目的:为解决中药羚羊角塞与羚羊角相比因失去"通天眼"等传统鉴别特征而鉴别困难的问题,建立准确鉴别鉴定羚羊角塞的方法.方法:通过比对羚羊角塞基原动物赛加羚羊与其7种常见混伪品的细胞色素C氧化酶亚基I(Cyto-chrome coxidase I,COI)序列,根据差异位点设计出仅扩增赛加羚羊DNA的特异性鉴别引物.结果:进行PCR时,当退火温度为64 ℃,循环数为33个时,仅羚羊角塞正品扩增获得约300 bp大小的条带,混伪品无条带.结论:该方法可作为准确有效检测待检样品是否来源于赛加羚羊的方法,用于羚羊角类样品的DNA鉴别.

目的:考察利用细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ (COⅠ)基因对羚羊角及其混伪品进行分子鉴定的可行性.方法:收集4个地区的羊角类整角、不完整角样品,共7个.比较样品骨塞部位和角质层部位DNA的提取效果,采用聚合酶链式反应(PCR)技术,以通用引物LCO Ⅰ 490、HCO2198扩增样品的COⅠ基因,通过凝胶电泳、纯化(取750 bp条带)、测序后,以COⅠ基因作为条形码比对序列,采用NCBI数据库中的Blast软件在线比对,确定收集样品的具体物种.结果:样品以角质层部位进行DNA提取的效果较好(DNA浓度为15.7～22.6 ng/μL,260nm/280nm吸光度值为1.73～4.72);在线比对结果显示,所有样品COⅠ基因的相似性均达到99％,其主要来源于赛加羚羊、藏羚羊、普氏原羚、山羊、绵羊等羊类的角.结论:基于COⅠ基因的DNA条形码技术可用于羚羊角及其混伪品的鉴定,该技术为羊角类药材的鉴定提供了一种准确、客观的方法.

目的:基于蛋白质组学技术对羚羊角进行研究,为合理使用羚羊角提供参考.方法:将酶解后的羚羊角角壳和骨塞样品,通过Nano-LC-Orbitrap液质联用仪进行多肽分离及质谱数据采集,结合UniPortKB收录的Capra Hircus蛋白质组数据库,采用PEAKS Studio软件进行数据处理.结果:发现两者主要功能蛋白质及多肽无论在数量上还是种类方面既有某些相似性也具有明显的差异性.结论:骨塞及角壳一起磨成羚羊角粉使用具有一定的合理性,但必须将角壳和骨塞的用量比例控制在合理范围内,以确保羚羊角临床用药的安全性和有效性.

目的 在不破坏样品的前提下,实现珍贵中药材物种鉴定,并建立新的药材鉴定方法.方法 采用螺旋CT扫描仪,设置模式化扫描基本参数扫描水牛角、黄牛角、牦牛角、羚羊角、藏羚羊角、山羊角等药材样品.结果 药材样品每层二维图差异明显;药材样品扫描曲面重建(CPR)的三维图与实物一致;最大密度投影(MIP)的三维图差异明显;可见样品各自内部结构、密度、骨腔、骨塞及其天然缝隙.结论 螺旋CT扫描技术可在不损伤药材样品的前提下获得二维、三维专属性特征鉴定图,达到鉴定动物角类中药材的目的.所建立的新的药材鉴定方法操作简便,结果清晰,但仍有进一步优化的空间.

目的:探讨基于中医"四季脾旺不受邪"理论在老年慢性阻塞性肺疾病(COPD)的用药规律.方法:选择老年COPD患者常用药物处方300张,分析其用药规律,指导临床患者用药,并对结果进行分析与总结.同时基于中医"四季脾旺不受邪"理论,分析老年COPD的用药规律并完成树状图的绘制,用药规律分析时主要针对药物使用频率相对较高的药物进行合理分类.结果:300张处方涉及中药165味1805频次,使用频数>15次药物合计42味.对使用频数较高的药物进行分为四类:第一类主要以黄精、麦冬、五味子、白术、黄芪、山萸肉、紫河车为主,第二类主要以贝母、杏仁、大黄、知母、牛蒡子、枳壳、苏子、苏梗为主,第三类以白芍、羚羊角、丹皮、三七、天麻等为主,第四类以半夏、郁金、黄芩为主.结论:老年COPD久病气虚,本虚标实,虚实夹杂,基于中医四季脾旺不受邪理论治疗更加重视清肺泻热、活血化瘀,用药方面能实现脾、肺、肾同治,能获得良好的预后,可指导临床用药.

珍稀濒危动植物药材在中医药临床使用中优势明显,需求量大,因其资源稀缺与临床用药需求矛盾凸显,极大限制中医药的发展,积极寻找和开发替代品是推进中医药高质量发展的重要举措.从理论层面与实际应用中不难发现不同替代策略均有各自的优势与劣势,本文以羚羊角与山羊角、黄山药和穿龙薯蓣等为典例,阐明基于亲缘关系寻找替代品的方法与优势;以犀角和水牛角、虎骨和塞隆骨等为典例,阐明基于功效相似寻找替代品的原因与成效;以人工合成麝香、人工合成冰片、体外培育牛黄等为典例,阐明基于成分相似寻找替代品的思路与劣势.综合阐述了三种替代策略现况,分析发现现有替代策略难以遵循中医药理论基础从而发展缓慢,因此,在干细胞/类器官等前沿生物技术快速发展的时期,创新提出从亲缘关系角度同基原替代品的研究新策略:利用动植物自身干细胞培育药用部位,分泌代谢产物,该策略兼顾同基原、同质性要求的替代手段.