目的:探讨蝉花菌丝联合海昆肾喜胶囊对糖尿病肾病(DN)肾小管上皮细胞自噬-溶酶体的影响与机制。方法:将24只大鼠腹腔单次注射链脲佐菌素(STZ)诱导SD大鼠高血糖模型后，随机分为模型组(DN)和治疗组(DN+蝉花菌丝联合海昆肾喜胶囊)，用药24周；另外10只未诱导高血糖大鼠设为对照组。检测各组大鼠肾功能指标，取肾皮质行组织病理学检查，采用Western印迹检测大鼠分离肾小管的胶原蛋白-Ⅲ、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、转录因子EB(TFEB)、自噬泡标记蛋白LC3和自噬底物p62表达。将HK-2细胞分为牛血清白蛋白(Co-BSA)组、Co-BSA治疗组、糖基化终末产物-BSA(AGEs-BSA)组及AGEs-BSA-治疗组。Western印迹检测各组细胞p62、TFEB表达；以TFEB质粒转染HK-2细胞，通过RT-PCR检测过表达效率，观察各组HK-2细胞溶酶体红色荧光探针荧光强度，并检测各组细胞组织蛋白酶活性。结果:与对照组大鼠相比，模型组大鼠的血肌酐(Scr)、24 h尿蛋白水平增高、LC3、p62、胶原蛋白-Ⅲ和α-SMA表达明显增多，而肾小球滤过率(GFR)、TFEB表达明显减少。与模型组大鼠相比，治疗组大鼠的Scr、24 h尿蛋白均明显降低，GFR明显升高，LC3、p62、胶原蛋白-Ⅲ和α-SMA表达明显减少，TFEB表达明显增多。在HK-2细胞中，TFEB和p62的表达情况与在大鼠肾组织中相似。与Co-BSA组相比，AGEs-BSA组的探针荧光强度和组织蛋白酶活性明显减弱；过表达TFEB后，AGEs-BSA组的荧光强度和组织蛋白酶活性均明显增强。结论:蝉花菌丝联合海昆肾喜胶囊对糖尿病肾小管上皮细胞可能具有上调TFEB表达、调节自噬-溶酶体通路的作用。

目的:探讨蝉花菌丝对AngⅡ作用下的肾小管上皮细胞Ⅰ型胶原(Col Ⅰ)、Ⅲ型胶原(Col Ⅲ)、纤连蛋白层(FN)、黏连蛋白(LN)分泌的影响,揭示蝉花菌丝防治高血压肾损害作用的机制.方法:以AngⅡ作用下的肾小管上皮细胞为研究对象,采用血清药理学研究方法,观察空白对照组、AngⅡ对照组和蝉花高、中、低剂量组的肾小管上皮细胞Col Ⅰ、ColⅢ、FN、LN分泌的情况,采用SPSS 20.0统计软件进行统计分析.结果:与空白组比较,AngⅡ组肾小管上皮细胞Col Ⅰ、ColⅢ、FN、LN的分泌显著增加,差异具有有统计学意义(P＜0.01,P＜0.05);与AngⅡ组比较,蝉花各剂量组的肾小管上皮细胞Col Ⅰ、ColⅢ、FN、LN分泌均有减少,差异具有统计学意义(P＜0.01,P＜0.05);蝉花高剂量组Col Ⅰ分泌低于蝉花低剂量组(P＜0.05),蝉花高、中剂量组FN分泌低于蝉花低剂量组(P＜0.01),蝉花高剂量组LN分泌低于蝉花低、中剂量组(P＜0.01,P＜0.05),不同剂量的蝉花组之间存在量效相关关系.结论:蝉花菌丝防治高血压肾损害,干预肾纤维化进程,其机制可能是抑制肾小管上细胞细胞外基质的分泌进而抗肾小管间质纤维化.

目的 测定几种不同种类野生虫草及人工培养虫草样品中微量元素含量,分析微量元素含量特征.方法 收集产自中国部分省区的雪峰虫草、球孢虫草、冬虫夏草、凉山虫草和新古尼虫草等5个种7个野生虫草样品,以及新古尼发酵菌丝粉、蝉花纯粉与菌质纯粉、小麦固体培养蛹虫草的培养基及其子实体、市售蛹虫草的子实体和柞蚕蛹虫草等7种人工培养虫草产品类样品,利用电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)测定样品中16种微量元素含量,对比分析不同类型虫草中微量元素的含量特征.结果 从所试野生虫草及人工虫草样品中均检测到较高含量的Mn、Fe、Cu、Zn、Sr等微量元素,且在野生虫草中含量普遍较高;而Se、Cs、V、Ni、Co等微量元素则大多从多数野生虫草及少数人工虫草样品中检测到,但除了Ni在几个野生和人工虫草样品中含量较高以外,其余元素的含量都普遍较低.另外,从所试所有野生虫草及人工虫草样品中均检测出重金属元素Cr、Pb和Hg,且野生虫草的检出均值高于人工虫草.重金属元素As从大部分样品中检出,Cd仅从野生和人工各1个样品中检出,而Ti则从全部样品中均未检出.结论 微量元素含量最高值大多在野生虫草中,而含量最低值则多在人工虫草样品中.

蝉虫草(蝉花)作为我国传统的中药材,是一种药食两用的虫生真菌,因含有丰富的活性物质而具有广泛的医疗保健价值.本研究以自由基清除率为指标分析蝉虫草胞内和胞外多糖的化学抗氧化活性,再以H2O2诱导的人肝LO2细胞氧化损伤为模型,进而分析比较二者对肝细胞氧化应激损伤的改善作用.结果 表明,在化学抗氧化能力比较上,蝉虫草菌丝体胞外多糖有效清除·OH自由基、ABTS自由基和DPPH自由基的EC50值分别为1.06mg/mL、0.96mg/mL和0.63mg/mL,而胞内多糖的EC50值分别为3.71mg/mL、2.83mg/mL和1.70mg/mL,表明蝉虫草胞外多糖的化学抗氧化能力更强;在改善细胞氧化应激损伤比较上,与模型组对比,二者均能随着浓度递增而显著地提高细胞存活率,但胞外多糖比胞内多糖更强,当多糖浓度为5mg/mL时,胞外多糖细胞存活率达到92.36％,胞内多糖只达到82.07％;在调节细胞抗氧化酶清除ROS的机制上,与模型组对比,胞外多糖分别上调SOD酶活力2.51倍和CAT酶活力2.91倍,极显著地降低了细胞ROS水平(P＜0.01)来改善细胞的氧化应激损伤作用.相应地,胞内多糖只上调了1.85倍和2.33倍,显著性地清除了ROS (P＜0.05),表明蝉虫草菌丝体胞外多糖具有更显著的抗肝细胞氧化损伤作用.本研究结果显示蝉虫草菌丝体胞外和胞内多糖均具有良好的抗肝氧化损伤活性,且胞外多糖比胞内多糖活性更好,为蝉虫草菌丝体多糖在保肝产品中的开发和应用提供了科学依据.

[背景]蝉花是传统中药材,前期研究发现柞蚕培养蝉花与野生蝉花成分类似,因此有替代野生蝉花利用的潜力.[目的]揭示柞蚕培养蝉花各部分的代谢组差异,为合理利用人工培养柞蚕蝉花提供理论依据.[方法]用基于HPLC-DAD-TOF/MS代谢组学方法,比较人工培养柞蚕蝉花的虫体、体表菌丝和孢梗束的代谢组差异.[结果]人工培养柞蚕蝉花不同部位代谢组差异显著.蝉花虫体内虽然充满菌丝(菌核),但次生代谢产物并不多,仅二氢神经酰胺和植物鞘胺醇等少数化合物较其他部位多,表明虫体内物质以大分子储藏物质为主.虫体内的植物鞘胺醇含量较高,与蝉棒束孢受柞蚕蛹的免疫损伤有关.虫体表面菌丝中被检测到大量次生代谢产物,这可能是因为虫体内分解的营养成分会优先被菌丝吸收.孢梗束的次生代谢产物相对较少.[结论]柞蚕蝉花不同部位的代谢物显著不同,其虫体表面菌丝次生代谢产物较多,具有较大的代谢物利用潜力.