目的:探讨黄精黄芪复方抑制肺癌进展的作用机制.方法:采用CCK-8法检测不同浓度黄精黄芪复方处理下人肺癌A549和H1299细胞的增 殖 抑 制 率 并 计 算 黄 精 黄 芪 复 方 的 半 抑 制 浓 度(half maximal inhibitory concentration,IC50);用携带Cre酶的腺病毒对C57BL/6小鼠(基因型:KRASG12D/+;TP53flox/flox)滴鼻1次,构建原发性肺癌小鼠模型,予以黄精黄芪饲料喂养以直接检测黄精黄芪复方在体内对肺癌组织的作用,采用免疫组织化学染色法检测小鼠肺组织的病理进展;生物信息学分析提示黄精黄芪复方通过爱帕琳肽(apelin)-过氧化物酶体增殖物激活受体 γ 共激活剂 1-alpha(peroxisome proliferator-activated receptor gamma coactivator 1-alpha,PGC1α)-解偶联蛋白 1(mitochondrial brown fat uncoupling protein 1,UCP1)信号通路影响肺癌进展;采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测黄精黄芪复方对A549和H1299细胞中apelin-PGC1α-UCP1信号通路相关基因mRNA和蛋白的表达水平的影响;分别采用ATP检测试剂盒和流式细胞术检测黄精黄芪复方对A549和H1299细胞ATP总产量及线粒体活性氧(reactive oxygen species,ROS)生成的影响;采用siUCP1沉默UCP1表达,用Z160诱导UCP1过表达,并检测A549和H1299细胞ATP总产量及线粒体ROS的变化,以进一步验证黄精黄芪复方是否通过apelin-PGC1α-UCP1信号通路影响肺癌进展.结果:黄精黄芪复方可明显抑制A549和H1299细胞的增殖,IC50分别为10.66 mg/mL和9.66 mg/mL;在小鼠肺原位癌模型中,黄精黄芪复方可明显抑制肿瘤的生长,并下调apelin-PGC1α-UCP1信号通路,抑制促肺癌基因UCP1的表达;在A549和H1299细胞中黄精黄芪复方能显著抑制apelin、PGC1α和UCP1的表达(P＜0.05)、促进ATP合成(P＜0.000 1)和ROS产生并恢复线粒体氧化磷酸化,抑制有氧糖酵解(P＜0.01);沉默UCP1能增加A549和H1299细胞的ATP合成(P＜0.01)和线粒体ROS产生,并降低有氧糖酵解关键酶己糖激酶2(hexokinase 2,HK2)和肌肉丙酮酸激酶同工酶2(pyruvate kinase isozyme type M2,PKM2)的蛋白表达水平(P＜0.05);而增加UCP1表达能减少细胞内ATP合成(P＜0.01)及线粒体ROS的产生,并增加HK2和PKM2蛋白的表达水平(P＜0.05),用黄精黄芪复方处理细胞的同时予以Z160干预(PA+Z160)可著逆转黄精黄芪复方复方对肿瘤细胞ATP产生及有氧糖酵解的抑制作用(P＜0.05).结论:黄精黄芪复方通过下调apelin-PGC1α-UCP1信号通路,抑制线粒体解偶联,恢复线粒体氧化磷酸化,抑制有氧糖酵解,逆转Warburg效应,从而抑制肺癌进展.

目的 分析国家专利数据库中治疗心律失常中药复方用药规律,为新药研发提供参考.方法 计算机检索国家专利数据库2003年4月-2018年1月收录的治疗心律失常中药复方专利数据.采用中医传承辅助平台(V2.5)集成的药物频次、关联规则、复杂网络、熵聚类等方法,分析中药复方专利的主治证候及配伍规律.结果 纳入治疗心律失常的中药复方专利149项,包含药物614味.最常见的主治证候为心血瘀阻证(65次、43.62％);高频药物有麦冬(43次、28.86％)、丹参(42次、28.19％)、炙甘草(37次、24.83％)、党参(34次、22.82％)、黄芪(34次、22.82％)等;常见药对有“麦冬-丹参”“炙甘草-党参”“麦冬-黄芪”等;常见角药有“炙甘草-麦冬-生地黄”“麦冬-丹参-人参”“麦冬-桂枝-五味子”等;重要关联规则有“炙甘草、生地黄→麦冬”“赤芍、人参→丹参”“柏子仁,黄芪→五味子”等;熵层次聚类得到的新处方有“党参、酸枣仁、人参、炙甘草”“琥珀、甘松、黄精、赤芍、山茱萸”等.结论 研发治疗心律失常的高效新药时,可考虑以心血瘀阻证为主治证候,以麦冬、丹参、炙甘草等为处方核心药物配伍加减.

目的:优选复方人参免疫增强方4味组方药材(人参、黄芪、黄精、枸杞)的最佳配伍比例,并对最佳配比提取物进行免疫活性及急性毒性研究.方法:在采用细胞活性试验筛选4味药材生药量浓度范围的基础上,以不同生药量浓度的药材提取物作用后小鼠RAW264.7巨噬细胞中的一氧化氮(NO)、白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量为指标,采用均匀设计法确定复方人参免疫增强方各药材的最佳配比.取小鼠240只,随机分为4批,每批60只,均随机分为空白组(生理盐水)、模型组(生理盐水)、阳性药物组[左旋咪唑,4 mg/(kg·d)]和复方人参免疫增强方最佳配比提取物低、中、高剂量组[0.9528、1.9056、2.8584 g/(kg·d)],每组10只,灌胃给药,qd,连续给药30 d;除空白组外,其余组小鼠于首次给药后第24天时腹腔注射环磷酰胺[40 mg/(kg·d)],qd,连续注射3 d以建立免疫低下模型.通过测定各组小鼠脏器系数,脾淋巴细胞转化能力,血清溶血素、IL-2、IgM、IgG、IgA含量,腹腔巨噬细胞吞噬功能,来评价最佳配比提取物的免疫活性.另取小鼠20只,灌胃最佳配比提取物20 mL/kg,给药2次,以经口最大耐受剂量(MTD)考察其急性毒性.结果:复方人参免疫增强方的最佳配比为人参、黄芪、黄精、枸杞生药质量比1:2:2:4.免疫活性实验结果显示,该方最佳配比提取物可显著提高小鼠的脏器指数,脾淋巴细胞增殖能力,血清中溶血素、IL-2、IgM、IgG、IgA含量以及腹腔巨噬细胞吞噬功能(P<0.05或P<0.01);急性毒性实验结果显示,其经口MTD均大于15 g/kg,口服无毒性.结论:复方人参免疫增强方最佳配比提取物可显著增强小鼠的免疫功能,且口服无毒性.

目的:为系统分析芪蛭降糖胶囊的化学组成,采用超高效液相色谱-四级杆-静电场轨道阱高分辨质谱法(UPLC-QE-Orbitrap-MS)对该复方的化学成分进行鉴定.方法:采用 ACQUITY UPLC HSS T3色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8 μm),以乙腈(A)-水(B)为流动相梯度洗脱(0～13 min,1％～25％A;13～21 min,25％～35％A;21～28 min,35％～85％A;28～30 min,85％～100％A;3 0～3 2 min,100％～1％A),流速设定0.2 mL·min-1,柱温3 0℃,进样量3 μL;运用电喷雾离子源(ESI),扫描范围m/z 100～1 500,正、负离子全扫描模式采集数据.采用对照品比对、自建化合物数据库搜索、文献信息比对、诊断离子筛选及Compound Discoverer 3.0软件推测的方法快速鉴定各离子峰.结果:共鉴定了芪蛭降糖胶囊中52个化学成分,并归属了化合物的来源药材,其中氨基酸类成分主要来源于水蛭,苯丙素类成分来源于黄芪和地黄,环烯醚萜苷类成分来源于地黄,香豆素和三萜类成分来源于黄芪,黄酮类成分来源于黄芪和黄精.结论:建立的UPLC-QE-Orbitrap-MS分析方法能全面快速地分析和鉴定芪蛭降糖胶囊中的化学成分,其中多种成分经现代药理研究证明具有改善糖尿病及其并发症相关症状的作用,体现了芪蛭降糖胶囊多成分协同作用的特点,可为其药效物质基础和质量控制研究提供参考.

目的 基于网络药理学研究中药复方益糖康从脾论治糖尿病的分子机制.方法 应用中药系统药理学技术平台(TCMSP)数据库检索中药复方益糖康中脾经药物红参、黄芪、黄连、黄精、茯苓、白术6味中药的有效成分,并进行靶点预测.通过DisGeNET、TTD数据库检索糖尿病相关的疾病靶点,将中药靶点与疾病靶点进行交集,筛选得到共同靶蛋白.应用STRING平台构建蛋白-蛋白相互作用(PPI)网络模型.使用Cytoscape软件对该网络进行拓扑学分析得到核心关键靶点,并对核心靶点基因进行GO-BP生物功能富集分析,应用DAVID平台对其进行KEGG通路分析.结果 经数据库分析共筛选出红参有效活性成分3个,黄芪有效活性成分16个,黄精有效活性成分11个,黄连有效活性成分10个,茯苓有效活性成分14个,白术有效活性成分5个和635个潜在作用靶点,其中与糖尿病共有靶点103个,通过对共同靶点的拓扑分析,筛选出32个核心关键蛋白.经GO-BP富集分析,发现中药复方益糖康可能通过保护调节能量代谢、MAP激酶的活性、改善血管功能、调控神经营养素受体信号传导、以及调节脂质、磷脂、活性氧的代谢过程等生物功能发挥对从脾论治糖尿病的治疗作用.通过KEGG通路分析,得到5条与糖尿病相关通路,即VEFG信号通路、MAPK信号通路、mTOR信号通路、胰岛素信号通路以及2型糖尿病信号通路.结论 从多角度探索了中药复方益糖康从脾论治糖尿病的分子机制,为其临床应用提供了科学依据.

目的 建立UPLC法同时测定双黄升白复方(黄芪、黄精、女贞子等)中蕊异黄酮葡萄糖苷、朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C、淫羊藿苷、宝霍苷Ⅰ、红景天苷、新北美圣草苷、柚皮苷、特女贞苷、芒柄花黄素的含量.方法 该药物50％甲醇提取液的分析采用Aglient Eclipse Plus C18 RRHD色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8 μm);流动相乙腈-水,梯度洗脱;体积流量0.3 mL/min;检测波长254、270、280 nm.结果 11种成分在各自范围内线性关系良好(r＞0.999 6),平均加样回收率99.25％～104.24％,RSD 0.4％～1.4％.结论 该方法稳定可靠,可用于双黄升白复方的质量控制.

黄精功善补气养阴、健脾润肺益肾,多用于治疗脾胃气虚、体倦乏力、肺虚燥咳、精血不足、腰膝酸软等症.现代药理研究显示,黄精可以增强机体免疫能力,延缓衰老,调节血糖血脂代谢,保护心肾和骨骼及治疗神经系统疾病等.临床中,黄精多与肉苁蓉、人参、黄芪、当归、枸杞和天冬等配伍使用.目前,对黄精配伍应用的研究仍处于起步阶段,多是基于古籍研究黄精复方的应用,药理学研究较少.今后,应对黄精及其配伍的潜在功能进行深入研究,进而不断丰富发展黄精的临床应用.

目的:探讨不同中药处方组成及其不同提取方法的复方提取物对小鼠耐缺氧能力的影响,以优选其处方组成和制备提取方法.方法:将雄性BALB/c小鼠随机分成6组:空白对照组、复方丹参组、复方红景天醇-水提取组(红景天、黄芪、黄精、枸杞子)、复方红景天水提取组、复方黄芪醇-水提取组(黄芪、黄精、枸杞子)、复方黄芪水提取组,每组30只,每组小鼠连续灌胃给药10 d,空白组灌胃灭菌注射用水,复方丹参组0.15 g/kg,复方红景天醇-水提取组和水提取组3 g/kg,复方黄芪醇-水提取组和水提取组1.7 g/kg.各组于末次灌胃1 h后进行常压耐缺氧实验、亚硝酸钠中毒存活实验和急性脑缺血缺氧实验,并测定小鼠脑组织氧化应激相关抗氧化物酶活性和代谢物含量.结果:与空白对照组相比,复方丹参组、复方黄芪醇-水提取组和水提取组常压耐缺氧存活时间均显著延长(P<0.01),脑缺血缺氧后张口喘气次数均显著增加(P<0.05).各组注射亚硝酸钠后存活时间没有统计学差异.与空白对照组相比,复方黄芪水提取组T-AOC、SOD、GSH和CAT活性均显著升高(P<0.05,P<0.01),MDA含量均显著降低(P<0.01),与复方丹参组相比,复方黄芪水提取组SOD、CAT、GSH活性均显著升高(P<0.01,P<0.05),MDA含量显著降低(P<0.05).结论:复方黄芪水提取组的耐缺氧效果最好,原复方红景天全方可以剔除红景天由黄芪、黄精、枸杞子组成,其提取方法为水提.