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聚丙烯酰胺凝胶电泳法鉴别哈蟆油药材及其伪品
编辑人员丨2023/8/6
目的 建立哈蟆油与伪品蟾蜍油、牛蛙油和青蛙油水溶性蛋白的非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(native-polyacrylamide gel electrophoresis,Native-PAGE)和十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)鉴别方法,并对2种电泳方法进行比较.方法 采用Native-PAGE和SDS-PAGE两种电泳系统,分别对不同产地哈蟆油与其伪品的水溶性蛋白的组成及其分子量分布范围进行比较研究.结果 Native-PAGE实验结果显示:哈蟆油与桓仁林蛙油均具有6条特征谱带,黑龙江林蛙油具有5条特征谱带,而蟾蜍油、牛蛙油和青蛙油的特征谱带数目分别为2条、1条和1条.SDS-PAGE实验结果显示:哈蟆油、黑龙江林蛙油和桓仁林蛙油均具有11条特征谱带,而蟾蜍油、牛蛙油和青蛙油的特征谱带数目分别为5条、6条和6条.2种电泳图谱中,哈蟆油等正品药材与伪品蟾蜍油、牛蛙油和青蛙油在特征谱带位置等特征上有明显区别.结论 Native-PAGE和SDS-PAGE两种电泳方法均可用于哈蟆油与类似品和伪品的鉴别,为哈蟆油质量评价和控制方法提供了一种简易的鉴别方法.
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编辑人员丨2023/8/6
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应用iTRAQ结合2D LC-MS/MS技术分析哈蟆油与伪品蛙油的差异蛋白质组
编辑人员丨2023/8/6
采用iTRAQ结合2D LC-MS/MS技术对哈蟆油、青蛙油、蟾蜍油、牛蛙油的蛋白质组进行研究.采用Q Exactive质谱鉴定并经MASCOT软件搜库,对所鉴定的蛋白质进行理化性质分析、层次聚类分析、Gene ontology (GO)功能注释和生物信息学分析.结果共获得2286个肽段,鉴定到1220个蛋白质,其中1212个蛋白质具有定量信息.鉴定得到的蛋白质分子量主要分布在4.1～36.9kDa,占82.79％,等电点主要分布在4.41 ～9.89,占94.84％.对比青蛙油、蟾蜍油和牛蛙油与哈蟆油蛋白质数据库,筛选得到8个差异蛋白(比值＞1.2或比值＜0.83,且P＜0.05),其中显著上调的蛋白质3个,显著下调的蛋白质5个.本结果在蛋白质组成上显示了哈蟆油与伪品蛙油的差异性,为进一步分析哈蟆油中蛋白质成分特点、功能奠定基础.
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编辑人员丨2023/8/6
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哈蟆油与青蛙油蛋白质组学差异分析
编辑人员丨2023/8/5
目的 筛选哈蟆油和青蛙油中的差异蛋白质,发现这些蛋白质与高膨胀度和临床功效相关.方法 采用iTRAQ结合质谱技术建立哈蟆油和青蛙油蛋白质组数据库,通过比较两个蛋白质组数据库,对筛选的差异蛋白质进行Gene Ontology功能注释和生物信息学分析.结果 通过比较青蛙油与哈蟆油中蛋白质定量的数据,共筛选出55个差异蛋白质,其中40个上调蛋白,15个下调蛋白.哈蟆油中有15个含量较高的差异蛋白质,主要参与免疫调节、生长发育等过程;青蛙油中有40个含量较高的差异蛋白质,主要参与糖代谢、能量代谢、应激反应、生长发育等过程.结论 哈蟆油中含量较高的15个差异蛋白质可作为哈蟆油区别于青蛙油的重要活性成分,同时哈蟆油具有较高的膨胀度与其含有大量的黏蛋白类成分密切相关.
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编辑人员丨2023/8/5
