目的:筛选与大鼠膝骨关节炎相关的差异代谢物及其代谢通路，为深入研究骨关节炎生物标志物提供线索。方法:60只雄性SPF级SD大鼠按体质量（300 ~ 350 g）采用随机数字表法分为模型组和对照组，每组30只。实验周期分别为4、8和12周，每个周期每组10只大鼠。模型组大鼠左侧膝关节采用改良Hulth法行造模手术，5 d后，驱赶大鼠使之活动，每天30 min。实验期间，两组大鼠均饲喂普通固体饲料、自由饮用自来水。实验期满，采集大鼠膝关节和血液样本。采用苏木素-伊红（HE）染色观察膝关节组织病理学变化，超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱仪（UPLC-Q-TOF-MS）检测血清中小分子代谢物，并通过多元统计分析和数据库比对，筛选与骨关节炎相关的差异代谢物及其相关代谢通路。结果:模型组大鼠膝关节软骨变薄，表层粗糙、缺损或剥脱，软骨细胞变性、坏死、缺失，病变随实验周期延长而加重。筛选出11个与骨关节炎相关的血清差异代谢物，分别为硒代半胱氨酸、6-羟褪黑素、γ-谷氨酰半胱氨酸、花生四烯酸、二氢神经鞘氨醇、白三烯A4、白三烯B4、11，12-环氧-二十碳三烯酸（11，12-EpETrE）、溶血磷脂酰胆碱、神经酰胺和N-花生四烯酰甘氨酸。其中，实验4周时筛选出9个，与对照组比较，模型组5个高表达，4个低表达；实验8周时筛选出8个，与对照组比较，模型组2个高表达，6个低表达；实验12周时筛选出8个，与对照组比较，模型组5个高表达，3个低表达。筛选出2条与骨关节炎密切相关的代谢通路，分别为鞘脂代谢通路和花生四烯酸代谢通路，其中，二氢神经鞘氨醇和神经酰胺归属到鞘脂代谢通路，花生四烯酸、白三烯A4和白三烯B4归属到花生四烯酸代谢通路。结论:骨关节炎疾病进程可以影响血清代谢物谱的构成和水平。11个血清差异代谢物涉及鞘脂代谢通路和花生四烯酸代谢通路，与骨关节炎的发生发展相关。

目的:探索微小RNA-506(miR-506)对胰腺癌肿瘤相关巨噬细胞及肿瘤微环境的影响。方法:使用Panc02细胞建立原位成瘤模型。将C57BL/6荷瘤小鼠分为miR-ctrl C57组和miR-506 C57组，每组15只，成瘤后分别通过腹腔注射二油酰磷脂酰胆碱(DOPC)脂质体包被的miR-ctrl(miR-ctrl/DOPC)或miR-506(miR-506/DOPC)，测量肿瘤重量和体积，以流式细胞术检测肿瘤浸润性免疫细胞亚群变化，并监测小鼠生存期。将荷瘤裸鼠分为miR-ctrl nude组和miR-506 nude组，每组5只，成瘤后分别通过腹腔注射miR-ctrl/DOPC或miR-506/DOPC，用以排除免疫系统影响。将C57BL/6荷瘤小鼠分为清除对照组和巨噬细胞清除组，每组10只，成瘤后两组分别通过腹腔注射磷酸盐缓冲液(PBS)或氯膦酸二钠脂质体(Clo)，用以排除巨噬细胞影响，2周后各组再分为miR-ctrl PBS组、miR-506 PBS组、miR-ctrl Clo组和miR-506 Clo组。 结果:miR-506 C57组小鼠的肿瘤体积(1.04±0.23)×10 3 mm 3和肿瘤重量(0.51±0.10)g均小于miR-ctrl C57组[(1.92±0.34)×10 3 mm 3和(0.99±0.19)g]，M2/M1比例低于miR-ctrl C57组[(1.19±0.46)比(2.85±0.40)]，差异具有统计学意义( P<0.01)。生存曲线显示，miR-506 C57组小鼠总生存期好于miR-ctrl C57组小鼠，差异具有统计学意义( P<0.01)。BALB/c裸鼠成瘤模型中miR-506 nude组小鼠的肿瘤体积和肿瘤重量与miR-ctrl nude组比较，差异无统计学意义( P>0.05)。C57BL/6荷瘤小鼠模型免疫微环境中miR-506 PBS组较miR-ctrl PBS组肿瘤调节性T细胞的比例更低[(4.70±1.86)%比(12.00±2.24)%]，细胞毒性T细胞的比例更高[(10.54±1.89)%比(4.54±1.25)%]，凋亡细胞毒性T细胞的比例更低[(14.00±4.00)%比(26.80±4.27)%]，细胞毒性T细胞产生干扰素-γ的浓度更高[(89.60±14.69)比(28.00±13.69)ng/g]，差异均具有统计学意义( P<0.05)；但经过Clo清除巨噬细胞后，miR-506 Clo组和miR-ctrl Clo组上述指标差异均无统计学意义( P>0.05)。 结论:MiR-506通过巨噬细胞依赖的方式抑制胰腺癌的进展并纠正其免疫抑制性肿瘤微环境。

目的:基于转录组测序（RNA-Seq），分析比较非酒精性脂肪性肝炎（NASH）早期小鼠模型中Yes相关蛋白（YAP）阳性肝细胞和YAP阴性肝细胞的差异表达基因（DEGs），初步了解此类YAP阳性肝细胞的功能学特征。方法:蛋氨酸-胆碱缺乏（MCD）饲喂C57BL/6小鼠2周构建NASH早期模型，对照组为正常饮食。肝组织行苏木精-伊红（HE）、天狼星红染色和病理学评分；免疫组织化学（IHC）观察YAP、p-YAP在肝组织的表达。胶原酶灌注联合Percoll密度梯度离心获取活率大于90%的原代肝细胞。进行YAP抗体标记、流式分选获得YAP阳性和YAP阴性肝细胞并进行RNA-Seq。测序结果用GO、KEGG和相互作用网路的分析方法筛选DEGs。RT-PCR验证模型组肝组织中YAP以及部分DEGs的表达水平。两样本均数比较采用独立样本 t检验。 结果:与对照组相比，MCD诱导小鼠2周的HE染色肝组织可见脂肪变（病理评分1.07±0.21），伴有小叶炎症（病理评分1.13±0.32）和肝细胞气球样变（病理评分0.80±0.20），天狼星红染色未见明显肝纤维化（病理学评分0.40±0.40）。IHC显示NASH早期的部分肝细胞YAP表达为阳性。RNA-Seq分析，YAP阳性和YAP阴性的肝细胞分别得到Clean reads为49 310 604条、54 820 036条。与YAP阴性肝细胞相比，YAP阳性肝细胞导致5 565个基因差异表达，包括上调基因1 662个，下调基因3 903个。上调基因的GO分析显示，嘌呤三磷酸核苷和三磷酸核苷等线粒体功能相关的代谢过程为显著富集的生物学过程（BP）；下调基因分析到显著富集的BP为嗅觉受体相关过程。KEGG分析显示，DEGs富集到292条通路，氧化磷酸化（OXPHOS）通路为显著富集信号通路。RT-PCR确认炎症因子（白细胞介素-1β、白细胞介素-6）、YAP及其靶基因（Cyr61、Ankrd1）以及OXPHOS通路的Cox5b、Sdhc基因水平显著上调，与测序结果一致。相互作用网络分析预测到8个关键基因。结论:NASH早期肝细胞代谢水平的变化可能与YAP活性增加有关。

目的:研究新北美圣草苷对淀粉样β蛋白片段25-35(Aβ 25-35)诱导PC12细胞损伤的保护作用，探讨其防治AD的作用机制。 方法:采用MTT法检测新北美圣草苷对正常PC12细胞及Aβ 25-35损伤PC12细胞增殖的影响，筛选新北美圣草苷溶液的干预浓度。将PC12细胞按随机数字表法分为空白组、模型组、雌二醇组和新北美圣草苷组。空白组与模型组以DMEM培养24 h；雌二醇组加入DMEM和1×10 -3 μmol/L雌二醇溶液；北美圣草苷组加入DMEM和6×10 4 μmol/L新北美圣草苷溶液，培养2 h后，除空白组外，其余各组加入20 μmol/L的Aβ 25-35储备液，继续培养22 h。采用AnnexinV-FITC/PI双标记检测凋亡率，Western blot法检测雌激素受体β(estrogen receptor β, ERβ)及p-P38/P38蛋白表达，检测PC12细胞上清中乙酰胆碱(acetylcholine, ACh)含量及胆碱乙酰转移酶(Choline acetyl transferase, ChAT)、乙酰胆碱酯酶(Acetylcholin esterase, AChE)活性。 结果:与模型组比较，新北美圣草苷组细胞凋亡率[(8.080±0.578)%比(18.500±0.870)%]降低( P<0.01)，ERβ蛋白[(0.348±0.042)比(0.273±0.006)]表达升高( P<0.01)，p-P38/P38蛋白[(0.372±0.058)比(0.571±0.063)]表达降低( P<0.01)，ACh[(14.319±1.039)μg/mg比(9.157±1.605)μg/mg]水平及ChAT[(0.715±0.053)U/mg比(0.280±0.093)U/mg]活性增高( P<0.01)，AChE[(2.607±2.048)U/mg比(6.038±1.867)U/mg]活性降低( P<0.01)。 结论:新北美圣草苷可促进Aβ 25-35损伤的PC12细胞增殖，抑制细胞凋亡，具有一定的细胞保护作用，其作用机制可能与调节ERβ表达，抑制P38蛋白磷酸化，提高胆碱能系统功能有关。

目的:探讨乳腺癌患者行根治术后联合促性腺激素释放激素类似物（gonadotrophin releasing hormone analogue，GnRHa）的治疗效果及其对血清代谢物的影响。方法:对2019年5月至2021年5月期间收集济宁医学院附属医院130例乳腺癌患者的临床资料进行分析，所有患者均接受根治术治疗，依据随机数字表法将患者随机分为对照组和观察组，每组各65例。对照组患者在根治术后接受传统的化疗方案，即多柔比星、环磷酰胺和5-氟尿嘧啶的联合应用。观察组患者在根治术后接受新的化疗方案，即醋酸曲普瑞林和环磷酰胺的联合应用。分析两组患者的临床疗效及血清代谢物水平的差异。结果:观察组患者临床治疗有效率为93.8%，对照组疗效有效率为61.5%，观察组显著高于对照组，差异有统计学意义（ χ 2=19.57， P=0.000）。观察组患者中性粒细胞减少症和心脏毒性发生率分别为23.1%和7.7%，对照组患者中性粒细胞减少症和心脏毒性发生率分别为41.5%和21.5%，观察组显著低于对照组，差异有统计学意义（ χ 2=5.07、4.99， P=0.024、0.026）。观察组患者3年生存率为87.7%，对照组患者3年生存率为73.8%，观察组高于对照组，差异有统计学意义（ χ 2=4.01， P=0.045）。经过治疗后，甘氨胆酸、甘油脱氧胆酸、胞二磷胆碱、水样尿酸、溶血磷脂酸、皮质醇、花生酸、L-谷氨酸8种代谢物在两组患者血清中差异存在统计学意义（ P<0.05）。 结论:乳腺癌患者在根治术后联合GnRHa化疗治疗效果更好，患者不良反应发生率低，生存率高，这可能与血清代谢物水平存在关联。

目的:探讨口腔鳞状细胞癌（oral squamous cell carcinoma，OSCC）的代谢紊乱特征，并发现和鉴定OSCC的生物标志物，为其早期诊断提供新思路。方法:本研究共纳入2019年8月至2020年1月就诊于郑州大学第一附属医院口腔颌面外科的76例OSCC患者和体检科的70名健康受试者，按照随机数表法按2∶1的比例将所有受试者分为测试组和验证组，测试组共96例受试者，其中OSCC患者51例，健康受试者45名；验证组共50例受试者，其中OSCC患者25例，健康受试者25名。收集所有受试者的血液样本及临床资料，基于超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱技术建立血清样本非靶向代谢组学分析方法，进一步结合主成分分析、偏正交最小二乘法判别分析和 t检验分析发现并鉴定测试组中OSCC患者和健康受试者之间的差异代谢物，并对得到的差异代谢物进行代谢通路分析。二元Logistic回归分析和受试者工作特征曲线分析用以进一步筛选和确定OSCC的生物标志物，构建OSCC诊断模型，用验证组检验诊断模型的诊断效能。 结果:对比分析测试组中OSCC患者和健康受试者的血清样本后得到21种内源性差异代谢物，代谢通路分析提示OSCC患者存在脂质代谢和氨基酸代谢紊乱（ P<0.05）。本研究构建了由溶血磷脂酰胆碱（lysophosphatidylcholine，LysoPC）（16∶0/0∶0）、LysoPC［18∶1（9Z）/0∶0］、牛磺酸和D-谷氨酸组成的诊断模型（曲线下面积为0.998，95% CI为0.994~0.999， P<0.05）。 结论:OSCC患者体内发生了明显的脂质和氨基酸代谢紊乱，代谢组学手段是建立OSCC诊断模型的有效方法。

目的:探索巨噬细胞在非酒精性脂肪性肝炎(NASH)中的作用、机制和治疗价值。方法:通过给予8周龄雄性Alms突变( foz/ foz)小鼠高脂饮食6、8和10周，给予8周龄雄性C57BL/6小鼠蛋氨酸胆碱缺乏(MCD)饮食7 d、3周和4周分别构建NASH小鼠模型，对照组小鼠分别给予普通饮食和MCD对照饮食。采用荧光定量聚合酶链反应方法检测NASH模型小鼠和对照组小鼠肝脏的 F4/80 mRNA水平，采用免疫荧光染色观察对照组小鼠和NASH模型小鼠肝脏中的巨噬细胞。lysM-Cre/DTR转基因小鼠予MCD饮食5周后，分为转基因实验组(给予白喉毒素清除巨噬细胞)和转基因对照组(给予磷酸盐缓冲液注射)。检测转基因实验组和转基因对照组小鼠肝脏中的甘油三酯水平和脂质过氧化物水平，并对小鼠的肝脏组织进行炎症评分。通过细胞因子分析实验和蛋白质印迹法分析巨噬细胞调节NASH中炎症的作用机制。通过AML-12肝细胞和RAW264.7巨噬细胞条件培养基与细胞共培养观察肝细胞和巨噬细胞的相互作用。通过氯膦酸脂质体清除野生型和NASH模型小鼠中的巨噬细胞，证实其在NASH预防中的价值。统计学方法采用独立样本 t检验。 结果:NASH模型 foz/ foz小鼠高脂饮食饲养6、8和10周时肝脏中的 F4/80 mRNA水平均高于对照组小鼠(1.49±0.19、1.70±0.15、1.93±0.04比1.05±0.22)，差异均有统计学意义( t＝3.06、4.92、7.92，均 P<0.05)；NASH模型小鼠MCD饮食饲养7 d和3周时肝脏中的 F4/80 mRNA水平均高于对照组小鼠(2.70±0.99和3.08±1.71比1.00±0.83)，差异均有统计学意义( t＝3.43、3.54，均 P<0.01)；免疫荧光染色结果显示，与对照组比较，NASH模型小鼠MCD饲养4周时肝脏中F4/80 +诱导型一氧化氮合酶(iNOS) +的M1型巨噬细胞增多，F4/80 +CD206 +的M2型巨噬细胞明显减少。巨噬细胞清除后转基因实验组小鼠的炎症评分、肝脏甘油三酯和脂质过氧化物水平均低于转基因对照组[(0.69±0.32)分比(1.95±0.74)分、(43.97±13.24) g/mg比(63.09±14.85) g/mg、(24.84±6.21) nmol/mg比(37.91±8.91) nmol/mg]，差异均有统计学意义( t＝3.14、2.72、2.41，均 P<0.05)。细胞因子分析实验结果显示，巨噬细胞清除可显著降低血液中白细胞介素(IL)-12和巨噬细胞炎症蛋白-1α的蛋白质水平(差异倍数分别为-3.98、-2.74，均 P<0.05)。转基因实验组小鼠细胞核中CCAAT/增强子结合蛋白β蛋白质减少。体外研究发现RAW264.7巨噬细胞条件培养基可促进AML-12肝细胞中脂肪聚集；MCD培养基处理的AML-12肝细胞条件培养基可促进RAW264.7巨噬细胞向M1型极化。经氯膦酸脂质体处理后的野生型小鼠肝脏中的甘油三酯和脂质过氧化物的蛋白质表达水平均低于MCD诱导的NASH模型小鼠[(45.33±14.59) g/mg比(63.10±16.02) g/mg、(2.11±0.48) nmol/mg比(2.73±0.17) nmol/mg]，差异均有统计学意义( t＝2.84、2.73，均 P<0.05)。蛋白质印迹法结果显示，经氯膦酸脂质体处理后的NASH模型小鼠肝脏中的磷酸化蛋白激酶R样内质网激酶、肌醇需求酶-1α、蛋白质二硫键异构酶、葡萄糖调节蛋白78、磷酸化真核起始因子2α的蛋白质相对表达量均低于未经氯膦酸脂质体处理的NASH模型小鼠(1.84±0.36比3.05±0.83、1.50±0.84比6.65±1.47、0.87±0.12比2.28±0.52、1.68±0.43比4.76±1.13、1.42±0.19比2.75±0.79)，差异均有统计学意义( t＝2.32、5.28、4.56、4.41、2.85，均 P<0.05)。 结论:NASH中巨噬细胞发生M1型极化，并与肝细胞相互作用促进炎症因子分泌、脂肪合成因子上调、氧化应激和内质网应激，引起NASH进展。巨噬细胞清除剂氯膦酸脂质体是预防NASH潜在的新途径。

目的:评估后部眼球筋膜下注射曲安奈德治疗视盘血管炎的效果。方法:回顾性分析郑州市第七人民医院2016年5月至2019年5月60例(60眼)视盘血管炎的临床资料。患者均采用自行改制6号泪道冲洗针头进行后部眼球筋膜下注射曲安奈德40 mg/0.5 ml，同时辅以静脉滴注复方血栓通及能量合剂，颞浅动脉旁皮下注射复方樟柳碱注射液，口服甲钴胺、胞二磷胆碱及复合维生素B。随访观察6～18个月。结果:60例均治愈，视力有不同程度提高，部分患者黄斑中心凹形态恢复，水肿减轻。结论:后部眼球筋膜下注射曲安奈德治疗视盘血管炎安全有效，操作简单，费用低廉。

干燥综合征是一种以侵犯泪腺、唾液腺等外分泌腺体为主要临床特点,以高度淋巴细胞浸润为特征的弥漫性结缔组织病.间质性膀胱炎是一种慢性膀胱炎性疾病,以尿频、尿急、夜尿多和/或盆腔疼痛为主要临床表现,其病理改变以膀胱黏膜下溃疡和纤维化为主要表现.干燥综合征并发间质性膀胱炎不少见.抗毒蕈碱型3型乙酰胆碱受体抗体不仅会引起干燥综合征患者腺体分泌功能障碍,同时在间质性膀胱炎中发挥重要的致病作用,其机制可能包括:①伴有肥大细胞参与的免疫性炎症和膀胱感觉神经上调的神经源性炎症;②引起逼尿肌收缩功能受损,诱发三磷酸腺苷释放,刺激感觉神经流出.

目的 观察消木丹颗粒对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠胆固醇合成的影响,基于mTORC1/USP20/HMGCR通路探讨其治疗NAFLD作用机制.方法 60只SD大鼠随机分为空白组、模型组、西药组(多烯磷脂酰胆碱)和中药低、中、高剂量组(消木丹颗粒).空白组予普通饲料喂养,其余组均予高脂饲料喂养12周建立NAFLD大鼠模型.造模成功后,各给药组予相应药物灌胃,空白组和模型组予无菌蒸馏水灌胃,连续4周.记录大鼠体质量、肝质量,计算肝指数,全自动生化分析仪检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转氨酶(AST)、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)含量,HE染色、油红O染色观察肝组织形态,实时荧光定量PCR和Western blot检测大鼠肝组织核糖体S6激酶(S6K)、泛素特异性蛋白酶20(USP20)、3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶(HMGCR)mRNA及p-S6K、S6K、USP20、HMGCR蛋白表达.结果 与空白组比较,模型组大鼠体质量、肝质量、肝指数显著升高(P<0.01,P<0.05),肝叶体积增大,边缘变钝;血清ALT、AST、TC、TG、LDL-C含量显著升高,HDL-C含量显著降低(P<0.01);大部分肝细胞脂肪变性、有明显空泡和炎性浸润,脂滴增多,肝组织USP20、HMGCR mRNA表达显著升高(P<0.01),p-S6K、USP20、HMGCR蛋白表达显著升高(P<0.01).与模型组比较,中药高剂量组和西药组大鼠体质量、肝质量、肝指数显著降低(P<0.01,P<0.05),肝脏外观改善;血清ALT、AST、TC、LDL-C含量降低,HDL-C含量升高(P<0.01,P<0.05);肝细胞脂肪变性和气球样变减轻,脂滴沉积减少,肝组织USP20、HMGCR mRNA及p-S6K、USP20、HMGCR蛋白表达降低(P<0.01,P<0.05).结论 消木丹颗粒可能通过mTORC1/USP20/HMGCR通路调节胆固醇合成,进而发挥治疗NAFLD作用.