轴突生长导向因子-1(netrin-1)是netrins家族中研究最广泛的成员.netrin-1 最初被认为是胎儿发育过程中轴突引导的调节因子,与其经典受体非协调 5(uncoordinated-5,UNC5)与结直肠癌缺失基因(deleted in colorectal cancer,DCC)共同介导轴突的吸引或排斥.随着更多netrin-1受体的发现,如唐氏综合征细胞粘附分子(down syndrome cell adhesion molecule,DSCAM)、整合素α6β4(integrin α6β4,Inα6β4)和整合素α3β1(integrin α3β1,Inα3β1)、腺苷A2B受体(A2B adenosine receptor,A2BAR)和CD146等的发现,扩展了netrin-1在非神经系统的功能,如调控血管生长,肿瘤生长,细胞凋亡,炎症发展.本文就netrin – 1及其受体在非神经系统中的作用的研究进展进行概述.

目的 探讨采用同位素标记相对和绝对定量(iTRAQ)技术的蛋白组学分析筛选增生性糖尿病视网膜病变(PDR)患者与玻璃体混浊患者玻璃体液之间差异表达蛋白的可行性,寻找PDR防治的新靶点.方法 实验研究.收集2016年9月至2017年11月在天津医科大学眼科医院就诊的PDR的患者28例,随机数字表法随机分为2个PDR组,每组14例;另将诊断为玻璃体混浊的患者4例作为对照组,随机分为2个对照组,每组2例.PDR患者与玻璃体混浊患者的平均年龄分别为52和64岁.将每组患者的样本混合后提取蛋白,行iTRAQ标记,根据液相质谱-串联质谱检测(LC-MS/MS)分析结果,行差异蛋白分析及相应蛋白基因本体论(GO)数据库功能富集及京都基因与基因组(KEGG)数据库通路图显著性富集分析.对玻璃体液蛋白谱的相对定量结果进行独立样本t检验,结合差异倍数(FC)和P值判定蛋白表达量变化.结果 根据不同患者的玻璃体液蛋白表达谱信息,发现其间共存在26个差异表达蛋白,PDR包括7个上调蛋白和19个下调蛋白,如视黄酸受体反应蛋白2(Chemerin)(PDR1组=85.0,PDR2组=83.0,对照1组=119.6,对照2组=120.2,FC=0.710,P=0.001)、轴突生长导向因子4B(Semaphorin 4B,Sema 4B)(PDR1组=64.4,PDR2组=68.8,对照1组=135.4,对照2组=146.0,FC=0.473,P=0.023)、载脂蛋白B(Apolipoprotein,ApoB)(PDR1组=104.4,PDR2组=106.6,对照1组=89.0,对照2组=85.3,FC=1.211,P=0.024)和热休克蛋白70(Heat shock protein 70,HSP70)(PDR1组=69.3,PDR2组=75.0,对照1组=137.7,对照2组=138.3,FC=0.523,P=0.026)与PDR的发生发展密切相关.通过对差异蛋白的GO功能显著性富集分析显示,差异基因的功能划分为生物过程、分子功能及细胞组分形成3大板块.差异表达基因功能涉及细胞代谢过程、有机氮化合物代谢过程、碳水化合物衍生物代谢过程及转移酶活化、跨膜信号受体活化等诸多方面.KEGG Pathway显著性富集分析结果显示,Chemerin参与的蛋白激酶B(Akt)信号通路,Sema 4B参与的磷脂酰肌醇3-激酶(phosphoinositide 3-kinase,PI3K)信号通路,及缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)信号通路在2个组玻璃体液间存在差异.结论 应用iTRAQ标记结合LC-MS/MS定量蛋白组学为筛选有生物学意义的差异表达蛋白提供良好的平台,进而为差异蛋白定量检测及低丰度差异蛋白筛选奠定基础.Chemerin、Sema 4B、ApoB和HSP70可作为PDR防治的新靶点.

神经长入和炎症反应是非特异痛性椎间盘最显著的病理改变.信号素Sema3A(Semaphorin3A)是一类跨膜蛋白家族,通过与NRP-1/plexinA受体复合,调控Sema3A-NRP-1-plexinA信号通路,在神经元发育、损伤与修复等过程中发挥重要的化学趋化及导向作用.近来研究发现Sema3A抑制DRG (dorsal root ganglion)神经元轴突生长,退变椎间盘中Sema3A显著下降,诱导外围神经长入纤维环内层及髓核.此外,Sema3A可抑制KLF5(Krüppel-like factor 5)介导的炎性反应,拮抗血管内皮生长因子的活性,导致新生血管受阻,抑制血管内皮细胞的生长和发展.因此,通过Sema3A调节退变椎间盘病理性神经血管长入及炎症反应成为一个新的治疗方向.

目的 分析Her-2蛋白、血清胃蛋白酶原Ⅱ(PG-Ⅱ)及轴突生长导向因子4D(Sema4D)蛋白在胃癌组织中的表达及临床意义.方法 选取2014年10月至2016年1月于安徽医科大学第一附属医院接受根治手术的100例胃癌患者,收集患者的胃癌组织及癌旁正常胃粘膜组织作为胃癌组和癌旁正常组织组.比较两组Her-2蛋白、PGⅡ及Sema4D蛋白水平表达差异,分析Her-2蛋白、PGⅡ及Sema4D蛋白与临床病理参数的关系,采用Logistic回归分析影响胃癌患者预后生存的危险因素.结果 胃癌组Her-2蛋白、PGⅡ及Sema4D蛋白阳性表达率均高于癌旁正常组织组,差异均有统计学意义(P<0.05).肿瘤直径(≥5 cm)、分化程度(低分化)、TNM分期(Ⅲ期～Ⅳ期)、淋巴结转移(有)患者的Her-2、PGⅡ及Sema4D蛋白的阳性表达率更高(P<0.05).肿瘤直径、分化程度、TNM分期、淋巴结转移为影响患者预后生存的单因素(P<0.05).logistic分析结果显示,患者的肿瘤直径、分化程度、TNM分期、淋巴结转移及Her-2、PGⅡ、Sema4D蛋白是影响患者预后的危险因素(P<0.05).结论 Her-2蛋白、PGⅡ及Sema4D蛋白在胃癌组织中呈高表达状态,可作为预测胃癌患者预后的分子标志物和肿瘤治疗的潜在靶点.