目的:建立附子炮制品中6个乌头碱成分的含量测定方法并进行临床用药分析.方法:采用高效液相色谱法测定附子炮制品中单酿型和双酿型乌头碱含量.色谱柱为岛津Shim-pack GIST C18(250 mm × 4.6 mm,5 μm),流动相为乙腈-0.2％冰乙酸溶液(用三乙胺调节pH值至6.2)(梯度洗脱),流速为1.0 mL·min-1,检测波长为235 nm,柱温为30 ℃.结果:苯甲酰新乌头原碱、苯甲酰乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱、新乌头碱、乌头碱、次乌头碱的进样量线性范围分别为0.034 4～8.602 4 μg(r=0.999 9)、0.003 4～0.848 9 μg(r=0.999 9)、0.003 1～0.786 9 μg(r=1.000 0)、0.018 9～4.726 5 μg(r=1.000 0)、0.019 0～4.741 4 μg(r=1.000 0)、0.017 9～4.473 0 μg(r=1.000 0);平均加样回收率分别为 101.5％(RSD=1.23％)、96.17％(RSD=1.58％)、98.90％(RSD=1.96％)、103.1％(RSD=1.85％)、91.16％(RSD=1.47％)、95.43％(RSD=0.31％)(n=9);精密度、重复性、耐用性试验的RSD均小于2.0％.60批样品测定结果显示,有效性:白附片、黑顺片＞炮附片＞淡附片;安全性:炮附片＞白附片＞淡附片＞黑顺片;综合评价:白附片＞炮附片＞黑顺片＞淡附片.结论:所建方法可靠、准确,可同时测定附子炮制品中6个乌头碱成分的含量,并发现4种附片中白附片有效性和安全性都较好,炮附片有效性稍弱、但安全性好,黑顺片需关注其安全性,淡附片需注意其有效性,该研究为临床用药提供了参考.

该文比较建昌帮阴附片、阳附片、淡附片3种附子炮制品在炮制过程中化学成分的变化,从成分角度为炮制减毒增效作用机制提供科学依据.分别对3种附片的炮制过程进行过程性取样,得到生附片、阴附片清水漂制(阴漂制)、阴附片姜汁润(阴姜润)、阴附片蒸制(阴蒸制、阴附片)、阳附片清水漂制(阳漂制)、阳附片砂炒(阳砂炒、阳附片)、淡附片清水漂制(淡漂制)、淡附片米泔水漂制(淡米泔水漂)、淡附片烤制(淡烤制、淡附片)样品,经UPLC-MS/MS检测提取液中乌头碱、新乌头碱、次乌头碱、苯甲酰乌头原碱、苯甲酰新乌头原碱、苯甲酰次乌头碱、乌头原碱、新乌头原碱、次乌头原碱、去甲猪毛菜碱、附子灵、去甲乌药碱的含量,再针对11组样品进行含量分析及聚类热图分析.3种饮片炮制过程中,漂制可大幅度降低附子中12种生物碱的含量;蒸制、炒制和烤制可显著降低双酯型生物碱(乌头碱、新乌头碱、次乌头碱)含量,显著提高单酯型生物碱(苯甲酰乌头原碱、苯甲酰新乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱)、胺醇型生物碱(乌头原碱、新乌头原碱、次乌头原碱)的含量.阴附片在炮制过程中,双酯型生物碱持续降低,单酯型生物碱、胺醇型生物碱呈现先降低后上升;阴附片、阳附片、淡附片在炮制过程中,双酯型生物碱持续降低,单酯型生物碱、胺醇型生物碱呈现先降低后升高趋势,蒸制的阴附片升高程度高于炒制的阳附片高于烤制的淡附片.综合分析3种附子炮制品中毒性成分及功效成分含量差异,得出建昌帮特色炮制方法确实可以实现对附子的减毒增效作用,为3种炮制方法作用机制提供参考.

目的 建立统一条件的色谱指纹图谱鉴别和含量测定分析方法,用于不同产区高乌头炮制品的质量研究.方法 通过HPLC梯度洗脱建立高乌头炮制品的指纹图谱,并采用中药指纹图谱相似度评价系统(2012版)、主成分分析(PCA)和聚类分析(CA)对指纹图谱进行分析.结果 建立了高乌头炮制品指纹图谱,10批高乌头制品的相似度均大于0.90,标定共有峰18个,并对其中2主要成分(高乌甲素、冉乌头碱)进行含量测定,聚类分析(CA)将所有批次高乌头制品分为4类,反映了10批不同产区高乌头制品的质量特征;主成分分析筛选出累计贡献率达到88.824％的4个主成分,得到决定高乌头药材质量7个化学成分.结论 该方法重现性好、特征性强可用于高乌头炮制品全面质量评价.

目的 建立不同产区高乌头炮制品的HPLC指纹图谱,并测定2种生物碱成分的含量,为高乌头制品质量控制提供参考依据.方法 通过HPLC梯度洗脱建立高乌头炮制品的指纹图谱,并采用中药指纹图谱相似度评价系统(2012版)、主成分分析和聚类分析对指纹图谱进行分析.结果 建立了高乌头炮制品指纹图谱,10批高乌头制品的相似度＞0.90,标定共有峰18个,并对其中2主要成分(高乌甲素、冉乌头碱)进行含量测定;聚类分析将所有批次高乌头制品分为4类,反映了10批不同产区高乌头制品的质量特征;主成分分析筛选出累计贡献率达到88.8％的4个主成分,得到决定高乌头药材质量7个化学成分.结论 该方法重复性好、特征性强,可用于高乌头炮制品全面质量评价.

乌头类中药痹证应用历史悠久、疗效确切,该文以乌头(川乌、草乌)、附子为例,挖掘其传统痹证处方用药规律,为临床用药提供思路与依据.检索东汉至清朝20余部医学、药学及综合类典籍,获得乌头类中药治疗痹证的处方1 106首,运用频次统计、百分位数、关联规则Apriori算法等对处方用药规律进行分析.结果显示,附子应用比例约为60.76％,明显高于川乌、草乌,乌头类中药叠加应用占17.63％.70.34％处方主要用于风寒湿痹证,还可见肝肾两虚型、痰瘀痹阻型、风湿热痹型.在剂量明确的处方中,80％附子用量在0.29 ～2.14 g·d-1,乌头(川乌、草乌)用量0.14～1.01 g·d-1.且受证型分类、剂型、炮制等影响,乌头类中药在风寒湿痹证分类中用量最高,汤剂、酒剂用量明显高于丸、散剂型,93.11％处方使用炮制品入药,制品剂量高于生品.临床应用中,川乌、草乌多与防风、甘草、没药、麻黄等配伍,附子与肉桂、牛膝、防风、川芎等同用,共奏祛风除湿、止痹痛之功.乌头类中药广泛应用于痹证的治疗,起到除痹止痛的功效.

目的:建立高乌头炮制品质量标准,提高其质量控制水平.方法:采用性状、TLC对高乌头炮制品进行定性鉴别;采用HPLC对其有效成分进行含量测定;采用药典方法测定其水分、灰分和浸出物.结果:高乌头炮制品薄层色谱斑点清晰,分离度好;暂定其炮制品药材水分、总灰分及酸不溶性灰分分别不得过12.5％、10.9％、5.3％,水溶性浸出物和醇溶性浸出物应分别≥24.8％、21.8％;高乌头炮制品中冉乌头碱与高乌甲素的含量应≥0.059％、0.438％.结论:该研究所建立的方法准确可靠,可用于高乌头炮制品质量控制和评价.

目的:比较不同附子炮制品制备所得麻黄细辛附子汤(MXF)的质量差异,探析经方中炮制品规格选用的科学性.方法:采用临床常用的5种附子炮制品规格分别制备MXF煎剂,选取MXF中具有效毒二重性的化学成分为评价指标,考察不同附子炮制品对MXF煎剂中效毒成分含量的影响.结果:建立了MXF中13种指标成分的含量测定方法.采用多元统计分析筛选出区别附子不同炮制品制备所得煎剂的指标性成分有卡枯醇、甲基丁香酚、细辛脂素、新乌头碱、次乌头碱和乌头碱.与附子的其他炮制品规格相比,炒附片制备所得煎剂中,双酯型生物碱类成分的含量较低但其单酯型生物碱类成分的含量最高.结论:附子不同炮制品制备所得MXF煎剂中效毒成分的含量存在较大差异,可为经方的古为今用提供参考.

目的:分析干热高温对比湿热高压对附子中6种酯型生物碱含量影响.方法:控制时间与温度,使用湿热高压蒸制与干热高温烘制法炮制附子,使用HPLC检测炮制品内六种生物碱的含量状况.结果:炮制附子使六种生物碱含量产生明显改变,单脂生物碱含量明显升高,双脂生物碱含量消失或者明显下降;乌头碱、次乌头碱及新乌头碱进样量依次在(0.03 ～ 3.21,r=0.98)、(0.03 ～3.10,r=0.98)、(0.03 ～2.96,r=0.98)间,苯甲酰次乌头原碱、苯甲酰新乌头原碱、苯甲酰乌头原碱进样量依次在(0.03～3.29,r=0.98)、(0.03～3.22,r=0.98)、(0.03～2.98,r=0.98)间,线性关系良好;乌头碱、次乌头碱及新乌头碱回收率RSD依次是0.89％、0.57％、0.98％,苯甲酰次乌头原碱、苯甲酰新乌头原碱、苯甲酰乌头原碱回收率RSD依次是0.99％、1.36％、0.97％.结论:附子炮制采用湿热高压蒸制与干热高压烘制法其方法简便,准确可控,降低毒性同时减少有效成分流失,为炮制附子提供了新的借鉴.

目的 将均谱法用于高乌头炮制品不同溶剂萃取部分HPLC指纹图谱研究,为全面评价高乌头炮制品的质量提供参考.方法 采用系统溶剂法对不同产区高乌头炮制品95％乙醇提取物进行萃取,分别得到石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇、乙醇和水6个不同溶剂萃取部分;采用HPLC于波长235、254、280、290、308 nm检测,将5个波长HPLC图谱的信号加和后求平均值作为该萃取部分的均谱;采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)》对10批高乌头炮制品不同溶剂萃取部分HPLC均谱进行共有峰确认及相似度评价.结果 建立了高乌头炮制品不同溶剂萃取部分的多波长指纹图谱(MWCF),高乌头炮制品石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇、乙醇及水提部分MWCF分别确定了26、35、22、17、15、25个共有峰,指认了2个指纹峰(高乌甲素和冉乌头碱).不同产区高乌头炮制品同一极性部位MWCF相似度较高,不同极性部位的MWCF有明显差异,充分表征了有效成分在各萃取部分的分布特征.结论 本研究建立的MWCF可全面反映高乌头炮制品不同溶剂萃取部分的化学成分分布,可为高乌头炮制品的整体质量评价提供参考.

目的:建立高乌头炮制前后毒性部位多波长指纹图谱(MWCF),从物质基础上揭示高乌头炮制后毒性降低的原因.方法:通过HPLC梯度洗脱分别建立10批不同地区高乌头药材炮制前后正丁醇萃取部分多波长指纹图谱,采用“中药指纹图谱相似度评价系统2012版”进行分析.结果:建立了生、制高乌头正丁醇毒性部位多波长指纹图谱;在生、制品正丁醇毒性部位图谱中分别标出24个共有峰、17个共有峰,制品消失10个峰,新增7个峰,分别占生、制品共有峰总峰面积30.00％,26.38％;同时对比生、制品正丁醇萃取部位2个成分(高乌甲素、冉乌头碱)变化,发现炮制后高乌甲素含量降低至原来的1/27,冉乌头碱未检测到.结论:该方法重现性好、特征性强,可用于高乌头生、制品毒性部位的质量评价,为阐明高乌头炮制前后物质基础变化及炮制原理提供科学依据.