目的:探讨西藏自治区高原雷击伤患者的临床特征、治疗情况及发生心脏损伤的危险因素。方法:采用回顾性病例系列研究方法。2008年1月―2023年7月，解放军西藏军区总医院收治55例符合入选标准的雷击伤患者。统计患者的性别、年龄、民族、受伤时间、受伤地（平均海拔）、受伤时活动、发生体表热力烧伤的情况、发生并发症情况、发生复合伤情况、伤前合并基础疾病/生理过程、住院天数、治疗结局、治疗有效率。按年龄段将患者分为少年组（11例）、青年组（28例）、中年组（14例）、老年组（2例），比较4组患者性别、民族分布。根据入院时是否发生心脏损伤，将患者分为心脏损伤组（44例）和非心脏损伤组（11例），比较2组患者性别、年龄、民族、受伤地平均海拔、住院天数、发生并发症情况、发生复合伤情况、体表热力烧伤部位、体表热力烧伤面积。对数据行Mann-Whitney U检验、 χ2检验、Fisher确切概率法检验。行多因素logistic回归分析，筛选影响雷击伤患者发生心脏损伤的独立危险因素。 结果:55例患者中，男39例、女16例，年龄为10~68岁，藏族47例、汉族8例。4个年龄段组患者性别和民族分布比较，差异均无统计学意义（ P>0.05）。受伤时间为5~9月，以6、7月多发，拉萨市城关区（平均海拔3 650 m）、那曲市巴青县（平均海拔4 500 m）雷击伤发病率较高，分别为20.0%（11/55）、16.4%（9/55）。96.4%（53/55）的患者受伤时正在进行室外活动，如放牧、挖虫草、收青稞等。55例患者中发生体表热力烧伤者46例，占83.6%，烧伤面积以不超过10%体表总面积为主，烧伤深度以深Ⅱ度为主。52例（94.5%）患者发生并发症，以心脏损害（44例，80.0%）最为常见；22例（40.0%）患者共发生11种复合伤，最常见的是创伤性颅脑损伤；17例（30.9%）患者伤前共合并11种基础疾病/生理过程；患者住院天数为9（5，17）d。55例患者中治愈出院14例、好转40例、死亡1例，治疗有效率为98.2%。与非心脏损伤组比较，心脏损伤组患者并发症发生比例（ χ2=12.28）、躯干烧伤比例（ χ2=5.15）、受伤地平均海拔（ Z=-2.38）均明显增加（ P<0.05），其余指标均无明显变化（ P>0.05）。多因素logistic回归分析显示受伤地平均海拔为雷击伤患者发生心脏损伤的独立危险因素（比值比为3.28，95%置信区间为1.35~7.99， P<0.05）。 结论:西藏自治区高原雷击伤主要发生在5~9月、受伤地平均海拔为4 500 m、受伤时活动主要为室外活动，受累患者以男性、青年、藏族为主，受伤程度以轻度烧伤居多；伤情复杂且并发症多，以心脏损伤最为常见。受伤地平均海拔为雷击伤患者发生心脏损伤的独立危险因素。

目的:探讨虫草素对脂多糖（LPS）诱导的大鼠肾小管上皮细胞损伤的保护作用及机制。方法:取大鼠肾小管上皮细胞NRK-52E，以1×10 5/mL接种于细胞培养板，并将传至第3代的细胞分为正常对照组（Ctrl组）、LPS组（1 mg/L的LPS刺激细胞）、10 μmol/L和20 μmol/L虫草素干预组（LPS+C 10组、LPS+C 20组）。采用细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒（CCK-8）检测细胞活性；2'，7'-二氯二氢荧光素二乙酸酯（DCFH-DA）染色法检测细胞内活性氧（ROS）水平；用蛋白质免疫印迹试验（Western blotting）检测炎症相关因子细胞间黏附分子-1（ICAM-1）、血管细胞黏附分子-1（VCAM-1）、白细胞介素-1β（IL-1β）以及核转录因子-κB（NF-κB）的蛋白表达。 结果:与Ctrl组比较，LPS可明显抑制NRK-52E细胞活性，增加细胞内ROS含量，上调ICAM-1、VCAM-1、IL-1β以及NF-κB的蛋白表达。与LPS组比较，经10 μmol/L或20 μmol/L虫草素处理后，NRK-52E细胞活性明显升高（以Ctrl组为1：0.717±0.017、0.916±0.036比0.554±0.046），细胞内ROS水平明显降低（以Ctrl组为1：1.527±0.165、1.098±0.168比2.543±0.127），同时ICAM-1、VCAM-1、IL-1β及NF-κB的蛋白表达均明显下调〔以Ctrl组为1：ICAM-1/GAPDH为2.364±0.097、1.561±0.074比3.101±0.121，VCAM-1/GAPDH为2.866±0.135、1.920±0.098比4.170±0.119，IL-1β/GAPDH为2.358±0.107、1.563±0.179比3.301±0.210，磷酸化NF-κB p65（NF-κB p-p65）/GAPDH为2.559±0.166、1.596±0.148比3.183±0.098〕，差异均有统计学意义（均 P<0.05）；且与LPS+C 10组比较，LPS+C 20组细胞活性更为显著（0.916±0.036比0.717±0.017， P<0.01），ICAM-1、VCAM-1、IL-1β及NF-κB蛋白表达下调更加明显（ICAM-1/GAPDH：1.561±0.074比2.364±0.097，VCAM-1/GAPDH：1.920±0.098比2.866±0.135，IL-1β/GAPDH：1.563±0.179比2.358±0.107，NF-κB p-p65/GAPDH：1.596±0.148比2.559±0.166，均 P<0.05）。 结论:虫草素可显著增加LPS诱导肾小管上皮细胞损伤的细胞活性，降低细胞内ROS水平，抑制细胞炎症，其抑制炎症作用可能与NF-κB通路相关。

[目的]探究参七虫草方对丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)/细胞外信号调节激酶(ERK)信号通路的影响,探讨其干预特发性肺纤维化(IPF)炎症反应、延缓肺纤维化的机制.[方法]将140只雄性SD大鼠随机分成 5组:空白组、模型组、参七虫草方组、吡非尼酮组、精氨酸脱亚胺酶组,每组 28 只.除空白组外,其余 4 组大鼠均采用气管内滴注博来霉素(BLM)的方法建立IPF大鼠模型.空白组及模型组大鼠予 0.9%氯化钠溶液灌胃,其余 3 组分别予参七虫草方、吡非尼酮灌胃及精氨酸脱亚胺酶腹腔注射,于药物干预第7、14、21、28 天分 4批处死大鼠.苏木精-伊红(HE)、Masson染色法观察肺组织病理变化;流式细胞术分别检测各组大鼠肺组织单细胞悬液中调节性T淋巴细胞(Th)1/Th2、自然杀伤T细胞(NKT细胞)阳性率;酶联免疫吸附(ELISA)法检测各组大鼠血清中转化生长因子-β1(TGF-β1)及白细胞介素-10(IL-10)的相对表达水平;蛋白免疫印迹(Western Blot)法检测各组大鼠肺组织中磷酸化丝裂原活化蛋白激酶(P-MEK)、磷酸化ERK(P-ERK)、核转录因子-κB p65(NF-κB p65)及活化蛋白酶-1(AP-1)的相对表达水平.[结果]与模型组比较,各治疗组大鼠肺组织中炎症细胞浸润及蓝色胶原沉积均有不同程度改善,但随时间推移,肺纤维化仍逐渐进展.与空白组比较,模型组大鼠相同时间点肺组织单细胞悬液中Th1/Th2 降低(P<0.05),NKT细胞阳性率升高(P<0.01),血清中TGF-β1 表达水平上升(P<0.01),IL-10 表达水平下降(P<0.01),肺组织中P-MEK、P-ERK、NF-κB p65 及AP-1 的表达水平增加(P<0.01).与模型组比较,各治疗组大鼠相同时间点肺组织单细胞悬液中Th1/Th2 无明显差异(P>0.05),NKT细胞阳性率降低(P<0.01),血清中TGF-β1 表达水平下降(P<0.01),IL-10表达水平上升(P<0.01),肺组织中P-MEK、P-ERK、NF-κB p65 及AP-1 的表达水平降低(P<0.01).[结论]参七虫草方可能通过抑制MAPK/ERK信号通路,提高IPF模型大鼠血清中IL-10 的表达水平,降低TGF-β1的表达水平,同时下调肺组织中NF-κB p65、AP-1 的表达水平,从而减轻炎症细胞浸润及胶原沉积,改善IPF病情进展.

目的:探讨虫草素对于穿支皮瓣存活的影响及可能机制.方法:将20只雄性SD大鼠随机分为对照组和虫草素组,每组10只.构建背部穿支皮瓣模型,虫草素组给予虫草素20 mg/kg,对照组给予0.9%氯化钠溶液,连续7 d.观察各组术后7 d皮瓣远端坏死情况以及血流灌注情况,同时取各组皮瓣组织检测皮下水肿率.通过病理学染色、氧化应激相关试剂盒检测、Tunel染色、Western blot等方法检测虫草素对于穿支皮瓣存活的作用以及相应组织内氧化应激、细胞凋亡和自噬指标的变化.结果:术后7 d,各组穿支皮瓣远端均出现不同程度的坏死.虫草素组相较于对照组,皮瓣远端坏死率以及皮下水肿率更低,有更佳的血流灌注(P＜0.05).HE染色及Masson染色结果显示虫草素组皮瓣内微小血管更多,皮下结构和胶原排列更加有序.氧化应激相关指标检测结果显示,虫草素组的丙二醛含量下调(P＜0.05)、超氧化物歧化酶和谷胱甘肽含量上调(P＜0.05).Tunel荧光染色结果显示,虫草素组凋亡细胞更少(P＜0.05).Western blot结果显示,虫草素可以调控皮瓣组织内氧化应激相关蛋白核因子E2相关因子2、血红素加氧酶-1水平升高(P＜0.05),凋亡相关蛋白Bcl-2水平升高、cleaved-caspase3和Bax水平下降(P＜0.05),自噬相关蛋白p-AMPK和微管相关蛋白轻链3II水平升高、p62水平下降(P＜0.05).结论:虫草素能促进穿支皮瓣远端存活,其机制可能是通过抑制氧化应激、抑制细胞凋亡和调控自噬水平起作用.

[目的]通过米曲霉中异源表达虫草素合成关键基因,构建米曲霉工程菌株合成虫草素.[方法]以米曲霉尿苷/尿嘧啶和组氨酸双营养缺陷型菌株AoΔpyrGΔHisB为背景菌株,利用农杆菌介导的转化方法对虫草素合成关键基因CmCns1-CmCns3 进行过表达;通过荧光显微镜观察CmCns1 和CmCns2 在米曲霉中的亚细胞定位;利用高效液相色谱法(HPLC)测定转基因米曲霉虫草素含量,同时对米曲霉发酵液添加合成虫草素的前体甘氨酸和腺嘌呤,探究其在米曲霉中对合成虫草素的影响.[结果]蛹虫草CmCns1 和CmCns2 在米曲霉中定位于脂滴;并且米曲霉中单独过表达CmCns1、共表达CmCns1 和CmCns2 以及共表达CmCns1-CmCns3 均能合成虫草素,发酵 48 h虫草素胞外产量最高达到 37.74 μg/mL;向米曲霉发酵液添加甘氨酸和腺嘌呤,不能有效提升虫草素的含量.[结论]成功在米曲霉异源表达合成虫草素.

目的:研究不同光质对蛹虫草子实体生物量和品质的影响.方法:将转色后的蛹虫草罐头瓶分别置于黑光(BK)、白光(W)、青色光(CY)、红光(R)、蓝光(BE)、洋红色光(CA)、太阳色光(SU)、黄光(Y)和绿光(G)9种光质条件下培养,分析不同光质条件下蛹虫草子实体色泽、生物量、活性成分和营养成分的差异.结果:光质Y处理的蛹虫草子实体颜色最优;光质Y处理的蛹虫草子实体生物量和腺苷含量最高,分别为29.97 g和2.45 mg/g;光质W处理的蛹虫草子实体多糖含量最高,为8.95 mg/g;光质BE处理的蛹虫草子实体虫草素含量最高,为0.30 mg/g;蛹虫草子实体被检测出的氨基酸种类有17种,其中光质BE处理的子实体总氨基酸含量最高,为25.32 g/100 g.结论:光质Y有助于提高子实体色泽、生物量和腺苷含量,光质W有助于提高子实体多糖含量,光质BE有助提高虫草素和总氨基酸含量.

目的 研究虫草菌丝(cultured mycelium Cordyceps sinensis,CMCS)对四氯化碳(CCl4)诱导肝纤维化模型小鼠肝腺苷酸活化蛋白激酶/沉默信息调节因子 1(AMPK/SirT1)信号通路的作用机制.方法 将C57BL/6小鼠(n=40)按体重分层随机分为 5 组:正常对照组、CMCS对照组(3.0 g/kg)、模型对照组、CMCS 1.5 g/kg组(1.5 g/kg)和CMCS 3.0 g/kg组(3.0 g/kg),采用腹腔注射10%CCl4(2 mL/kg)诱导小鼠肝损伤模型.造模与给药2 周后,检测血清ALT、AST、TBil水平;苏木素-伊红(HE)染色观察肝炎症;天狼星红染色观察肝胶原沉积;Jamall's法检测肝羟脯氨酸(Hyp)含量;流式蛋白定量技术(cytometric bead array,CBA)检测肝组织 IL-6、MCP-1、IFN-γ、TNF、IL-10、IL-12p70 水平;免疫组化观察肝组织 Collagen Ⅰ和 SirT1 表达情况;RT-qPCR 检测肝组织 Prkaa1、Prkaa2、Lkb1 和p53 水平.结果 CCl4 染毒 2 周后,模型对照组血清ALT、AST、TBil水平均明显升高(P＜0.05);HE染色和天狼星红染色分别提示肝内大量炎症细胞浸润和胶原沉积;肝Hyp含量及IL-6、MCP-1、TNF表达明显增多(P＜0.05),IL-10 和IL-12p70 表达明显减少(P＜0.01);免疫组化染色提示肝组织Collagen I表达增多;SirT1在肝窦间隙表达减少,在胶原沉积处表达增多;RT-qPCR检测提示肝组织Prkaa1、Prkaa2、Lkb1 表达下降,p53 表达增多(P＜0.05).CMCS 可显著降低纤维化小鼠血清 ALT、AST 水平;降低肝组织 IL-6、MCP-1、TNF 表达(P＜0.05),上调IL-10、IL-12p70 水平(P＜0.05);减少肝炎细胞浸润、胶原形成和Hyp含量,促进肝窦内SirT1 表达,上调肝Prkaa1、Prkaa2、Lkb1 表达(P＜0.05);减轻肝内CollagenⅠ、p53 表达(P＜0.05).与CMCS 1.5 g/kg组相比,CMCS 3.0 g/kg组抑制肝炎症、胶原沉积及上调AMPK/SirT1 表达更为明显(P＜0.05).结论 CMCS可通过上调AMPK/SirT1 信号通路而发挥抗CCl4 诱导小鼠肝纤维化的作用.

目的 观察参七虫草方对肺纤维化大鼠精氨酸琥珀酸盐合成酶-1(ASS1)/src酪氨酸激酶(src)/信号转导和转化激活因子3(STAT3)通路相关因子表达的影响,探讨其治疗肺纤维化的作用机制.方法 选择120只SPF级SD雄性大鼠,采用随机数字表法分为5组:空白组、模型组、参七虫草方组、吡非尼酮组、精氨酸脱亚胺酶(ADI)腹腔注射组(24只/组).除空白组以外,4组均使用一次性气管内滴注博来霉素(BLM)诱导制备特发性肺纤维化的大鼠模型.造模成功后,参七虫草组予参七虫草方汤剂(0.423 g/kg)灌胃;吡非尼酮组予溶于生理盐水的吡非尼酮胶囊粉末(10 mL·kg-1·d-1)灌胃2次;ADI腹腔注射组予以2.25 mg/(kg·d)腹腔注射,1次/3 d;空白组、模型组分别以10 mL/(kg·d)生理盐水灌胃;给药疗程28 d.于第7、14、21、28天分4批处死大鼠,分离肺组织并计算肺指数.采用苏木素-伊红、马松染色观察大鼠肺组织的组织病理学;吉姆萨染色分析BALF中不同种类的炎症细胞;采用酶联免疫吸附测定法检测血清趋化因子配体2(CCL2)、转化生长因子β1(TGF-β1)的含量;蛋白免疫印迹法测定肺组织src、p-srcTry529、STAT3、p-STAT3Try705的蛋白表达;采用实时荧光定量聚合酶链式反应技术检测肺组织ASS1、src、STAT3的表达水平.结果 参七虫草组、吡非尼酮组和ADI腹腔注射组各时间点中性粒细胞、巨噬细胞、淋巴细胞均低于同一时间点的模型组(P<0.05).在相同时间点,参七虫草组、吡非尼酮组和ADI腹腔注射组大鼠血清CCL2、TGF-β1水平均低于模型组(P<0.05).参七虫草组、吡非尼酮组和ADI腹腔注射组的p-srcTry529、p-STAT3Try705蛋白表达水平及肺组织ASS1、src、STAT3 mRNA均低于同一时间点的模型组(P<0.05).结论 参七虫草方可以缓解大鼠的肺纤维化程度,其机制可能通过调控ASS1/src/STAT3信号通路的活化从而缓解BLM大鼠肺纤维化的炎症反应.

严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)引起的COVID-19在全球范围内大流行,危害了人类健康和公共安全,随着对SARS-CoV-2的结构、功能和致病过程的了解,越来越多的潜在药物被开发.蛹虫草(Cordyceps militaris)是我国传统的药用真菌,具有显著的抗病毒作用,虫草素作为蛹虫草的主要活性成分能够与SARS-CoV-2刺突蛋白、主蛋白酶(Mpro)相结合,抑制病毒RNA依赖的RNA聚合酶(RDRP)活性,阻断SARS-CoV-2在机体内复制.蛹虫草还具有提升机体免疫力、修复受损组织的作用.本文概述虫草素抗SARS-CoV-2的机制和蛹虫草其他相关药理作用,以期为蛹虫草用于新型冠状病毒感染的辅助治疗提供参考.

蛹虫草Cordyceps militaris是食药两用真菌,在传统医学中应用广泛,并于2009年被我国卫生部批准为新资源食品.已有研究表明,蛹虫草提取物及其活性成分(虫草多糖、虫草素等)具有多种药理作用.从化学成分、体内/体外药理作用和产业化现状3个方面对蛹虫草相关文献进行梳理,对其调节免疫、抗肿瘤、调血脂、神经保护等药理作用及其相关大健康产品进行综述,并指出蛹虫草在药效物质基础发现、大健康产品研发方面存在的问题及解决思路,以期充分发掘其菌种资源,创造更大的医药价值、经济价值和社会价值.