目的 建立检测鸡肝、鸡胗中11种喹诺酮、4种四环素、氯霉素残留的高效、便捷的检测方法.方法 鸡胗、鸡肝经提取、净化、固相萃取等步骤处理后,利用超高压液相色谱-质谱/质谱仪(ultra-high performance liquidchromatography-tandem mass spectrometer,UPLC-MS/MS)对兽药残留进行分离,定量测定.结果 16种兽药残留线性范围为1.0～40 ng/mL(氯霉素0.1～4.0 mg/mL),相关系数除诺氟沙星其他均＞0.999 0,在不同浓度情况下测定平均回收率在61.6％～107.1％,诺氟沙星、环丙沙星、达氟沙星、四环素、强力霉素、土霉素、金霉素方法检出限为0.6μg/kg,定量限为1.8 μg/kg;二氟沙星、培氟沙星、氧氟沙星、恩诺沙星、洛美沙星、沙拉沙星、恶喹酸、氟甲喹方法检出限为0.2 μg/kg,定量限为0.6 μg/kg;氯霉素方法检出限为0.02 μg/kg,定量限为0.06 μg/kg.结论 用本方法对2022年采集的鸡胗、鸡肝样本进行检测,线性范围、检出限、精密度、准确度均达到检测要求.本方法提高了检测效率,适合市场上鸡肝、鸡胗的大量样品的兽药筛查检测,适合作为食品安全风险监测快速筛查的方法.

目的 建立超高压液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)检测人血清万古霉素浓度的新方法.方法 采用Waters ACQUITY UPLC/ABSCIEX QTRAP4000超高效液相色谱串联质谱仪和ACQUITY UPLC BEH Amide色谱柱,以去甲万古霉素为内标,电喷雾离子源、正离子多反应监测模式检测万古霉素血药浓度.方法学评价实验包括:专属性、线性、精密度、准确度和与微粒子化学发光分析法,并进行方法学比较.结果 UPLC-MS/MS法专属性好,反应时间为2 min,线性范围为1～100 mg/L(R2=0.997),定量下限为1 mg/L,日内、日间精密度小于15％,准确度范围在96.2％ ～108％.UPLC-MS/MS法与常规开展的微粒子化学发光免疫分析方法比较,结果相关性良好,相关方程y=0.576x+2.367(R2=0.911),但存在21％的负偏倚.结论 UPLC-MS/MS可简便、特异地定量人血清中万古霉素浓度,与化学发光方法具有较好的可比性,可用于临床检测.

目的 观测子痫前期患者血清12-羟基二十碳四烯酸(12-HETE)浓度变化及对绒毛膜外滋养细胞诱导血管内皮细胞凋亡的影响,探讨12-HETE参与在子痫前期发生、发展的可能机制.方法 收集2019年6月至2020年6月复旦大学附属中山医院吴淞医院子痫前期患者临床症状出现前26例和出现后23例,以及与之孕周、年龄及BMI相匹配的正常孕妇26例及正常未孕妇女14例血清样本,利用超高压液相色谱串联质谱仪(UPLC-MS)检测各组血清12-HETE浓度;建立人血管内皮细胞的单培养及其与胎盘滋养细胞HTR-8/Snveo的共培养模型,分为正常对照组、12-HETE处理组、共培养对照组、共培养12-HETE处理组.采用流式细胞术检测各组细胞血管内皮细胞的凋亡情况,计算凋亡率.结果 12-HETE的保留时间为3.33 min,母离子碎片为319.33 m/z,离子碎片为179.22 m/z,在20～2000 pg/ml的线性范围内,相关系数r2=0.99,能够满足样本检测需求.子痫前期患者临床症状出现前、后12-HETE浓度均高于正常孕妇组和正常未孕妇女组(均P<0.01).血管内皮细胞单培养中,12-HETE处理组细胞凋亡率显著低于正常对照组(P<0.01);共培养对照组血管内皮细胞的凋亡率显著高于正常对照组(P<0.01);共培养12-HETE处理组血管内皮细胞的凋亡率显著低于共培养对照组(P<0.01).结论 子痫前期患者临床症状出现前后外周血中12-HETE浓度均显著升高,其可能通过抑制血管内皮细胞凋亡参与子痫前期的发生、发展.

目的 通过正交试验比较甲卡西酮在不同溶剂pH值、浓缩温度、保存时间和保存温度提取条件下的稳定性,建立适合污水中甲卡西酮稳定测定的提取制备方法用于超高压液相色谱质谱联用仪的检测.方法 在甲卡西酮检测过程中设置4个因素(提取溶剂pH值、浓缩温度、保存时间、保存温度)进行考察,每个因素选择3个水平,然后采用L9(34)进行正交试验,提取液使用液相色谱三重四极杆串联质谱仪(Exion LC/QTRAP 6500)检测,以甲卡西酮m/z=105.1的子离子峰面积作为定量指标,采用SPSS 16.0统计软件进行数据分析找出最佳条件.结果 正交试验结果分析表明,提取溶剂pH=2.0,保存时间0d,保存温度-20℃,浓缩温度60℃为最佳提取条件,并根据该条件进行了方法学考察,结果表明甲卡西酮在1ng/L～500ng/L浓度范围内线性良好,提取回收率>90％,RSD<5.33％,基质效应<6.52％,RSD<0.31％,均符合相关标准要求.结论 本研究通过正交试验筛选到的甲卡西酮制备方法有利于其稳定检测,适用于质谱的定性定量分析,可用于对污水中甲卡西酮成分的监测工作.

目的 通过代谢组学探讨国医大师张震创立的疏调气机汤治疗甲状腺功能亢进症的效应机制.方法 大鼠适应性喂养后,分为空白组5只和甲亢造模组18只,使用左甲状腺素诱导大鼠呈甲状腺功能亢进症,将造模后的甲亢大鼠分为模型组、阳性药丙硫氧嘧啶(PTU)组和疏调气机汤给药组每组6只,各组分别给药6周.对甲状腺组织进行苏木精-伊红染色,观察其甲状腺组织病理变化;检测大鼠血清促甲状腺激素(TSH)、游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、游离甲状腺素(FT4)、抗促甲状腺素受体抗体(TRAb)、干扰素γ(IFN-γ)、白介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子(THF-α)水平,观察其指标变化;应用超高压液相色谱仪、质谱仪对空白组、模型组、疏调气机汤给药组大鼠血清中的代谢产物进行非靶向检测,并对差异代谢物进行相关通路分析.结果 疏调气机汤能降低甲亢大鼠血清TSH水平,升高FT3和FT4水平,并显著降低炎症因子IFN-γ、TNF-α/IL-6水平(P＜0.05).病理切片显示:模型组甲状腺组织中淋巴细胞浸润,甲状腺滤泡上皮细胞肿大,滤泡腔增大,滤泡内胞质分布不均,胶质分泌旺盛;疏调气机汤组较模型组滤泡结构完好,淋巴细胞浸润较轻,胶质分布均匀.运用代谢组学技术筛选出具有显著性变化的潜在血清标记物61个,对差异代谢物进行KEGG代谢通路分析后发现,在2-氧代羧酸代谢途径,神经活性配体-受体相互作用途径、甘氨酸丝氨酸和苏氨酸代谢等通路呈高表达水平.结论 疏调气机汤对甲状腺功能亢进大鼠具有良好的治疗作用,推测其作用机制与2-氧代羧酸代谢途径,神经活性配体-受体相互作用途径、甘氨酸-丝氨酸-苏氨酸代谢相关.