目的:研究藤梨根乙醇提取物(TLG)对H1688、H446细胞凋亡的影响,并探究其相关的分子机制.方法:用不同浓度TLG处理H446、H1688细胞:使用MTT法检测细胞活力;流式细胞仪检测细胞凋亡状况;Western blot检测Erk1/2、Foxo3a、PU-MA、Cleaved PARP蛋白表达量.结果:经TLG处理后,与不加药组相比,细胞的增殖抑制率以剂量依赖性形式增加;细胞凋亡率增加;Western Blot显示Erk1/2蛋白表达量随着TLG浓度的增加而降低;Foxo3a、PUMA、Cleaved PARP蛋白表达量随着TLG浓度的增加而增加.结论:TLG可促进小细胞肺癌细胞H1688、H446的凋亡,其机制可能是通过Erk1/2-Foxo3a-PUMA轴发挥作用.

目的 研究藤梨根Actinidia chinensis Planch的化学成分及其体外抗肿瘤转移活性.方法 藤梨根95％乙醇提取物采用硅胶、Toyopearl HW-40、制备HPLC进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构.通过划痕实验和Transwell实验来评价其体外抗肿瘤转移活性.结果 从中分离得到8个化合物,分别鉴定为β-谷甾醇(1)、3-氧代-12-烯-28-乌苏酸(2)、乌苏酸(3)、2α,3α,24-三羟基乌苏烷-12-烯-28酸(4)、2α,3α,23-三羟基乌苏烷-12-烯-28酸(5)、2α,3β-二羟基齐墩果烷-12-烯-28酸(6)、2α,3β,23,24-四羟基乌苏烷-12-烯-28酸(7)、胡萝卜苷(8).化合物7能明显抑制肿瘤细胞转移,并呈一定剂量依赖性.结论 化合物2、7为首次从该植物中分离得到,化合物7具有较强的体外抗肿瘤转移活性.

目的 研究藤梨根对非小细胞肺癌(NSCLC)A549细胞增殖和侵袭的影响及其调控机制.方法 使用乙醇回流法提取藤梨根有效成分.将A549细胞随机分为4组,分别转染miR-148b-3p模拟物(miR-148b-3p mimics组),miR-148b-3p模拟物阴性对照RNA(miR NC组),miR-148b-3p抑制剂(miR-148b-3p inhibitors组)与miR-148b-3p抑制剂阴性对照RNA(NC组).以CCK-8法检测细胞增殖,Transwell检测细胞侵袭,荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-qPCR)检测miR-148b-3p表达,Western blot检测HSPA4L蛋白的表达.结果 不同浓度藤梨根乙醇提取物(0,0.1,1,10,100,500μg·mL-1)处理A549细胞48 h后细胞增殖率分别为(97.30±4.02)％,(97.12±3.42)％,(95.78±5.90)％,(90.21±9.23)％,(77.42±8.01)％,(73.62±7.61)％.0,100μg·mL-1藤梨根乙醇提取物细胞侵袭数目分别为(45.00±6.56),(18.33±6.43)个;miR-148b-3p相对表达量分别为1.11±0.06,3.27±0.19,0和100μg·mL-1藤梨根乙醇提取物组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05).miR NC组、miR-148b-3p mimics组、NC组和miR-148b-3p inhibitors组HSPA4L蛋白表达分别为0.67±0.20,0.24±0.02,0.60±0.02和0.77±0.05,miR NC组与miR-148b-3p mimics组比较,NC组与miR-148b-3p inhibitors组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05).结论 藤梨根乙醇提取物可以通过miR-148b-3p/HSPA4L轴抑制A549细胞增殖和侵袭.

目的 研究藤梨根乙醇提取物(TLG)对结直肠癌细胞的作用及其抗肿瘤机制.方法 利用MTT检测TLG对人结直肠腺癌细胞HCT-15、LoVo的毒性,细胞平板克隆实验检测TLG对结直肠癌细胞HCT-15、LoVo增殖的影响,Hoechst-33258 染色法和流式细胞术检测TLG对结直肠癌细胞凋亡的影响,Western blot实验检测TLG对HCT-15 中相关蛋白 Caspase-3、PARP、P65、PUMA、AKT、GSK-3β表达的影响,双荧光素酶报告基因实验检测TLG对HCT-15 中相关启动子活性的影响.结果 结直肠癌细胞HCT-15、LoVo经TLG处理后,与对照组相比,细胞活力以时间及剂量依赖性下降(P<0.01,P<0.001),转染AKT cDNA、PUMA siRNA或GSK-3β抑制剂处理后能够恢复增殖(P<0.001);不同浓度TLG处理后,细胞凋亡率提高(P<0.01,P<0.001),转染AKT cDNA或GSK-3β抑制剂处理后能够遏制TLG诱导的凋亡(P<0.01,P<0.001);Western blot显示HCT-15 细胞中的p-AKT/AKT、p-GSK-3β/GSK-3β蛋白表达量随TLG浓度上升而减少(P<0.01),Cleaved-Caspase-3/Caspase-3、Cleaved-PARP/PARP、p65、PUMA蛋白表达量随TLG浓度上升而增加(P<0.05,P<0.01,P<0.001),同时转染AKT cDNA、PUMA siRNA或GSK-3β 抑制剂处理后能够阻滞 TLG 对下游蛋白 Cleaved-Caspase-3/Caspase-3、Cleaved-PARP/PARP、p65、PUMA的影响(P<0.05,P<0.01,P<0.001);报告基因结果显示NF-κB、PUMA启动子活性随TLG浓度上升而增强(P<0.05,P<0.01),同时转染AKT cDNA或GSK-3β抑制剂处理后恢复(P<0.01,P<0.001).结论 TLG可以显著诱导结直肠癌细胞凋亡,发挥较强的抑制肿瘤作用,其机制可能与AKT/PUMA信号通路有关.