目的:探讨6尿素神经酰胺对结肠癌细胞增殖的影响及其分子生物学机制。方法:体外培养人源低分化结肠癌细胞系RKO细胞(购自美国典型菌种保藏中心)，经过5(低剂量组)、10(中剂量组)、20 μmol/L(高剂量组)不同浓度的6尿素神经酰胺分别诱导处理RKO细胞24、48、72 h，同时设立空白对照组。分别利用噻唑蓝(MTT)、流式细胞术检测各组细胞相对生存率、凋亡率；蛋白免疫印迹(Western blot)检测各组细胞中Wnt信号通路相关蛋白表达情况。采用SPSS 23.0软件中方差分析和 t检验进行数据统计学分析。 结果:随着药物浓度升高和药物作用时间延长，RKO细胞相对生存率[空白组为100%、100%、100%；低剂量组为(85.35±12.52)%、(72.95±10.11)%、(53.55±8.56)%；中剂量组为(70.75±10.74)%、(56.33±7.05)%、(40.05±10.11)%；高剂量组为(50.55±7.42)%、(35.58±5.75)%、(20.98±7.11)%]显著降低( F＝23.803， P<0.05)，凋亡率显著升高( F＝18.284， P<0.05)，差异均有统计学意义；各组细胞在相应条件下培养24 h后总蛋白激酶B(Akt)、糖原合成酶激酶3(GSK3β)蛋白表达量差异无统计学意义( F＝1.093， P>0.05)，但随着药物浓度增加磷酸化Akt、磷酸化GSK3β和β-连环蛋白(β-catenin)表达量显著降低( F＝6.824， P<0.05)，差异有统计学意义。 结论:6尿素神经酰胺可以通过抑制Akt磷酸化，从而抑制GSK3β磷酸化，减少β-catenin表达，抑制结肠癌细胞增殖。

目的:探讨慢性肾脏病（CKD）患者抗菌药物相关脑病（AAE）的发生情况及临床特征。方法:收集2016年1月1日至12月31日在中南大学湘雅医院住院期间使用抗菌药物≥2 d的CKD 3~5期患者的电子病历，从中筛选出应用抗菌药物后出现神经精神症状或诊断为脑病者，由临床医师和药师应用Naranjo评定法进行评分，将评分≥4分者判定为AAE。提取AAE患者基本信息、基础疾病信息、抗菌药物应用情况以及AAE相关情况进行描述性统计分析。结果:2 438例CKD 3~5期住院患者中共有977例（40.07%）使用抗菌药物治疗。经综合评估判定发生AAE者33例（3.38%）。33例AAE患者中，男性15例，女性18例；年龄68（56，78）岁，范围27~88岁；CKD 3b期2例，4期6例，5期25例；行透析治疗者21例；血清肌酐（492±265）μmol/L，血尿素氮（16.9±10.7）mmol/L，估算肾小球滤过率（eGFR）10.4（7.0，14.9）ml/（min·1.73 m 2）。涉及AAE的抗菌药物为β内酰胺类和氟喹诺酮类，其中AAE发生率最高的药物为头孢吡肟[28.57%（4/14），95% CI：1.5~55.6）]，其次为头孢他啶[14.67%（11/75），95% CI：6.5~22.9]。使用抗菌药物至发生AAE的时间为（6±3）d。AAE的主要临床表现有谵妄、躁狂（45.45%，15/33），肢体不自主运动和癫痫大发作（各18.18%，6/33），神志淡漠（15.15%，5/33），嗜睡（12.12%，4/33），妄想、幻觉（3.03%，1/33）。33例AAE患者经停药或更换抗菌药物并给予血液透析、血液滤过和对症治疗，截至出院，30例（90.90%）患者症状消失，3例（9.10%）未愈。 结论:CKD患者是发生AAE的危险人群，尤其是使用β内酰胺类治疗的患者。需要抗菌药物治疗的CKD患者应按eGFR调整药物剂量，治疗期间注意监测，防止AAE的发生。

目的 运用代谢组学方法分析淫羊藿95％乙醇洗脱部位(E95EE)对正常大鼠尿液中内源性物质代谢的影响,通过寻找相关代谢途径及潜在作用靶点,探究其标志物表达的差异是否会随体液循环分布影响机体的不同系统,从而产生潜在的保护或毒性作用.方法 SD大鼠随机分为正常对照组和E95EE给药组,各10只,E95EE组ig给予E95EE 17.1 g·L-1,1/d,连续20 d.正常对照组以等量生理盐水代替,于末次给药后用代谢笼收集大鼠12 h尿液,处理后进行UPLC-TOF/MS分析.结果 鉴定出9个差异性的内源性代谢产物,即3-sn-磷脂酸、l-1磷脂酰乙醇胺、草酰乙酸、甲酰-N-乙酰-5-甲氧基犬尿素烯胺、N-乙酰-5-羟色胺、5,10-甲酰四氢叶酸、N-亚氨代甲基l-l-谷氨酸盐、1-酰基甘油酮3-磷酸盐和亚硫酸;6条主要代谢通路,即柠檬酸的乙酰辅酶A生物合成、组氨酸代谢、甘油三酯代谢、色氨酸代谢、维生素A代谢、糖酵解与糖异生;推测E95EE可能通过降低3-sn-磷脂酸和草酰乙酸水平,上调N-亚氨代甲基l-l-谷氨酸盐的表达,从而对神经、心血管系统发挥保护作用;可能通过降低5,10-甲酰四氢叶酸和l-1磷脂酰乙醇胺水平,增加肿瘤发生的风险.结论 E95EE对正常大鼠神经系统、心脑血管系统、免疫系统及肿瘤相关疾病存在药效与毒性并存的干预作用,其作用机制与甘油三酯代谢、维生素A代谢和色氨酸和组氨酸代谢等通路有关.

目的 探讨阿米替林对脓毒症肾损伤大鼠的保护作用及其机制.方法 48只大鼠随机分为6组:假手术组、假手术+生理盐水组、假手术+阿米替林组、脓毒症组、脓毒症+生理盐水组、脓毒症+阿米替林组.假手术组行假手术处理,脓毒症组行脓毒症造模,阿米替林干预组造模前3d皮下注射阿米替林10 mg/kg,2次/d;相应对照组注射等量生理盐水.术后采集血液检测酸性鞘磷脂酶(ASMase)活性,检测神经酰胺(ceramide)、白介素1β(IL-1β)、尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)含量;取肾组织测丙二醛(MDA)含量,行HE染色观察组织结构.另取48只大鼠随机分为4组:假手术组,脓毒症组,脓毒症+生理盐水组,脓毒症+阿米替林组.各组处理情况同前.造模后观察术后7d大鼠生存率.结果 假手术组生存率为100％,脓毒症组和脓毒症+生理盐水组生存率＜20％;而脓毒症+阿米替林组生存率＞50％.脓毒症组、脓毒症+生理盐水组、脓毒症+阿米替林组造模后2、5、15、24 h大鼠血IL-1β水平及24 h血ASMase、ceramide、BUN、SCr水平、肾组织MDA水平较相应的假手术组均明显升高,而脓毒症+阿米替林组各指标较脓毒症组降低,差异均有统计学意义(P＜0.01).假手术组、假手术+生理盐水组、假手术+阿米替林组大鼠肾脏病理结构正常;脓毒症组及脓毒症+生理盐水组大鼠肾组织炎症细胞浸润明显,肾小管细胞刷状缘脱落、变性,肾小管扩张,腔内管型形成,间质水肿;而脓毒症+阿米替林组肾脏病变程度及范围较脓毒症组减轻.结论 阿米替林可抑制脓毒症大鼠异常升高的酸性鞘磷脂酶活性而减轻脓毒症大鼠的炎症反应,减轻大鼠肾组织氧化应激损伤而对脓毒症所致肾损伤产生保护作用.

1 病例资料 患者女,80 岁,因"乏力、腹胀伴呕吐 1 d"于 2018 年 7 月 31 日入院,初步诊断:(1)乏力待查;(2)慢性肾脏病,5 期;(3)2 型糖尿病;(4)高血压,Ⅲ级;(5)冠心病,纽约心脏协会心功能分级Ⅲ级.患者于 2017 年 11 月开始维持性血液透析治疗,患 2 型糖尿病已 30 余年,定时皮下注射胰岛素,血糖控制尚可.入院后患者除上述主诉外提及"排尿不适和下腹部胀痛(轻微持续隐痛)".体格检查:体温(腋表)36.8 ℃、脉搏83 次/min、呼吸频率 18 次/min、血压 138/72 mmHg (1 mmHg=0.133 kPa),见患者呈被动平卧体位,体型偏瘦,营养差;双肺呼吸音粗,心率 83 次/min,律齐;腹平软,无压痛,膀胱区膨隆,叩诊呈鼓音,鼓音区大小约 8 cm×6 cm,余未见明显异常.实验室检查:血常规、肝功能、电解质均在正常范围;血肌酐 458 μmol/L,尿素氮 14.6 mmol/L,尿酸 318 μmol/L;空腹血糖 11.8 mmol/L.超声检查结果显示下腹部大量气体干扰,无法查见膀胱(图 1A),计算机断层扫描(computed tomography,CT)检查结果显示膀胱体积增大,内见大量积气,可见液气平面(图 1B、1C).予以导尿,导尿管一入膀胱即可见尿袋被气体填充,随即流出约 80 mL 茶色混浊尿液,取尿液分别作常规检验及微生物学检查和培养.尿常规:尿糖(-),尿蛋白(3+),亚硝酸盐(+),隐血(3+);镜检示每高倍视野下红细胞计数为 12～15,白细胞满视野.尿培养:大肠埃希菌、产 β-内酰胺酶菌株,对左氧氟沙星、氨曲南等耐药,对头孢西丁、美罗培南等敏感.入院后予血液透析,丹红注射液、阿司匹林改善微循环,依达拉奉营养神经,给予莫西沙星注射液经验性抗菌治疗.患者于 2018 年 8 月 3 日在透析过程中突发心肌梗死,经抢救无效,于当日死亡.死亡原因:急性心肌梗死.最终诊断:(1)慢性肾脏病5 期;(2)2 型糖尿病;(3)高血压Ⅲ级,很高危;(4)冠心病,纽约心脏协会心功能分级Ⅲ级;(5)气肿性膀胱炎;(6)急性心肌梗死.

(按英文缩写的首字母顺序排列) AD:阿尔茨海默病ALP:碱性磷酸酶ALT:丙氨酸转氨酶AST:天冬氨酸转氨酶Bax: BcL-2相关X蛋白BcL-2:B淋巴细胞瘤-2 BMI:体重指数BUN:尿素氮caspase-3:半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3 CAT:过氧化氢酶COPD:慢性阻塞性肺疾病CRP:C-反应蛋白CT:计算机断层扫描DAPI:4',6-二脒基-2-苯基吲哚DAB:二氨基联苯胺DBiL:直接胆红素DMSO:二甲基亚砜DN:糖尿病肾病DNA:脱氧核糖核酸DPN:糖尿病周围神经病变E2:雌二醇ELISA:酶联免疫吸附测定ESR:红细胞沉降率FBS:胎牛血清FDA:食品和药品管理局FEV1:第1秒用力呼气容积FPG:空腹血糖FSH:促卵泡激素FVC:用力肺活量2 hPG:餐后2 h血糖GAPDH:甘油醛-3-磷酸脱氢酶GSH-Px:谷胱甘肽过氧化物酶hCG:人绒毛膜促性腺激素H.pyLori:幽门螺杆菌HbA1c:糖化血红蛋白HDL-C:高密度脂蛋白胆固醇HE染色:苏木精-伊红染色HPLC:高效液相色谱IBiL:间接胆红素ICU:重症监护室IgG:免疫球蛋白G IL:白细胞介素IOD:积分光密度LDH:乳酸脱氢酶LDL-C:低密度脂蛋白胆固醇MDA:丙二醛MMP:基质金属蛋白酶MRI:磁共振成像MTT:四甲基偶氮唑盐NF-κB:核因子-κB NK细胞:自然杀伤细胞NO:一氧化氮NOS:一氧化氮合酶NYHA:纽约心脏病协会oR:比值比PaCO2:动脉血二氧化碳分压PaO2:动脉血氧分压PBS:磷酸盐缓冲液PCOS:多囊卵巢综合征PCR:聚合酶链反应PLT:血小板计数RBC:红细胞计数RCT:随机对照试验RSD:相对标准偏差RT-PCR:逆转录-聚合酶链反应SCr:血肌酐SDS-PAGE:十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳SOD:超氧化物歧化酶STZ:链脲佐菌素T2DM:2型糖尿病TBiL:总胆红素TC:总胆固醇TG:三酰甘油TGF:转化生长因子TNF:肿瘤坏死因子TTC:2,3,5-氯化三苯基四氮唑TUNEL:末端脱氧核苷酰基转移酶介导dUTP切口末端标记UPLC:超高效液相色谱WBC:白细胞计数Western bLot:蛋白质免疫印迹VAS:视觉模拟评分量表VEGF:血管内皮生长因子WHO:世界卫生组织95% CI :95%可信区间β-actin:β-肌动蛋白

目的 观察口服不同剂量的磷酯酰丝氨酸(PS)对射击运动员赛前心理应激适应能力和脑内神经递质激活水平的影响.方法 将18名手枪射击运动员,随机分为3组,每组6人,分别为空白组、PS-400组(400mg/d)和PS-800组(800mg/d),实验组受试者在比赛前连续服用PS 2w,空白组不使用任何营养品.营养干预前和干预后(2w后,比赛开始前),测试所有受试者的血清皮质醇、尿素氮、肌酸激酶值并进行心境状态量表(POMS量表)和匹兹堡睡眠质量指数量表(PSQI表)评分,同时采用脑电测试脑内神经递质激活水平,包括抑制介质(INH)、5羟-色胺(5-H T)、乙酰胆碱(ACh)、多巴胺(DA)、去甲肾上腺素(NE)和兴奋介质(EXC).结果 18名受试者完成全部实验.2w后,三组受试者的皮质醇均显著升高,PS-800组的皮质醇绝对值和增量均显著低于空白组(P=0.025,P=-0.016),PS-400组的皮质醇增量显著低于空白组(P=0.023).与干预前相比,PS-800组在POMS量表中慌乱值评分显著降低(P=0.038),且干预后显著低于空白组与PS-400组(P=0.027,P=0.016).两实验组受试者在PS补充2w后,睡眠质量分数均有下降.脑电测试显示,在全脑神经递质中,PS-800组的ACh和DA激活水平较干预前有显著升高(P=0.050,P=0.029),干预2w后与空白组相比,5-HT和DA水平均显著升高(P=0.049,P=0.019).在各脑区方面,PS-800组的5-HT和DA激活水平在P4、T5、T6三个脑区均出现了显著升高(P＜0.05),干预2w后在F4脑区的ACh,F7的ACh、DA,T5的DA激活水平均显著高于空白组(P＜0.05),而在F3的INH和F7区的INH、NE激活水平显著低于空白组(P＜0.05),兴奋性神经递质ACh和DA与抑制性神经递质INH和NE的激活呈现相反变化,脑电活动趋于同步化,更为协调.这种变化趋势在补充PS 400mg/的实验组中也被观察到,但与空白组的差异较小.结论 补充PS 800mg/d能够降低射击运动员赛前血清皮质醇水平,在减轻压力、稳定慌乱情绪及改善睡眠质量方面发挥积极作用,并能够调节脑内中枢神经递质激活水平,从不同层面上提高运动员心理应激适应能力.

目的 探讨右美托咪定联合限制性液体复苏在重症颅脑损伤(STBI)患者院前急救中的应用效果.方法 回顾性分析93例STBI患者的临床资料,根据院前急救的方式将患者分为对照组、观察组与联合组,每组31例.对照组患者采用积极液体复苏治疗,观察组患者采用限制性液体复苏治疗,联合组患者采用右美托咪定联合限制性液体复苏治疗.比较急救前、入院即刻3组患者生命体征指标[心率、平均动脉压(MAP)、脉搏血氧饱和度(SpO2)]水平变化,以及入院即刻的凝血功能指标[凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、纤维蛋白原(FIB)、D-二聚体]、血清氧化应激指标[丙二醛、晚期氧化蛋白产物(AOPP)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)]、脑脊液神经活动指标[硫化氢、多巴胺、5-羟色胺、乙酰胆碱]、肾功能指标[血清肌酐、尿素氮、β2-微球蛋白(β2-MG)]水平及Glasgow昏迷量表(GCS)评分.术后6个月随访时,采用Glasgow预后量表(GOS)评估患者的预后情况,并分析联合组患者GOS分级与院前时间、右美托咪定使用剂量的相关性.结果 入院即刻,3组患者的心率均低于急救前,MAP、SpO2均高于急救前,且联合组与观察组的心率均低于对照组,MAP、SpO2均高于对照组(均P<0.05);联合组与观察组的PT、APTT、D-二聚体水平均短于或低于对照组,FIB水平均高于对照组(均P<0.05);联合组和观察组以上指标差异均无统计学意义(均P>0.05).联合组脑脊液硫化氢水平及血清肌酐、尿素氮、β2-MG水平均低于观察组与对照组,而脑脊液多巴胺、5-羟色胺、乙酰胆碱水平及GCS评分均高于观察组与对照组(均P<0.05).3组患者血清丙二醛、AOPP水平由低到高均为联合组、观察组、对照组,血清SOD、GSH-Px水平由高到低均为联合组、观察组、对照组(均P<0.05).术后随访6个月时,联合组与观察组GOS分级均优于对照组(均P<0.05).联合组GOS分级与院前时间呈负相关性(P<0.05),与右美托咪定使用剂量无相关性(P>0.05).结论 采用限制性液体复苏进行院前急救可有效地改善STBI患者的血流动力学、氧合能力和凝血功能;在此基础上联合应用右美托咪定可更好地抑制机体的氧化应激反应,促进患者早期神经功能恢复并避免肾功能损伤.