目的:为控制赶黄草药材的质量,全面开展赶黄草药材的薄层色谱、水分、总灰分、酸不溶性灰分、浸出物、含量测定和指纹图谱研究,建立完善的赶黄草质量标准.方法:收集10批不同产地的赶黄草药材,以乔松素-7-O-β-D-葡萄糖苷建立定性薄层鉴别;采用2015年版中国药典方法对水分、总灰分、酸不溶性灰分、浸出物进行检查;采用HPLC法测定赶黄草药材中乔松素-7-O-β-D-葡萄糖苷、thonningian B、PGHG和thonningian A 4种成分的含量,运用国家药典委员会“中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2004版A)”软件进行相似度评价;通过比较对照品与色谱峰的保留时间,指认色谱峰并建立赶黄草药材指纹图谱.结果:TLC鉴别特征斑点清晰、分离度高;水分平均为6.365％、总灰分平均为6.909％、酸不溶灰分平均为0.679％、浸出物平均为15.617％;4种含量测定成分分离效果良好,在相应的浓度范围内与峰面积有良好的线性关系;指纹图谱显示各批次具有较高的相似度,利用对照品指认出11个色谱峰.结论:该文建立的TLC定性鉴别、检查、含量测定和指纹图谱方法简便,准确度高,专属性强,可用于赶黄草药材的质量标准.

目的 研究赶黄草Penthorum chinense地上部分的化学成分.方法 利用大孔吸附树脂、聚酰胺、硅胶和凝胶等柱色谱、制备薄层色谱、液相色谱等多种色谱方法对其进行分离和纯化,根据理化性质及波谱数据进行结构鉴定.结果 从赶黄草醋酸乙酯部分分离和鉴定了9个黄酮类化合物:6'-羟基-2'-甲氧基二氢查耳酮-4'-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(1)、山柰酚(2)、槲皮素(3)、槲皮苷(4)、广寄生苷(5)、阿福豆苷(6)、绣线菊苷(7)、乔松素-7-O-[4",6"-(S)-六羟基联苯二酰基]-β-D-葡萄糖苷(8)、乔松素-7-O-[3"-O-没食子酰基-4",6"-(S)-六羟基联苯二酰基]-β-D-葡萄糖苷(9).结论 化合物1为新化合物,命名为赶黄草苷,化合物5～7为首次从该属植物中分离得到.

[目的]研究赶黄草中肝保护的有效成分.[方法]采用不同的化学分离手段,包括硅胶柱层析以及Sephadex LH-20凝胶柱层析等方法,对赶黄草乙酸乙酯部位进行化学分离;同时结合不同的波谱解析手段对分离的化合物进行结构鉴定,采用H2O2诱导的HL-7702细胞进行肝保护有效成分的检测.[结果]从赶黄草乙醇提取物中分离出10个黄酮类化合物,分别为木犀草素(1)、槲皮素(2)、芹菜素(3)、乔松素-7-O-β-D-葡萄糖苷(4)、槲皮苷(5)、槲皮素-3-O-α-L-阿拉伯糖苷(6)、山奈酚-3-O-α-L-呋喃阿拉伯糖苷(7)、山奈酚-3-O-α-L-鼠李糖苷(8)、4-deoxy-phlorizin(9)、2’,4’,6’-trihydroydihydrochalcone-4’-O-β-D-glucoside (10);其中化合物4、7和10的OD450值分别为0.317±0.017、0.287±0.017、0.412±0.017.[结论]化合物6和8为首次从扯根菜属植物中分得,化合物7、9、10为首次从虎耳草科植物中分得,其中化合物4、7和10具有较强的肝细胞保护作用.

目的 探讨赶黄草水提取物、70％乙醇提取物、95％乙醇提取物对小鼠内毒素性肝损伤的保护作用.方法 脂多糖刺激RAW264.7细胞建立体外炎症模型,尾静脉注射脂多糖建立小鼠体内肝损伤模型,3种提取物干预,肝苏颗粒为阳性对照.Giemsa法观察细胞形态学变化,MTS法检测细胞活力,ELISA法检测细胞上清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β (IL-1β)水平,HE染色观察肝组织病理学变化,赖氏法测定血浆丙氨酸氨基转移酶(ALT)、门冬氨酸氨基转移酶(AST)水平,超氧化物歧化酶法测定肝组织超氧物歧化酶(SOD)水平,TBA法检测肝组织丙二醛(MDA)水平,免疫荧光法检测肝组织凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)表达.结果 与脂多糖组比较,脂多糖+70％乙醇提取物组(25、50 mg/L)明显抑制细胞形态学变化,TNF-α、IL-1β水平显著降低(P＜0.05,P＜0.01).与模型组比较,70％乙醇提取物组明显改善肝组织病理损伤,降低ASC、NLRP3表达,显著降低ALT、AST、MDA水平(P＜0.05).结论 赶黄草70％乙醇提取物对小鼠内毒素性肝损伤具有明显保护作用,其机制可能与减少TNF-α产生、调控ROS/NLRP3/IL-lβ通路有关.

本研究以总黄酮吸附量和解析率为检测指标,结合动态洗脱考察结果,考察11种树脂对赶黄草总黄酮的富集精制能力.优化树脂类型,选定了对总黄酮进行富集纯化较好的树脂HPD450;采用单因素及正交实验,确定最佳工艺条件:上样量10mL,以6mL/min的流速8BV水、6BV 80％甲醇溶液洗脱,pH值为6～7.以此方法得到90％以上的赶黄草总黄酮,实验结果良好,总黄酮精制工艺成效显著.用HPLC法精确测定赶黄草中槲皮苷、PGHG和ThA三个指标性黄酮成分,最佳色谱条件为:C18色谱柱,检测波长280 nm,进样量5 μL,流动相:乙腈-0.05％磷酸溶液(0～25 min:12％～45％乙腈;25～40 min:45％70％乙腈)梯度洗脱;精确测定赶黄草全草中3种黄酮成分的含量.采用分光光度法检测,指导优化总黄酮精制工艺,并以HPLC法精确测定三种黄酮代表成分.比较两种方法测定结果相一致,互为补充;故在工业生产时,可以分光光度法指导生产,以HPLC法精确定量测定.

目的:探讨腺苷蛋氨酸联合复方赶黄草方治疗胆道梗阻所致胆汁淤积性肝损伤的临床疗效.方法:选取2018年10月—2019年4月在我院收治的胆道梗阻所致胆汁淤积性肝损伤的患者70例,根据随机数字表法将患者分为对照组和观察组,每组患者35例.其中对照组患者使用丁二磺酸腺苷蛋氨酸肠溶片,观察组患者额外联合复方赶黄草方汤剂,比较两组的疗效、肝功能以及炎性因子的水平.结果:治疗后,两组患者血清中的直接胆红素(DBIL)、总胆固醇(CHOL)、丙氨酸氨基转氨酶(ALT)、天冬氨酸氨基转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、总胆红素(TBIL)、间接胆红素(IBIL)水平均显著降低(P<0.05),且观察组优于对照组;两组患者白细胞计数(WBC)、C反应蛋白(CRP)表达水平均显著降低(P<0.01),同时观察组下降水平较对照组更加明显(P<0.05),而两组患者血清IgA、IgE、Ca2+水平与治疗前比差异无统计学意义(P>0.05).结论:腺苷蛋氨酸联合复方赶黄草方可以有效缓解胆道梗阻所致胆汁淤积性肝损伤临床症状,能够改善患者肝功能并降低炎症反应水平.

目的 建立HPLC法同时测定赶黄草中大环多酚类成分:乔松素-7-O-[4',6'-(S)-六羟基二苯甲酰基]-β-D-葡萄糖苷(PHG)、乔松素-7-O-[3'-O-没食子酰基-4',6'-(S)-六羟基二苯甲酰基]-β-D-葡萄糖苷(PGHG)、乔松素二氢查耳酮-7-O-[3'-O-没食子酰基-4',6'-(S)-六羟基二苯甲酰基]-β-D-葡萄糖苷(THA)的含量,并优化其最佳提取工艺.方法 通过HPLC法测定PHG、PGHG、THA的含量,以PHG、PGHG、THA的总提取率为指标对赶黄草提取物进行分析,采用正交设计考察溶媒浓度、提取时间、溶媒用量、提取次数对提取率的影响,从而优化赶黄草大环多酚类成分的最佳提取工艺.结果 在采用的含量测定方法下,PHG、PGHG、THA在线性范围内线性关系良好,加样回收率在100.90％～102.04％之间,RSD值均小于1.5％.最佳提取工艺为取赶黄草干药材,切3～5 cm小段,加入10倍体积、浓度为80％的乙醇水溶液,回流2次,每次2 h.该工艺下,大环多酚提取率超过90％.结论 新建立的含量测定方法准确稳定,重复性好;经优化的提取工艺稳定可行,可为该类成分的进一步开发利用打下基础.

目的 建立HPLC法同时测定赶黄草中乔松素-7-O-β-D-葡萄糖苷、pinocembrin-7-O-[4″,6″-(S)-hexahydroxydiphenoyl]-β-D-glucose、thonnin gianin A、pinocembrin-7-O-[3″-O-galloyl-4″,6″-(S)-hexahydroxydiphenoyl]-β-D-glucose的含量.方法 赶黄草80％甲醇提取物的分析采用Agilent ZORBAX SB-C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm)流动相乙腈-0.5％甲酸水,梯度洗脱;体积流量1.0 mL/min;柱温30℃;检测波长280 nm.结果 4种成分在各自范围内线性关系良好(r≥0.9999),平均加样回收率100.90％ ～ 102.04％,RSD 0.82％ ～2.54％.结论 该方法准确稳定,重复性好,可用于赶黄草的质量控制.

目的 采用网络药理学方法探讨赶黄草治疗慢性肾脏病(CKD)蛋白尿的物质基础及作用机制.方法 通过TCMSP数据库和文献挖掘收集赶黄草的活性成分;利用PharmMapper服务器、OMIM、NCBI和GeneCards数据库预测和筛选赶黄草活性成分治疗蛋白尿的作用靶点.采用Cytoscape软件构建活性成分-作用靶点网络与蛋白相互作用网络图,采用Clue-GO对靶点进行KEGG通路分析.结果 通过OB和DL两个参数筛选得到15个候选活性成分,其中诃子次酸、儿茶素、黄芩苷、木犀草素和槲皮素为赶黄草治疗蛋白尿的主要活性成分.这些成分可能通过调节AKT1、EGFR、SRC、CASP3和IGF1等102个靶点发挥作用.ClueGO分析结果涉及Prostate cancer、Prolactin、Rap1和Ras等信号通路.结论 该研究从网络药理学的角度初步揭示了赶黄草治疗CKD蛋白尿的药效物质基础及作用机制,可为赶黄草的药物开发及临床应用提供参考.

目的 提升赶黄草质量标准.方法 采用显微鉴别、TLC法进行定性研究,2020年版《中国药典》方法测定水分、总灰分、酸不溶性灰分、50％乙醇浸出物含量,HPLC法测定乔松素-7-O-β-D-葡萄糖苷、乔松素-7-O-[4″,6″-(S)-六羟基联苯二酰基]-β-D-葡萄糖苷(PHG)、乔松素-7-O-[3″-O-没食子酰基-4″,6″-(S)-六羟基联苯二酰基]-β-D-葡萄糖苷(PGHG)、thonningianin A含量.结果 显微鉴别专属性理想.TLC斑点清晰,分离度良好.15批样品中水分、总灰分、酸不溶性灰分、50％乙醇浸出物含量分别为6.07％ ～9.55％、5.36％ ～7.97％、0.07％ ～0.23％、15.11％～23.06％,4种成分含量分别为0.62～1.50、1.81～10.92、3.49～11.85、0.52～17.73 mg/g.结论 该方法合理可行,可用于赶黄草的质量控制.