28岁，G 3P 1，孕12 +5周超声测量胎儿颈后透明带为3.0 mm，孕中期血清学筛查21三体、18三体均为低风险，升级版无创产前检测提示胎儿7号染色体部分单体综合征高风险。夫妻双方外观无异常，否认孕早期毒物及放射物接触史。在签署知情同意书后，于孕18 +4周抽取羊水30 mL以及双方外周血样各2 mL，其中10 mL羊水用于染色体微阵列分析(chromosomal microarray analysis，CMA)，结果为arr[hg19] 7p14.1p11.2(38529602_55367509)×1(图1)，提示胎儿7p14.1p11.2区存在约16.8 Mb的缺失。对剩余20 mL羊水进行常规细胞培养、制片、染色体G显带核型分析，参照《人类细胞遗传学国际命名体制(ISCN 2016)》进行描述，胎儿染色体核型为46，XN，del(7)(p11.2p14)(图2)。孕23 +1周超声提示胼胝体发育不良可能、心脏发育异常(右心室双出口伴肺动脉狭窄可能、房室间隔缺损可能)。孕妇夫妇系非近亲结婚，否认家族遗传病史，第1胎生长发育未见明显异常，双方染色体核型未见明显异常，但拒绝接受CMA亲代验证。鉴于胎儿7号染色体短臂存在大片段缺失以及超声提示的结构异常，孕妇夫妇选择终止妊娠。本研究通过了温州市人民医院伦理委员会的审查[伦审(2021)第(56)改号]。

目的:探讨不同染色体核型的Turner综合征（Turner syndrome，TS）的产前诊断指征和妊娠结局。方法:回顾性分析广州市妇女儿童医疗中心产前诊断中心2010年1月1日至2021年6月30日产前诊断胎儿核型为TS者的临床信息。依据核型结果，将这些病例分为X单体（核型为45,X）和非X单体类（核型包括X数目异常、等臂X、X缺失、X重排、假双着丝粒X和含Y数目异常嵌合体，以及Y缺失）2类。采用 χ 2检验对TS的检出率、产前诊断指征和妊娠结局进行比较，采用Bonferroni法进行亚组间两两比较，采用 χ 2检验（或Fisher精确概率法）对超声异常征象进行比较，采用Mann-Whitney U检验对2组颈项透明层（nuchal translucency，NT）厚度进行比较。 结果:（1）研究期间共27 981例行介入性产前诊断，检出TS共205例（0.73%），包括X单体（135例）和非X单体类（70例，其中性染色体数目异常44例，性染色体结构异常26例）。（2）205例中，164例（80.0%）有1项产前诊断指征，41例（20.0%）有多项产前诊断指征。X单体中，超声异常的检出率［85.2%（115/135）］高于其他3类指征［血清学筛查高风险为67.3%（35/52），无创产前检测（non-invasive prenatal testing，NIPT）性染色体异常高风险为60.0%（15/25），其他指征（高龄、不良孕产史和夫妻双方携带地中海贫血基因）为5.2%（7/135）］（ P值均<0.05），且高于该指征在非X单体类的检出率［25.7%（18/70）］（ χ2=71.55， P<0.001）。非X单体类中，血清学筛查高风险和NIPT性染色体异常高风险的TS检出率［54.7%（29/53）和68.3%（28/41）］高于其他2类指征［超声异常为25.7%（18/70），其他指征为14.3%（10/70）］（ P值均<0.05）。（3）133例以超声异常为产前诊断指征者中，65例（48.9%）存在单个、68例（51.1%）存在多个超声异常征象。早孕期超声异常的95例和中晚孕期超声异常的38例中，X单体淋巴水囊瘤和水肿的发生率均高于非X单体类［早孕期：71.8%（61/85）与1/10、34.1%（29/85）与0/10；中晚孕期：73.3%（22/30）与0/8、50.0%（15/30）与0/8；Fisher精确概率法， P值均<0.05］。X单体的NT厚度大于非X单体类［7.5 mm（1.0~17.4 mm）与1.7 mm（0.8~9.5 mm）］（ Z=－5.25， P<0.001）。（4）72例以超声异常以外的指征行产前诊断者中，68例完成血清学筛查，61例完成NIPT。血清学筛查高风险、NIPT性染色体异常高风险及其他指征（高龄、不良孕产史和夫妻双方携带地中海贫血基因）的检出率分别为54.4%（37/68）、59.0%（36/61）和22.2%（16/72）；3部分病例产前诊断指征检出率差异有统计学意义（ χ 2=22.40， P<0.001）。血清学筛查高风险和NIPT性染色体异常高风险的检出率均高于其他指征（ χ 2值分别为18.77和15.40， P值均<0.001）。72例中，19例（26.4%）为X单体，53例（73.6%）为非X单体类；嵌合体共42例（58.3%）。（5）205例TS病例中，185例随访成功（X单体123例，非X单体类62例）。X单体中1例活产（0.8%，1/123），非X单体类中17例活产（27.4%，17/62）。2组妊娠结局差异有统计学意义（ χ 2=33.22， P<0.001）。获随访的超声未见异常的63例TS病例（X单体18例，非X单体类45例）中，18例X单体均引产；而非X单体类13例活产（28.9%，13/45），32例引产（71.1%，32/45）。18例活产病例中，1例（非X单体类）于孕36周早产，其余均足月出生。对11例病例完成随访，其中的1例X单体患儿身高低于同龄同性别儿童平均身高的－2 SD；10例非X单体类患儿身高位于同龄同性别儿童平均身高的－1 SD~+3 SD。这11例儿童智力运动发育良好，未见其他结构异常。7例拒绝随访。 结论:胎儿TS病例中，X单体最常见的产前诊断指征为超声异常，非X单体类最常见的产前诊断指征为血清学筛查高风险和NIPT性染色体异常高风险。与非X单体类相比，X单体的终止妊娠率更高。

28岁，G 3P 1，孕12 +1周B超提示胎儿颈部透明层(NT)为2.6 mm，疑似伴有淋巴管水肿，孕12 +4周复查NT为3.2 mm。在签署知情同意书后，于孕19周行羊膜腔穿刺，常规进行羊水染色体检查以及基于细菌人工染色体微珠(BoBs)的检测。胎儿染色体核型为46，XY，del(6)(p22.3p24)( 图1)，BoBs检测未见异常。孕妇核型为46，XX，其丈夫为46，XY，ins(10；6)(q22；p22.3p24)( 图2)。单核苷酸多态性微阵列检测结果显示胎儿6p22.3p24区存在9.1 Mb缺失，涉及 EDN1、ATXN1和 PHACTR1等25个OMIM基因( 图3)。经遗传咨询，该夫妇决定终止妊娠，引产儿外观无明显畸形，未行病理学检查。

目的:对1个孕中期反复出现结构异常胎儿的家系进行遗传学分析，明确导致胎儿发育异常的可能原因，为该家系的遗传咨询和产前诊断提供依据。方法:应用染色体G显带、拷贝数变异测序(copy number variation-sequencing, CNV-seq)及荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization，FISH)技术对胎儿组织及父母的外周血染色体进行分析鉴定。 结果:CNV-seq结果显示胎儿基因组存在一段6.59 Mb重复(7p22.3-p22.1)与一段3.81 Mb缺失(4p16.3)；父母G显带核型未见明显异常；FISH结果显示父亲4号染色体短臂末端与7号染色体短臂末端存在微小片段的相互易位。结论:7p微重复与4p微缺失可能是导致该家系胎儿发育异常的原因。这些染色体组的微小结构畸变源于父亲存在的隐匿染色体平衡易位。在常规染色体检查无特殊且反复出现不良妊娠的夫妻中，应该考虑到亚显微染色体相互易位的可能，并经FISH等检测技术予以确认。

为研究剑叶凤尾蕨(Pteris ensiformis)的化学成分,该研究选用硅胶、凝胶、MCI、C18 等柱色谱进行分离纯化,结合1 H-NMR、13 C-NMR、MS、IR等波谱数据鉴定化合物结构,并通过MTS和APTT、PT以及TT等方法对所分离得到的部分单体化合物进行抗肿瘤和抗凝血活性筛选.结果表明:(1)从剑叶凤尾蕨中分离得到 15 个化合物,分别为 2-羟基-乙酰基吡咯(1)、N-(3-羧丙基)-2-乙酰基吡咯(2)、3-羟基-2-甲基吡啶(3)、N-甲基羟胺(4)、pterosin S 13-O-glucoside(5)、obtupterosin C(6)、ent-11α-hydroxy-15-oxokauran-19-oic acid(7)、ent-11α-hydroxy-15-oxokaur-16-en-19-oic acid(8)、β-谷甾醇(9)、ent-11α-hydroxy-15-oxokaur-16-en-19-oic acid-O-glucopyranoside(10)、5,5′-二丁氧基-2,2′-双环呋喃(11)、5,5′-二(2-乙基-己氧基)-2,2′-双环呋喃(12)、黑麦草内酯(13)、丁二酸(14)、富马酸(15).化合物 1 为新的吡咯生物碱类天然产物,化合物 1-7、10-15 为首次从剑叶凤尾蕨中分离得到,化合物 1、3、4 为首次从凤尾蕨属植物中分离得到.(2)活性测试结果表明,在浓度为 40 μmol·L-1时,化合物 1、2、3、5、6、10 对肿瘤细胞HL-60、A549、SMMC-7721、MDA-MB-231 及SW480 的体外肿瘤生长有抑制作用;在样品浓度为2.0 mmol·L-1时,化合物1、2、3、6 对APTT有缩短作用,化合物 1、5、6 对PT有延长作用.该研究结果丰富了黔产剑叶凤尾蕨的化学成分,为抗肿瘤药物的研发提供了物质基础.

背景:椎间盘退变是由于椎间盘内部髓核和纤维环组织发生损伤和退化导致的椎间盘结构和功能发生变化,目前尚无有效的治疗药物.目的:探讨丁香苷抑制大鼠椎间盘退变的作用.方法:取10只雄性 SD大鼠,将每只大鼠的尾椎Co4/Co5椎间盘设为模型组、Co5/Co6椎间盘设为丁香苷组、Co6/Co7椎间盘设为对照组,对照组不进行任何处理,模型组、丁香苷组采用微型穿刺针进行纤维环全层穿刺建立椎间盘退变模型,造模后即刻,模型组、丁香苷组椎间盘分别注射2.5 μL的生理盐水、丁香苷溶液(5 μmol/L).注射4周后取材,采用苏木精-伊红和番红O-固绿染色观察大鼠椎间盘退变程度,免疫组化染色分析大鼠椎间盘组织内Ⅱ型胶原、聚集蛋白聚糖及基质金属蛋白酶3,13的表达.结果与结论:①苏木精-伊红染色显示,模型组椎间盘高度降低,软骨终板变薄且有裂隙出现,纤维环结构紊乱且出现裂隙,髓核消失;丁香苷组椎间盘高度正常或略低于对照组,软骨终板退变程度较模型组轻,纤维环排列较模型组相对规整且无裂隙,髓核部分皱缩.②番红O-固绿染色显示,模型组椎间盘软骨终板出现缺损且软骨钙化层变薄,出现明显退变;丁香苷组椎间盘软骨终板结构形态有一定程度恢复.③免疫组化染色显示,与对照组比较,模型组椎间盘软骨组织内Ⅱ型胶原、聚集蛋白聚糖的表达降低(P<0.000 1),基质金属蛋白酶3,13的表达升高(P<0.000 1);与模型组比较,丁香苷组椎间盘软骨组织内Ⅱ型胶原、聚集蛋白聚糖的表达升高(P<0.001,P<0.000 1),基质金属蛋白酶3,13的表达降低(P<0.001,P<0.000 1).④结果表明,丁香苷可通过抑制基质金属蛋白酶3,13的表达、提高Ⅱ型胶原和聚集蛋白聚糖的表达来改善椎间盘的结构和功能,预防和减缓椎间盘退变过程.

目的:系统开展血人参乙酸乙酯部位保肝活性化学成分的研究工作.方法:将血人参的乙醇提取浸膏,依次进行萃取得到乙酸乙酯、正丁醇部位.开展在小鼠体内的保肝活性筛选试验,设立正常组、四氯化碳模型组、联苯双酯组、乙酸乙酯灌胃组和皮下组、正丁醇灌胃组和皮下组,检测不同组小鼠血清中谷丙转氨酶(ALT)活性,评价待测药物保肝活性.针对保肝活性部位,利用硅胶柱,Sephadex LH-20,反相C18色谱柱等手段进行活性单体化合物的分离,并进行结构鉴定.在四氯化碳诱导人肝HL-7702细胞株损伤模型下,对分离出来的化合物进行体外保肝活性筛选.结果:皮下给予血人参乙酸乙酯提取物对四氯化碳造成的小鼠肝损伤具有显著保护作用(P＜0.05).从血人参乙酸乙酯部分分离得到了11个化合物,经结构鉴定,确定为豆甾醇(化合物1),L-高丽槐素(化合物2),medicarpin(化合物3),豆甾4-烯-3-酮(化合物4),豆甾烷-3-酮(化合物5),3-hydroxy-8,9-dimethoxypterocarpan(化合物6),表儿茶素(化合物7),2α,3α-epoxyflavan-5,7,3',4-tetraol-(4β→8)-flavan-5(化合物8),2α,3α-epoxy-5,7,3',4'-tetrahydroxyflavan-(4β→8)-epicatechin(化合物9),表儿茶素(化合物10)和schizandriside (化合物11).其中化合物2首次从血人参中分离得到,化合物3,化合物6首次从木蓝属植物中分离得到.化合物8,化合物9和化合物11对四氯化碳诱导的人肝HL-7702细胞损伤有一定程度的保护作用(P＜0.05),HL-7702细胞存活率明显升高,提示化合物8,化合物9和化合物11在体外对肝细胞损伤有保护作用.结论:该研究确定血人参乙酸乙酯部位是该药材保肝活性的主要部位,而从中分离出的化合物8,化合物9和化合物11是血人参保肝活性的有效化合物.

目的:探讨SPE及其单体对嘌呤霉素氨基核苷(PAN)诱导的损伤足细胞中Toll样受体4(TLR4)通路表达的影响.方法:足细胞与含有甘西鼠尾草总酚酸提取物(SPE)、迷迭香酸(RA)、丹酚酸B(SalB)、RA+ SalB混合及他克莫司的完全培养液预先孵育30 min,再加入PAN(100 μg/ml)继续作用24h,观察足细胞骨架结构F-actin变化,western blot及半定量RT-PCR检测足细胞中TLR4、myd88、phosphor-NF-κB (pp65)在蛋白及mRNA水平的表达量变化.结果:(1)PAN作用24h后,足细胞骨架蛋白F-actin明显损伤,微丝解聚、胞体回缩,少数细胞尚存排列紊乱的丝状结构,而提前给予保护药物SPE、SalB、RA、SalB+ RA混合药物及他克莫司组的足细胞损伤明显减弱.(2)western blot数据显示,PAN诱导的损伤足细胞中TLR4、myd88及pp65蛋白的表达与正常组相比均有明显上调(P＜0.05);保护药物组:TLR4蛋白表达较模型组有明显下降(P＜0.05);MyD88蛋白表达除SalB高剂量组及SalB+ RA低剂量组较模型组无显著下降外,其余均能明显下调其表达量(P＜0.05);pp65在保护药物组中的表达均较模型对照组低(P＜0.05).(3)半定量RT-PCR结果显示,模型对照组中TLR4、MyD88及NF-κB的mRNA表达量明显高于正常对照组;保护药物组中:TLR4 mRNA表达量在各药物处理组中均明显低于PAN组(P＜0.05),其中的SPE高、低剂量组,RA高、低剂量组,SalB+ RA高剂量组与正常组相接近(P＞0.05);MyD88 mRNA表达量在SPE及其单体处理后均有明显下调(P＜0.05);NF-κB mRNA表达量除SalB高剂量组中无明显下调外(P＞0.05),其余各保护药物组均下调(P＜0.05).结论:SPE及其活性单体对PAN诱导损伤足细胞的保护作用机制可能部分通过抑制TLR4信号相关蛋白表达来实现;甘西鼠尾草总酚酸提取物中的单体迷迭香酸对TLR4及其下游信号分子MyD88、NF-κB的抑制作用优于丹酚酸B和混合给药组.

目的 探究中药杨树花的化学成分.方法 采用ODS、硅胶、Sephadex LH-20柱色谱、重结晶等方法进行分离纯化,结合理化性质并利用ESI-MS、NMR等波谱学技术对分离所得化合物进行结构鉴定.采用ABTS快速法测定部分化合物抗氧化活性,MTT法检测部分化合物抗肿瘤活性.结果 从毛白杨雄花序的70%乙醇提取物乙酸乙酯部位分离得到14个单体化合物,分别鉴定为乔松素(1),五桠果素(2),金圣草黄素(3),柚皮素(4),异野樱素(5),芹菜素(6),山柰酚(7),芹菜素-7-O-(-6″-p-羟基肉桂酰)-β-D-吡喃葡萄糖苷(8),水杨苷-2′-苯甲酸酯(9),邻苯二酚(10),3,3′,4,4′-四羟基联苯(11),香豆酸(12),熊果酸(13),桦木酮酸(14).ABTS快速法结果显示,化合物2、6和7总抗氧化能力分别为0.61、0.14和0.46.体外抗肿瘤活性实验结果显示,化合物1、4和5对人非小细胞肺癌细胞A549的IC50值分别为26.04、43.45和24.01 mg/L;对人肝癌细胞HepG2的IC50值为13.50、23.80和9.13 mg/L;对人结肠癌细胞HCT116的IC50值为36.11、48.95和32.25 mg/L.结论 化合物2、3、11、13和14为首次从杨属植物中分离得到,化合物2~5、10、11和13~15为首次从该植物中分离得到.化合物2、6、7有一定的抗氧化能力;化合物1、4、5对肿瘤细胞有一定的抑制作用.

目的 多数急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)的TP53表型为野生型,但p53功能常常被过表达的MDM2所抑制.本研究探讨p53-MDM2结合小分子拮抗剂Nutlin3对p53野生型急性髓系白血病细胞株OCI-AML3和MOLM13的杀伤作用及其机制.方法 CCK8法检测不同浓度Nutlin3对OCI-AML3及MOLM13细胞的增殖抑制作用,Annexin Ⅴ/PI及JC-1法检测不同浓度Nutlin3诱导OCI AML3和MOLM13细胞的凋亡情况,蛋白印迹法检测Nutlin3处理后线粒体凋亡通路相关蛋白PUMA、NOXA和PARP的表达变化.结果 CCK-8细胞毒性实验结果显示,0.625、1.25、2.5、5、10 μmol/L的Nutlin3处理OCI-AML3细胞48 h抑制率分别为(19.26±0.09)％、(34.49±0.07)％、(21.54±0.14)％、(33.05±0.13)％和(72.48±0.07)％,上述浓度Nutlin3作用MOLM13细胞48 h的抑制率分别为(12.48±0.05)％、(26.71±0.01)％、(62.44±0.07)％、(84.28±0.06)％和(94.13±0.02)％,Nutlin3对OCI-AML3和MOLM13细胞具有明显的增殖抑制作用,呈剂量依赖性;Kruskal-Wallis检验分析表明,与对照组相比,1.25～10 μmol/L的Nutlin3处理OCI-AML3细胞与MOLM13细胞IC50分别为(5.53±2.86)和(2.03±0.23) μmol/L,差异均有统计学意义,x2值分别为6.485和79.68,P值分别为0.004和＜0.001.凋亡实验显示,Nutlin3能增加OCI-AML3及MOLM13细胞凋亡率,0.625、1.25、2.5、5、10 μmol/L的Nutlin3作用OCI-AML3细胞48 h凋亡率分别为(1.79±1.86)％、(1.29±1.74)％、(4.19±2.45)％、(10.21±3.65)％和(30.03±5.26)％,与对照组比较差异有统计学意义,x2=15.38,P=0.009;上述浓度Nutlin3作用MOLM13细胞48 h凋亡率分别为(2.33±0.13)％、(7.14±2.95)％、(30.79±7.25)％、(47.68±1.70)％和(59.64±8.75)％,与对照组比较差异有统计学意义,x2=58.37,P＜0.001. JC-1法检测线粒体膜电位变化结果显示,Nutlin3能显著降低线粒体膜电位,2、4、8μmol/L的Nutlin3 JC-1多聚体/单体比值分别为0.44±0.01、0.41±0.01和0.23±0.02,与对照组(0.55±0.02)比较差异有统计学意义,P＜0.001.蛋白印迹结果显示,Nutlin3能促进p53及其下游的促凋亡蛋白PUMA和NOXA的表达,活化Caspase-3;Z-VAD-FMK能部分挽救Nutlin3所导致的凋亡.说明Nutlin3介导的OCI-AML3细胞死亡部分通过Caspase依赖的凋亡而实现.结论 Nut-lin3可能通过活化p53诱导线粒体凋亡通路从而诱导p53野生型AML细胞株的凋亡,抑制其增殖.