目的:筛选与大鼠膝骨关节炎相关的差异代谢物及其代谢通路，为深入研究骨关节炎生物标志物提供线索。方法:60只雄性SPF级SD大鼠按体质量（300 ~ 350 g）采用随机数字表法分为模型组和对照组，每组30只。实验周期分别为4、8和12周，每个周期每组10只大鼠。模型组大鼠左侧膝关节采用改良Hulth法行造模手术，5 d后，驱赶大鼠使之活动，每天30 min。实验期间，两组大鼠均饲喂普通固体饲料、自由饮用自来水。实验期满，采集大鼠膝关节和血液样本。采用苏木素-伊红（HE）染色观察膝关节组织病理学变化，超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱仪（UPLC-Q-TOF-MS）检测血清中小分子代谢物，并通过多元统计分析和数据库比对，筛选与骨关节炎相关的差异代谢物及其相关代谢通路。结果:模型组大鼠膝关节软骨变薄，表层粗糙、缺损或剥脱，软骨细胞变性、坏死、缺失，病变随实验周期延长而加重。筛选出11个与骨关节炎相关的血清差异代谢物，分别为硒代半胱氨酸、6-羟褪黑素、γ-谷氨酰半胱氨酸、花生四烯酸、二氢神经鞘氨醇、白三烯A4、白三烯B4、11，12-环氧-二十碳三烯酸（11，12-EpETrE）、溶血磷脂酰胆碱、神经酰胺和N-花生四烯酰甘氨酸。其中，实验4周时筛选出9个，与对照组比较，模型组5个高表达，4个低表达；实验8周时筛选出8个，与对照组比较，模型组2个高表达，6个低表达；实验12周时筛选出8个，与对照组比较，模型组5个高表达，3个低表达。筛选出2条与骨关节炎密切相关的代谢通路，分别为鞘脂代谢通路和花生四烯酸代谢通路，其中，二氢神经鞘氨醇和神经酰胺归属到鞘脂代谢通路，花生四烯酸、白三烯A4和白三烯B4归属到花生四烯酸代谢通路。结论:骨关节炎疾病进程可以影响血清代谢物谱的构成和水平。11个血清差异代谢物涉及鞘脂代谢通路和花生四烯酸代谢通路，与骨关节炎的发生发展相关。

目的:观察低硒条件下T-2毒素对大鼠关节软骨及骺板软骨肝细胞生长因子（HGF）、HGF受体（C-Met）表达的影响。方法:选择24只健康雄性SD大鼠，体质量为60~80 g，按体质量采用随机数字表法分为常规饲料组（硒含量为101.5 μg/kg）和低硒饲料组（硒含量为1.1 μg/kg），每组12只。喂养30 d后，将常规饲料组分为常规组和T-2毒素组（100 μg·kg -1·d -1），低硒饲料组分为低硒组和低硒+T-2毒素组（100 μg·kg -1·d -1），每组6只。继续喂养30 d后处死大鼠，取膝关节软骨组织，采用HE染色光镜下观察膝关节软骨及骺板软骨形态学改变；免疫组织化学法检测膝关节软骨及骺板软骨HGF和C-Met表达情况，计算HGF和C-Met阳性表达率。 结果:光镜下，低硒+T-2毒素组关节软骨及骺板软骨细胞排列稀疏，深层可见坏死无结构区，区域内软骨细胞细胞外基质降解而淡染，附近可见增生的肉芽组织。低硒、T-2毒素、低硒+T-2毒素组大鼠关节软骨及骺板软骨HGF阳性表达率[（21.97 ± 6.90）%、（49.41 ± 8.24）%、（76.39 ± 5.88）%，（23.36 ± 12.49）%、（58.43 ± 14.48）%、（66.59 ± 10.83）%]高于常规组[（9.13 ± 6.01）%、（11.14 ± 4.67）%， P均< 0.05]。低硒、T-2毒素、低硒+T-2毒素组关节软骨及骺板软骨C-Met阳性表达率[（25.34 ± 7.53）%、（58.21 ± 12.54）%、（81.46 ± 7.89）%，（35.21 ± 4.71）%、（40.84 ± 2.03）%、（49.41 ± 6.29）%]高于常规组[（11.21 ± 5.11）%、（12.12 ± 4.71）%， P均< 0.05]。 结论:低硒条件下T-2毒素对大鼠关节软骨及骺板软骨HGF、C-Met表达有影响。

目的:了解低硒条件下T-2毒素对大鼠关节软骨及软骨下骨髓成纤维细胞生长因子8（FGF8）和成纤维细胞生长因子受体3（FGFR3）表达的影响，探讨其在大骨节病（KBD）软骨深层损伤和继发性并发症中的作用机制。方法:选取24只健康雄性SD大鼠（体质量为60 ~ 80 g），采用随机数字表法分为常规饲料组（硒含量101.5 μg/kg）和低硒饲料组（硒含量1.1 μg/kg），每组12只。饲养30 d后，将常规饲料组分为对照组和T-2毒素组（100 μg·kg -1·d -1），低硒饲料组分为低硒组和低硒+ T-2毒素组，每组6只。继续饲养30 d处死大鼠，取膝关节软骨附带松质骨，HE染色观察膝关节软骨病理学改变；免疫组化法检测膝关节软骨及软骨下骨髓FGF8和FGFR3表达情况，计算关节软骨FGF8和FGFR3阳性表达率，并通过Image-Pro Plus 6.0软件测定软骨下骨髓FGF8和FGFR3阳性表达积分光密度（IOD）值。 结果:光镜下，低硒+ T-2毒素组软骨细胞稀疏，关节软骨深层和中层可见空的软骨细胞囊增多，软骨细胞死亡成为红染的细胞影子，深层区域内细胞外基质降解而淡染，成为坏死无结构区，附近可见增生的肉芽组织。低硒+ T-2毒素组大鼠关节软骨FGF8阳性表达率[（88.61 ± 10.97）%]高于对照、低硒、T-2毒素组[（10.35 ± 2.48）%、（19.26 ± 3.08）%、（58.89 ± 9.29）%， P均< 0.05]，软骨下骨髓FGF8阳性表达IOD值[（16.73 ± 1.72）× 10 6]高于对照、低硒、T-2毒素组[（1.20 ± 0.41）× 10 6、（4.33 ± 0.97）× 10 6、（12.80 ± 1.12）× 10 6， P均< 0.05]。低硒+ T-2毒素组大鼠关节软骨FGFR3阳性表达率[（89.76 ± 8.59）%]高于对照、低硒、T-2毒素组[（13.18 ± 2.25）%、（21.15 ± 2.33）%、（32.55 ± 6.72）%， P均< 0.05]，软骨下骨髓FGFR3阳性表达IOD值[（16.50 ± 5.36）× 10 6]高于对照、低硒、T-2毒素组[（7.58 ± 1.02）× 10 6、（10.73 ± 7.13）× 10 6、（9.83 ± 5.63）× 10 6， P均< 0.05]。 结论:在低硒条件下T-2毒素改变了大鼠关节软骨深层及软骨下骨髓FGF8和FGFR3的表达，FGF8和FGFR3的高表达可能参与KBD继发性改变的发生和发展。

实验旨在研究饲料中不同类型和水平的硒源对杂交鲟(Acipenser baerii ♂× Acipenser schrenckii ♀)幼鱼生长、抗氧化能力及组织硒含量的影响.不同类型的硒源为亚硒酸钠、酵母硒和富硒螺旋藻,添加水平为0、0.4和1.2mg/kg,制作对照饲料(C)、亚硒酸钠添加饲料(S1和S2)、酵母硒添加饲料(Y1和Y2)和富硒螺旋藻添加饲料(P1和P2).使用实验饲料饲喂初始体重为(7.82±0.12)g的杂交鲟幼鱼,养殖62d.结果表明,不同硒源和硒水平对杂交鲟幼鱼的特定生长率和饲料效率无显著影响(P＞0.05).高水平亚硒酸钠显著提高了全鱼和肝脏硒含量(P＜0.05),但对肌肉和脊椎骨硒含量无显著影响(P＞0.05).高水平酵母硒和富硒藻螺旋添加组杂交鲟幼鱼的全鱼、肝脏、肌肉及脊椎骨硒含量均显著高于对照组(P＜0.05).酵母硒添加组的血浆总蛋白(TP)和总胆固醇(TC)含量均显著高于对照组(P＜0.05).同时,高水平硒添加组杂交鲟幼鱼的血浆谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性显著高于对照组和低水平硒添加组(P＜0.05).亚硒酸钠组肌肉硒含量与全鱼硒含量显著正相关(P＜0.05),与肝脏硒含量显著负相关(P＜0.05).血浆GSH-Px活性与肌肉、脊椎骨和肝脏硒含量正相关(P＜0.05).综上所述,高水平硒添加可以提高全鱼及肝脏硒含量,不同类型硒在鱼体的蓄积模式不一致,高水平的有机硒(酵母硒和富硒螺旋藻)添加比无机硒(亚硒酸钠)更易在肌肉和脊椎骨中蓄积;高水平硒添加可显著提高杂交鲟抗氧化能力,不同硒源对杂交鲟的抗氧化能力无显著影响.

目的 了解不同膳食硒水平下皮炎小鼠胸腺基质淋巴细胞生成素(thymic stromal lymphopoietin,TSLP)的表达情况.方法 40只BALB/c小鼠随机分为4组(n=10),3个致敏组分别以低硒(0.01 mg/kg)、中量硒(0.25 mg/kg,正常水平)和高量硒(3.00 mg/kg)饲料喂养,对照组以中量硒(正常水平)饲料喂养.饲养8周后致敏组采用1-氯2,4二硝基苯(1-Chloro 2,4-dinitrobenzene,DNCB)激发特应性皮炎样症状.激发期间监测皮炎症状.激发3周后采样进行皮肤组织病理观察,血浆总IgE检测,组织硒含量测定,TSLPmRNA丰度和TSLP蛋白表达分析.结果 激发小鼠均出现典型的皮炎症状和皮炎病理改变,皮炎症状评分、挠痒计数和血浆总IgE显著高于对照组(P＜0.05).与对照组(标化为1)相比,除缺硒组(2.51±0.43)皮肤组织外(P＜0.05),激发小鼠皮肤(中、高硒组:1.83±0.79,2.26±0.75)、脾脏(低、中、高硒组:1.33±0.17,1.06±0.13,0.99±0.45)、肾脏(低、中、高硒组:1.16±0.42,1.10±0.40,1.53±0.40)和肝脏(低、中、高硒组:0.95±0.30,0.90±0.31,1.11±0.43)组织TSLP mRNA相对表达量与对照组比较,差异均无统计学意义(P＞0.05),激发小鼠4种组织中TSLPmRNA的相对表达量在三个硒水平组之间差异无统计学意义(P＞0.05);线性回归分析发现,3个硒水平组激发小鼠皮肤组织中TSLP mRNA相对表达量与皮肤组织中硒水平无相关性(R2=0.006,P＞0.05).蛋白分析发现,致敏组TSLP蛋白在低中高三个硒水平致敏组小鼠皮肤组织中的表达差异无统计学意义;在致敏组小鼠肝脏、脾脏和肾脏中均未见明显表达条带.结论 DNCB激发特应性皮炎样皮炎小鼠皮肤、肝脏、脾脏和肾脏组织中TSLP的表达不受膳食硒水平的影响,这可能与TSLP的亚型和表达时机有关.

目的 探讨长期饮用凤冈锌硒茶对高脂高糖饮食致肥胖大鼠是否有清脂作用.方法 成年SD大鼠30只随机分为对照组、普茶组、锌硒茶组,每组10只.适应性饲养1周后按8 g/100 g体质量给予高脂高糖干饲料自由摄食饮水.6周后每口下午四时对大鼠以5 mL/kg体积双蒸水、普通绿茶制剂、风冈锌硒茶制剂进行灌胃,茶叶暴露剂量均为0.24 g/(kg·d),连续灌胃26周后,用全自动生化分析仪检测血清总胆固醇(TC)、甘油三脂(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C);取性腺旁脂肪垫称重并计算脂肪系数;HE染色后200倍镜下观察组织细胞形态学病理变化,并随机视野拍照进行细胞计数.结果 26周时,各组体质量、脂肪质量、脂肪系数比较:对照组＞普茶组＞锌硒茶组(P均＜0.05);血清TG、LDL-C比较:锌硒茶组＜普茶组＜对照组(P均＜0.05);脂肪组织镜下观察到对照组脂肪细胞体积大于其他两组,锌硒茶组细胞排列较整齐,细胞面积明显小于对照组,略小于普茶组;平均视野细胞数:锌硒茶组＞普茶组＞对照组(P均＜0.05).结论 长期饮茶水对肥胖大鼠有清脂作用,可降低体质量、减少脂肪量,凤冈锌硒茶的效果比普通绿茶的效果显著.

目的 观察硒对小鼠特应性皮炎样表现的影响.方法 40只BALB/c小鼠随机等分为缺硒组(0.01 mg/kg)、正常硒组(0.25 mg/kg)、过量硒组(3.00 mg/kg)和对照组(0.25 mg/kg),4组小鼠先用缺硒饲料饲养4周后,再分别以缺硒、正常硒、过量硒和正常硒饲料喂养4周.此后,3个致敏组(缺硒组、正常硒组、过量硒组)采用二硝基氯苯(DNCB)诱导特应性皮炎样表现.激发期间监测小鼠皮炎表现严重程度.激发3周后检测小鼠血浆总IgE、全血炎症细胞计数,并剪取小鼠背部皮肤组织进行组织病理检查,分析组织中硒含量.单因素方差分析方法评估多组间IgE、硒水平和细胞计数等检测结果差异,Pearson相关性分析和线性回归分析评估IgE等检测指标与硒水平的相关性.结果 致敏6d后,致敏组小鼠皮肤表现评分明显高于对照组(致敏第6、8、11、13、15、18天时各组间比较,F值分别为44.897、76.622、114.866、33.352、28.605、11.271,均P＜ 0.01),第11天过量硒组皮肤表现评分明显高于缺硒组和正常硒组(均P＜ 0.05).与对照组相比,致敏小鼠均发生明显的皮炎病理改变,但3个致敏组之间皮损中炎症细胞计数差异无统计学意义(均P＞ 0.05).致敏小鼠全血炎症细胞和血浆总IgE水平均随膳食硒水平的增加而升高;其中过量硒组血浆总IgE水平升高最明显,与缺硒组、正常硒组和对照组比较,差异均有统计学意义[(167.17±8.49) μg/L比(124.78±5.32) μg/L、(132.61±4.71) ug/L、(109.13±0.79) μg/L,t值分别为3.919、3.222、6.485,均P＜0.05].致敏组小鼠皮肤组织硒含量与小鼠血浆总IgE水平(r=0.579,P＜0.001)、全血白细胞(r=0.414,P＜0.05)、中性粒细胞(r=0.439,P＜0.05)、淋巴细胞(r=0.417,P＜0.05)和嗜酸性粒细胞(r=0.505,P＜0.01)均呈线性正相关.结论 不同硒水平对小鼠皮炎表现严重程度的影响不同,过量硒组皮炎表现更严重.

目的 探讨低硒大鼠microRNA表达谱的变化.方法 将30只SD大鼠随机分为对照组、低硒组及补硒组,每组各10只,对照组喂养标准饲料,低硒组喂养低硒饲料,补硒组喂养低硒饲料14周后再给予亚硒酸钠补硒3周.各组喂养17周后,检测大鼠的血硒水平.提取各组大鼠心肌组织RNA进行microRNA基因芯片检测,寻找低硒大鼠与正常大鼠microRNA的表达差异.采用GO分析等生物学方法对差异性表达的microRNA基因进行深度的分析,并通过RT-qPCR进行验证.结果 成功构建了SD大鼠低硒模型(血硒含量0.026 ng/L),低硒组大鼠血硒水平与对照组相比明显降低(P＜0.05),补硒后又明显增加(P＜0.05).通过microRNA基因芯片检测低硒组筛选出显著差异性表达基因共30个,上调基因中表达最显著的为:miR-374,miR-16,miR-199a-5p,miR-195和miR-30e*,下调基因中表达最显著的为:miR-3571,miR-675和miR-450a*.其中miR-374表达量最高,与低硒密切相关.结论 低硒大鼠中miR-374,miR-16,miR-199a-5p,miR-195,miR-30e*,miR-3571,miR-675,miR-450a*表达显著异常,其中miR-374与低硒关系最为密切.为MicroRNA在克山病的诊断及治疗方面研究提供实验依据.

目的 探讨低硒对大鼠心肌组织结构及心功能的影响.方法 将60只纯系断乳SD大鼠随机分为对照组、低硒组(LS组)及补硒组(SS组),每组各20只,对照组喂养标准饲料,LS组大鼠喂养低硒饲料,SS组喂养低硒饲料14周后再给予亚硒酸钠补硒3周,各组喂养17周后,检测大鼠的血硒含量,并采用HE染色观察大鼠心肌组织形态学变化,电镜下观察心肌组织超微结构,采用分类脑钠肽(Triage BNP)快速检测实验检测血浆BNP,心脏超声检测大鼠心功能的变化.结果 LS组、SS组大鼠血清硒水平均低于对照组(P均<0.05),SS组大鼠补硒后血清硒水平上升,高于LS组(P<0.05).对照组大鼠心肌组织结构正常,LS组大鼠心肌组织结构紊乱,SS组大鼠心肌组织结构仅有轻度异常.与对照组相比,LS组大鼠脑钠肽(BNP)、左心室收缩末期内径(LVESD)、左心室舒张末期内径(LVEDD)均升高(P均<0.05),左心室射血分数(LVEF％)及左室短轴缩短率(LVFS％)均降低(P均<0.05).SS组大鼠BNP、LVEDD和LVESD水平均低于LS组,LVEF％和LVFS％均高于LS组(P均<0.05).结论 低硒可导致大鼠心肌组织结构的破坏,进而导致心功能的下降,补硒后可改善大鼠心功能.

目的 探讨Wnt/β-catenin信号通路在硒缺乏大鼠心力衰竭中的调控作用. 方法 40只大鼠被随机分为对照组和硒缺乏组,分别喂食标准饲料(硒含量为0.5 mg/kg)和硒缺乏饲料(硒含量为0.01 mg/kg),喂养17周后采用2,3-二氨基萘荧光法测定血清硒含量,BNP检测试剂盒测定脑尿钠肽(brain natriuretic peptide,BNP)水平,心脏超声进行检测心功能,West-em blot检测心肌组织中Wnt及β-catenin的表达. 结果 硒缺乏组的血清硒水平较对照组显著降低[(0.035±0.002) ng/Lvs (0.142±0.004) ng/L,P＜0.05],而硒缺乏组BNP水平则显著高于对照组[(1 450±4.64)pg/ml vs (850±3.27) pg/ml,P＜0.05].心脏超声提示硒缺乏组大鼠左心室射血分数较对照组显著降低[(42.73±11.03)％ vs (72.54±12.28)％,P＜0.05].Western blot结果显示,硒缺乏组Wnt蛋白表达水平和β-catenin蛋白表达水平高于对照组[(25.06±1.37)％ vs(12.13±1.68)％;(30.15±1.46)％ vs (10.09±1.52)％,均P＜0.05]. 结论 硒缺乏可导致大鼠发生心力衰竭,其可能机制与Wnt/β-catenin信号通路的上调有关.