目的:基于永离有丝分裂基因A相关激酶9(NEK9)/转移相关肿瘤基因家族2(MTA2)信号通路泛素化修饰探讨胃癌(GC)的转移机制.方法:使用癌症基因组图谱(TCGA)和Kaplan-Meier Plotter数据库分析NEK9表达与GC分期、预后之间的关联.体外实验中,将GC细胞分为:对照组、shNC 组、shNEK9 组、shNC+NC-OE 组、shNEK9+NC-OE 组和 shNEK9+MTA2-OE 组.分别采用 MTT 和Transwell法测定细胞的增殖、迁移和侵袭,并通过 Western blot检测 NEK9、MTA2、上皮间充质转化(EMT)标记和PI3K/AKT信号通路蛋白表达.结果:TCGA数据库分析显示,NEK9 mRNA在肿瘤组织中的表达明显上调,并且与TNM分期较晚和NEK9高表达者的预后较差密切相关.此外,NEK9在7个GC细胞系中的表达明显高于正常胃上皮GES-1细胞(P＜0.05).与对照组相比,shNEK9组细胞活力、相对集落形成、EdU阳性细胞数、侵袭和迁移细胞数均显著降低(P＜0.05).此外,在shNEK9组细胞中,E-钙粘蛋白水平上调(P＜0.05),波形蛋白水平下调(P＜0.05).通过免疫共沉淀试验证明NEK9与MTA2有相互作用.NEK9敲低加速了 HGC-27细胞中MTA2的降解,并且 MTA2泛素化在NEK9沉默的细胞中增加.与shNEK9+NC-OE组组相比,shNEK9+MTA2-OE组相对集落形成、EdU阳性细胞数和迁移和侵袭数均显著增加(P＜0.05).结论:NEK9在GC中明显上调,其敲低在体外抑制GC细胞的生长和转移.NEK9可能通过去泛素化途径稳定 MTA2进而激活PI3K-AKT信号通路来对GC细胞产生促癌影响.

细胞分裂周期相关(CDCA)基因家族是细胞增殖过程中重要的调节因子，其中细胞分裂周期相关蛋白2(CDCA2)是蛋白磷酸酶1γ(PP1γ)的靶向亚单位，参与有丝分裂中染色质重塑、细胞周期中的DNA损伤反应以及核包膜的形成。CDCA2在多种癌症中表达上调，并与恶性肿瘤的侵袭、转移及凋亡密切相关。本文主要就近年来CDCA2基因在恶性肿瘤中的作用及机制做简要综述。

以Ras 同源基因家族成员C(Ras homolog gene family member C,RhoC)为靶点探讨栓菌酸(trametenolic acid,TA)对人肝癌HepG2.2.15 细胞迁移侵袭的影响及机制,为栓菌酸的利用提供依据.采用MTT法检测TA对HepG2.2.15 细胞增殖的影响;划痕实验、Transwell实验检测TA对细胞迁移、侵袭的影响;pull down实验检测TA对Ras相似物GTP 酶(Ras homo-logue GTPases,Rho GTPases)活性的影响;Western blot实验检测TA对RhoC从胞质到胞膜转运及对RhoC/Rho相关激酶 1(Rho-associated kinase 1,ROCK1)/肌球蛋白轻链(myosin light chain,MLC)/基质金属蛋白酶 2(matrix metalloprotease 2,MMP2)/基质金属蛋白酶 9(matrix metalloprotease 9,MMP9)通路相关蛋白表达的影响;采用瞬时质粒转染过表达pcDNA3.1-RhoC,激光共聚焦检测细胞骨架中F-actin的变化,并检测细胞迁移侵袭及RhoC/ROCK1/MLC/MMP2/MMP9 通路相关蛋白表达的变化,以及RhoC GTP酶活性;建立BALB/c 裸鼠皮下移植瘤模型,以索拉菲尼为阳性对照(Sora 20 mg·kg-1),测量TA低、中、高剂量组(40、80、120 mg·kg-1)瘤体积和质量,瘤组织通过Western blot检测相关蛋白的表达.结果显示,TA呈浓度依赖性抑制HepG2.2.15 细胞增殖,24、48 h的IC50 分别为 66.65、23.09 μmol·L-1.裸鼠肿瘤质量、肿瘤体积均显著降低,索拉菲尼,TA低、中、高剂量组的抑瘤率分别为 62.23%、26.48%、55.45%、62.36%.TA能显著降低HepG2.2.15 细胞迁移侵袭数,且呈浓度依赖性抑制RhoC蛋白的表达及RhoC GTP酶活性,使膜组分RhoC显著下调,减少膜结合RhoC GTP 酶的量.体内外实验证实,TA可显著抑制RhoC下游ROCK1、MLC、p-MLC、MMP2、MMP9 蛋白表达.HepG2.2.15 细胞转染pcDNA3.1-RhoC过表达RhoC后,TA能有效抑制过表达后RhoC、ROCK1、MLC、p-MLC、MMP2、MMP9 蛋白的表达水平,及RhoC GTP酶的活性,与过表达前相对抑制水平相似.综上所述,TA可抑制人肝癌HepG2.2.15 细胞迁移侵袭,其机制可能是通过靶向抑制RhoC GTP酶的活性,下调RhoC表达,从而抑制RhoC/ROCK1/MLC/MMP2/MMP9 信号通路.该研究为利用中药有效成分多靶点优势,开发以热休克蛋白 90α(heat shock protein 90α,HSP90α)为靶点的自噬调节剂,达到阻滞肝癌细胞增殖,同时抑制肝癌细胞的侵袭和转移双重作用提供了新思路和方法.

目的 探讨靶向DNA测序技术在血管免疫母细胞性T细胞淋巴瘤(AITL)患者诊断和治疗中的价值.方法 选择2020年10月至2022年6月首都医科大学宣武医院诊治的4例AITL患者的病理组织,利用石蜡组织基因组DNA提取技术和靶向DNA测序技术测定T细胞肿瘤相关基因突变;回顾性分析患者的临床表现及病理结果,并查阅相关文献.结果 4例老年AITL患者,临床表现完全不同,其中3例患者在病理诊断方面并不顺利,均经过多次或多部位病理切片得以诊断;但4例患者的组织病理二代基因测序(NGS)结果极为相似,均具有RHOAG17V突变和髓系肿瘤中常见的甲基化基因突变,如10-11异位的甲基胞嘧啶双加氧酶2(TET2)、DNA甲基化转移酶3A(DNMT3A)、异柠檬酸脱氢酶(IDH)2.结论 病理组织的靶向DNA测序检查,对于AITL的精确诊断和指导治疗具有重要的意义.

zeste基因增强子同源物2(EZH2)是果蝇zeste基因增强子[E(z)]的人类同源物组蛋白甲基化的重要工具酶,也是多梳基因家族PcG(polycomb group)的核心成员.EZH2参与多梳蛋白复合体2的形成,促使相应组蛋白甲基化,从表观遗传学的角度介导相应靶基因沉默,在肿瘤的发生、发展过程中发挥着重要作用.其高表达与多种恶性肿瘤的发生、发展和极差的预后密切相关.近年来,越来越多的学者对EZH2的致癌机制进行了深入研究,为乳腺癌转移的检测、预后评估及治疗提供了全新的思路.笔者就EZH2表达情况及其与乳腺癌发生、发展、转移及预后之间的关系作一综述,以便临床医师更好地认识这一新的肿瘤标志物.

目的:探讨多梳基因家族成员环指蛋白2(RNF2)和增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白在食管癌组织中的表达及其临床意义.方法:应用免疫组化法检测64例食管癌患者癌组织、30例癌旁正常组织中RNF2和PCNA蛋白的表达情况,分析其与临床病理指标及预后的关系.随访并分析RNF2阳性表达与食管癌患者术后5年存活率的关系.结果:RNF2和PCNA蛋白在肿瘤组织中均高表达,RNF2在癌组织和癌旁组织中的阳性表达率分别为54.69％(35/64)和30.00％(9/30),差异有统计学意义(x2=5.000,P＜0.05);PCNA在癌组织和癌旁组织中的阳性表达率分别为60.94％(39/64)和46.67％(14/30),差异有统计学意义(x2=6.237,P＜0.05);2种蛋白的阳性表达均与食管癌的肿瘤大小、TNM分期和淋巴结转移有关(P＜0.05),而与患者年龄、性别、分化程度无关(P＞0.05);食管癌组织中PCNA蛋白表达与RNF2蛋白表达具有正相关关系(r=-0.494,P＜0.01).5年总生存期分析结果显示RNF2阳性表达者的生存时间更短(P＜0.01).结论:RNF2和PCNA与食管癌的发生发展密切相关,且二者在食管癌发生发展中具有协同作用.

LIM同源框基因2(LIM-homeobox gene 2 ,LHX2)属于L IM同源框基因家族 ,因其具有同源框结构域和富含半胱氨酸的LIM结构域而被鉴定[1] . L H X2与c-Abl相邻定位于9号染色体上 ,其异常表达常由染色体易位引发[2] .LIM 同源框基因家族参与多个重要的生理过程 ,如细胞分裂、细胞增殖、特异性细胞分化和胚胎发育等[1 ,3-5 ] .除特定的生理功能外 ,LHX2与多种肿瘤的发生、发展密切相关 ,如 LHX2通过诱导血小板源性生长因子 B (platelet-derived grow th factor-B ,PDGF-B)促进乳腺癌细胞的增殖和转移[6].此外 , L HX2蛋白质在多种肿瘤中过表达 ,包括慢性髓细胞样白血病、胃肠癌、胰腺癌和肾癌[2 ,7] .然而 ,迄今鲜见L HX2在食管鳞状细胞癌中表达的报道.因此 ,本研究采用免疫组织化学、实时荧光定量 PCR和蛋白质印迹法检测食管鳞状细胞癌组织和正常食管上皮组织中L H X2的表达 ,分析其表达水平与食管鳞状细胞癌患者临床病理学参数和预后的关系 ,为发现新的食管鳞状细胞癌的预后指标奠定基础.

目的:探讨黑色素瘤相关抗原A家族(melanoma antigenA,MAGE-As)在食管癌患者外周血中的表达,分析其与食管癌患者临床病理学指标及预后的关系.方法:采用多重巢式PCR(multiplex semi-nested PCR)法检测153例食管癌患者和30例健康人外周血中MA GE-As mRNA表达水平,并利用酶切的方法鉴定该家族成员MA GE-A1、A2、A3、A4 和A6的表达情况.结果:MA GE-As在食管癌患者外周血中阳性表达率为19.61％(30/153),MA GE-A1、A2、A3、A4、A6的阳性表达率分别为10.46％(16/153)、16.34％(25/153)、9.8％(15/153)、11.11％(17/153)和18.30％(28/153).MA GE-As阳性表达与临床分期、远处转移、淋巴结转移呈正相关(均P＜0.05),MA GE-As及其亚型基因的阳性表达均与食管癌患者5年生存率较差相关(均P＜0.05);MA GE-As表达、肿瘤大小、淋巴结转移及远处转移可作为食管癌患者生存的独立预后因素(均P＜0.01).结论:MA GE-As在食管癌患者外周血中的表达与食管癌预后相关,有可能作为监测食管癌预后的重要指标.

尿苷二磷酸葡萄糖醛酸基转移酶(UDP-g1ucuronosyltransferase,UGT)是人体内重要的Ⅱ相代谢酶,UDP-尿苷二磷酸葡萄糖醛酸为其主要的糖基供体.UGT为多基因编码并且含有大量同工酶的超基因家族,包括UGT1和UGT2两个亚家族.UGT2B17是UGT2B家族的一员,越来越多的研究发现UGT2B17基因存在普遍遗传缺失现象,其造成的遗传差异对疾病的影响已引起了众多关注.UGT2B17基因拷贝数变异(Copy Number Variants,CNV)源自4号染色体上一段约120 kb的DNA序列缺失和插入,CNV发生频率高,种族差异明显,与器官移植、骨质疏松、肿瘤发生,乃至兴奋剂检测密切相关.UGT2B17的CNV研究及功能意义具有重大遗传药理学及药物基因组学意义.我们将从UGT2B17的基因拷贝数变异与种族差异、移植排斥反应与肿瘤发生发展等几个方面进行探讨.

目的 TBX15(T-box 15)是T-box基因家族的一员,在多种恶性肿瘤中高表达,与肿瘤的恶性进展和转移密切相关.TBX15在透明细胞性肾细胞癌(clear cell renal cell carcinoma,ccRCC)的表达及其作用尚未阐明.本研究通过检测TBX15蛋白在ccRCC组织中的表达,探讨该蛋白在ccRCC发病中的作用及临床意义.方法 收集2009-01-01-2011-12-31苏州大学附属第二医院60例手术切除的ccRCC组织及17例癌旁正常肾组织制作组织芯片,应用免疫组织化学法检测TBX15蛋白的表达,利用癌症基因图谱(the cancer genome atlas,TCGA)数据库分析TBX15 mRNA在ccRCC组织和正常肾组织中的差异性表达,分析TBX15蛋白表达与ccRCC临床病理的关联性及其与预后的关系.结果组织芯片结果显示,与正常肾组织相比,TBX15蛋白在ccRCC组织中高表达,差异有统计学意义,χ2=41.191,P<0.001;ccRCC组织中TBX15的表达水平与远处转移(χ2=2.60,P=0.049)、临床分期(χ2=3.15,P=0.038)及生存时间(χ2=4.62,P=0.032)有关联.TCGA数据库分析结果表明,TBX15 mRNA在ccRCC组织中的表达(2.474±0·172)高于正常肾组织(0.093±0.028),t=-13.67,P<0.001,且TBX15基因高表达的ccRCC患者生存时间短于TBX15基因低表达的ccRCC患者(χ2=8.009,P=0.005),提示TBX15基因高表达与ccRCC患者预后差有关联.结论TBX15可能成为判断ccRCC患者预后的有用指标.