目的:探讨补体C3a受体在db/db小鼠糖尿病肾病发病中的作用，为糖尿病肾病的防治提供新靶点。方法:12只8周龄雄性2型糖尿病（db/db）小鼠及6只同窝野生型（db/m）小鼠饲养于无特定病原体级环境。实验分组及干预：db/m组、db/db组、C3a受体拮抗剂组，每组6只，其中C3a受体拮抗剂组为db/db小鼠腹腔注射C3a受体拮抗剂（SB290157，10 mg/kg）进行干预，2 d腹腔注射1次，连续注射8周。收集血、尿样本，检测小鼠体重、血糖、血肌酐、血尿素氮、尿微量白蛋白/尿肌酐、尿N-乙酰-β- D-氨基葡萄糖苷酶（NAG）水平；收集肾组织，采用HE、PAS、Masson染色观察肾组织病理变化，免疫组化、免疫荧光及Western印迹检测肾组织C3及C3a受体表达，Western印迹检测肾组织肾损伤分1（Kim-1）、α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、紧密连接蛋白1（ZO-1）、波形蛋白、E钙黏蛋白（E-cadherin）的表达，免疫荧光分析α-SMA、ZO-1、Kim-1表达及分布，免疫组化分析白细胞介素1（IL-1）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）表达，TUNEL法检测肾组织细胞凋亡情况。 结果:与db/m组相比，db/db组小鼠体重、空腹血糖、尿微量白蛋白/尿肌酐及尿NAG均明显较高（均 P<0.01）；与db/db组相比，C3a受体拮抗剂组小鼠体重、空腹血糖、尿微量白蛋白/尿肌酐及尿NAG均较低（均 P<0.01）；三组血肌酐和血尿素氮的差异均无统计学意义（均 P>0.01）。与db/m组相比，db/db组小鼠肾小球肥大，肾小管上皮细胞坏死、脱落，肾小管扩张，C3、C3a受体蛋白表达均明显较高（均 P<0.01）；与db/db组相比，C3a受体拮抗剂组肾小球病变轻微，肾小管上皮细胞轻度坏死，肾小管扩张不明显。db/db组小鼠肾组织Kim-1、IL-1、TNF-α蛋白表达均高于db/m组，而C3a受体拮抗剂组Kim-1、IL-1、TNF-α蛋白表达均低于db/db组（均 P<0.01）。与db/m组相比，db/db组小鼠肾小管上皮细胞α-SMA、波形蛋白蛋白表达均明显较高，ZO-1、E-cadherin蛋白表达均明显较低（均 P<0.01）；与db/db组相比，C3a受体拮抗剂组α-SMA、波形蛋白蛋白表达均明显较低，ZO-1、E-cadherin蛋白表达均明显较高（均 P<0.01）。与db/m组相比，db/db组小鼠肾组织凋亡细胞数量增加；与db/db组相比，C3a受体拮抗剂组凋亡细胞数量减少。 结论:db/db小鼠肾组织C3和C3a受体表达明显升高。拮抗C3a受体可降低db/db小鼠体重、血糖、尿微量白蛋白/尿肌酐及尿NAG，减轻肾脏病理损伤，抑制肾组织炎症、细胞凋亡和肾小管上皮间充质转化。

目的:探讨低物质的量浓度过氧化氢预处理对小鼠骨髓间充质干细胞（BMSC）氧化应激性凋亡的作用及其机制。方法:采用实验研究方法。通过全骨髓培养法从2只2周龄雄性BALB/c小鼠中分离培养BMSC，鉴定后取第3~7代对数生长期细胞进行实验。将细胞按随机数字表法（分组方法下同）分为用相应终物质的量浓度过氧化氢处理的0 μmol/L过氧化氢组（即不加入过氧化氢，下同）、25 μmol/L过氧化氢组、50 μmol/L过氧化氢组、100 μmol/L过氧化氢组、150 μmol/L过氧化氢组、200 μmol/L过氧化氢组、250 μmol/L过氧化氢组、300 μmol/L过氧化氢组，培养24 h后，用流式细胞术检测细胞凋亡率（样本数为4）。将细胞分为用相应终物质的量浓度过氧化氢处理的0 μmol/L过氧化氢组、25 μmol/L过氧化氢组、50 μmol/L过氧化氢组、100 μmol/L过氧化氢组，培养24 h后，用蛋白质印迹法检测B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）的蛋白表达，计算Bcl-2/Bax比值（样本数为3）。将细胞分为用相应终物质的量浓度过氧化氢处理的0 μmol/L过氧化氢组、25 μmol/L过氧化氢组、50 μmol/L过氧化氢组、100 μmol/L过氧化氢组、200 μmol/L过氧化氢组、300 μmol/L过氧化氢组，培养24 h后，用蛋白质印迹法检测糖原合成酶激酶-3β（GSK-3β）及磷酸化GSK-3β（p-GSK-3β）的蛋白表达（样本数为3）。将细胞分为用相应终物质的量浓度过氧化氢处理的0 μmol/L过氧化氢组、50 μmol/L过氧化氢组、300 μmol/L过氧化氢组，以及预先加入50 μmol/L过氧化氢刺激12 h再加入300 μmol/L过氧化氢的过氧化氢预处理组，培养24 h后，用倒置荧光显微镜（非荧光条件）和免疫荧光法观察细胞形态和生长情况，用流式细胞术检测细胞凋亡率，用蛋白质印迹法检测Bcl-2、Bax、胱天蛋白酶3（caspase-3）、caspase-9、剪切型caspase-3、剪切型caspase-9、GSK-3β及p-GSK-3β蛋白表达，计算Bcl-2/Bax比值，样本数均为3。对数据进行单因素方差分析、Bonferroni检验。结果:培养24 h后，与0 μmol/L过氧化氢组比较，25 μmol/L过氧化氢组、50 μmol/L过氧化氢组、100 μmol/L过氧化氢组细胞的凋亡率均无明显变化（ P>0.05），150 μmol/L过氧化氢组、200 μmol/L过氧化氢组、250 μmol/L过氧化氢组、300 μmol/L过氧化氢组细胞凋亡率均明显上升（ P<0.01）。培养24 h后，与0 μmol/L过氧化氢组比较，25 μmol/L过氧化氢组、50 μmol/L过氧化氢组细胞Bcl-2/Bax比值均明显增加（ P<0.05或 P<0.01），100 μmol/L过氧化氢组细胞Bcl-2/Bax比值显著减少（ P<0.05）。培养24 h后，与0 μmol/L过氧化氢组比较，25 μmol/L过氧化氢组、50 μmol/L过氧化氢组细胞GSK-3β蛋白表达均无明显变化（ P>0.05），p-GSK-3β蛋白表达均显著增加（ P<0.01）；100 μmol/L过氧化氢组细胞GSK-3β、p-GSK-3β蛋白表达均无明显变化（ P>0.05）；200 μmol/L过氧化氢组、300 μmol/L过氧化氢组细胞GSK-3β蛋白表达均明显增加（ P<0.05），p-GSK-3β蛋白表达均显著减少（ P<0.05）。培养24 h后，0 μmol/L过氧化氢组与50 μmol/L过氧化氢组细胞形态及生长情况相近，均正常，与之相比，300 μmol/L过氧化氢组细胞变小、变圆，细胞突起变短或消失，细胞核出现空化，细胞脱落明显增多；过氧化氢预处理组大部分细胞形态正常，细胞脱落少于300 μmol/L过氧化氢组，细胞核形态正常。培养24 h后，4组间细胞caspase-9蛋白表达相近（ P>0.05）。与0 μmol/L过氧化氢组比较，50 μmol/L过氧化氢组细胞凋亡率以及剪切型caspase-9、caspase-3、剪切型caspase-3的蛋白表达均无明显变化（ P>0.05），Bcl-2/Bax比值明显增加（ P<0.05）；300 μmol/L过氧化氢组细胞凋亡率显著升高（ P<0.01），剪切型caspase-9、caspase-3、剪切型caspase-3蛋白表达均明显增加（ P<0.01），Bcl-2/Bax比值明显减少（ P<0.05）。与300 μmol/L过氧化氢组比较，过氧化氢预处理组细胞凋亡率显著下降（ P<0.01），剪切型caspase-9、caspase-3、剪切型caspase-3的蛋白表达均明显减少（ P<0.05或 P<0.01），Bcl-2/Bax比值显著增加（ P<0.01）。培养24 h后，0 μmol/L过氧化氢组、50 μmol/L过氧化氢组、300 μmol/L 过氧化氢组、过氧化氢预处理组细胞GSK-3β、p-GSK-3β蛋白表达分别为1.09±0.14、0.62±0.17、1.35±0.21、0.74±0.34，0.68±0.03、0.85±0.08、0.38±0.10、0.54±0.09。与0 μmol/L过氧化氢组比较，50 μmol/L过氧化氢组细胞p-GSK-3β蛋白表达明显增加（ P<0.05）；300 μmol/L过氧化氢组细胞GSK-3β蛋白表达明显增加（ P<0.05），p-GSK-3β蛋白表达明显减少（ P<0.01）。与300 μmol/L过氧化氢组比较，过氧化氢预处理组细胞GSK-3β蛋白表达明显减少（ P<0.01），p-GSK-3β蛋白表达明显增加（ P<0.01）。 结论:50 μmol/L可能是过氧化氢预处理小鼠BMSC的最佳物质的量浓度，50 μmol/L过氧化氢预处理通过抑制GSK-3β活性对抗线粒体途经的氧化应激性凋亡。

目的:比较不同眼内灌注液对视网膜组织学及功能的影响。方法:取人角膜内皮细胞(HCEC)、人视网膜色素上皮(HRPE)细胞和大鼠视网膜神经节细胞(RGC)，分为正常对照组、平衡盐灌洗液(BSS)组和复方电解质眼内灌注液(CEIIS)组，分别在含体积分数10%DMEM/F12培养基、BSS和CEIIS中培养12、24、48 h，采用细胞计数试剂盒8(CCK8)法测定培养细胞的增生 A值；采用细胞免疫荧光染色法检测培养细胞中凋亡相关蛋白表达；采用流式细胞术测定细胞凋亡率和细胞周期；采用乳酸脱氢酶(LDH)和琥珀酸脱氢酶(SDH)定量检测试剂盒检测细胞线粒体损伤。选用新西兰大耳白兔15只，采用抽签法随机分为对照组3只、BSS组6只和CEIIS组6只，均取左眼行玻璃体切割术，术中根据分组方法分别采用不同的眼内灌注液。分别于术前和术后24 h采用闪光视网膜电图(ERG)测定术眼视网膜功能，采用光相干断层扫描(OCT)检测实验眼视网膜各层结构变化。收集各时间点术眼眼球，采用TUNEL染色法检测视网膜各层细胞的早期凋亡情况；采用免疫组织化学染色法检测视网膜组织中细胞色素C和bax蛋白表达情况；透射电子显微镜下观察实验眼视网膜超微结构变化。 结果:BSS组和CEIIS组3种培养细胞均有不同程度的损伤，随培养时间延长，细胞增生减少，凋亡细胞数量增加；与BSS组相比，CEIIS组培养细胞排列致密整齐，细胞形态和大小均一。BSS组HRPE细胞和RGC的细胞凋亡率分别为(37.157±6.918)%和(29.993±12.330)%，明显高于CEIIS组的(4.163±1.310)%和(6.337±1.903)%，差异均有统计学意义( P＝0.003、0.045)。正常对照组、BSS组和CEIIS组间HCEC和HRPE细胞的G0/G1+S期比例总体比较，差异均无统计学意义(HCEC： F＝2.226， P＝0.189；HRPE： F＝2.634， P＝0.151)；BSS组RGC的G2/M分裂阻滞期比例高于正常对照组和CEIIS组，差异均有统计学意义( P＝0.047、0.024)。各培养时间点CEIIS组HCEC、HRPE细胞和RGC的增生 A值均明显高于BSS组，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。BSS组各细胞中细胞色素C、bax、caspase-3和caspase-9荧光强度强于正常对照组和CEIIS组，bcl-2荧光强度弱于CEIIS组，闭锁小带蛋白(ZO-1)荧光强度弱于正常对照组和CEIIS组。不同时间点BSS组各细胞LDH释放水平均明显高于CEIIS组(均 P<0.001)；培养48 h时，BSS组各细胞SDH释放水平高于CEIIS组，差异有统计学意义(均 P<0.05)。2个组兔眼玻璃体切割术后OCT检查均未见视网膜组织学异常，但透射电子显微镜检查显示2个组术后均出现不同程度的视网膜感光层细胞排列疏松、光感受器外节膜盘大量脱落、空泡变性等，以BSS组更为严重。TUNEL染色显示术后凋亡细胞主要位于视网膜内核层和RGC层，BSS组视网膜细胞凋亡数为(135.2±22.8)个/高倍视野，明显高于CEIIS组的(81.3±17.7)个/高倍视野，差异有统计学意义( t＝4.175， P＝0.002)。全视野闪光ERG检查显示，CEIIS组术眼术后24 h暗视3.0 ERG a波、b波振幅较术前有所下降，但差异均无统计学意义(均 P>0.05)，BSS组术眼术后24 h暗视3.0 ERG a波、b波振幅较术前显著下降，差异均有统计学意义( P＝0.026、0.010)。 结论:与BSS比较，玻璃体切割术中眼内灌注CEIIS在体内、体外实验中对视网膜组织和功能损伤均较小。

目的:探究 Klhl24基因起始密码子突变小鼠毛囊异常的生理表型，为阐明 Klhl24调控毛囊发育的机制提供基础。 方法:将通过CRISPER/Cas9技术构建的 Klhl24基因起始密码子突变 Klhl24 c.3G>T杂合（ Klhl24 c.3G/T）雄性小鼠与野生型雌性小鼠杂交，对同窝小鼠进行基因型鉴定， Klhl24 c.3G/T 雄性小鼠和野生型（WT）雄性小鼠分别作为实验组与对照组，每组小鼠≥ 3只。在小鼠出生后第21天（第1个毛发静止期）及45天（第2个毛发静止期）进行胶带贴毛实验，对小鼠背部皮肤组织进行Ki67免疫组化检测，并用扫描电镜、透射电镜观察，用脱氧核糖核苷酸介导的dUTP末端标记（TUNEL）试剂盒检测毛囊内凋亡细胞。实验组与对照组检测结果比较采用Dunnett- t检验。 结果:第1个静止期与第2个静止期 Klhl24 c.3G/T小鼠每0.25 cm 2胶带脱落毛干数量分别为1 224 ± 51.08与1 514 ± 72.15，WT小鼠分别为320 ± 55.68和125 ± 2.86，第1、2个静止期 Klhl24 c.3G/T小鼠脱落毛干数量均明显多于WT小鼠（ t = 11.96、19.24，均 P < 0.001）。对第1个静止期脱落毛干进行扫描电镜观测，显示脱落毛干底部呈杵状。出生后第59天时，WT小鼠背部无新毛干长出，毛囊处于静止期，而 Klhl24 c.3G/T小鼠背部已有新毛干长出，毛囊进入下一个生长期。透射电镜观察显示，在第1个毛囊静止期（P21） Klhl24 c.3G/T 小鼠背部皮肤毛囊细胞中线粒体内嵴结构混乱，单个毛囊结构中凋亡细胞数量为12 ± 1.15，高于WT小鼠（3 ± 0.63， n = 8， t = 6.874， P < 0.001）。 结论:Klhl24 c.3G/T小鼠毛发异常表型主要为毛囊静止期锚定毛干能力降低，毛囊生长期提前，毛囊细胞中线粒体结构异常，并且凋亡细胞数量增加。

目的:探究小细胞肺癌的机械感知功能及其关键蛋白肌球蛋白重链9（MYH9）在细胞失巢凋亡中的作用。方法:采用3 kPa和12 kPa基质刚度水凝胶，比较小细胞肺癌细胞的Paxillin面积和细胞极化。组织和细胞系水平从11个重要机械感知蛋白中筛选关键蛋白MYH9。通过慢病毒敲减和过表达MYH9表达水平，明确MYH9对细胞机械感知功能的作用，采用流式细胞膜联蛋白V（Annexin V）/碘化丙锭（PI）双染法测定MYH9对细胞失巢凋亡能力的影响。两组连续变量采用独立样本的 t检验，3组组间比较采用One-Way ANOVA分析。 结果:人支气管上皮细胞的软基质组黏着斑面积[（0.79±0.17） μm 2比（1.68±0.30） μm 2， t＝8.26， P<0.01]和细胞形态比值（1.30±0.22比1.81±0.26， t＝4.65， P<0.01）低于硬基质组。小细胞肺癌细胞的软基质组黏着斑面积[（0.48±0.21） μm 2比（0.53±0.22） μm 2， t＝0.51， P>0.05]和细胞形态比值（1.26±0.20比1.36±0.22， t＝1.06， P>0.05）较硬基质组差异无统计学意义。筛选基因表达综合数据库（GEO）中小细胞肺癌组织的转录组测序数据，小细胞肺癌细胞组MYH9蛋白表达（0.12±0.02比0.30±0.02， t＝11.44， P<0.01）低于对照组。过表达小细胞肺癌细胞中MYH9后，软基质组黏着斑面积[（0.69±0.21） μm 2比（1.12±0.43） μm 2， t＝2.85， P<0.05]和细胞形态比值（1.37±0.18比1.70±0.34， t＝2.72， P<0.05）低于硬基质组，漂浮培养下的早期凋亡细胞比例[（12.81±1.92）%比（4.81±1.30）%， t＝7.69， P<0.01]高于硬基质组。 结论:小细胞肺癌细胞的机械感知功能缺失，其关键功能蛋白MYH9显著下调。过表达MYH9在恢复小细胞肺癌细胞机械感知功能的同时，削弱其抗脱落凋亡能力。

目的:探讨不同剂量氟对大鼠血管内皮损伤的影响。方法:选取2 ~ 3月龄的清洁级雄性SD大鼠30只，体质量为180 ~ 220 g，采用饮水染氟法建立大鼠氟中毒模型，按照体质量采用随机数字表法分为对照组（氟化钠含量0 mg/L）、低剂量组（氟化钠含量100 mg/L）、高剂量组（氟化钠含量200 mg/L），每组10只。大鼠持续染氟12周，每隔2周测量体质量。染氟12周后，采用酶联免疫吸附实验（ELISA）检测各组大鼠血清骨钙素（BGP）、内皮素-1（ET-1）、细胞间黏附因子-1（ICAM-1）、白细胞介素-6（IL-6）、脂联素（APN）的含量。透射电镜观察大鼠腹主动脉血管内皮超微结构的改变。结果:大鼠染氟第4周，对照组体质量[（306.90 ± 19.13）g]高于低、高剂量组[（280.31 ± 18.44）、（269.03 ± 17.47）g， P均< 0.05]，但低剂量与高剂量组间比较差异无统计学意义（ P > 0.05）；染氟第6、8、10、12周，对照组体质量[（377.40 ± 23.72）、（422.89 ± 32.23）、（450.00 ± 29.26）、（473.20 ± 28.43）g]高于低、高剂量组[（329.50 ± 21.78）、（368.90 ± 23.79）、（395.17 ± 28.22）、（409.27 ± 29.95）g；（306.75 ± 27.09）、（343.00 ± 18.41）、（362.99 ± 21.77）、（371.76 ± 21.65）g， P均< 0.05]，且高剂量组体质量低于低剂量组（ P均< 0.05）。大鼠饮水染氟12周后，对照组血清BGP、ET-1、ICAM-1、IL-6水平均低于低、高剂量组，血清APN高于低、高剂量组（ P均< 0.05）；高剂量组血清BGP、ET-1、ICAM-1、IL-6水平高于低剂量组，APN低于低剂量组（ P < 0.05）；同对照组相比，低剂量组血管内皮细胞外部突体不规范，内皮与基膜连接不紧密，空泡明显；高剂量组内皮细胞连接变短或脱离，胞内异染色质含量明显增多，内皮细胞脱落到血管腔，内皮细胞凋亡。 结论:高氟可引起大鼠血管内皮损伤。

目的:观察GYY4137对大鼠精索静脉曲张(VC)生精功能损伤的保护作用。方法:选取健康成年雄性SD大鼠32只购自湖北省疾病预防控制中心，随机分为4组：假手术组、假手术＋GYY4137组、VC组及VC＋GYY4137组。假手术组、假手术＋GYY4137组仅分离而不结扎左肾静脉，VC组与VC＋GYY4137组结扎左肾静脉制备VC模型，VC＋GYY4137组、假手术＋GYY4137组术后每日腹腔注射GYY4137(10 mg/kg)。采用苏木精-伊红(HE)染色观察睾丸组织病理改变；测定睾丸组织中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)含量；采用原位缺口末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡指数；免疫组织化学及蛋白质印迹法(Western blot)检测睾丸组织中B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(bax)和半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3的表达。两组间比较采用 t检验。 结果:VC组可见各级生精细胞排列紊乱且广泛脱落，VC＋GYY4137组可见生精细胞排列轻度紊乱，少数腔内见脱落的生精细胞。与假手术组[(1.86±0.23) nmol/g蛋白]和假手术＋GYY4137组[(1.83±0.22) nmol/g蛋白]比较，VC组[(4.33±0.37) nmol/g蛋白]中MDA含量明显增加( t＝9.820、10.059， P<0.05)；VC＋GYY4137组[(2.38±0.27) nmol/g蛋白]与VC组比较，MDA含量显著下降( t＝-7.374， P<0.05)。VC组的SOD活性[(0.23±0.04) U/mg蛋白]与假手术组[(0.81±0.06) U/mg蛋白]和假手术＋GYY4137组[(0.82±0.07) U/mg蛋白]比较明显降低( t＝-9.757、-9.926， P<0.05)；VC组经GYY4137处理后SOD活性增加[(0.62±0.06) U/mg蛋白]( t＝9.368， P<0.05)。TUNEL结果显示假手术组及假手术＋GYY4137组[(3.89±0.45)%、(3.92±0.51)%]可见较少的睾丸生精细胞凋亡，VC组凋亡细胞明显增加[(17.26±0.98)%， P<0.05]；与VC组比较，VC＋GYY4137组生精细胞凋亡明显减少[(8.24±0.65)%， P<0.05]。免疫组织化学及Western blot结果显示Caspase-3和bax表达水平在VC组(0.41±0.04、0.59±0.06)中的表达明显高于假手术组(0.11±0.02、0.19±0.03， t＝9.650、9.097， P<0.05)和假手术＋GYY4137组(0.12±0.02、0.20±0.03， t＝9.327、8.870， P<0.05)；与VC组比较，VC＋GYY4137组(0.21±0.03、0.34±0.04)中Caspase-3和bax表达水平下降( t＝-6.928、-6.005， P<0.05)。 结论:GYY4137可减轻氧化应激水平和抑制凋亡，从而对VC睾丸生精功能发挥保护作用。

目的:观察超低温环境下长期保存后人角膜基质透镜的透明度及结构变化，探讨简单可行且有效的角膜基质透镜长期保存方案。方法:收集2013—2020年于中山大学中山眼科中心海南眼科医院行飞秒激光小切口角膜透镜取出术(SMILE)200眼，手术中获取完整人角膜基质透镜标本200份。将人角膜基质透镜标本置于-80 ℃超低温冰箱中保存，按照保存时间的不同将标本分为1个月组、24个月组、60个月组和84个月组，每组50份。采用超微量分光光度计测量各组在300~800 nm波长范围内角膜基质透镜的透光率，每个透镜共连续检测10次，每次间隔50 nm；分别采用苏木精-伊红染色和Masson染色观察各组角膜基质透镜的组织学形态变化和胶原纤维结构改变；采用透射电子显微镜观察各组角膜基质透镜中胶原纤维排列方式及角膜基质细胞的超微结构变化；采用TUNEL染色法检测各组人角膜基质透镜中角膜基质细胞凋亡情况。结果:各组450~800 nm波长范围内角膜基质透镜透光率比较差异均无统计学意义(均 P>0.05)。Masson染色结果显示，1个月组角膜基质透镜胶原纤维排列整齐、紧密，24个月组部分胶原纤维间出现空泡，60个月组胶原纤维排列疏松，空泡增多，84个月组部分胶原纤维脱落，角膜基质透镜变薄；苏木精-伊红染色显示角膜基质透镜形态改变与胶原纤维变化相对应。透射电子显微镜下可见1个月组角膜基质透镜胶原纤维排列规则，角膜基质细胞呈长梭形，核膜完整，胞质丰富；24个月组胶原纤维排列稍疏松，角膜基质细胞变形，核膜不完整；60个月组胶原纤维排列疏松、不整齐，细胞核萎缩变形；84个月组胶原纤维排列紊乱，角膜基质细胞皱缩，核膜不连续，核质裂解。TUNEL染色结果显示，1个月组、24个月组、60个月组和84个月组透镜中基质细胞凋亡率分别为(87.80±1.17)%、(89.50±1.05)%、(89.30±1.51)%和(90.20±1.47)%，总体比较差异无统计学意义( F＝4.525， P＝0.053)。 结论:人角膜基质透镜超低温环境下保存84个月可见胶原纤维排列紊乱及角膜基质细胞凋亡，但其透明度和完整性仍较好。超低温保存技术长期保存角膜基质透镜有效且简单可行。

糖尿病肾脏疾病（DKD）是糖尿病的严重并发症之一，并已成为我国慢性肾衰竭的首要病因。足细胞是一种高度分化的上皮细胞，作为构成肾小球滤过屏障的重要组成部分，其足突融合、消失或裂孔膜蛋白表达下降及足细胞凋亡与脱落均可能导致蛋白尿的发生，并影响DKD的病程进展。自噬是真核细胞降解胞质内蛋白质和细胞器的重要过程，自噬水平的提高有助于减轻足细胞损伤。内质网应激（ERS）是错误折叠的蛋白质在内质网中过度积累，可使细胞进入应激状态，其对细胞损伤的调控可能是双向的。足细胞自噬与ERS受多种信号通路的调节被认为与DKD的发生发展关系密切。本文综述DKD状态下足细胞自噬与ERS的主要信号通路以及足细胞自噬与ERS间的相互影响和作用，提示通过干预足细胞自噬与ERS可以治疗DKD的一些潜在靶点，以期对未来DKD的治疗提供一定帮助。

目的:明确氟中毒大鼠生殖损伤状态下的氧化应激和内质网应激水平，并观察α-硫辛酸（α-LA）干预后各相关指标的变化，探讨α-LA在氟中毒大鼠生殖损伤中的作用及可能机制。方法:将40只雄性Sprague-Dawley（SD）大鼠采用随机数字法分为四组，分别为对照组（0.9%氯化钠）；α-LA组（100 mg/kg α-LA）；氟化钠（NaF）组（25 mg/kg NaF）；NaF和α-LA联合作用组（25 mg/kg NaF+100 mg/kg α-LA）。采用灌胃的方式染毒，染毒8周后，各组分别进行精子质量分析、睾丸氟含量测定及HE染色；TUNEL法检测睾丸组织细胞凋亡；生化法测定氧化应激相关指标；Western印迹检测睾丸组织中GRP78、PERK及CHOP的蛋白表达水平。结果:与对照组相比，NaF组的精子密度及精子存活率较低[（5.99±1.45）×10 6/ml比（10.96±1.83）×10 6/ml， P<0.01；（33.40±2.71）%比（66.41±3.33）%， P<0.01]，精子畸形率较高[（26.43±2.43）%比（11.44±1.55）%， P<0.01）]；与NaF组相比，NaF+α-LA组的精子密度及精子存活率较高[（8.47±0.82）×10 6/ml比（5.99±1.45）×10 6/ml， P<0.05；（49.97±3.51）%比（33.40±2.71）%， P<0.05]，而精子畸形率较低[（22.69±2.39）%比（26.43±2.43）%， P<0.05]。与对照组相比，NaF组的睾丸氟含量较高[（11.14±0.77）μg/g比（5.78±0.28）μg/g， P<0.01]。光学显微镜下可见NaF组的生精细胞间结构较为疏松，生精细胞和成熟精子数量减少，与α-LA联合作用后，生精细胞结构损伤有所改善，管腔脱落细胞减少。TUNEL检测发现，NaF组的凋亡指数较高[（61.32±7.14）%比（6.99±2.17）%， P<0.01]；与NaF组相比，NaF+α-LA组细胞凋亡指数较低[（45.96±5.31）%比（61.32±7.14）%， P<0.01]。氧化应激水平检测发现，与对照组相比，NaF组的丙二醛（MDA）较高[（5.46±0.30）nmol/mgprot比（3. 24±0.58）nmol/mgprot， P<0.01]，超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）较低[（6.04±0.71）U/mgprot比（7.19±0.52）U/mgprot， P<0.01；（23.67±0.99）U/mgprot比（26.91±1.67）U/mgprot， P<0.01]；与NaF组相比，NaF+α-LA组MDA较低[（4.66±0.70）nmol/mgprot比（5.46±0.30）nmol/mgprot， P<0.05]，GSH-Px较高[（25.90±1.93）U/mgprot比（23.67±0.99）U/mgprot， P<0.05]。内质网应激水平检测发现，与对照组相比，NaF组的GRP78、PERK和CHOP蛋白表达水平明显上调（0.79±0.05比0.45±0.09， P<0.01；0.71±0.04比0.40±0.05， P<0.01；0.79±0.09比0.19±0.08， P<0.01），与NaF组相比，α-LA抑制了NaF介导的GRP78和CHOP蛋白表达上调（0.46±0.06比0.79±0.05， P<0.01；0.52±0.09比0.79±0.09， P<0.01）。 结论:α-LA可通过抑制氧化-内质网应激信号通路，对氟中毒大鼠生殖损伤起到一定的保护作用。