目的 制备马来酸阿塞那平微乳凝胶剂(ASPM-Emulgel),并通过鼻腔给药评价其脑靶向性.方法 根据马来酸阿塞那平(ASPM)在不同种类油、乳化剂和助乳化剂中的平衡溶解度以及辅料相容性结果确定马来酸阿塞那平微乳(ASPM-Emul)的处方组成及用量,并以卡波姆 940 作为凝胶基质将ASPM-Emul制备成凝胶剂;考察ASPM-Emul的粒径分布及微观形态,通过Franz扩散池法比较ASPM-Emul与ASPM-Emulgel的体外释放速率以及在羊鼻黏膜的渗透性;采用在体蟾蜍上颚模型法考察ASPM-Emulgel的鼻腔纤毛毒性;评价ASPM-Emulgel经大鼠鼻腔给药的脑靶向性.结果 根据平衡溶解度和相容性结果,选择单亚油酸甘油酯、吐温 80 和二乙二醇单乙基醚分别作为ASPM-Emul的油相、乳化剂和助乳化剂,配比为 4 ∶ 4 ∶ 2;ASPM-Emul为淡蓝色半透明状微乳液,粒径为(73.6±7.4)nm,在透射电镜下可观察到微乳呈规则球形,均匀分散;体外释放及渗透结果显示,ASPM-Emul的释药速率较快,ASPM-Emulgel释药速率持续平缓,但两者在羊鼻黏膜中的渗透率基本一致;ASPM-Emul和ASPM-Emulgel对蟾蜍鼻腔纤毛无明显毒性;与尾静脉ASPM组相比,ASPM-Emul和ASPM-Emulgel经鼻腔给药后在大脑中的药物含量显著增高,均表现出明显的脑靶向性,且ASPM-Emulgel的脑靶向效率更高.结论 将ASPM制备成微乳凝胶剂,经鼻腔给药后可以显著提高药物的脑靶向性,有望提高马来酸阿塞那平的临床治疗效果.

目的 优化常绿钩吻碱微乳处方,并对其进行安全性评价.方法 溶解度法筛选油相、乳化剂、助乳化剂种类,绘制伪三元相图.以油相、乳化剂、助乳化剂用量为影响因素,粒径、载药量为评价指标,Box-Behnken响应面法优化处方.采用在体蟾蜍上颚模型、大鼠鼻黏膜病理切片考察微乳的鼻腔给药安全性.结果 最佳处方为油相(Labrafil M 1944 CS)、乳化剂(RH40)、助乳化剂(1,2-丙二醇)、水用量 5%、19.53%、19.25%、56.22%,平均粒径为 32.6 nm,载药量为 2.201 mg/mL,多分散系数为 0.165,室温pH值为6.27.与生理盐水组比较,常绿钩吻碱微乳组蟾蜍上颚纤毛摆动时间无明显变化(P>0.05).鼻腔给药后,大鼠鼻黏膜结构完整,纤毛整齐.结论 该方法稳定可靠,可用于制备无明显纤毛毒性、鼻黏膜刺激性的常绿钩吻碱微乳.

目的 建立哈蟆油与伪品蟾蜍油、牛蛙油和青蛙油水溶性蛋白的非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(native-polyacrylamide gel electrophoresis,Native-PAGE)和十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)鉴别方法,并对2种电泳方法进行比较.方法 采用Native-PAGE和SDS-PAGE两种电泳系统,分别对不同产地哈蟆油与其伪品的水溶性蛋白的组成及其分子量分布范围进行比较研究.结果 Native-PAGE实验结果显示:哈蟆油与桓仁林蛙油均具有6条特征谱带,黑龙江林蛙油具有5条特征谱带,而蟾蜍油、牛蛙油和青蛙油的特征谱带数目分别为2条、1条和1条.SDS-PAGE实验结果显示:哈蟆油、黑龙江林蛙油和桓仁林蛙油均具有11条特征谱带,而蟾蜍油、牛蛙油和青蛙油的特征谱带数目分别为5条、6条和6条.2种电泳图谱中,哈蟆油等正品药材与伪品蟾蜍油、牛蛙油和青蛙油在特征谱带位置等特征上有明显区别.结论 Native-PAGE和SDS-PAGE两种电泳方法均可用于哈蟆油与类似品和伪品的鉴别,为哈蟆油质量评价和控制方法提供了一种简易的鉴别方法.

采用iTRAQ结合2D LC-MS/MS技术对哈蟆油、青蛙油、蟾蜍油、牛蛙油的蛋白质组进行研究.采用Q Exactive质谱鉴定并经MASCOT软件搜库,对所鉴定的蛋白质进行理化性质分析、层次聚类分析、Gene ontology (GO)功能注释和生物信息学分析.结果共获得2286个肽段,鉴定到1220个蛋白质,其中1212个蛋白质具有定量信息.鉴定得到的蛋白质分子量主要分布在4.1～36.9kDa,占82.79％,等电点主要分布在4.41 ～9.89,占94.84％.对比青蛙油、蟾蜍油和牛蛙油与哈蟆油蛋白质数据库,筛选得到8个差异蛋白(比值＞1.2或比值＜0.83,且P＜0.05),其中显著上调的蛋白质3个,显著下调的蛋白质5个.本结果在蛋白质组成上显示了哈蟆油与伪品蛙油的差异性,为进一步分析哈蟆油中蛋白质成分特点、功能奠定基础.

目的 以具有抗老年痴呆作用的石菖蒲挥发油为模型药物,制备石菖蒲挥发油鼻喷微乳.方法 根据石菖蒲挥发油在各溶媒中的溶解度初步确定微乳处方组成,并通过绘制伪三元相图,通过比较微乳区域大小、稳定性、载药量等优选最优处方.结果 优选最优处方为石菖蒲挥发油-Cremophor EL-丙三醇-水(6.25:20.83:10.42:62.5),平均粒径为(30.5±0.2)nm,多分散系数(PDI)为0.150±0.002,黏度(2.80±0.21)mPa.s;以β-细辛醚计,体外透皮速率为(1 288.76±16.20)μg/(cm2·h),比石菖蒲挥发油普通乳透皮速率提高了14倍;蟾蜍纤毛毒性实验显示该制剂无显著毒性.结论 所制得的石菖蒲挥发油鼻喷微乳理化性质稳定,透皮性能好,对鼻黏膜纤毛毒性低.

目的:制备薄荷素油鼻黏膜保湿微乳,并对其黏膜黏附性和纤毛毒性进行考察.方法:以聚氧乙烯氢化蓖麻油为乳化剂制备薄荷素油鼻黏膜保湿微乳,基于综合评分以正交设计法优化微乳的制备工艺;对所制微乳进行表征并采用气相色谱法测定薄荷醇含量;通过测定蟾蜍在体纤毛传输速率评价其黏膜黏附性,测定蟾蜍离体纤毛持续运动时间以评价其纤毛毒性.结果:自制微乳的优化制备工艺为先将薄荷素油与乳化剂分散,再加入无水乙醇、食用甘油、蒸馏水混合后,于1200 r/min的转速下搅拌2 h.3批自制微乳中薄荷醇的平均含量为2.682、2.507、2.496 mg/mL,RSD为2.89％(n=3).自制微乳高、中、低剂量组(以薄荷醇计2.561、0.256、0.128 mg/mL)蟾蜍在体上颚纤毛传输速率分别为(0.65±0.01)、(0.78±0.03)、(0.92±0.04)cm/min,显著低于生理盐水组和复方薄荷脑滴鼻液组(P<0.05);蟾蜍离体上颚纤毛运动时间分别为(206.7±4.9)、(226.0±13.5)、(269.3±12.9)min,显著长于去氧胆酸钠组(P<0.05).结论:自制微乳的制备工艺可行、质量可控,其黏膜黏附性较好,无纤毛毒性.

目的:建立一种基于聚类分析与多元统计分析对东北林蛙油及其类似品黑龙江林蛙油、伪品中华蟾蜍油、牛蛙油的十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)图谱有效分类与鉴别的方法.方法:利用SDS-PAGE法,得到18批药材的电泳图谱,将SDS-PAGE电泳图谱转化为数据矩阵,利用NTSYSpc 2.10e统计分析软件进行聚类分析,结合SMICA-P14.1分析软件进行多元统计分析中的无监督的主成分分析(PCA),有监督的偏最小二乘法判别分析(PLS-DA)和正交偏最小二乘法判别分析(OPLS-DA)方法进行多元分析评价.结果:SDS-PAGE电泳图谱技术结合聚类分析与多元统计分析方法能够对东北林蛙油及其类似品、伪品进行准确分类、鉴别.除1号药材外,聚类分析可将四类药材聚为4支.PCA分析结果优于聚类分析,多元统计分析中有监督的PLS-DA和OPLS-DA的分析结果优于无监督的PCA分析,OPLS-DA的分类与鉴别效果最优,OPLS-DA将东北林蛙油、黑龙江林蛙油、牛蛙油、中华蟾蜍聚成4类,并通过VIP (variable importance in projection)值与OPLS-DA载荷图综合分析得到6个差异性蛋白质成分,相对分子质量分别为51.363,35.838,14.565,17.563,15.358及21.696 kDa.结论:SDS-PAGE电泳图谱技术结合聚类分析及多元统计分析方法可以作为一种有效分类、鉴别东北林蛙油及其类似品、伪品的方法.该研究为东北林蛙油的品质评价及筛选提供了一定的参考依据.

目的:基于脂质组学技术阐明脱氢蟾蜍色胺对脂多糖(LPS)介导的炎症斑马鱼模型的抗炎机制.方法:利用LPS刺激转基因荧光斑马鱼,建立炎症模型,以脱氢蟾蜍色胺进行干预给药,基于超高效液相串联质谱(UPLC-QE-MS)技术对各样品组进行代谢轮廓分析,利用多元统计分析筛选差异代谢物.结果:LPS刺激后,卵黄囊中性粒细胞数显著性升高(P＜0.01),说明造模成功,脱氢蟾蜍色胺给药后,中性粒细胞数显著性降低,抗炎率最高达58％;根据多元统计分析从模型组与空白组筛出19个脂质差异代谢物,其中包括16个甘油三酯,2个鞘磷脂,1个神经酰胺.结论:蟾皮中脱氢蟾蜍色胺对LPS介导的斑马鱼炎症模型有明显抗炎活性,可能通过调节甘油三酯和鞘脂等脂质的稳态来发挥抗炎作用.

该文介绍了具有口腔黏膜表面麻醉的单味中药主要有檐酥、草乌、细辛、九里香、两面针、胡椒、菊三七、丁香油酚、薄荷脑和花椒等,其有效成份分别是蟾蜍灵、古柯碱、丁香油酚、乌头碱、次乌头碱等,可选择性的作用于感觉神经末梢产生表面麻醉作用.同时回顾和分析了不同的中药复方表面麻醉剂分别用于口腔溃疡、黏膜炎性疼痛、拔牙、牙槽脓肿切开、口腔表浅手术及扁桃体切除术等临床应用效果.

目的 制备含有柴胡挥发油与黄芩苷有效组分的鼻腔给药温度/离子双敏感即型凝胶剂.方法 以泊洛沙姆407与去乙酰结冷胶为凝胶基质,10％Pharmasolve与2％聚山梨酯-80为增溶剂,0.8％三乙醇胺为pH调节剂,制备柴黄鼻用即型凝胶鼻腔剂,对制剂外观、相转换温度、黄芩苷释放性能等进行研究,并采用大鼠干酵母致热模型和小鼠耳廓肿胀炎症模型进行药效学评价.结果 凝胶剂的相转换温度为36℃,黄芩苷从中的释放具有明显的缓释特征,符合零级动力学方程.大鼠干酵母高热模型和小鼠二甲苯耳廓肿胀炎症模型实验结果显示凝胶剂具有显著的解热和抗炎效果,且均显著优于空白基质和柴黄颗粒对照组.纤毛毒性实验结果显示凝胶剂对蟾蜍上颚黏膜纤毛无明显毒性.结论 所制备的柴黄即型凝胶剂具有速效、高效、长效的特点,具有进一步应用开发的前景.