目的:探讨慢性心衰大鼠室旁核(PVN)内脂肪酸酰胺水解酶(FAAH)表达失衡导致中枢交感传出增加的机制.方法:雄性Wistar大鼠左冠状动脉结扎8周后,用超声心动图检测心功能,并通过组织病理学测定心肌梗死面积,鉴定大鼠心衰模型构建成功;酶联免疫吸附法测血浆去甲肾上腺素(NE)水平;Western blot 测定PVN内FAAH蛋白表达量;高效液相色谱法测定PVN内N-花生四烯酰乙醇胺(AEA)的生成量;PVN微量注射AEA、FAAH抑制剂PF3845或rAAV2-FAAH shRNA病毒,记录交感驱动和心功能指标的变化.结果:与假手术组相比,心衰组心功能显著降低,血浆NE显著增加,PVN内FAAH表达量显著上调,AEA生成量显著减少(P<0.05);PVN微量灌注PF3845、AEA或rAAV2-FAAH shRNA病毒后,心衰组交感驱动指标显著降低,心功能明显改善.结论:心衰状态下PVN内FAAH蛋白表达上调可能引起AEA生成量的减少,从而增强交感神经兴奋性,恶化心衰.

目的:探究慢性心衰大鼠下丘脑室旁核(PVN)内花生四烯酰乙醇胺(AEA)对心脏功能和交感神经活动的影响.方法:采用冠状动脉结扎法构建大鼠心衰模型,超声心动图检测心功能;PVN内连续4周分别灌注AEA、钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)选择性抑制剂KN-93、瞬时受体电位香草酸亚型1(TRPV1)通道特异性阻断剂辣椒平(CPZ)、Ca2+螯合剂BAPTA-AM和小电导钙激活钾通道(SK通道)阻断剂apamin后,检测交感驱动及心功能指标;同时采用不同浓度AEA孵育NG108细胞,荧光测定法检测细胞内钙离子浓度([Ca2+]i);Western blot检测CaMKII、SK2及磷酸化TRPV1蛋白水平.结果:与假手术组相比,心衰组左心室舒张末期压(LV-EDP)明显升高,左室压力最大上升、下降速率(±dp/dtmax)和射血分数(EF)明显下降;PVN内AEA含量、[Ca2+]i及CaMKII、SK2和磷酸化TRPV1蛋白水平均显著降低;与溶剂组相比,心衰组PVN内灌注AEA可显著降低心衰大鼠死亡率和交感驱动指标,并改善心功能;然而,PVN内分别灌注KN-93、CPZ、BAPTA-AM和apamin均显著增强交感驱动指标并恶化心功能;AEA可剂量依赖性增加NG108细胞内[Ca2+]i及CaMKII、SK2和磷酸化TRPV1蛋白水平.结论:室旁核内CaMKII/TRPV1/Ca2+/SK2信号通路可能参与了AEA对心衰大鼠心脏功能和交感神经活动的影响.

子宫内膜容受性主要是指孕激素介导的子宫内膜间质细胞向蜕膜细胞增殖、分化的过程,对于胚胎植入的早期阶段是至关重要的.内源性大麻素系统(ECS)参与人体各种生理活动,广泛分布于中枢神经系统,对于代谢和生殖起着十分重要的调节作用.其中主要的内源性大麻素物质——N-花生四烯酰基乙醇胺(AEA)动态变化参与妊娠早期过程,特别是胚胎种植期.本文就子宫内膜容受性与ECS间的关系进行综述,探讨ECS对子宫内膜容受性的作用,进一步阐述其对妊娠的影响.

目的:分析不同舌苔胃癌患者的血清代谢物差异.方法:106例胃癌患者分为薄白苔组(30例)、白厚苔组(29例)、黄薄苔组(26例)和黄厚苔组(21例),33例薄白苔健康人群为对照组,利用超高效液相色谱质谱联用技术(ultra high performance liquid chromatography-mass spectrometer,UPLC-MS)分析血清代谢组,采用主成分分析、正交偏最小二乘法分析、非参数检验分析等方法确定不同舌苔胃癌患者的血清代谢标志分子.结果:与对照组相比,胃癌四组中棕榈油酸、α-亚麻酸、亚油酸和溶血磷脂酰乙醇胺均显著上升,磷脂酸在薄白苔组、黄薄苔组和黄厚苔组均显著上升,薄白苔组中二十碳五烯酸显著上升,黄薄苔组有花生四烯酸乙醇胺、溶血磷脂酸、溶血磷脂酰胆碱和硬脂酰肉碱显著上升.结论:胃癌患者不同舌苔存在特征性的血清代谢分子,为舌苔形成机制研究提供了新的思路.

目的:通过青礞石干预戊四氮(PTZ)点燃癫痫大鼠的脑组织代谢组学研究,探讨青礞石治疗癫痫可能的作用机制.方法:运用PTZ点燃法建立大鼠癫痫动物模型,实验分为空白组、模型组、卡马西平组、青礞石组.通过超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱法(UPLC/Q-TOF-MS)技术检测脑组织样品,利用偏最小二乘法-判别分析(PLS-DA)和SPSS 18.0软件等方式对实验结果进行统计分析.结果:建立了大鼠脑组织代谢指纹图谱、代谢轮廓图,显示各组代谢轮廓发生了明显的变化,各组间均能很好地分开,并且青礞石组较卡马西平组有更靠近空白组的趋势.筛选出了7个差异代谢物,包括磷脂酰丝氨酸(PS)(18∶0/18∶0),L-谷氨酸,二十二碳六烯酰基乙醇酰胺,花生四烯酸,葡糖鞘氨醇,胆甾烷-3,7,12,24,25-五醇,溶血磷脂酰胆碱(LysoPC)(P-18∶0).除二十二碳六烯酰基乙醇酰胺和LysoPC(P-18∶0)外,青礞石对其他5个差异代谢物均有显著性干预调节作用.影响PTZ点燃大鼠发生代谢紊乱的可能代谢通路有12条,较为重要的代谢通路有3条,即D-谷氨酰胺和D-谷氨酸代谢,丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢以及花生四烯酸代谢,其中又以D-谷氨酰胺和D-谷氨酸代谢最为重要.结论:从脑组织代谢组学分析来看,青礞石对PTZ癫痫大鼠具有明确的干预作用,这可能与其干预以上差异代谢物含量及相关代谢通路有关,可减少兴奋性神经递质对脑组织神经元的毒性作用以及抑制脑组织炎症的发展以维持脑细胞的生物学功能而减缓癫痫发生.

背景:神经轴突再生主要受其自身再生能力和抑制性外环境的影响,N-花生四烯基乙醇胺在秀丽线虫中已被证实可以调控神经轴突再生,而在哺乳动物中的作用仍是未知.目的:探究N-花生四烯基乙醇胺对小鼠背根神经节神经元轴突再生的作用.方法:取6-8周龄ICR小鼠的L4-L5处背根神经节组织,经过胶原酶和胰酶消化后,分成脂肪酸酰胺水解酶选择性抑制剂URB597干预组、N-花生四烯基乙醇胺干预组、二甲亚砜对照组、电转绿色荧光蛋白与特异性脂肪酸酰胺水解酶siRNA混合物组.细胞经过3 d的体外培养后,通过神经元特异性抗体免疫标记轴突,测量轴突长度、初级分支和次级分支数量并对其进行统计,判断N-花生四烯基乙醇胺对背根神经节神经元轴突再生的调控作用.结果 与结论:①抑制脂肪酸酰胺水解酶活性后,背根神经节细胞轴突再生没有明显的变化并且URB597对背根神经节神经元不具有细胞毒性作用(P>0.05);②敲减脂肪酸酰胺水解酶后,背根神经节细胞轴突再生没有明显的变化(P>0.05);③外源性N-花生四烯基乙醇胺对背根神经节细胞轴突再生没有明显的调控作用,并且N-花生四烯基乙醇胺,对背根神经节神经元细胞没有细胞毒性作用(P>0.05);④无论是抑制脂肪酸酰胺水解酶活性还是加入外源性N-花生四烯基乙醇胺,对背根神经节神经元轴突分支均没有影响(P>0.05).

目的 基于非靶标代谢组学探索溃疡性结肠炎(UC)脾气虚证的生物学基础.方法 采用液相色谱质谱联用方法对UC脾气虚证和湿热证患者血清进行代谢组学分析.结果 UC脾气虚证存在脂质代谢紊乱,与UC湿热证患者比较,UC脾气虚证血清中1-油酰基甘油磷酸胆碱、溶血磷脂、鞘氨醇、N-棕榈酰磷酸乙醇胺、棕榈酰肉碱、O-花生四烯酰缩水甘油等代谢产物丰度降低,2-亚油酰甘油丰度升高.ROC曲线结果显示,O-花生四烯酰缩水甘油、棕榈酰胺、2-亚油酰甘油可能是诊断UC脾气虚证的潜在生物标志物.结论 代谢组学方法有望揭示UC中医证候的生物学本质,为UC中医辨证提供一定客观依据.