器官移植是目前治疗终末期脏器功能衰竭最为有效的手段。器官短缺是制约器官移植工作开展的全球性问题 ［1］。供者器官获取、保存及移植后缺血再灌注损伤（ischemic reperfusion injury，IRI）是影响移植预后的重要因素。自20世纪器官移植技术开展以来，器官保护技术一直是该领域的研究热点。器官保存液如Collins液、威斯康星大学保存液（the University of Wisconsin solution，UW液）、组氨酸-色氨酸-酮戊二酸盐液（histidine-tryptophan-ketoglutarate solution，HTK液）等相继问世，促进了器官静态冷保存（static cold storage，SCS）技术的迅速发展 ［2］。随着对移植器官IRI认识的不断深入，对器官保存质量、保存时限要求的不断提高，为适应不断增长的供者器官需求和接受扩大标准供者器官，针对不同器官的专用保存液如：HTK-N液 ［3］，肺脏保存液（如Steen液） ［4］，肾脏灌注液（如KPS1液） ［5］等被相继研发应用。目前，SCS仍然是器官移植的标准保存技术 ［2］，但SCS会导致器官冷缺血损伤，且无法在冷保存过程中有效地评估器官功能。机械灌注（machine perfusion，MP）器官保存技术包括常温机械灌注（normothermic machine perfusion，NMP，32℃~37℃）、亚常温机械灌注（subnormothermic machine perfusion，SNMP，20℃~32℃）、低温携氧机械灌注（hypothermic oxygenated perfusion，HOPE，0℃~12℃）和低温机械灌注（hypothermic machine perfusion，HMP，0℃~12℃）。此外，如超低温保存（supercooling preservation，-4℃~6℃） ［6］等新型保存技术也相继出现。离体灌注系统能够在不同温控条件下，实现在器官保存过程中清除代谢废物、提供满足器官代谢需求的基本物质，不仅能延长器官保存时间，同时也能评估离体器官功能、改善器官质量，减少术后相关并发症的发生，提高边缘器官的利用率。多项发表在多个高质量期刊上的的临床随机对照试验（randomized controlled trial，RCT）研究结果 ［7-11］也证实MP能显著修复供者器官质量及减少移植后相关并发症的发生率，未来有望强力推动器官移植事业进步。

[背景]六价铬[Cr(Ⅵ)]暴露能引起肠道菌群结构紊乱,造成功能损伤.维生素C(VC)是人体必需的微量营养素之一,在促进肠道益生菌生长,改善肠道屏障,维持肠道菌群稳态中起重要作用.而VC对Cr(Ⅵ)暴露致肠道菌群紊乱的调节作用还有待研究.[目的]探讨VC对Cr(Ⅵ)暴露导致小鼠肠道菌群紊乱的影响.[方法]32只SPF级C57BL/6小鼠适应性喂养 3 d后,随机分为正常对照组(Con组)、VC组、重铬酸钾(K2Cr2O7)组[Cr(Ⅵ)组]和VC+K2Cr2O7 组[VC+Cr(Ⅵ)组].于第 4天早 8:00,Con组小鼠灌胃给予双蒸水,腹腔注射双蒸水;VC组小鼠灌胃给予VC,腹腔注射双蒸水;Cr(Ⅵ)组小鼠灌胃给予双蒸水,腹腔注射K2Cr2O7 溶液;VC+Cr(Ⅵ)组小鼠灌胃给予VC,腹腔注射K2Cr2O7溶液.VC给药量为 200 mg·kg-1,K2Cr2O7 给药量为 1.25 mg·kg-1,连续处理 45 d后处死小鼠,取结肠内容物于无菌冻存管中,每组收集3个重复样本.标记好后立即投入液氮中迅速冷冻.待所有样本收集完成后,转移至-80℃超低温冰箱中保存.结肠内容物样本通过高通量测序及生物信息学软件分析肠道菌群结构.[结果]与Con组相比,Cr(Ⅵ)暴露导致小鼠体重增加值减少.小鼠回肠组织发生病理改变,Cr(Ⅵ)组有明显炎症细胞浸润,VC+Cr(Ⅵ)组炎症细胞浸润减少.Cr(Ⅵ)组小鼠肠道菌群分类操作单元(OTU)数目改变.α多样性分析中,Cr(Ⅵ)暴露组Sobs指数平均为 240.333±67.796,Chao指数为 258.173±64.813,Ace指数为 259.481±66.891,较Con组降低(P＜0.05),PD whole tree指数为 27.863±2.399,较Con组升高(P＜0.05),VC干预可改善Cr(Ⅵ)暴露导致上述指标的变化(P＜0.05).β多样性分析中,主坐标分析结果表明Cr(Ⅵ)组和Con组之间有明显分离,VC干预后,分离趋势有回调,差异减小.多样本相似性树状图结果显示正常对照组和VC组最先聚类在一起,然后与VC+Cr(Ⅵ)组聚成一类,最后再与Cr(Ⅵ)组聚成一类.Cr(Ⅵ)组小鼠肠道中的拟杆菌门、单糖菌门和软壁菌门丰度降低,厚壁菌门丰度升高;乳杆菌属、另枝菌属、拟杆菌属和瘤胃梭菌属丰度升高,其中拟杆菌属与Con组小鼠相比,丰度升高有统计学意义(P＜0.05);而经VC干预后,上述肠道微生物中菌门及菌属的丰度变化均有所改善.[结论]Cr(Ⅵ)暴露可导致小鼠肠道损伤及菌群结构紊乱,而VC干预可在一定程度上改善上述变化,使肠道菌群结构趋向正常.

卵巢组织冻存与移植技术不仅保护女性生育力,还可保存卵巢内分泌功能,有效防治医源性早发性卵巢功能不全,尤其适用于青春期前女童与亟需原发病治疗的女性.卵巢组织冻存的有效性与安全性已得到了广泛验证,目前的临床金标准为慢速冻存,而玻璃化冻存仅适用于研究.尽管该技术近年来发展迅速,但仍面临超低温冻存损伤、冷冻保护剂毒性、卵泡储备量的评估、冻存与移植的安全性等问题.本文针对以上问题的研究进展进行综述.

目的 探讨给与谷胱甘肽(GSH)及其拮抗剂——丁硫氨酸亚砜胺(BSO)对慢性砷暴露小鼠体内砷代谢及氧化应激的影响.方法 将SPF级雌性昆明小鼠随机分为对照组(蒸馏水)、单纯染砷组(50 m//L亚砷酸钠)、GSH干预组(50 mg/L亚砷酸钠+400 mg/kg GSH)和BSO(50 mg/L亚砷酸钠+600mg/kg BSO)干预组,除对照组小鼠饮用蒸馏水外,其余各组均饮用含50 mg/L亚砷酸钠的水溶液连续染毒30周,然后给予400 mg/kg GSH或600 mg/kg BSO,用蒸馏水配制GSH和BSO水溶液,每天两次腹腔注射,连续2d,用氢化物发生-超低温捕集-原子吸收分光光度法测定尿液各形态砷水平,用DTNB及试剂盒法分别测定全血及肝脏中GSH和总抗氧化能力(T-AOC)水平.结果 GSH干预组小鼠尿中二甲基胂(DMA)、DMA含量构成比、二甲基化率(SMR)及总砷含量高于单纯染砷组(P＜0.05),而BSO干预组各形态砷、DMA含量构成比、一甲基化率(FMR)、SMR及总砷含量均低于单纯染砷组(P＜0.05);单纯染砷组小鼠肝脏和血液GSH和T-AOC的水平均低于对照组(P＜0.05).给予GSH干预后,肝脏和血液GSH和T-AOC水平均高于单纯染砷组(P＜0.05)且与对照组差异无统计学意义(P＞0.05).BSO干预组小鼠肝脏和血液GSH和T-AOC的水平均低于其他各组(P＜0.05).结论 外源性GSH干预可以增强砷暴露小鼠的砷甲基化能力,增加砷从尿液中的排出,拮抗砷所致的GSH和T-AOC水平下降,从而减少了砷对机体造成的氧化损伤.

目的 探讨三维塑形钛网与超低温保存自体颅骨在去骨瓣减压术后早期行颅骨修补中的临床疗效及并发症的差异.方法 回顾性分析我院2013年3月至2018年3月我院收治的去骨瓣减压术后行颅骨修补患者155例,根据颅骨修补材料不同分为自体颅骨组和三维钛网组.两组患者均早期行颅骨修补,自体颅骨组与三维钛网组分别采用超低温保存自体颅骨和三维塑形钛网作为修补材料,比较两组患者术后并发症发生率和临床疗效.结果 两组患者颅骨修补术后各项并发症差异无统计学意义(P>0.05),但总体并发症发生率比较差异有统计学意义(P<0.05).两组患者颅骨修补后头颅外观缺陷差异无统计学意义(P>0.05),在头皮不适及自觉头部畏冷热方面差异有统计学意义(P<0.05),且自体颅骨组患者满意度高于三维钛网组(P<0.05).两组患者颅骨修补术前及术后Karnofsky功能评分(KPS)差异无统计学意义(P>0.05).结论 颅脑损伤去骨瓣减压术后早期行颅骨修补时,使用超低温保存自体颅骨较三维塑形钛网的总体并发症低,且患者术后满意度高,值得推荐.

该研究利用液氮将不同含水量的无菌马尾松种子(27.4％、24.6％、22.7％、16.8％、15.8％、10.7％、7.5％、6.1％、4.8％、3.2％)进行超低温保存.结果表明:(1)在3.2％～6.1％含水量范围内,经液氮冷冻保存后的发芽率随着含水量升高而逐渐升高,在含水量6.1％时,发芽率达到最大值(91.33％);当含水量大于6.1％时,发芽率逐渐下降,尤其是当含水量大于15.8％时,发芽率迅速下降;在3.2％～7.5％含水量范围内冻存后发芽率在80％以上.(2)冷冻、化冻方式影响超低温保存效果.种子无需低温预冷,直接投入液氮保存(快速冷冻)效果最好;室温空气化冻(缓慢化冻)较42℃水浴化冻发芽率高,且后者容易发生种皮炸裂现象.(3)种皮对马尾松种子超低温保存过程起到保护作用,使其免受机械损伤,去掉外种皮的种子冻存后发芽率显著下降,且容易出现形态不正常的幼苗.(4)超低温保存对马尾松种子萌发具有一定"刺激"作用,在最适含水量6.1％时,经超低温保存后种子的发芽率显著大于对照种子.总之,含水量、冷冻方法、化冻方法、种皮结构显著影响超低温保存效果,马尾松种子超低温保存的最优方法是将种子含水量控制在6.1％,直接投入液氮快速冷冻后室温空气缓慢化冻,冻后发芽率可在90％以上.马尾松种子超低温保存技术体系的建立,为其种质资源的长期保存提供了技术支持.

为保护兰州鲇(Silurus lanzhouensis Chen)种质资源,促进新品种选育,文章开展了兰州鲇精液超低温冻存抗冻剂筛选及程序保存技术研究,并通过精子解冻激活率、核DNA检测、扫描电镜和透射电镜检测技术对冻存效果和冻存损伤情况进行了评测.结果表明:兰州鲇精液以10％DMSO为抗冻剂,4℃平衡20min,–80℃平衡30min后立即置于液氮超低温保存,并于40℃水浴解冻时精子冻存效果较佳,冻精激活率达(75.56±3.91)％.SCGE检测DNA损伤结果显示超低温冻存10d、20d及30d兰州鲇精液的彗星率和损伤系数无显著差异.扫描电镜检测显示兰州鲇精子明显分头部,中段及尾部3部分,属于单鞭毛型,无顶体,无侧鳍,中心粒相互垂直呈"T"形,鞭毛为典型的"9+2"微管结构.冻存结构损伤主要表现为膜损伤,细胞质膜与染色质膜发生破损、折皱、囊泡化或整体脱落,细胞核膜与质膜空隙加大,核发生变形,核质疏散,线粒体结构弥散,线粒体内容物外流,中心粒复合体易位,鞭毛外膜变形脱离,中段位置断裂,微管结构基本完好.研究筛选的超低温冷冻保存技术可长期有效保存兰州鲇精液,为兰州鲇种质资源保护及今后精液超低温冷冻保存技术改良提供理论依据和技术基础.

运动疲劳是指运动本身引起的机体运动能力暂时性下降的现象.其产生的机制较为复杂,涉及多个身体器官.运动疲劳是疲劳链突然变化所致,疲劳链包含运动时产生的乳酸堆积、血糖下降、肌糖原消耗等环节.大量运动后,代谢废物堆积、能源物质耗竭、有害物质不及时清除等因素导致神经系统紊乱以及组织细胞损伤,造成运动疲劳[1],若不及时缓解疲劳,则可发展为慢性疲劳,表现为长期的疲劳感,并伴有不同程度的失眠、记忆力下降、肌肉疼痛等症状[2-3].如果机体内未被清除的自由基不断积累,还会引起细胞出现毒性反应和不可逆损伤[4].运动疲劳是军事训练和体育运动中制约成绩提高的瓶颈问题.中医非药物疗法和物理疗法用于治疗运动疲劳,因其疗效明显、易于操作、无药物不良反应、不涉及兴奋剂问题等优势逐渐受到认可.本文主要就运动疲劳的产生机制、中医非药物疗法及主要物理疗法的抗疲劳机制及应用的研究进展综述如下.

以2个品种牡丹(Paeonia suffruticosa)花粉为材料,通过对比分析花粉超低温保存前后生活力以及AsA-GSH抗氧化循环系统组分及其相关指标的变化情况,探讨AsA-GSH抗氧化循环系统在花粉超低温保存中的作用机制.结果表明:超低温保存后'新日月'花粉生活力未产生显著的变化,'花王'花粉生活力显著降低,但是两个品种花粉的ROS含量均发生了不同程度的变化.'新日月'花粉的氧化损伤指标含量显著增加,AsA在超低温保存3个月后发生了显著的降低,而GSH含量在超低温保存3个月、APX在超低温保存1个月、GR在超低温保存3～8个月后均发生了显著的增加;'花王'花粉仅蛋白质氧化损伤指标发生了显著的变化,AsA在超低温保存3～8个月后均发生了显著的降低,GSH含量在超低温保存1～3个月、APX在超低温保存3个月、GR在超低温保存1和8个月后均发生了显著的增加.进一步研究发现,超低温保存后生活力显著下降的'花王'花粉经AsA和GSH处理后,生活力显著上升,同时ROS累积水平以及氧化损伤指标MDA、PCO显著降低.说明花粉超低温保存中AsA-GSH抗氧化循环系统通过调控胞内ROS的累积水平参与了液氮冻存后花粉生活力的变化.

目的:基于细胞周期阻滞探讨艾司洛尔对脓毒症急性肾损伤（SAKI）大鼠保护作用的可能机制。方法:48只雄性SD大鼠，按随机数字表法分为假手术组（Sham组）、模型组（CLP组）、试验组（ES组），每组16只又随机平均分为6 h组和24 h组。Sham组采用盲肠探查法，CLP组与ES组采用盲肠结扎穿刺术法建立脓毒症模型。造模成功后Sham组与CLP组分别经颈内静脉置管泵入生理盐水（速度为1 mL/h），ES组泵入艾司洛尔［给药量为15 mg/（kg·h），速度为1 ml/h］。泵药6 h后分别于术后6、24 h相应时间点处死各组大鼠，留取血清及组织标本。大鼠血液离心后采用ELISA法检测血清尿素氮（BUN）、肌酐（Cr）含量；摘取两侧肾脏，其中左侧肾脏行p53免疫组化染色，观察细胞周期阻滞情况；右侧肾脏组织置于-80℃超低温保存箱保存，待组织匀浆后一部分行Western blot分析，检测Toll样受体4（TLR-4）、核因子κB（NF-κB）、毛细血管扩张性共济失调症突变蛋白（ATM）的表达水平，另一部分肾脏组织行ELISA检测基质金属蛋白酶组织抑制剂-2（TIMP-2）、胰岛素样生长因子结合蛋白-7（IGFBP-7）水平。结果:（1）TLR-4与NF-κB水平：ES 6 h组和CLP 6 h组较Sham 6 h组升高（P＜0.05），CLP 24 h组较Sham 24 h组升高（P＜0.05），ES 24 h组TLR-4水平较CLP 24 h组下降（P＜0.05）。（2）大鼠血清Cr、BUN水平：ES 6 h组和CLP 6 h组较Sham 6 h组明显升高（P＜0.05），ES 24 h组较CLP 24 h组降低（P＜0.05）。（3）在术后6 h和24 h中，与Sham组相比，CLP组与ES组大鼠肾脏组织IGFBP-7、TIMP-2、ATM、p53水平均明显升高（P＜0.05），同时ES组上述因子水平较CLP组降低（P＜0.05）。结论:艾司洛尔可能通过影响TLR-4/NF-κB/ATM/p53通路关键蛋白，减轻炎症反应和肾小管上皮细胞周期阻滞，促进SAKI大鼠肾功能恢复，进而对SAKI大鼠起到保护作用。