503A5 (CYP3A5)基因多态性影响患者口服他克莫司体内药代动力学。然而，CYP3A5等基因多态性与他克莫司非口服给药途径药物代谢动力学的相关性目前知之甚少。文章简要综述CYP3A5等基因多态性对移植受者他克莫司不同给药途径药物代谢动力学的影响，旨在为他克莫司个体化给药方案的制定提供新的帮助。

目的:探讨分析人类白细胞抗原(HLA)-DQA1、细胞色素P450(CYP)3A5*3基因多态性与特发性膜性肾病(IMN)遗传易感性的关联性.方法:将IMN患者62例作为研究组,另将健康者62例作为对照组.采用聚合酶链反应(PCR)技术和基因测序技术检测入组患者的HLA-DQA1(rs2187668)、CYP3A5*3(rs776746)基因型,判断各基因型与IMN患者的关系.结果:研究组中HLA-DQA1 rs2187668基因型AA占比高于对照组(P＜0.05),基因型GG、AG占比低于对照组(均P＜0.05);研究组等位基因A占比高于对照组(P＜0.05).研究组与对照组CYP3A5*3 rs776746不同基因型占比及等位基因占比比较无统计学差异(均P＞0.05).HLA-DQA1 rs2187668AA基因型IMN患者24 h尿蛋白量和血肌酐水平显著高于AG和GG型,肾小球滤过率显著低于AG和GG型(均P＜0.05).结论:HLA-DQA1 rs2187668位点的基因多态性与IMN的发生有关,AA基因型和等位基因A可增加IMN易感性.

目的:分析心脏移植(HT)术后接受三联免疫抑制方案的患者发生早期感染的危险因素,并构建预测HT术后早期感染的列线图模型.方法:回顾性分析2012年10月～2024年1月行HT且术后接受三联免疫抑制方案患者的临床资料.采用单因素分析、Pearson相关性分析和多因素逐步Logistic回归分析筛选患者发生早期感染的危险因素,并通过R语言构建列线图预测模型.结果:多因素逐步Logistic回归分析显示,术前血红蛋白、手术持续时间、术后ICU时间、合并使用甲氧氯普胺和细胞色素P4503A5(CYP3A5)rs776746位点基因多态性为早期感染的独立影响因素(P＜0.05).基于上述5个独立影响因素构建的列线图预测模型预测性能优秀,在测试集中曲线下面积(AUC)为0.844,bootstrap法验证得到的校准曲线与标准曲线拟合良好,平均绝对误差为0.041,提示模型一致性较好,临床决策曲线(DCA)也表明模型具有较高的净获益水平.结论:本研究构建的列线图预测模型考虑了免疫抑制剂与HT术后早期感染的相关性,有助于HT术后更准确高效地识别早期感染高风险人群.

2016年4月,匹莫范色林获FDA批准上市,成为首款用于帕金森病患者幻觉和妄想症状的药物.匹莫范色林是选择性5-羟色胺2A受体的反向激动剂,血浆t1/2约为57 h,Tmax为6 h,经细胞色素P4503 A4酶代谢,其与该酶抑制剂或诱导剂同时使用时应警惕药物相互作用的发生.近年来,开展匹莫范色林临床试验的适应证领域逐渐增多,主要针对Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期的临床试验.研究发现,匹莫范色林不仅对帕金森病患者的精神症状有明确的疗效和安全性,对重度抑郁症、痴呆相关精神病、阿尔茨海默病相关精神病、精神分裂症阴性症状、阻塞性睡眠呼吸暂停和创伤后应激障碍可能同样存在治疗潜力.

目的 探讨龙胆苦苷通过过氧化物酶体增殖物激活受体-α(PPAR-α)通路对胆汁淤积性肝损伤的影响及作用机制.方法 ①48只C57BL/6J雄性小鼠随机分为正常组、模型组[α-萘基异硫氰酸酯(ANIT),灌胃]、熊去氧胆酸组(200 mg/kg,灌胃)以及龙胆苦苷低、中、高剂量组(50、100、200 mg/kg,灌胃),每组8只.各组小鼠连续给予相应干预措施7 d.第5天给药6 h后,正常组灌胃给予空白橄榄油溶液,其余各组小鼠灌胃给予ANIT诱导胆汁淤积性肝损伤.给药结束后,观察小鼠体质量变化;记录肝脏质量,计算肝脏指数;检测小鼠血清中天冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)、总胆汁酸(TBA)、总胆红素(TBil)水平;苏木精-伊红(HE)染色观察肝组织病理变化;实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(RT-qPCR)法检测肝组织PPAR-α、核转录因子-κB(NF-κB)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)mRNA表达;Western blot法检测小鼠肝脏中PPAR-α、细胞色素P4503A4(CYP3A4)、肉碱棕榈酰转移酶2(CPT2)以及组成型雄甾烷受体(CAR)蛋白表达.②采用L02人肝细胞进行体外实验,建立牛磺鹅去氧胆酸钠(TCDC)胆汁淤积性肝细胞损伤模型,采用10、50、100 μmol/L龙胆苦苷进行干预.测定细胞上清液中AST、ALT、TBA的含量;RT-qPCR法验证肝细胞中PPAR-α、NF-κB、TNF-α、IL-1β mRNA表达;Western blot法检测肝细胞中PPAR-α、CYP3A4、CPT2以及CAR蛋白表达.③另在TCDC胆汁淤积性肝细胞损伤模型基础上,采用PPAR-α激动剂(非诺贝特)和抑制剂(GW6471)进行PPAR-α拮抗实验.Western blot法检测肝细胞中PPAR-α、CYP3A4、CPT2、CAR蛋白表达.结果 ①龙胆苦苷可下调胆汁淤积性肝损伤小鼠血清中AST、ALT、TBA、TBil含量(P<0.05),并改善小鼠肝脏病变情况.②龙胆苦苷可上调胆汁淤积性肝损伤模型小鼠肝组织和模型细胞中PPAR-α mRNA水平,降低促炎细胞因子NF-κB、TNF-α、IL-1β的mRNA水平.③龙胆苦苷能上调胆汁淤积性肝损伤小鼠肝组织PPAR-α、CYP3A4、CPT2蛋白水平,降低CAR蛋白水平.④PPAR-α抑制剂可降低龙胆苦苷对胆汁淤积性肝损伤细胞中PPAR-α的上调作用,并进一步影响PPAR-α对于CYP3A4、CPT2、CAR蛋白的调控作用.结论 龙胆苦苷可通过上调PPAR-α蛋白调控胆汁酸相关蛋白CYP3A4、CPT2、CAR表达,进而降低NF-κB、TNF-α、IL-1β等促炎细胞因子水平,从而发挥抗胆汁淤积性肝损伤的作用.

目的 通过构建体外质粒DNA作为质控样品开展他克莫司代谢基因——细胞色素P4503A5(CYP3A5)基因检测室间质量评价计划(简称室间质评),评估参评实验室检测能力及存在的问题,提高临床实验室CYP3A5基因的检测质量.方法利用基因工程技术体外构建含CYP3A5*3(rs776746)位点上、下游序列的重组质粒,筛选CYP3A5*3 AA和GG基因型分别作为野生型和突变型样品,两者等比例混合后作为杂合突变型样品,并制备质控样品盘开展室间质量评价.依据回报结果计算各实验室成绩,汇总不同样品的总体符合率,并分析不同检测方法的符合率和检测错误类型.结果体外构建的重组质粒经Sanger测序验证分别含CYP3A5*3位点野生型和突变型序列.2017年两次室间质评中成绩满分的实验室分别为93.33％(14/15)和100％(17/17).两次室间质评中,样品检测的总体符合率分别为96％(72/75)和100％(85/85).荧光分子杂交法检测的样品符合率均为100％;Sanger测序法检测样品符合率为90％(27/30)和100％(40/40).结论制备的质控样品能够有效监测试剂检测性能,具有良好的适用性.各实验室在CYP3A5*3基因位点检测总体准确率较高,但个别实验室检测能力有待提高.室间质评计划能帮助实验室发现检测中存在的问题,提高检测质量.

肝移植术后早期的成功移植和长期优质的生活取决于免疫抑制剂治疗效果和不良反应之间的平衡,仅保持治疗性药物有效的血药浓度水平是有局限性的,还需根据受者的细胞色素P4503A5(CYP3A5)遗传背景和个体的高危因素选择合适的钙神经蛋白抑制剂(CNI),并选择适当的药物剂量.但目前CYP3A5与环孢素(CsA)合适剂量或初始剂量之间的关系仍需要进一步探讨.本文从CYP3A5的特点、CYP3A5基因表达对肝移植术后CNI用药的影响、CYP3A5基因多态性对临床疗效的影响、根据基因型个性化精准化选用CNI等方面进行述评.关注CNI的精准化用药,从针对所有受者的综合治疗方案向个性化精准化治疗方案转变.

目的 利用代谢动力学等相关技术研究马兜铃酸I对小鼠肝脏代谢酶的影响,揭示马兜铃酸I影响小鼠肝脏代谢功能的作用机制.方法 取雄性6周龄C57BL/6小鼠作为研究对象,按照设定的马兜铃酸I剂量随机分为4个给药组和l个正常对照组,灌胃给药,每周5天,连续4周,利用代谢动力学相关技术和分子生物学手段研究马兜铃酸I对小鼠肝脏代谢酶的影响.结果 显示马兜铃酸I可以诱导小鼠肝脏细胞色素P4501a2和细胞色素P4503a11的酶活性和mRNA表达,也可以通过诱导磺基转移酶增加吲哚酚硫酸的含量,但不是主要因素.AAI引起的肾毒性是吲哚酚硫酸在血浆、肝脏和肾脏蓄积的主要原因,反过来也加重了AAI引起的肾脏毒性.结论 马兜铃酸I对小鼠肝脏代谢酶有多重影响.

目的 评价基于细胞色素P450(CYP)3A5*1基因多态性指导肝移植术后他克莫司(FK506)个体化用药的安全性和有效性.方法 分析连续入组的100例首次行肝移植术受者的临床资料,并随机分为实验组和对照组,每组各50例.实验组术前对供、受者进行CYP3A5基因检测,并根据CYP3A5*1基因型确定FK506用药方案.观察术后7、14、28 d以及3、6、9、12个月两组受者FK506目标血药浓度达标率、肝功能恢复正常率以及随访过程中FK506调整用量次数.记录两组受者1年移植物存活率,及急性排斥反应、感染、急性肾损伤、消化道症状、新发高血压、新发糖尿病、感冒、皮疹等并发症的发生率.结果 两组受者术后7、14 d FK506目标血药浓度达标率比较,差异均有统计学意义(均为P<0.05).两组术后28 d及3、6、9、12个月FK506目标血药浓度达标率及术后7个观察时间点肝功能恢复正常率比较,差异均无统计学意义(均为P>0.05).两组受者随访期间FK506剂量调整次数比较,差异有统计学意义(P=0.021).两组受者术后及随访期间1年移植物存活率和并发症发生率比较,差异均无统计学意义(均为P>0.05).结论 根据CYP3A5*1基因多态性指导肝移植术后FK506个体化用药是安全的,能在术后早期提高受者FK506目标血药浓度达标率,并且可以有效减少随访期间药量调整次数.

目的:探讨羊耳菊活性部位(IC-MAC)对孕烷X受体(PXR)高表达HepG2细胞中细胞色素P4503A4酶(CYP3A4)蛋白表达的影响.方法:将质粒pcDNA3.1-PXR转化至DH5α感受态大肠杆菌中扩增并提取质粒,采用FuGENE?6转染试剂,将pcDNA3.1-PXR质粒转染至人肝癌HepG2细胞,以重组PXR为对照,采用Western blot技术测定PXR-HepG2和HepG2细胞中PXR的表达,并筛选得到高表达PXR的PXR-HepG2细胞模型;将PXR-HepG2细胞和HepG2细胞分别分为阴性对照组(DMSO组,0.1％)、药物处理组(25、50、100 mg/L IC-MAC)和阳性药物组[PXR激动剂利福平(RIF)组,10μmol/L],分别处理24、48及72 h后,采用Western blot技术测定细胞中CYP3A4蛋白的表达.结果:Western blot结果显示,与HepG2细胞相比,转染pcDNA3.1-PXR质粒的PXR-HepG2细胞中PXR表达明显上调(P<0.01),证明PXR-HepG2细胞模型构建成功;25、50及100 mg/L IC-MAC分别作用于PXR-HepG2和HepG2细胞24、48和72 h后,与DMSO组相比,25、50及100 mg/L IC-MAC均可上调PXR-HepG2和HepG2细胞中CYP3A4表达(P<0.05),且PXR-HepG2细胞上调幅度较HepG2细胞更大.结论:PXR高表达的PXR-HepG2细胞中IC-MAC上调CYP3A4蛋白表达的幅度大于HepG2细胞,提示IC-MAC可能通过PXR来调控CYP3A4蛋白的表达.