认知功能障碍与神经细胞凋亡、自噬、氧化应激及神经炎症等多方面有着密切的联系。在许多临床疾病或刺激因素的作用下，患者会出现认知功能的改变，包括记忆、语言、执行和计算等方面能力下降，这给患者生活和家庭都带来很多不便，因此研究各种方法改善患者认知功能障碍十分重要。文章回顾了腺嘌呤核糖核苷酸（adenosine monophosphate, AMP）活化蛋白激酶（AMP-activated protein kinase, AMPK）和沉默信息调节因子1 (sirtuin 1, SIRT1）这两种细胞代谢关键分子，并概括总结了AMPK/SIRT1信号转导通路主要通过拮抗氧化应激、激活细胞自噬和抑制神经炎症三个方面来降低认知功能损害。AMPK/SIRT1信号通路的神经保护作用将为更多认知功能障碍相关疾病的治疗提供可能。

目的:研究角膜上皮细胞是否存在腺嘌呤核糖核苷酸活化的蛋白激酶(AMPK)磷酸化及真菌对角膜上皮细胞AMPK磷酸化和白细胞介素6(IL-6)表达的影响。方法:取人永生化角膜上皮细胞系，采用实时无标记细胞多功能分析仪筛选AMPK激动剂5-氨基-4-甲酰胺咪唑核糖核苷酸(AICAR)(100、300、500和1 000 μmol/L)和抑制剂化合物C(10.0、12.5、15.0、17.5和20.0 μmol/L)对角膜上皮细胞作用的安全浓度范围。以单纯角膜上皮细胞作为正常对照组，角膜上皮细胞与孢子共培养作为孢子对照组，在孢子对照组基础上分别加入AICAR和化合物C作为AICAR组和化合物C组，分别培养4 h。采用Western blot法检测角膜上皮细胞磷酸化AMPK(p-AMPK)和AMPK的表达，采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法测定角膜上皮细胞培养上清液中IL-6质量浓度。结果:不同浓度AICAR作用于角膜上皮细胞不同时间后，细胞指数总体比较差异均无统计学意义(均 P>0.05)。10.0 μmol/L和12.5 μmol/L化合物C作用于角膜上皮细胞后细胞指数较未处理细胞升高。正常对照组、孢子对照组、AICAR组和化合物C组p-AMPK水平分别为0.67±0.15、2.57±0.12、3.67±0.58和1.50±0.50，各组间总体比较差异有统计学意义( F＝32.820， P<0.001)。孢子对照组p-AMPK水平较正常对照组升高，差异有统计学意义( P<0.001)；AICAR组较孢子对照组p-AMPK水平升高，化合物C组较孢子对照组p-AMPK水平降低，差异均有统计学意义(均 P＝0.010)。正常对照组、孢子对照组、AICAR组和化合物C组AMPK相对表达量总体比较差异无统计学意义( F＝0.120， P＝0.950)。正常对照组、孢子对照组、AICAR组和化合物C组IL-6质量浓度分别为(107.81±17.15)、(156.32±9.94)、(167.96±14.16)和(127.42±19.75)pg/ml，各组间总体比较差异有统计学意义( F＝15.210， P<0.001)，其中孢子对照组IL-6质量浓度较正常对照组升高，差异有统计学意义( P<0.001)；AICAR组IL-6质量浓度较孢子对照组略升高，差异无统计学意义( P＝0.260)，化合物C组IL-6质量浓度较孢子对照组降低，差异有统计学意义( P＝0.010)。 结论:角膜上皮细胞有AMPK磷酸化表达，且真菌孢子刺激角膜上皮细胞后AMPK磷酸化增强，IL-6分泌增多。

目的:探讨微小核糖核酸-133a(miR-133a)和沉默交配型信息调节2同源基因1(SIRT1)在电针促进废用性肌萎缩恢复中的作用。方法:将C57BL/6小鼠30只按随机数字表法随机分为正常组、实验对照组、实验组，每组10只小鼠，将实验对照组和实验组小鼠进行尾悬吊构建废用性肌萎缩模型，实验组在尾悬吊的同时进行电针刺激，刺激穴位为阳陵泉和足三里，每日刺激1次，每次15 min，连续治疗14 d。正常组和实验对照组则常规饲养，不进行任何干预。3组大鼠均于实验组干预14 d后统一取材，测定比目鱼肌、腓肠肌的湿重比和横截面积，采用透射电镜观察其骨骼肌和线粒体结构，Western Blot检测沉默交配型信息调节2同源基因1(SIRT1)、过氧化物酶体增殖物激活受体C辅激活因子1a(PGC-1a)、尼克酰胺磷酸核糖转移酶(NAMPT)、腺苷酸活化蛋白激酶α(AMPK-a)以及磷酸化-AMPK-a(P-AMPK-a)蛋白的表达，实时荧光聚合酶链式反应(RT-PCR)检测肌肉萎缩F盒蛋白(Atrogin-1)、肌肉特异性环指蛋白1(MuRF1)、微小核糖核酸-133a(miR-133a)、SIRT1、配对盒基因(Pax7)、生肌调节因子(MyoD)和肌细胞生成素(MyoG)基因的表达，试剂盒检测尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)的浓度和NAD+/还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)。结果:干预14 d后，与实验对照组比较，实验组比目鱼肌的湿重和横截面积分别增加了21.03%、30.25%( P<0.05)，腓肠肌的湿重和横截面积与实验对照组比较，分别增加了5.24%、16.96%( P<0.05)。实验组Atrogin-1、MuRF1、SIRT1、PGC-1a、NAMPT、P-AMPK-a/AMPK-a的表达和NAD+浓度、NAD+/NADH均显著低于实验对照组( P<0.05)，而实验组miR-133a的表达则较实验对照组干预14 d后增加了163.3%( P<0.05)。干预14 d后，与细胞增殖相关的Pax7、MyoD基因在实验对照组中表达的显著上调，与正常组和实验组比较，差异均有统计学意义( P<0.05)；实验组与细胞分化相关的MyoG基因则呈高表达状态，与正常组和实验对照组比较，差异均有统计学意义( P<0.05)。 结论:SIRT1相关通路属于机体反射性保护机制之一，参与介导骨骼肌的自然恢复；电针刺激经miR-133a/SIRT1增强成肌细胞分化，改善线粒体能量代谢，从而促进废用性肌萎缩的恢复。

衰老是在细胞、组织和器官水平上发生的生理性内稳态的渐进性损害过程。在衰老过程中，自噬水平明显下调，受损细胞器（如线粒体）和蛋白质的累积可导致诸多生理过程发生增龄性改变，最终诱发诸如代谢紊乱、心肌缺血再灌注损伤和癌症等众多疾病。二甲双胍作为治疗2型糖尿病的药物对其他衰老相关疾病亦有积极作用，可通过不同途径诱导线粒体自噬以清除细胞内损伤线粒体，但其能否通过调节线粒体自噬途径而防治衰老相关疾病尚不明确。该文对线粒体自噬在二甲双胍防治衰老相关疾病中的作用进行综述，以期为基于自噬调控角度探寻延缓衰老以及防治衰老相关疾病的临床干预手段提供参考资料。

观察传统经方"大黄蛰虫丸(DHZCP)"改善肾脏衰老的效果,并探究其潜在的多靶点作用.将大鼠随机分为正常组、模型组、DHZCP组和维生素E(VE)组.首先建立D-半乳糖(D-gal)诱导的大鼠肾脏衰老模型,而后在造模同期,每天分别给予 4 组大鼠双蒸水、DHZCP混悬液和VE混悬液.在药物干预第 60 天末,检测大鼠肾脏衰老和损伤的各项指标,包括肾功能,肾脏组织病理学特征,肾脏衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)染色特征,肾组织Klotho、细胞周期阻滞蛋白和衰老相关分泌表型(SASP)蛋白表达水平.此外,对于大鼠的肾组织分别进行非靶向代谢组学特征分析,筛选潜在生物标志物,富集代谢通路.最后,进行关键作用靶点信号通路的初步验证.结果显示,DHZCP和VE能明显改善衰老模型鼠的肾功能、肾小管/间质组织病理学特征和SA-β-gal染色程度,上调肾组织中Klotho蛋白表达,下调细胞周期阻滞蛋白和SASP 蛋白表达.此外,DHZCP和VE能显著调节衰老模型鼠肾脏内源性代谢物;各组共同影响的差异代谢物有21 个,其中有5 个差异代谢物在衰老模型鼠中显著增加,经DHZCP 和 VE干预后显著回调,这些代谢物关联脂质代谢和能量代谢等途径;各组曲线下面积为0.88～1;DHZCP主要影响腺嘌呤核糖核苷酸活化蛋白激酶(AMPK)通路、环鸟苷一磷酸-蛋白激酶G(cGMP-PKG)通路、环腺苷酸(cAMP)通路、磷脂酰肌醇3 激酶-蛋白激酶B(PI3K-Akt)通路、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)通路、自噬通路等;还影响肾素分泌、长寿调节途径、糖尿病心肌损伤以及烟酸和烟酰胺代谢等多条代谢途径.此外,DHZCP 和VE能明显上调衰老模型鼠肾组织中AMPK信号通路关键信号分子的蛋白表达.总之,DHZCP和VE在体内能改善衰老模型鼠肾脏衰老和损伤;DHZCP的多靶点作用涉及肾脏内多条信号通路和多条代谢途径;其中,AMPK信号通路可能是其关键作用靶点之一.

目的 通过验证 secoemestrin C(Sec C)对肝癌细胞增殖的影响,观察细胞内脂质过氧化水平,检测内质网应激(ERS)相关信号通路变化,进而揭示 Sec C 在抑制肝癌增殖过程中的作用机制,为针对肝癌的药物研发提供新的思路.方法 四甲基偶氮唑蓝(MTT)实验和平板克隆法测定 Sec C对 HepG2 和 BEL7404 细胞增殖的影响;流式细胞术测定Sec C 对肝癌细胞脂质过氧化和凋亡的影响;Western blot法探究 Sec C 对肝癌细胞内质网应激和细胞凋亡相关蛋白表达的影响.结果 Sec C 以剂量依赖性方式抑制 HepG2 和 BEL7404细胞增殖,IC50 分别为 1.556 和 3.489 μmol/L;平板克隆实验结果显示,1 μmol/L Sec C 处理 7 d 后,肝癌细胞的克隆数目和大小显著降低,表明 Sec C 显著抑制肝癌细胞增殖且呈现浓度依赖.流式结果显示,与对照相比,Sec C 处理后,Bodipy 的阳性率增加且呈现浓度依赖,表明 Sec C促进肝癌细胞内脂质过氧化,且流式结果显示 Sec C 以剂量依赖性的方式诱导肝癌细胞凋亡.Western blot 结果表明,Sec C 会引起内质网应激相关蛋白免疫球蛋白结合蛋白、1 型内质网转膜蛋白激酶、活化转录因子 4 和磷酸化的真核生物起始因子 2 表达增多,其作用呈现浓度依赖性;同时 Western blot 结果显示,凋亡相关蛋白多聚腺嘌呤二核苷酸核糖聚合酶的表达显著降低,以及凋亡剪切产物聚腺苷二磷酸核糖聚合酶、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3 和活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶 7 的表达显著增多,其作用呈现浓度依赖性.结论 Sec C 能够显著抑制肝癌细胞的增殖,其作用机制可能通过诱导细胞内质网应激导致细胞凋亡.

目的:探讨三棱抗血小板聚集及抗血栓形成的分子机制.方法:利用中药整合药理学平台(TCM-IP)的中药材数据库、中药成分数据库和疾病靶标数据库的数据信息和分析功能,检索三棱所含的化学成分信息,构建三棱作用的潜在靶标和疾病靶标之间的相互作用网络,然后富集计算核心靶标,进行基因功能分析和通路分析,再进一步构建“中药材-化学成分-核心靶标-关键通路”多维关系网络.结果:对三棱预测活性成分主要包括黄酮、酚酸等成分,如山柰酚、三棱酸等;抗血栓形成涉及202个核心靶标,包括蛋白激酶Cδ(PRKCD),葡萄糖激酶(GCK),腺嘌呤核糖核苷酸活化蛋白激酶α-2催化亚基等;涉及内分泌系统、循环系统、神经退行性疾病等相关生物过程和信号通路.抗血小板聚集涉及136个核心靶标,包括PRKCD,细胞色素C氧化酶蛋白7C(COX7C),GCK等;涉及帕金森病、循环系统、神经退行性疾病等相关生物过程和信号通路.结论:三棱主要通过调控中枢神经系统的神经递质活性达到调节血管内皮细胞黏附分子表达以及血小板线粒体功能介导血小板的凋亡,从而发挥抗血栓形成及抗血小板聚集的药效作用.

莱菔硫烷干预能够降低糖尿病患病风险,主要是通过调控核因子E2相关因子2抑制内皮细胞活化,改善高密度脂蛋白水平来实现.此外,莱菔硫烷通过调控脂质代谢,对脂肪肝病也具有明显的改善作用,其重要途径包括调节氧化物酶体增殖剂激活受体γ、激素敏感性脂肪酶和腺嘌呤核糖核苷酸依赖的蛋白激酶,促进脂肪分解.综上,深入挖掘植物性食源功能成分莱菔硫烷的作用机制,可能是防治糖尿病及脂肪肝病的关键.

目的 观察秦苓液对尿酸性肾病大鼠肾组织AMPK/iNOS信号途径的影响,探讨其对尿酸性肾病肾脏损伤的保护机制.方法 采用腺嘌呤灌胃配合酵母饲料喂养的方法制备高尿酸肾病大鼠模型,将成模大鼠随机分为模型组,别嘌呤醇组[23.33 mg/(kg·d)],秦苓液大、中、小剂量组[剂量分别为:36.4、18.2、9.1 g,(kg·d)],每组12只,予对应药物干预.6周和8周时处死各组1,2大鼠,取肾脏组织.RT-PCR检测AMPKα1、iNOS mRNA表达水平,Western Blot检测AMPKα1、p-AMPKα1、iNOS蛋白表达水平.结果 与正常组比较,6周及8周模型组AMPKα1 mRNA和蛋白表达、p-AMPKα1蛋白表达降低,iN-OS mRNA及蛋白表达升高(P＜0.01,P＜0.05).与模型组比较,6周时秦苓液各组AMPKα1 mRNA表达升高,p-AMPK蛋白表达升高,iNOS蛋白表达降低,秦苓液大、小剂量组AMPKα1蛋白表达升高(P＜0.01,P＜0.05);8周时秦苓液小剂量组AMPKα1 mRNA表达升高,中、小剂量组AMPKoα1、P-AMPKα1蛋白表达升高,jNOS mRNA及蛋白表达降低(P＜0.01,P＜0.05).结论 秦苓液可能通过调节AMPK/iNOS信号途径改善代谢,抑制炎性损伤,减轻尿酸性肾病大鼠的肾脏损伤.

沉默信息调节因子 2 相关酶(silent mating type information regulator 2-related enzymes,Sirtuin)是烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(nicotinamide adenine dinucleotide,NAD+)依赖性的去乙酰化酶.Sirt7是定位于核仁的Sirtuin蛋白家族成员,除了具有去乙酰化酶活性外,还具有腺苷二磷酸(adenosine diphosphate,ADP)-核糖基转移酶、去琥珀酰化酶和去戊二酰化酶活性.Sirt7的作用底物包括组蛋白、DNA损伤修复相关因子、核仁小核糖核蛋白成分(核仁纤维蛋白、U3)、转录因子(GA结合蛋白β1(GA binding protein β1,GABPβ1)、叉头框蛋白O4、GATA4)、细胞周期蛋白依赖激酶9、组蛋白乙酰转移酶1、聚合酶相关因子53(polymerase associated factor 53,PAF53)、Ras相关核蛋白(Ras-related nuclear protein,Ran)、活化T细胞的核因子c1和p53等.另外,Sirt7还可以与损伤特异性 DNA 结合蛋白 1(damage-specific DNA binding protein 1,DDB1)/cullin 4/DDB1-cullin 4相关因子1、Suv39h1/Sirt1、Myc、核呼吸因子1和Elk4等作用,进而调节其功能,但作用机制尚不清楚.Sirt7的多种活性使其在维持基因组稳定、调节RNA转录、抵御应激反应、调控代谢及炎症等病理生理活动中发挥重要作用.本文将介绍Sirt7在调节以上病理/生理活动中的作用机制,以及腺苷酸活化蛋白激酶(adenosine 5'-monophosphate activated protein kinase,AMPK)、蛋白质精氨酸甲基转移酶6、泛素特异性肽酶7等对Sirt7蛋白合成及活性的调节作用,并对目前Sirt7研究中存在的问题进行讨论.