目的:建立白头翁药材的超高效液相色谱（UPLC）特征图谱方法，为白头翁药材的产地区分及质量控制提供参考。方法:采用UPLC法，色谱柱为Agilent SB C18（2.1 mm×100 mm，1.8 μm）；以乙腈-甲醇（2∶1）-0.1%磷酸溶液为流动相，梯度洗脱；流速0.30 ml/min；柱温30 ℃；检测波长215 nm；进样量2 μl。通过特征图谱对比及主成分分析、正交偏最小二乘判别分析（OPLS-DA）对常见的白头翁伪品及不同产地的白头翁药材进行评价。结果:白头翁药材特征图谱呈现9个特征峰，通过高分辨质谱及对照品对比，指认了其中8个共有峰。通过主成分分析，可明显区分不同产地的白头翁药材，并结合OPLS-DA分析发现，峰2、峰3、峰6是不同产地白头翁差异的主要标志物。结论:所建立的方法专属性、重复性、耐用性良好，可有效区分白头翁的常见伪品，并为白头翁药材的质量控制及产地选择提供依据。

目的:建立唾液1,5-脱水葡萄糖醇（1,5-AG）的检测方法。方法:2017年6月至2018年3月于上海交通大学附属第六人民医院招募正常糖代谢（NGT）者和糖尿病患者共100例（NGT 69例，糖尿病31例，男、女各50例），咀嚼Salivette唾液采集管匹配的棉棒收集唾液。采用酶法检测探究检测唾液1,5-AG样本留取及储存方法。采用质谱法检测唾液1,5-AG水平，分析其在NGT和糖尿病患者之间的差异。组间比较采用 t检验及Mann-Whitney U检验，相关性分析采用Spearman相关法。 结果:（1）唾液采集前刷牙与否不影响唾液1,5-AG水平；1 min咀嚼40~50、50~60和60~70次采集的唾液量差异均无统计学意义（均 P>0.05）；与采集后立即检测相比，唾液采集后常温或4 ℃储存2 h检测的唾液1,5-AG水平差异无统计学意义（均 P>0.05）。（2）与NGT相比，糖尿病患者唾液1,5-AG[（1.17±0.24）比（0.94±0.19）μg/ml， t=4.084]及血清1,5-AG水平[22.0（17.6，28.5）比4.6（2.8，8.2）μg/ml， Z=-5.421]均显著降低（均 P<0.05）。唾液1,5-AG水平与血清1,5-AG水平呈显著正相关（ r=0.528， P<0.05），与餐后2 h血糖、糖化血红蛋白、糖化白蛋白均呈显著负相关（分别为 r=-0.366、-0.543、-0.444，均 P<0.05）。 结论:唾液采集过程简单，可于常温或4 ℃短时储存。唾液1,5-AG水平可显著区分NGT人群与糖尿病患者，有望成为评估糖尿病患者短期血糖控制水平的补充指标。

目的:基于代谢组学探讨红花水提物治疗慢性酒精性肝损伤的作用机制。方法:将大鼠按随机数字表法分为正常组、模型组、阳性对照组及红花水提物低、中、高剂量组，每组10只。除正常组外，其余各组灌胃56°牛栏山二锅头白酒8 ml/kg制备慢性酒精性肝损伤大鼠模型。造模成功后，阳性对照组灌胃护肝片0.36 mg/kg，红花水提物低、中、高剂量组分别灌胃0.476 7、1.430 1、4.290 3 g/kg的红花提取液，1次/d，连续21 d。采用全自动生化分析仪检测血清GPT、GOT、TG、ALP2酶含量，并结合超高效液相色谱-质谱联用技术（UPLC-MS）与聚类分析、主成分分析（PCA）、正交偏最小二乘判别分析（OPLS-DA），探讨蒙药红花水提物治疗大鼠慢性酒精性肝损伤的作用机制。结果:与模型组比较，红花水提物中、高剂量组大鼠血清GPT［（42.11±6.58）U/L、（42.38±6.58）U/L比（49.96±10.70）U/L］、GOT［（104.81±14.70）U/L、（102.91±23.65）U/L比（159.66±53.69）U/L］水平降低（ P<0.05或 P<0.01），TG［（0.85±0.29）U/L、（0.85±0.23）U/L比（0.62±0.21）U/L］、ALP2［（104.53±13.53）U/L、（100.30±17.28）U/L比（77.13±12.54）U/L］水平升高（ P<0.05或 P<0.01）；聚类分析、PCA与OPLS-DA结果显示，模型组和红花水提物高剂量组可明显区分。在红花水提物治疗慢性酒精性肝损伤大鼠血清中共获得20个化学标志物，其中红花水提物可下调慢性酒精性肝损伤模型大鼠血清亚麻酸甘油三酯水平，上调TG、棕榈酸、溶血磷脂类、棕榈酰乙醇酰胺、肾上腺素、鞘氨醇、α-亚麻酸、二十二碳六烯酸、二十碳五烯酸10个内源性代谢产物。 结论:红花水提物治疗慢性酒精性肝损伤可能与调节内源性代谢产物二十二碳六烯酸、二十碳五烯酸、α-亚麻酸有关。

心力衰竭（心衰）患病率及死亡率逐年增加，在全球范围内都导致巨大的医疗和经济负担。B型利钠肽（BNP）是心衰生物标志物的“金标准”，多部指南推荐其用于心衰的诊断及预后评估。近年来研究发现心衰中BNP并非以完整片段形式存在，可被不同酶降解产生不同截短形式，对心衰的诊断和分型等具有临床鉴别意义。临床常用的传统免疫分析法由于抗体的交叉反应无法区分不同的BNP截短形式，而采用质谱分析法通过不同质荷比易于区分并确定不同截短形式，是精准检测BNP截短形式的方法。同时，随着敞开式质谱、离子淌度质谱等技术的成熟，将有助于降低血样前处理的复杂度并提高BNP片段的分离效率，进而深入探究BNP截短形式异质性的临床价值。

目的:采用血清代谢指纹采集方法筛选肺癌相关差异调控代谢物，为肺癌诊断提供候选标志物。方法:在上海长海医院开展队列入组工作，共纳入2021年1月27日至6月4日的228例受试者，其中包括初诊确认肺癌患者97例和健康体检人群131名。根据标准流程采集入组队列血清样本，并通过分层随机抽样，将入组队列分为训练集和完全独立的验证集。采用纳米辅助激光解吸电离质谱对血清样品进行代谢指纹图谱采集。对训练集样本年龄、性别进行质量控制后，通过机器学习算法构建基于血清代谢指纹图谱的诊断模型，并采用受试者工作特征（ROC）曲线评价模型的分类效能。结果:通过新型纳米辅助激光解吸电离质谱，可在1 min内完成血清样品的代谢指纹提取，过程仅需消耗1 μl原始血清。针对训练集，基于此构建的分类器诊断肺癌的ROC曲线下面积（AUC）为0.92（95% CI 0.87~0.97），敏感度为89%，特异度为89%。在独立验证队列中，AUC为0.96（95% CI 0.90~1.00），敏感度为91%，特异度为94%，没有表现出性能损失。确定了由5个代谢物组成的标志物组合，展示了肺癌患者的独特代谢模式。 结论:本研究结合血清代谢指纹图谱和机器学习建立了肺癌的诊断模型，用于区分肺癌患者以及健康对照，可用于临床的体外诊断。

目的:探讨高氧环境对氧诱导视网膜病变(OIR)模型小鼠肾脏代谢物的影响，了解病理性视网膜血管新生和肾损伤之间的潜在机制。方法:采用随机数字表法将16只健康SPF级C57/B6J新生小鼠随机分为OIR组与正常对照组，每组8只。小鼠自出生后标准饲养至第7天(P7)，OIR组小鼠和母鼠置于(75±2)%的高氧箱中饲养至P12，然后正常饲养；正常对照组一直在正常环境下饲养。各组小鼠在饲养P17时采用二氧化碳安乐死，取视网膜组织铺片并行血管异凝集素(IB4)染色，观察视网膜血管形态、中央无灌注区及病理性新生血管情况；另取小鼠肾组织进行液相色谱－质谱分析，取其对应小鼠的全血进行抗凝处理，通过离心沉淀，获得不含细胞成分的血浆，对血浆进行靶向代谢组学分析。使用代谢组学数据处理软件Progenesis QI v2.3对质谱信息进行解析，用无监督的主成分分析及正交偏最小二乘法分析(OPLS-DA)来区分各组间代谢轮廓的总体差异，比较2个组间代谢物的倍数变化。以变量权重值>1且 P<0.05为条件筛选出差异代谢物。基于KEGG数据库对差异代谢物进行代谢通路富集分析。 结果:视网膜铺片IB4染色结果显示，P17时正常对照组小鼠视网膜血管分布均匀；OIR组小鼠视网膜周边血管迂曲、紊乱，中央可见大面积无灌注区域形成，在视网膜无灌注区和血管区交界处形成大量新生血管簇，呈强荧光染色。OIR组小鼠视网膜无灌注区相对面积为(25.16±3.50)%，明显大于正常对照组的(0.63±0.30)%，差异有统计学意义( t＝12.07， P<0.001)。OPLS-DA模型参数R2X cum、解释率R2Y cum、和预测率Q2 cum分别为0.578、0.978和0.857，表明OPLS-DA模型具有较好的预测能力。共筛选鉴定到26个主要的差异代谢物，其中上调表达17个，下调表达9个，包括甘油磷脂类化合物[PC 20∶4(5Z，8Z，11Z，14Z)/0∶0、PC 22∶6(4Z，7Z，10Z，13Z，16Z，19Z)/0∶0、PC 14∶1(9Z)/20∶2(11Z，14Z)、PE P-18∶0/20∶4(6E，8Z，11Z，14Z)(5OH[S])]、氨基酸类代谢物(精氨酸、鸟氨酸、哌可酸和羟基赖氨酸)、嘌呤类(鸟嘌呤、次黄嘌呤、羟嘌醇)和脂肪酸类(15-棕榈酸甲酯、2，6，8，12-Tetramethyl-2，4-tridecadien-1-ol)等。差异代谢物主要富集于ABC转运蛋白(L-精氨酸、牛磺酸、肌醇、腺苷、N-乙酰基-D-氨基葡萄糖、L-谷氨酰胺)、氨酰-tRNA生物合成(L-异亮氨酸、L-脯氨酸、L-精氨酸、L-组氨酸、L-谷氨酰胺)、精氨酸生物合成(L-精氨酸、L-鸟氨酸、L-谷氨酰胺)等代谢通路。血浆的靶向代谢组学结果显示，差异的氨基酸类代谢产物主要富集于氨酰-tRNA生物合成、精氨酸生物合成代谢以及ABC转运蛋白等代谢通路。 结论:OIR小鼠的ABC转运蛋白、氨酰-tRNA生物合成、精氨酸生物合成代谢通路可能参与了肾损伤及早产儿视网膜病变新生血管形成的病理变化过程。

目的:通过超高效液相色谱-质谱联用技术（ultra-high performance liquid chromatography-mass spectrometry，UHPLC-MS）分析尿毒症患者血清代谢物变化，为尿毒症患者的预防和治疗提供一定的理论依据。方法:筛选西南医科大学附属医院肾病内科的尿毒症患者和健康体检中心的志愿者，通过纳入、排除标准，筛选出尿毒症患者（试验组）和志愿者（对照组）各20例。运用UHPLC-MS检测两组受试者血清中的代谢物，并进行差异分析，筛选尿毒症患者的差异代谢物并进行相关性分析和通路富集研究。结果:UHPLC-MS一共鉴定出412种代谢物，主成分分析（principal components analysis，PCA）结果证明，这些代谢物能够良好地区分对照组和试验组。按照变量权重值（variable importance for the projection，VIP）>1、变异倍数（fold changes，FC）>1.25或FC<0.8和 P<0.05作为显著差异代谢物筛选标准，最终筛选出28种显著差异代谢物，其中18种代谢物显著上升，10种差异代谢物显著下降。相关分析结果证明，28种差异代谢物与试验组和对照组样本之间、28种差异代谢物自身之间都具有一定的相关性。富集分析发现，28种差异代谢物可能富集儿茶酚胺生物合成通路；通路分析发现，28种差异代谢物可能影响丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢途径。 结论:基于代谢组学分析，尿毒症患者血清中的一些代谢物发生了变化，而这些改变的代谢物影响到一些代谢通路，影响尿毒症患者的病理生理过程。

目的:基于非靶向代谢组学方法探索布鲁氏菌感染人体后血清中小分子代谢产物的变化，筛选具有代表性的生物标志物。方法:将2019年1月至2021年12月在包头市疾病预防控制中心布鲁氏菌病（简称布病）门诊收集的109份血清样本，根据临床诊断分为布病急性期组（ n = 40）、慢性期组（ n = 35）以及健康组（ n = 34）。采用超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱技术，对血清进行检测，筛选差异代谢产物，并利用受试者工作特征曲线对差异代谢产物进行布病预测能力评估。通过京都基因和基因组百科全书（KEGG）通路分析筛选富集通路，确定受显著影响的代谢途径。 结果:急性期组与健康组之间筛选出17种差异代谢产物，慢性期组与健康组之间筛选出12种差异代谢产物，共有5种差异代谢产物（油酸酰胺、亚油酸酰胺、硬脂酰胺、棕榈油酸、α-亚麻酸）水平在3组间有统计学意义（ F = 16.84、17.52、14.31、13.01、20.76，均 P < 0.05）。KEGG通路分析显示，急性期组的差异代谢产物主要富集在乙醚脂质代谢、甘油磷酸酯代谢、鞘脂信号、鞘脂代谢通路；慢性期组的差异代谢产物主要富集在甘油磷酸酯代谢、乙醚脂质代谢、蛋白质消化吸收代谢通路。 结论:非靶向代谢组学方法可以筛选出布鲁氏菌感染人体后血清中发生变化的小分子代谢产物，其中油酸酰胺、亚油酸酰胺、硬脂酰胺、棕榈油酸、α-亚麻酸可以作为区分布病患者和健康人群的潜在生物标志物。

目的:建立念珠菌血症小鼠模型，寻找辅助诊断念珠菌血症的差异多肽峰。方法:SPF级ICR雄性小鼠170只，体质量27~30 g，根据随机数字表法将小鼠完全随机分为白色念珠菌感染组（ n=80）、近平滑念珠菌感染组（ n=80）和对照组（ n=10），通过尾静脉注射的方法建立念珠菌血症小鼠模型。利用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱检测模型小鼠血清多肽谱，选择差异较为明显的多肽峰建立诊断模型。 结果:比较白色念珠菌感染组和对照组共得到65个差异多肽峰，组合质荷比（m/z）为1 100.4、1 581.0、3 808.0这3个差异多肽峰建立诊断模型，敏感度为95.24%（40/42），特异度为90.63%（29/32），准确率为93.24%（69/74），ROC曲线下面积为0.972（95 %CI：0.941~1.000）；比较近平滑念珠菌感染组和对照组共得到73个差异多肽峰，组合质荷比（m/z）为1 433.2、1 148.5、4 093.5、4 522.2、8 140.9、8 234.6这6个差异多肽峰建立诊断模型，敏感度为95%（38/40），特异度为81.25%（26/32），准确率为88.89%（64/72），ROC曲线下面积为0.953（95 %CI：0.903~1.000）。比较白色念珠菌感染组和近平滑念珠菌感染组，共得到78个差异多肽峰，组合质荷比（m/z）为2 736.9、8 091.5、8 153.7这3个差异多肽峰建立诊断模型，区分白色念珠菌感染和近平滑念珠菌感染的准确率为98.78%（81/82）。 结论:通过念珠菌血症小鼠模型筛选的差异多肽峰有利于寻找辅助念珠菌血症诊断的血清标志物，为临床早期诊断及合理用药提供了依据。

淋巴管平滑肌瘤病（LAM）是一种罕见的肺部疾病，以囊性肺破坏、进行性肺功能下降和肺衰竭为主要特征。LAM的病理特征是肺内异常平滑肌样LAM细胞过度增殖，LAM细胞异常表达多种蛋白酶［主要是基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、MMP-9和组织蛋白酶K］，可能直接导致肺结构破坏和囊肿形成。雷帕霉素是LAM患者的主要治疗方法，但停药后疾病会继续进展。目前，肺功能检查［如第一秒用力呼气容积（FEV1）］是监测LAM患者疾病负担和治疗反应的标准方法，但FEV1水平易出现技术变异，且对治疗的反应较慢，因此急需定量、准确和快速反应的生物标志物来监测LAM患者疾病进展及治疗预后。基于活性的纳米传感器是一种新兴的生物传感器，可以检测体内失调的蛋白酶，并释放一个报告器来提供疾病的泌尿系统读数。由于LAM中存在广泛的蛋白酶调节失调，该研究开发了一种包括14种肽底物的纳米传感器面板，将其气管滴注到LAM模型小鼠肺内，收集尿液进行质谱测定纳米传感器裂解产物，监测LAM小鼠对雷帕霉素治疗的反应，通过机器学习区分健康与LAM小鼠、治疗与未治疗小鼠。结果发现，基于多活性的纳米传感器PP03（被MMP、天冬氨酸和半胱氨酸蛋白酶切割）（ P<0.001）和PP10（被丝氨酸、天冬氨酸和半胱氨酸蛋白酶切割）（ P=0.017）的切割信号在LAM小鼠和正常小鼠中存在显著差异，机器学习模型可进行强分类。在雷帕霉素治疗后的2 d内，LAM小鼠中PP03和PP10的切割信号恢复正常，机器学习模型使治疗反应的准确分类成为可能［未经治疗组曲线下面积（AUC）=0.94］。