该研究分别以喀斯特地区的酸性土和石灰土为盆栽基质,对金橘分别接种摩西管柄囊霉(Funneli?formis mosseae, F.m)或幼套近明囊霉(Claroideoglomus etunicatum, C.e),采用变性梯度凝胶电泳(DGGE)等技术研究AMF对金橘根际细菌群落多样性及植株生长的影响.结果表明:与不接种处理相比,同类型土中分别接种C.e或F.m,金橘根际菌根侵染率相关指标(F、m、v)值均为C.e处理的最高,C.e或F.m处理后金橘根际土壤中蔗糖酶、酸性磷酸酶、蛋白酶及脲酶活性均显著提高.其中,蛋白酶和脲酶活性变化为石灰土中各处理酶活性值高于酸性土,蔗糖酶和磷酸酶活性变化则为酸性土中各处理酶活性值高于石灰土,差异均达显著水平(P<0.05);两种土壤中上述四种土壤酶活性均为C.e处理的值最高;接种C.e或F.m后,金橘根际土壤细菌的DGGE图谱中,DNA条带数增多,其细菌丰富度(R)、多样性(H)和均匀度(E)指数均比不接种处理高,三种指数值均以C.e处理的最高.细菌DNA优势条带序列分析结果表明:与优势细菌同源性最高的大部分为不可培养细菌,包括酸酐菌属、变形杆菌属、根瘤菌属和放线菌属等,相似性均大于97%.此外,接种后,金橘整株生物量比不接种处理显著提高,而酸性土中接种C.e处理的金橘生物量最高.综上所述,C.e和F.m均能与金橘建立良好的共生关系,且C.e对金橘根系的侵染效果更好.

目的:对牛黄与其一种伪品进行鉴别研究.方法:将中药传统性状鉴定与体式显微和光学显微技术相结合,鉴定并报道了一种新发现的牛黄伪品.并应用高效液相色谱法及液质联用方法对染色物质进行了确证.结果:牛黄与该伪品在层纹的断面特征及颗粒状团块的显微特征等方面存在差异.该伪品主要是用淀粉和色素混合制作而成,伪品中掺有金胺O、皂黄、金橙Ⅱ、柠檬黄、胭脂红等5种染色物质.结论:从宏观到微观层级递进的观察方法可有效鉴别牛黄药材的真伪.HPLC-DAD和HPLC-MS等现代仪器分析方法可用于牛黄药材染色物质的确认.

由于花冠色红而鲜艳是优质中药红花的主要评价指标,在中药材市场上常有染色红花出现,影响其质量和疗效.为了建立快速测定染色红花的方法,该研究从红花的不同产地和中药材市场上收集了127份红花和染色红花.将近红外光谱(NIRS)与红花的性状鉴别、HPLC、主成分分析、偏最小二乘回归分析相结合,建立NIRS定性、定量检测染色红花及其柠檬黄、胭脂红、日落黄、偶氮玉红、酸性红73及金橙Ⅱ等6种染料含量的方法.结果 表明,在NIRS主成分分析图中,50份红花与77份染色红花分布在不同区域,而予以鉴别.在77份染色红花中均检测出柠檬黄(0.60～3.66 mg·g-1)、胭脂红(0.11～1.37 mg·g-1)及日落黄(0.10～0.71 mg·g-1),说明这3种成分是红花的主要染料;而偶氮玉红、酸性红73及金橙Ⅱ未检出.以62份染色红花为校正集样品建立的NIRS测定染料含量的模型,经另外15份染色红花为验证集样品进行预测准确性验证,柠檬黄、胭脂红和日落黄的NIRS预测值与HPLC实测值之间的平均绝对误差(MAD)均小于5％,相关系数分别为0.970,0.975,0.971.说明这2种方法的测定结果一致.由此可见,NIRS不仅可以鉴别红花与染色红花,而且可以测定其染料的含量,用于红花质量的快速检测.

目的 观察金橘水提、醇提液对小鼠胃排空和小肠推进功能的影响,研究讨论其作用机制.方法 采用酚红含量测定法,观察金橘水提、醇提液对正常、阿托品和新斯的明负荷小鼠胃排空和小肠推进的影响.结果 金橘水提、醇提液均对正常状态小鼠胃排空功能无明显影响,但对小肠推进功能有促进作用;二者均可拮抗阿托品所致的抑制作用;二者均对新斯的明所致亢进有拮抗作用.结论 金橘提取物对小鼠胃排空和小肠推进具有双向调节作用,该作用可能与胆碱能系统有关.

目的:建立金橘药材的超高效液相色谱(UPLC)指纹图谱,并进行聚类分析和主成分分析.方法:采用UPLC法,色谱柱为Waters Acquity UPLC BEH C18,流动相为乙腈-0.1％磷酸水溶液(梯度洗脱),流速为0.3 mL/min,检测波长为330 nm,进样量为2μL.以金柑苷峰为参照,绘制8批药材样品的UPLC指纹图谱;采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》(2012版)进行相似度评价,确定共有峰;采用SPSS 24.0软件对8批药材样品进行聚类分析和主成分分析.结果:8批药材样品的UPLC指纹图谱有24个共有峰,相似度均大于0.97.聚类分析结果显示,8批药材样品可聚为两类,S1～S4、S6～S8聚为一类,S5聚为一类.经主成分分析,3个主成分因子的累计方差贡献率为81.366％.结论:所建UPLC指纹图谱及聚类分析和主成分分析结果可为金橘药材的质量控制提供参考.

目的:建立牛黄清胃丸中化工染料检查方法并对其天然色素成分进行分析.方法:采用HPLC,Phenomenon Luna C18色谱柱,流动相为乙腈-0.05 mol·L-1醋酸铵(冰醋酸调pH 4.5)梯度洗脱,在490 nm检测波长对处方中黄芩、黄柏等药材可能存在的黄色系化工染料进行检查;此外,以430 nm为检测波长建立了本品天然色素成分指纹图谱.结果:在490 nm检测波长下,18家企业生产的49批牛黄清胃丸样品中均未检出柠檬黄、日落黄、亮黄、金橙Ⅱ和金胺O 5种黄色系化工染料.与此同时,研究建立了本品中天然色素成分HPLC指纹图谱(430 nm),采用Chem pattern软件分析表明,样品与共有模式的相似度为0.68～0.99;确定14个共有峰并鉴定其中9个成分;此外采用主成分分析阐明不同企业产品间差异较大的色素成分.结论:所建立的方法准确、可靠、简便,可用于牛黄清胃丸中化工染料检查及天然色素成分分析,为本品质量控制提供了参考.

目的 建立金橘的质量标准.方法 性状、显微、TLC法进行定性鉴别;2015年版《中国药典》方法进行检查和浸出物测定;UPLC法测定野漆树苷、金柑苷含有量.结果 各鉴别方法专属性强;10批样品水分、总灰分、酸不溶性灰分、浸出物平均含有量分别为6.66％、3.63％、0.11％、29.09％;野漆树苷、金柑苷分别在0.4～2、8.2～41 μg/mL范围内线性关系良好(r=0.999 9),平均加样回收率分别为99.6％、99.8％,RSD分别为0.41％、0.65％.结论 该方法简便稳定,可用于金橘的质量控制.

目的 建立UPLC-MS/MS法检测冠心苏合制剂10种非法添加色素金胺O、金橙Ⅱ、碱性橙2、日落黄、柠檬黄、孔雀石绿、亮蓝、亮绿、碱性橙21、碱性橙22.方法 以Waters ACQUITY UPLC BEH C18(2.1 mm×100 mm,1.8μm)为色谱柱;负模式流动相为10 mmol·L-1甲酸铵溶液和乙腈,正模式流动相为20 mmol·L-1甲酸铵-0.1％ 甲酸溶液和乙腈,梯度洗脱;流速为0.4 mL·min-1;柱温为35℃.选择ESI离子源,正离子扫描,负离子扫描;多反应监测(MRM)模式.结果 10种色素呈现良好的线性关系,r均大于0.9984,检测限为0.01～0.03 ng·mL-1,平均加样回收率为91.3％ ～105.2％,RSD均小于3％.结论 该方法准确、可靠,可为冠心苏合制剂的质量评价提供参考.

目的 建立可同时检测绿袍散及其原料中5种(金胺O、柠檬黄、日落黄、金橙Ⅱ和酸性橙10)非法添加黄色素的高效液相色谱二极管阵列检测器(ultra performance liquid chromatography-diode array detector,UPLC-DAD)检测方法,用于快速筛查绿袍散及原料中的非法添加染色色素.方法 色谱柱为Acquity BEH C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm);流动相分别以甲醇为流动相A、0.02 mol/L乙酸铵为流动相B进行梯度洗脱;柱温40℃;流速0.3 ml/min,检测波长:金胺O和柠檬黄为432 nm,日落黄、金橙Ⅱ和酸性橙10为484 nm;进样量:2μl.采用超高效液相色谱串联质谱(ultra performance liquid chroma-tography tandem mass spectrometry,UPLC-MS)对UPLC-DAD检出色素的疑似阳性样品进行佐证和确认.结果 5种色素对照品溶液在一定浓度范围内线性关系良好,线性相关系数(r)均大于0.9997;精密度良好,相对标准偏差(RSD)均小于1.03％;重复性良好;柠檬黄、日落黄、酸性橙10、金胺O和金橙Ⅱ峰面积的RSD分别为2.73％,2.92％,1.97％,1.56％和1.58％,表明该供试品溶液在24 h之内稳定性良好;回收率均在96.33％-99.34％之间.10批绿袍散样品中均未检出上述5种非法添加黄色素,6批原料药中仅有一批原料药(黄柏)中检出金胺O.结论 UPLC-DAD技术应用快速、灵敏,且容易推广,可作为筛查绿袍散及其原料中5种非法添加黄色染料的检查方法.

目的 研究金橘Fortunella margarita(Lour.)Swingle的化学成分.方法 金橘成熟果实95％乙醇提取物采用硅胶、ODS、MCI、Sephadex LH-20以及半制备HPLC进行分离纯化,根据理化性质和波谱数据鉴定所得化合物结构.结果 从中分离得到17个化合物,分别鉴定为无羁萜(1)、α-香树脂醇(2)、β-谷甾醇(3)、羽扇豆醇(4)、β-香树脂醇(5)、柠檬苦素(6)、表无羁萜醇(7)、滨蒿内酯(8)、东莨菪内酯(9)、citrusinine-Ι(10)、山柰酚(11)、芦丁(12)、(+)-nyasol(13)、金柑苷(14)、acacetin-8-C-neohesperidoside(15)、syringaresinol 4'-O-β-D-glucopyranoside(16)、vanilloloside(17).结论 化合物1～2、4～5、7～10、13、16～17为首次从该植物中分离得到,化合物16为金橘属植物中首次分离得到.