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基于GSH响应共价成环的AIE自组装探针的构建及体外评价
编辑人员丨5天前
目的:构建基于谷胱甘肽(GSH)响应共价成环的聚集诱导发光(AIE)自组装探针并进行体外评价。方法:通过固相多肽合成法制备含2-氰基-6-氨基苯并噻唑-半胱氨酸(CBT-Cys)缩合基序的多肽序列,再经点击化学反应与AIE分子偶联,构建了一种基于GSH响应共价成环的AIE自组装探针(记作探针1),同时以缺乏Cys结构的探针2为对照。测试探针的吸收和发射光谱,分析探针对GSH的特异性及响应后的粒径和结构变化,考察不同pH值、温度、探针浓度和GSH浓度对探针荧光强度的影响,并评价探针对肿瘤细胞HeLa、HepG2和MDA-MB-231的毒性。结果:经GSH响应后,探针1的荧光增强约6倍,探针2的荧光增强约2倍;探针1转化为二聚体,粒径约896.1 nm,探针2缺乏成环基序,仅转化为单体,粒径约427.4 nm。在pH值为7.0、温度为37 ℃条件下,探针1的荧光强度显著高于探针2。两种探针对肿瘤细胞HeLa、HepG2和MDA-MB-231的毒性均较低。结论:探针1分子中的二硫键经GSH还原后,分子因失去亲水序列导致荧光开启(第1次聚集),并因含有CBT-Cys成环基序随即生成AIE二聚体(第2次聚集)。与探针2单次聚集相比,探针1实现了双重AIE效应,显著增强了荧光强度,并在生理环境下具有较好的适用性,为体内原位生成共价成环探针提供了思路,后期有望用于体内肿瘤成像与治疗。
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编辑人员丨5天前
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一种聚集诱导发光光热剂用于骨肉瘤诊疗研究
编辑人员丨5天前
目的:探讨具有聚集诱导发光(AIE)性质的新型荧光分子(AIEgens)构建的纳米颗粒(2TT-oC6B NPs)的光热和荧光成像性能,以及其对骨肉瘤细胞的杀伤效果和体内肿瘤靶向能力。方法:首先用不同功率(0.5、1.0和1.5 W/cm 2)808 nm激光和不同浓度(0、25、50、100、200 μmol/L)的2TT-oC6B NPs磷酸盐缓冲液(PBS)溶液进行体外光热性能检测,然后采用143B作为模型细胞,探讨其生物相容性和光热杀伤效果,最终用K7M2细胞接种在BALB/c小鼠皮下,构建小鼠肿瘤模型,通过尾静脉注射2TT-oC6B NPs 5 mg/kg检测其体内肿瘤靶向能力。采用 t检验确定实验组与对照组之间的显着性。 结果:与对照组比较,2TT-oC6B NPs在808 nm激光照射下最高温度可升至约70 ℃并具有近红外二区发光成像能力;CCK-8实验表明,与对照组143B细胞存活率比较,100 μmol/L时143B细胞存活率不受影响( t=1.734, P>0.05),差异无统计学意义,表现出其良好的生物相容性。而经过808 nm激光照射后143B细胞存活率显著下降( t=15.01, P<0.05),表现出其优异的光热杀伤效果;同时活/死细胞染色更直接的呈现了这一结果;小鼠体内肿瘤成像结果表明其能在30 min内就富集在肿瘤部位并长时间保留。 结论:2TT-oC6B NPs具有优异的光热转换性能和荧光成像能力,其本身具有良好地生物相容性,而当在808 nm激光照射下展现出高效的光热杀伤效果。同时它能迅速靶向肿瘤,并在瘤内长期富集,这表明其可能作为骨肿瘤外科手术切除的一种良好辅助治疗方式,是一个性能优异的骨肉瘤诊疗一体化探针。
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编辑人员丨5天前
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用于小干扰RNA递送的基于超分子主客体化学组装的聚集诱导发光囊泡材料的构建及其对肿瘤细胞毒性的研究
编辑人员丨5天前
目的:构建一种基于超分子主客体化学组装的聚集诱导发光囊泡材料(AIE-HG-Vesicle)用于递送小干扰RNA(siRNA)及实现荧光成像功能,并探究其被肿瘤细胞摄取的效果及其基于siRNA对肿瘤细胞的杀伤效果。方法:通过合成聚乙烯亚胺树型分子修饰的β-环糊精(H-β-CD-dendrimer)作为主体化合物,同时合成含有四苯乙烯AIE基团的Bola型金刚烷(G-Ada-AIE)作为客体化合物,通过超分子主客体自组装过程制备得到AIE-HG-Vesicle囊泡材料用于负载siRNA。通过透射电子显微镜及动态光散射仪测试其形貌和尺寸,通过荧光分光光度计测试其聚集诱导发光性质,通过凝胶阻滞实验测试其对siRNA的负载效果,通过激光共聚焦显微镜测试负载siRNA的AIE-HG-Vesicle囊泡材料在肿瘤细胞内的递送效果,并通过MTT实验测试负载siRNA的AIE-HG-Vesicle囊泡材料对肿瘤细胞的杀伤效果。结果:AIE-HG-Vesicle具有囊泡状形态,直径约为100 nm,壁厚约为9 nm,且表面带正电荷可有效负载siRNA。负载于AIE-HG-Vesicle的siRNA表现出良好的稳定性,且负载siRNA后的AIE-HG-Vesicle可将siRNA递送到HeLa细胞内部,并可通过聚集诱导发光现象被观测到,负载siRNA后的囊泡对HeLa细胞有明显的杀伤效果。结论:构建了AIE-HG-Vesicle可用于递送siRNA,该材料具有荧光成像和基于siRNA的肿瘤细胞毒性作用,后期有望应用于肿瘤体内治疗。
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编辑人员丨5天前
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具有聚集诱导发光性质的脂滴靶向光敏剂用于骨肿瘤细胞成像和光动力治疗
编辑人员丨5天前
目的:探讨聚集诱导发光材料LD-Orange对骨肿瘤细胞的生物相容性,肿瘤细胞内吞能力,细胞器定位和对骨肿瘤细胞的光动力杀伤效果。方法:采用骨肿瘤细胞系143B作为模型细胞,应用激光共聚焦成像探究LD-Orange与143B细胞孵育后的荧光成像以评估其内吞性能,用商业脂滴染料尼罗红(Nile Red)和LD-Orange共染,应用激光共聚焦成像确定其亚细胞定位并评估其细胞器靶向性能,用DCFH-DA作为活性氧指示剂,探究LD-Orange的细胞内、外活性氧产生能力,用Calcein-AM/碘化丙锭(PI)细胞活性检测试剂盒和噻唑蓝(MTT)实验评估研究细胞杀伤和生物相容性,采用 t检验确定实验组和对照组之间的显著性。 结果:LD-Orange能够被骨肉瘤细胞系143B内吞,定位于细胞脂滴中,且其与商业脂滴染料具有95%的共染率,是一种靶向脂滴的染料。在30 mW/cm 2的低功率普通LED白光的照射下,LD-Orange表现出优异的活性氧产生能力。MTT细胞毒性实验表明,与对照组143B细胞存活率比较LD-Orange为15 μmol/L时,143B细胞存活率不受影响( t=0.474, P>0.05),差异无统计学意义。而实验组经过白光(30 mW/cm 2)照射后,143B细胞的杀伤率为98.27%( t=39.610, P<0.01)。 结论:LD-Orange具有良好的生物相容性,其能够被骨肉瘤细胞143B内吞,具有高的脂滴靶向性,具备较为优异的活性氧产生能力。LD-Orange对骨肿瘤细胞的脂滴良好的靶向成像能力和荧光成像引导下对骨肉瘤细胞的光动力治疗效果确认其为一种有效的脂滴细胞器靶向性光敏剂,为协助下的骨肉瘤外科手术等治疗手段的效果提升提供了较为有效的尝试。
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编辑人员丨5天前
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具有聚集诱导发光特性的纳米材料在肿瘤诊断和治疗中的研究进展
编辑人员丨5天前
聚集诱导发光(AIE)是指发光体由于聚集而发射荧光,具有AIE特性的发光体被称之为AIEgens。传统荧光材料在聚集或团聚状态时容易出现聚集诱导淬灭(ACQ),与之相反,AIE不受ACQ效应干扰,在生物医学应用方面展现着巨大潜力。该文将概述AIE的发光机制和性能特点,并对其纳米材料在肿瘤的生物成像和成像引导下治疗方面的最新研究进展进行综述。
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编辑人员丨5天前
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基于AIE技术构建快速细菌药物敏感性试验新方法
编辑人员丨5天前
目的:基于AIE荧光探针6PD-DPAN可结合细菌并聚集发光,荧光强度可体现细菌数量的原理,建立一种快速、简便、准确的细菌药物敏感性试验新方法,为临床快速精准用药提供依据。方法:评价类研究。收集东莞市厚街医院2022年1—12月临床样本分离菌共107株,其中46株用于新方法的建立,61株用于方法学验证。微量肉汤稀释法测定的最低抑菌浓度(MIC)为金标准,以庆大霉素,左氧氟沙星、头孢噻肟3种抗菌药物作为实验药物;计算第4 h荧光强度比值(R值),采用ROC曲线分析R值在判断细菌生长与否的效能并确定其截断值。新方法检测61株临床菌株的MIC,以微量肉汤稀释法为金标准,分析新方法的基本一致性、分类一致性、极重大错误和重大错误,采用Kappa检验确定两者的一致性。结果:培养4 h R值的ROC曲线分析:截断值为3.0,其对细菌生长的判定敏感度和特异度均为100%;细菌生长受抑制R值为11.1(8.6,14.4);细菌生长R值为1.1(1.0,1.2)。与金标准相比,新方法检测61株临床菌株MIC的基本一致性为100%(61/61),分类一致性为96.7%(59/61),未出现极重大错误和重大错误,Kappa值为0.94,新方法与微量肉汤稀释法结果一致性较好。结论:本研究成功构建了一种基于AIE技术的细菌药物敏感性试验新方法,可在5 h内取得满意结果,为临床早期精准药物治疗提供依据。
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编辑人员丨5天前
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具有聚集诱导发光性能的高效增敏剂用于骨肉瘤的光热治疗研究
编辑人员丨5天前
目的:探讨BITT的聚集诱导发光(AIE)性质,骨肉瘤细胞靶向性、荧光成像以及光热治疗效果。方法:采用MG63、143B细胞作为模型细胞,探讨其生物相容性,以商业细胞核染料Hoechst 33342为比较对象,探讨其细胞内定位区域及抗光漂白性,应用激光照射,探讨其对肿瘤细胞的暗毒性和光热治疗效果,激光照射和黑暗组两组间比较采用 t检验。 结果:随着激光功率的提高、浓度的升高,BITT溶液的温度迅速升高。浓度40 μmol/L的BITT溶液在激光照射153 s后可达45 ℃,相同条件下60 μmol/L可达49.5 ℃。随着激光功率的提高,浓度60 μmol/L的BITT溶液的温度迅速升高,1 W/cm 2的660 nm激光照射300 s可达58.8 ℃。BITT即使在低浓度(20 μmol/L)下也能显示出优异的光热性能。激光共聚焦显示BITT主要定位在骨肉瘤细胞质中,具有优异的光稳定性。采用低能量(0.3 W/cm 2)的660 nm激光照射,其光热治疗杀伤效果显示,在较低的浓度下(16 μmol/L),肿瘤细胞可被大比例杀伤(杀伤率>90%)。 结论:BITT在水溶液中具有良好的光热转换能力,其良好的光热转化能力、生物相容性、光稳定性能为后续光热治疗协同放疗增敏研究提供良好的增敏剂及基础技术支持,为骨肉瘤外科手术的协同治疗带来新的协同治疗方式选择。
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编辑人员丨5天前
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基于聚集诱导发光的多肽荧光探针的制备及其在早期龋齿检测中的应用
编辑人员丨5天前
目的:制备基于聚集诱导发光的多肽荧光探针,并对其在早期龋齿检测中的应用进行探讨。方法:将8个天冬氨酸-丝氨酸-丝氨酸(DSS)与聚集诱导发光材料结合制备多肽荧光探针,体外建立人工脱矿模型,将样本浸泡于多肽荧光探针溶液中1 min,应用荧光成像系统对牙齿样本进行检测并收集图像和荧光数据。同时应用扫描电镜观察牙齿的表型,电子显微镜检测牙齿釉质表面钙磷比,偏光显微镜观察牙齿釉质区域。结果:多肽荧光探针处理区域明显可以观察到脱矿牙齿的荧光强度低于正常牙齿,且差异有统计学意义( P<0.05)。扫描电镜显示脱矿组的牙釉质表面可见较多不规则孔隙;未脱矿组的牙釉质表面较为表面平坦,可见一些不规则的片状物堆积。偏振光显微镜结果显示正常牙齿的釉质区域可以观察到明显的双折射,而脱矿牙齿的釉质区域可以观察到一道黑色区域,或是双折射效应消失,可见部分黑色暗影。 结论:制备了一种基于聚集诱导发光的多肽荧光探针,其能够精准定位牙釉质,在早期龋齿检测中具有一定的应用价值。
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编辑人员丨5天前
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表皮生长因子受体靶向性纳米探针的肺癌细胞靶向性能与双光子荧光成像
编辑人员丨5天前
目的:探讨新型具有聚集诱导发光性质的纳米探针(AIE-225)对表皮生长因子(EGFR)的靶向结合能力,细胞器靶向性及其双光子成像效果。方法:采用HCC827,HLF细胞作为模型细胞,探讨其细胞结合能力,以商业溶酶体染料为参比对象,探讨其亚细胞水平的靶向区域和靶向能力,同时应用多种波长的双光子激光(如850、950 nm)进行激发,探讨该纳米探针的双光子靶向成像能力。结果:AIE-C225探针具有良好的靶向性,对EGFR高表达的HCC827细胞具有良好的靶向性能,与之比较,使用未耦联西妥昔单抗的AIE纳米颗粒未见到荧光,同时采用正常肺永生化细胞HLF也没荧光信号。AIE-C225作用的HCC827细胞其细胞器定位为溶酶体,与商用溶酶体染料具有高达0.88的共定位系数,且其在850 nm和950 nm的双光子激发下的的细胞荧光成像与488 nm激发下的共定位系数分别为0.991、0.998(Manders系数)。结论:AIE-C225具有良好的肺癌细胞EGFR靶向性能,其良好的双光子吸收、荧光发射性能为其后续双光子光动力研究提供基础技术支持。
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编辑人员丨5天前
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具有聚集诱导发光特性的线粒体靶向荧光探针在骨肿瘤诊疗中的应用
编辑人员丨5天前
目的:探讨MeTTPy的聚集诱导发光(AIE)性质,细胞器靶向性,单光子成像效果,以及光动力治疗(PDT)效果。方法:采用人源骨肉瘤细胞系MG63细胞作为细胞模型,探讨MeTTPy浓度为1 μmol/L时的生物相容性,以商业线粒体染料为比较对象,探讨其亚细胞水平的靶向区域和靶向能力,并探讨其活性氧(ROS)产生能力,应用28 mw/cm 2白光光源辐照,探讨其不同浓度对肿瘤细胞的杀伤率,应用活死细胞染色法评价MeTTPy对MG63肿瘤细胞的潜在的光动力治疗效果。采用 t检验确定治疗组与对照组之间的显著性。 结果:MeTTPy浓度为1 μmol/L时具有良好的生物相容性,其对线粒体的靶向性能与商业线粒体染料具有90%的共染率,对活细胞中的线粒体具有高特异性靶向;MeTTPy具有较强的原位ROS产生能力,其ROS产生量与对照组比较明显增加;细胞毒性测试实验显示,与对照组MG63细胞存活率比较,MeTTPy浓度为2.5 μmol/L时MG63细胞存活率不受影响( t=1.862, P>0.05),差异无统计学意义,表现出其良好的生物相容性。采用低功率白光光源照射下(28 mw/cm 2),MeTTPy在较低的浓度下(2.5 μmol/L),MG63细胞可被大比例杀伤(杀伤率>92%, t=16.35, P<0.05),显示出MeTTPy对肿瘤细胞具有良好的光疗效果。 结论:MeTTPy具有良好的荧光成像功能,对线粒体具有高靶向性,具有高效率的ROS产生能力,能够对骨肉瘤细胞进行高效杀伤,是一款高效的光敏剂,可以作为骨肉瘤等肿瘤细胞进行手术切除等治疗方式的良好辅助。
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编辑人员丨5天前
