目的:探讨生物型股骨长柄半髋关节置换对老年股骨粗隆间骨折患者术后髋关节功能、血清骨性标志物、血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）、皮质醇（Cor）水平的影响。方法:选取2017年6月至2019年6月在皖北煤电集团总医院行手术治疗的老年股骨粗隆间骨折患者120例，按非随机临床同期对照研究与患者自愿原则，分为关节置换组和内固定组，每组60例。内固定组行股骨近端防旋髓内钉（PFNA）内固定术，关节置换组行生物型股骨长柄半髋关节置换术。比较两组围手术期相关指标，并发症发生情况，手术前后血清AngⅡ、Cor水平，手术前后血清骨标志物骨钙素（OC）、降钙素（CT）、碱性磷酸酶（ALP）水平，手术前后Harris髋关节功能量表评分、Barthel指数（BI）评分、生命质量综合评定问卷（GQOL-74）评分及术后6个月髋关节功能优良率。结果:关节置换组下床活动时间短于内固定组，手术时间长于内固定组，术中出血量与术后引流量高于内固定组，差异均有统计学意义（ P<0.05）。关节置换组术后并发症发生率低于内固定组[8.33%（5/60）比25.00%（15/60）]，差异有统计学意义（ χ2 = 6.000， P<0.05）。两组术后第1、3天血清AngⅡ、Cor水平较术前增高，并且关节置换组高于内固定组[术后第1天：（218.68 ± 42.04）mmol/L比（158.19 ± 34.36）mmol/L、（327.15 ± 39.08）μg/L比（285.42 ± 34.06）μg/L；术后第3天：（169.46 ± 32.73）mmol/L比（138.02 ± 25.97）mmol/L、（294.83 ± 33.95）μg/L比（262.64 ± 30.57）μg/L]，差异均有统计学意义（ P<0.05）。两组术后1、3个月血清OC、CT、ALP水平较术前增高，并且关节置换组高于内固定组[术后1个月：（17.40 ± 4.25）μg/L比（14.96 ± 3.79）μg/L、（1.34 ± 0.49）ng/L比（1.15 ± 0.43）ng/L、（159.49 ± 19.75）U/L比（137.24 ± 17.28）U/L；术后3个月：（19.18 ± 5.79）μg/L比（16.24 ± 4.36）μg/L、（1.46 ± 0.57）ng/L比（1.24 ± 0.50）ng/L、（180.94 ± 22.42）U/L比（163.72 ± 19.36）U/L]，差异均有统计学意义（ P<0.05）。两组术后1、3、6个月Harris髋关节功能量表评分较术前增高，并且关节置换组高于内固定组，差异均有统计学意义（ P<0.05）。关节置换组术后髋关节功能优良率高于内固定组[90.00%（54/60）比75.00% （45/60）]，差异有统计学意义（ χ2 = 4.675， P<0.05）。两组术后1、3、6个月BI、GQOL-74评分均较术前提高，并且关节置换组高于内固定组，差异均有统计学意义（ P<0.05）。 结论:与PFNA内固定比较，应用生物型股骨长柄半髋关节置换治疗老年股骨粗隆间骨折患者可促进恢复，减少并发症，减轻对骨性标志物的影响，提高患者髋关节功能、日常生活能力及生命质量，但对机体创伤较重，应激反应较强。

目的:探索一种操作简单、实用性强的体内构建大尺寸骨组织的方法。方法:采用大鼠双侧股骨及胫骨原代培养骨髓间充质干细胞（BMSCs），应用流式细胞仪鉴定BMSCs表面标志物、倒置显微镜观察细胞形态、Von Kossa矿化结节染色观察BMSCs成骨分化、油红O染色观察BMSCs的成脂分化情况。用CBD-BMP2（具有胶原结合区的BMP2）和微米级胶原丝结合构建分化微控单元，用大鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）和Cultispher-s胶原微球构建细胞单元。分别用注射器把分化微控单元-细胞单元混合组（实验组）、细胞单元组（对照组1）、分化微控单元组（对照组2）注入到11只SD雄性大鼠背部皮肤下，3组大鼠养至30 d后处死，取出皮下培养出的仿生组织。电镜及显微（Micro）CT扫描观察仿生组织表面和内部结构，对仿生组织进行HE染色、碱性磷酸酶（ALP）染色来观察组织内细胞分布及成骨成分的染色表达。采用5-溴-4-氯-3-吲哚-磷酸盐（BCIP）/四唑淡蓝（NBT）ALP显色试剂盒对仿生组织进行碱性磷酸酶活性检测；能谱分析测定仿生组织的钙离子含量；压缩模量检测仿生组织的生物力学强度。结果:P3代BMSCs表面阳性抗原CD44和CD90表达比例分别为95.11%、96.18%；造血表面标志CD11b和CD45的比例分别为1.18%、1.82%。BMSCs呈梭形、融合成片、旋涡状。BMSCs成骨诱导后可见大量的黑色矿化结节形成；BMSCs成脂诱导后可见大量的圆形红色的脂滴形成。实验组培养出大小约为1.3 cm×2.1 cm×0.6 cm、质地较硬的骨样组织，对照组1组培养出大小为1.0 cm×1.0 cm×0.4 cm、质地软的组织，对照组2未培养出成形组织。电镜及Micro-CT可见实验组仿生组织的外表为高信号的骨性结构，内部也充满大范围的高信号的骨性结构；对照组1仿生组织则未发现高信号结构。HE染色显示实验组形成大量骨组织，对照组1则未形成骨组织。实验组较对照组1产生更多的ALP，且实验组ALP活性高于对照组1[（0.023±0.005）nmol·mg -1·min -1比（0.005±0.002）nmol·mg -1·min -1， P<0.05]。实验组钙离子含量为7.42%，对照组1为0.34%。实验组压缩模量高于对照组1[（2.62±1.41）MPa比（0.03±0.01）MPa， P<0.05]。 结论:利用细胞单元和分化调节单元在体内构建出大尺寸骨组织简单可行。细胞单元和分化微控单元具有可注射性，可以直接将其注入到骨折或者骨缺损处进行治疗，为组织工程走进临床试验提供了新思路。

目的:通过生物信息学分析骨性关节炎(OA)软骨下骨改变过程中的潜在生物标志物及相关通路。方法:从基因表达数据库(GEO)下载GSE51588数据集，鉴定差异表达基因(DEGs)并进行富集分析。构建蛋白互作网络(PPI)，模块分析并筛选Hub基因。预测Hub基因的靶向MicroRNAs(miRNAs)，鉴定关键miRNAs并绘制其受试者工作特征(ROC)曲线。结果:最终鉴定出与OA软骨下骨改变相关的10个Hub基因，3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)、白蛋白(ALB)、骨髓肿瘤细胞(MYC)、Toll样受体2(TLR2)、髓过氧化物酶(MPO)、中性粒细胞表达的弹性蛋白酶(ELANE)、甲酰肽受体2(FPR2)、精氨酸酶1(ARG1)、前血小板碱性蛋白(PPBP)、甲酰肽受体1(FPR1)，及8个关键miRNAs(hsa-miR-6809-3p、hsa-miR-4263、hsa-miR-6759-5p、hsa-miR-6165、hsa-miR-6754-5p、hsa-miR-5588-5p、hsa-miR-877-3p、hsa-miR-4270)。结论:本研究结果显示的潜在生物标志物及相关通路为OA的诊断和治疗研究提供候选靶点。

目的:探讨透明细胞软骨肉瘤（clear cell chondrosarcoma，CCCS）的临床表现、影像学特点、病理组织学特征、诊断陷阱、治疗以及预后。方法:回顾性分析2010年1月至2020年1月23例收治并手术治疗的透明细胞软骨肉瘤患者资料，其中男21例，女2例；年龄（45.78±16.19）岁（范围：27~72岁）。21~40岁8例（35%），41~60岁10例（43%），61~80岁者5例（23%）。发病部位股骨8例，骨盆7例，胸腰椎4例，骶骨3例，胫骨1例。术前穿刺及术后大体标本用10%中性福尔马林固定，5%硝酸脱钙处理，石蜡包埋，行苏木素-伊红（hematoxylin and eosin，HE）染色及免疫组织化学染色（envision法），收集术前影像学表现及临床症状，术后显微镜下病理组织学表现及免疫表型，归纳总结透明细胞软骨肉瘤的临床、影像学及病理形态学特点。结果:23例透明细胞软骨肉瘤中影像学均显示骨质破坏，部分病例为境界相对清楚的溶骨性破坏，部分病例有硬化缘。7例术前有血清碱性磷酸酶升高。肿瘤组织大体灰白灰红色，部分病例可见瓷白色软骨样区域。镜下肿瘤细胞圆形、多角形，部分胞浆透亮，境界清楚，部分胞浆嗜酸性，细胞核圆形、居中，核分裂像罕见。常常可见结节状分布的软骨样基质及幼稚的编织骨，散在多核破骨巨细胞样巨细胞。免疫组化染色可不同程度的表达S-100、D2-40、EMA、Vimentin、p16、SATB2，表达不具备特异性。治疗主要通过外科手术整块切除，术后出现复发10例（43.5%），无远处转移病例。结论:透明细胞软骨肉瘤是软骨肉瘤的一种少见亚型，具有低度恶性生物学行为，准确诊断需要临床、影像学和病理三结合，外科整块切除预后较好。

目的:探究刺平面细胞极性蛋白1（prickle planar cell polarity protein 1，PRICKLE1）基因变异参与骨性Ⅲ类错 畸形发生的分子机制。 方法:收集2021年10月于南京医科大学附属口腔医院正畸科就诊的骨性Ⅲ类错 畸形伴上颌骨发育不足家系1个，提取该家系成员基因组DNA进行全外显子组测序，筛选致病基因及突变位点，Sanger测序验证突变序列。收集2021年10月至2022年12月于南京医科大学附属口腔医院口腔颌面外科就诊的正颌患者手术过程中切除的颌骨组织，提取并培养人颌骨骨髓间充质干细胞，转染过表达慢病毒（过表达目的基因的慢病毒为野生组，过表达突变位点的慢病毒为突变组）和敲降慢病毒（分为敲降1组和2组，以干扰阴性慢病毒为对照组），开展实时荧光定量PCR（real-time fluorescence quantitative PCR，RT-qPCR）实验、蛋白质印迹法实验、增殖实验、Transwell实验、碱性磷酸酶和茜素红染色。构建斑马鱼模型，注射吗啉代寡聚核苷酸（morpholino oligonucleotide，MO），在斑马鱼体内敲低prickle1a和prickle1b的表达（共敲组），对照组注射标准化MO作为参照。对2组斑马鱼颅面部组织进行转录组测序、富集分析和共表达分析。 结果:该家系2例患者均携带PRICKLE1 c.113C>T突变。转染实验显示，相比野生组（PRICKLE1相对表达量为21.97±0.60），突变组人颌骨骨髓间充质干细胞PRICKLE1相对表达量（5.05±0.05）显著降低（ P<0.05），细胞增殖能力和迁移能力显著增强（ P<0.05），成骨分化能力显著减弱（ P<0.05）；相比对照组，2个敲降组细胞的增殖能力和迁移能力均显著增强（ P<0.05），成骨分化能力均显著减弱（ P<0.05）。斑马鱼模型实验显示，与对照组（338.80±24.92）相比，共敲组斑马鱼筛板宽度显著减小（282.50±61.77）（ t=5.29， P<0.001）。转录组测序富集分析结果显示，共敲组和对照组的差异基因在丝裂原活化蛋白激酶信号通路上富集明显。 结论:PRICKLE1 c.113C>T突变下调丝裂原活化蛋白激酶信号通路，抑制颌骨骨髓间充质干细胞的成骨分化能力，进而参与骨性Ⅲ类错 畸形的发生发展。

目的 探讨小针刀疗法联合自拟接骨活血方治疗高龄膝关节骨性关节炎的效果.方法 选取2021年11月-2023年3月本院收治的84例高龄膝关节骨性关节炎患者为研究对象,利用随机数字表法将其分为2组,观察组和对照组,各42例,对照组采用小针刀疗法治疗,观察组采用小针刀疗法联合自拟接骨活血方治疗,比较2组患者的中医证候积分、膝关节功能评分、炎症因子、骨代谢指标及临床疗效.结果 治疗前,2组中医症状积分、莱氏(Lysholm)评分、血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平、白介素-6(IL-6)水平、骨特异性碱性磷酸酶(BALP)水平、胰岛素样生长因子1(IGF-1)水平、骨钙素(BGP)水平差异无统计学意义(P＞0.05).治疗后,观察组中医症状积分、TNF-α水平、IL-6水平低于对照组(P＜0.05),观察组Lysholm评分、BALP水平、IGF-1水平、BGP水平高于对照组(P＜0.05);观察组总有效率高于对照组(P＜0.05);2组患者不良反应发生率差异无统计学意义(P＞0.05).结论 小针刀疗法联合自拟接骨活血方能够有效降低患者中医证候积分,改善膝关节功能,降低疼痛程度,提高临床疗效,值得推广.

目的:探讨芒果苷(MGF)通过调控Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路对大鼠髋部骨折愈合的作用,阐明其相关作用机制.方法:建立SD大鼠髋部骨折模型,造模成功后将大鼠分为模型组、MGF组和MGF+XAV-939(Wnt/β-catenin信号通路抑制剂)组,另设假手术组,每组15只.术后第1天各组大鼠按分组方法给予MGF或XAV-939干预,每2d给药1次,共14次.采用Lane-Sandhu X射线评分法评估术后第2和4周各组大鼠骨折愈合情况,显微CT(Micro CT)检测各组大鼠骨显微结构参数骨体积(BV)、骨小梁数量(Tb.N)、骨体积分数(BV/TV)和骨小梁厚度(Tb.Th),HE染色观察各组大鼠骨痂组织形态表现,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测各组大鼠血清中成骨标志物骨碱性磷酸酶(BALP)和Ⅰ型前胶原N端前肽(PINP)及破骨标志物抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP-5b)和Ⅰ型胶原羧基末端肽(CTX)水平,Western blotting法检测各组大鼠骨痂组织中β-catenin、Runt相关转录因子2(Runx2)和骨形态发生蛋白2(BMP-2)蛋白表达水平.结果:与假手术组比较,模型组大鼠骨折后第2和4周骨折线清晰,骨折部位存在较多纤维组织,未发现骨性骨痂,Lane-Sandhu X射线评分及骨显微结构参数BV、Tb.N、BV/TV和Tb.Th均降低(P＜0.05),血清中 BALP 水平降低(P＜0.05),PINP、TRACP-5b 和 CTX 水平升高(P＜0.05),骨痂组织中β-catenin、Runx2和BMP-2蛋白表达水平降低(P＜0.05).与模型组比较,MGF组大鼠骨折后第2周新生骨痂明显增多,第4周骨折线基本消失,骨折愈合较快,骨折部位大量纤维组织被骨组织替代,骨性骨痂量明显增多,Lane-Sandhu X射线评分及骨显微结构参数BV、Tb.N、BV/TV和 Tb.Th 均升高(P＜0.05),血清中 BALP 水平升高(P＜0.05),PINP、TRACP-5b 和 CTX 水平降低(P＜0.05),骨痂组织中β-catenin、Runx2和BMP-2蛋白表达水平升高(P＜0.05).与MGF组比较,MGF+XAV-939组大鼠骨折后第2和4周骨折部位仅有少量新生骨痂,髓腔未形成,Lane-Sandhu X射线评分及骨显微结构参数BV、Tb.N、BV/TV和Tb.Th均降低(P＜0.05),血清中BALP 水平降低(P＜0.05),PINP、TRACP-5b和 CTX水平升高(P＜0.05),骨痂组织中β-catenin、Runx2和BMP-2蛋白表达水平降低(P＜0.05).结论:MGF可促进大鼠髋部骨折愈合,其作用机制可能与激活Wnt/β-catenin信号通路有关.

目的:探讨忍冬藤提取物对骨质疏松性骨折大鼠模型的影响及其机制.方法:将大鼠随机分为对照组,模型组,忍冬藤提取物低剂量组、中剂量组、高剂量组.除对照组外均建模,建模成功后,低、中、高剂量组分别给予50、100、200 mg·kg-1·d-1忍冬藤提取物,灌胃12周,对照组和模型组给予等体积生理盐水.对比各组双能X线摄片结果、骨痂组织H-E染色结果、骨密度、血清碱性磷酸酶(ALP)水平、血清炎症因子即肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)水平,应用免疫印迹和RT-PCR检测骨痂组织Wnt3、β-catenin蛋白和mRNA表达水平.结果:双能X线摄片结果显示,模型组骨折线清晰、骨痂生长明显;与模型组相比,低、中、高剂量组骨折端缝隙以及骨痂体积减小,高剂量组骨折愈合最佳.H-E染色结果显示,模型组可见软骨性骨痂,成熟的骨小梁细胞较少,骨小梁排列紊乱;低、中、高剂量组,组织病理变化有程度不同改善,骨小梁数目逐渐增多,排列趋于有序.与对照组比较,模型组大鼠骨密度、ALP及Wnt3、β-catenin蛋白和mRNA表达水平显著降低,血清TNF-α、IL-1β水平显著升高;与模型组比较,低、中、高剂量组骨密度、ALP及Wnt3、β-catenin蛋白和mRNA表达水平显著升高,血清TNF-α、IL-1β水平显著降低.结论:忍冬藤提取物可促进骨质疏松性骨折大鼠模型骨折愈合,其机制可能与其能激活Wnt/β-catenin通路有关.

目的 分析四肢骨折患者内固定术后感染病原菌及Smad通路和骨代谢指标水平.方法 回顾性分析2020年1月-2022年12月湖州市第一人民医院收治的985例四肢骨折内固定术患者的临床资料;根据患者术后感染情况分为术后感染组(27例)、术后未感染组(958例);统计术后感染组病原菌耐药性及其临床特点;比较两组术后Smad通路和骨代谢指标水平.结果 27例四肢骨折内固定术后感染患者共培养分离病原菌34株,其中革兰阳性菌21株占61.76％,革兰阴性菌12株占35.29％,真菌1株占2.94％,以金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌和大肠埃希菌为主;金黄色葡萄球菌对红霉素、青霉素、苯唑西林、氨苄西林的耐药率较高,对阿米卡星、米诺环素、利福平较敏感;大肠埃希菌对头孢呋辛、头孢拉定、头孢噻肟、米诺环素、氨苄西林/舒巴坦的耐药率较高,对亚胺培南、阿米卡星较敏感;术后感染组外周血单个核细胞Smad 1、Smad 2、Smad 3蛋白高于术后未感染组,而血清降钙素(CT)、骨钙素(OC)、骨性碱性磷酸酶(BALP)、Ⅰ型前胶原氨基端肽(P Ⅰ NP)、骨γ-羟基谷氨酸蛋白(BGP)、骨形态发生蛋白-2(BMP-2)低于术后未感染组(P＜0.05).结论 四肢骨折内固定术后感染病原菌主要为革兰阳性菌,可激活Smad通路,降低骨代谢水平,不利于骨折愈合恢复,且其发生与基础疾病、骨折类型、治疗情况等有关,而其主要病原菌耐药性存在差异.

患者,男,45岁.13年前无意中发现右小腿黑色痣,行黑色痣切除术.2年前原部位发现质韧肿物,进行性增大,未给予特殊治疗.查体:右小腿中段前内侧可见2.5 cmX2.5 cm半球形肿物,质软,活动度差,边界不清,右侧腹股沟可触及肿大淋巴结.实验室检查示碱性磷酸酶水平升高,患者既往身体健康.MRI检查示右小腿软组织异常团块影呈T1加权像(T1WI)稍高信号,T2WI低信号,考虑黑色素瘤复发(图1).CT检查示右侧第5肋骨不规则样骨质破坏,大小约4.2 cm×1.2 cm×2.1 cm,以成骨为主,轻度膨胀性生长,骨皮质欠连续且有大量硬化,边界清楚,周围可见局限性增厚软组织影,并有少量骨膜反应,结合病史考虑混合型骨转移,以成骨性病变为主(图2).PET/CT全身骨扫描结果示单发右侧第5肋骨摄取放射性增高(见封三图3).