为给辽东楤木(Aralia elata)适时采收提供理论依据,以栽培型辽东楤木为试验材料,分析了辽东楤木叶在不同采收时期(S1时期,2023年4月10日;S2时期,2023年4月30日;S3时期,2023年5月20日;S4时期,2023年6月9日)的生物量、光合色素含量、总酚和总黄酮含量、抗氧化能力.同时,建立了高效液相色谱(HPLC)的检测方法,测定辽东楤木皂苷A、辽东楤木皂苷V、辽东楤木皂苷X的含量,并且基于高效液相色谱-质谱代谢组学技术,对比分析了不同采收期辽东楤木在次生代谢产物上的差异.结果表明:(1)辽东楤木叶鲜质量、干质量、光合色素含量均随着生长而增加,在S4时期达到最大值;(2)总酚和总黄酮含量在S1时期达到最大值(1.36 mg·g-1、29.38 mg·g-1);(3)S1 时期 DPPH自由基清除能力最强(IC50为 0.262 g·L-1),S2 时期 ABTS自由基清除能力最强(IC50为0.511 g·L-1);(4)辽东楤木皂苷A的含量在S4时期达到最大值,为12.90 mg·g-1,辽东楤木皂苷V和辽东楤木皂苷X在S2时期的含量显著高于其他时期,分别为1.53、3.30 mg·g-1;(5)共鉴定了 24种酚类代谢物,4个时期的酚类化合物总量分别为64.84、119.31、101.95、89.32 mg·g-1,其中C6C1骨架化合物(原儿茶酸、龙胆酸),C6C3C6骨架化合物(芦丁),C6C3骨架化合物(咖啡酸)在S2时期显著积累.综上所述,综合考虑功能成分含量、抗氧化活性和食用性认为,S2时期为最适宜的采收时间.

中国传统药材辽东楤木[Aralia elata(Miq.)Seem.]又称龙牙楤木,具有"补气安神,强精滋肾,祛风活血"的功效,用于治疗神经衰弱、阳虚气弱、肾气不足、脾阳虚衰之水湿停滞、消渴、跌打损伤等症.楤木皂苷类化合物是其发挥药理作用的主要物质基础.辽东楤木具有广泛的现代药理学作用,主要包括通过调控离子稳态及抑制炎症发挥抗心肌缺血和缓解继发性心肌缺血再灌注损伤的作用;通过抑制肿瘤细胞增殖促进肿瘤细胞凋亡及增强机体免疫来发挥抗肿瘤作用;通过调控机体糖脂代谢发挥降血糖、调血脂药理作用;以及保肝护肝、神经保护和抗炎、镇痛作用.未来,辽东楤木药理作用机制的深入研究将有利于促进其开发及利用.本文综述了国内外近二十年来对辽东楤木的相关研究,并提出了针对辽东楤木的药理研究新思路,旨在为同行提供参考.

该研究采用超高效液相色谱串联三重飞行时间质谱(UPLC-Triple-TOF-MS)对3个辽东楤木三萜皂苷同分异构体(Ⅵ,Ⅶ和B)进行质谱区分.通过分析楤木皂苷Ⅵ(1)和楤木皂苷Ⅶ(2)的[M+Na]+的二级质谱(CE =90 eV),二者在m/z981.502 5[Y0α+Na]+,819.443 3[Y0α-Glc+ Na]+,527.157 2[C3β+Na]+,509.150 4[B3β+ Na]+和365.106 5[C3β-Glc+Na]+处产生了相同的碎片离子峰,而楤木皂苷B(3)的[M+Na]+二级质谱在m/z 671.198 2和689.208 7处产生了2个明显不同的碎裂离子峰,其分别归属于[B4β+ Na]+和[C4β+Na]+.因此,[B4β+ Na]+和[C4β+Na]+可作为化合物3区分其他两个异构体(1和2)的特征性的诊断离子.进一步分析楤木皂苷Ⅵ(1)和楤木皂苷Ⅶ(2)的[M+NH4]+或[M+H]+的二级谱图(CE =40 eV),二者在m/z 455.350 7和437.341 2处产生相同的苷元脱水碎片离子峰,其分别归属于[苷元-H2O+H]+和[苷元-2H2O+H]+.楤木皂苷Ⅵ(1)的苷元类型是刺囊酸,其[苷元-2H2O+H]+和[苷元-H2O+H]+的离子强度比值＜1,而楤木皂苷Ⅶ(2)的苷元类型是常春藤,其[苷元-2H2O+H]+和[苷元-H2O +H]+的离子强度比值＞1,基于此可以有效区分梅木皂苷Ⅵ(1)和楤木皂苷Ⅶ(2).以上研究表明,利用电喷雾二级质谱法可以快速、简便、准确地区分3种楤木皂苷(Ⅵ,Ⅶ和B)异构体.

目的:观察辽东楤木叶总皂苷(ETS)对荷瘤裸鼠人结肠癌HT-29移植瘤Toll样受体-4/核转录因子-κB(TLR-4/NF-κB)信号通路及血清中炎性因子的影响,从而探讨其抑瘤机制.方法:将人结肠癌HT-29细胞株接种于50只裸鼠的右腋部皮下,建立人结肠癌异位皮下移植瘤的动物模型.将接种后的裸鼠随机分为5组,每组10只,即模型组,ETS低、中、高剂量组(37.5,75,150 mg·kg-1),5-氟尿嘧啶组(20 mg·kg-1).分组后2d进行给药,5-氟尿嘧啶组腹腔注射给药,隔日1次;ETS低、中、高组给药;模型组给灌胃等体积的生理盐水;连续给药8周.眼眶取血,酶联免疫吸附法(ELISA)检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-1(IL-1);实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测肿瘤组织中TLR-4,NF-κB mRNA表达水平;光学显微镜和透射电子显微镜下观察ETS对荷瘤裸鼠人结肠癌HT-29移植瘤形态学方面的影响.结果:病理组织学和超微病理学实验显示各给药组肿瘤组织均有不同程度的损伤,与模型组比较,ETS低、中、高剂量组及5-氟脲嘧啶组对荷瘤裸鼠人结肠癌移植瘤均有不同程度的抑制作用(P ＜0.05,P＜0.01),4组抑瘤率分别是20.14％,32.43％,59.56％,63.58％;与模型组比较,ETS各剂量组TLR-4,NF-κB mRNA及TNF-α,IL-1水平表达明显降低(P＜0.05).结论:ETS可有效抑制结肠癌肿瘤的生长,其机制可能与调控TLR-4/NF-κB信号通路,减少炎性因子表达有关.

目的:建立辽东楤木叶总皂苷高效薄层色谱指纹图谱,并分析不同产地不同采收期的辽东楤木叶成分的差别.方法:采用高效硅胶G薄层板(20 cm ×20 cm)载样,以三氯甲烷-甲醇-乙酸乙酯-甲酸-水(9.5∶ 10∶20∶0.5∶5)为展开剂,以10％浓硫酸乙醇溶液为显色剂,于恒温鼓风干燥箱里100℃条件下加热至斑点清晰,置于365 nm紫外光下照射获得其显色后的荧光高效薄层色谱图,经软件组合处理生成斑点灰度峰曲线,建立共有模式,并进行相似度分析及聚类分析.结果:获得分离度良好、斑点清晰的高效薄层色谱指纹图谱,建立了辽东楤木叶总皂苷薄层色谱指纹图谱共有模式,由10个共有斑点峰组成,并指认了其中的4个斑点峰代表的具体成分.分析表明不同地区8月初至9月中旬的辽东楤木叶相似度较高;聚类分析将11个不同批次的样品聚为一大类.结论:建立的薄层色谱指纹图谱方法简单、快速、可靠,可用于辽东楤木叶药材的鉴定和质量控制评价.确定东北地区8月采收的辽东楤木叶药材均符合质量要求,可作为以总皂苷为主要药效部位的药材使用.

目的评价辽东楤木叶总皂苷胶囊对心血管系统和呼吸功能的影响.方法Beagle犬24只,设空心胶囊组、辽东楤木叶总皂苷胶囊低剂量组(20 mg/kg)、中剂量组(60 mg/kg)、高剂量组(162 mg/kg),每组6只,雌雄各半,单次口服给药,空心胶囊组给药剂量同高剂量组.监测给药前后体温、血压、呼吸频率、呼吸强度、心电指标的变化.结果Beagle犬体温、平均动脉压、舒张压、收缩压、呼吸频率、呼吸强度、RR间期、心率、PR间期、P波时程、QRS时程、QT间期、QTc F在给药前后比较无统计学意义(P＞0.05).结论辽东楤木叶总皂苷胶囊对心血管系统和呼吸功能没有影响.

目的 建立辽东楤木Aralia elata 叶指纹图谱,并寻找能够反映辽东楤木叶抗肿瘤活性能力的质量评价方法.方法 采用70％乙醇和水饱和的正丁醇提取各批次辽东楤木叶总皂苷,运用HPLC-ELSD测试分析皂苷并建立指纹图谱,MTT法测试楤木叶总皂苷和单体皂苷对人肺腺癌A549细胞、人肝癌SMMC-7221细胞、人结肠癌HT-29细胞的抑制作用,用灰色关联法分析指纹图谱峰与抗肿瘤作用之间的关系.结果 建立了含有28个共有峰的辽东楤木叶HPLC-ELSD指纹图谱,各批次图谱与共有模式图谱间相似度在0.850以上,指认并归属其中5个峰成分.各批次楤木叶总皂苷抗肿瘤作用的半数抑制浓度(half inhibitory concentration,IC50)为7.39～79.13mg/L,其中,黑龙江凤凰山7月的样品抗肿瘤效果最佳.谱-效相关性表明28个共有峰成分与抗肿瘤活性的关联度为0.469 2～0.810 3,其中10个成分与抗肿瘤活性间的关联度大于0.70,8个成分与抗肿瘤活性间的关联度小于0.60.图谱中有2个峰成分在各批次药材中含量都相当大,但谱-效关联度却很小.5个已知的峰成分中,楤木皂苷TTP和楤木皂苷Ⅴ抗肿瘤作用的IC50均小于190mg/L,楤木皂苷Ⅳ、Ⅵ、Ⅶ抗肿瘤作用的IC50均大于200 mg/L.结论 辽东楤木叶HPLC指纹图谱及抗肿瘤相关性分析可以为辽东楤木叶的质量评价提供参考.若从己知的5种楤木皂苷中挑选质量控制成分,楤木皂苷TTP和V要优于楤木皂苷Ⅳ、Ⅵ、Ⅶ.