目的 探讨发酵粘液乳杆菌WMU003通过调节肠道菌群-肠-脑轴对APP/PS1小鼠认知障碍和神经元损伤的改善作用.方法 应用发酵粘液乳杆菌WMU003(Lf)对雄性APP/PS1转基因小鼠进行处理,利用筑巢实验和旷场实验评估认知功能情况,利用尼氏染色和刚果红染色评估神经病理学的改善,利用16S rRNA基因测序评估小鼠肠道菌群的变化.结果 与APP/PS1组相比,APP/PS1+Lf处理组小鼠的筑巢功能评分显著升高,旷场实验中停留时间显著减少、移动距离显著增加、平均速度显著升高;大脑皮质和海马区的尼氏小体数量增多;脑内β-淀粉样蛋白(Aβ)沉积降低;肠道菌群alpha多样性显著改变.在科水平上 APP/PS1 组Saccharimonadaceae 丰度显著增多,APP/PS1+Lf 处理组 Muribaculaceae 和 Rikenellaceae 丰度显著增多;在属水平上 APP/PS1组 Candidatus_Saccharimonas、Gordonibacter 和 Eubacterium_xylanophilum_group丰度显著增多,APP/PS1+Lf 处理组 Dubosiella、Prevotellaceae_UCG-001、Faecalibaculum、Marvinbryantia 丰度显著增多.结论 发酵粘液乳杆菌WMU003可以通过调控肠道菌群-肠-脑轴改善阿尔茨海默病的认知障碍和神经元损伤.

目的:观察黄芪甲苷(astragaloside Ⅳ,AST Ⅳ)对阿尔茨海默病(Alzheimer disease,AD)模型小鼠认知功能障碍和病理改变的影响,并探讨可能的调控机制.方法:将APP/PS1转基因(APPswe/PSEN1dE9)小鼠随机分为AD+AST Ⅳ组和AD组,并以C57BL/6野生型(wild-type,WT)小鼠作为对照组(WT组),灌胃治疗两个月(n= 8).应用Morris水迷宫和Y迷宫实验评价小鼠空间认知功能(n=8),尼氏染色检测神经元数量与形态,免疫荧光染色观察神经元核抗原(neuronal nuclear antigen,NeuN)和β-淀粉样蛋白(amyloid β-protein,Aβ)水平(n=4),Western blot法检测全脑组织中神经突生长抑制因子A(neurite outgrowth inhibitor A,NogoA)、Nogo-66受体(Nogo-66 recep-tor,NgR)、p75神经营养因子受体(p75 neurotrophin receptor,p75NTR)、含富亮氨酸重复序列和免疫球蛋白样结构域蛋白1(leucine rich repeat and immunoglobin-like domain-containing protein-1,LINGO-1)、环磷酸腺苷(cyclic ade-nosine monophosphate,cAMP)和蛋白激酶A(protein kinase A,PKA)的表达(n=4).结果:AST Ⅳ能够显著缓解APP/PS1小鼠的认知功能障碍,提高其学习、记忆和探索功能.与WT组相比,APP/PS1小鼠大脑皮质区和海马区Aβ沉积增加(P<0.01),尼氏小体丢失严重(P<0.05或P<0.01),神经元数量减少(P<0.05);而AST Ⅳ可以显著减少Aβ沉积(P<0.05),减少尼氏小体丢失(P<0.05),增加神经元数量(P<0.05).与WT组相比,APP/PS1小鼠脑组织NogoA、NgR、p75NTR和LINGO-1表达显著增加(P<0.05或P<0.01),cAMP和PKA表达显著减少(P<0.05或P<0.01);而AST Ⅳ可以显著抑制NogoA、NgR、p75NTR和LINGO-1表达(P<0.05或P<0.01),增加cAMP和PKA表达(P<0.05).结论:AST Ⅳ通过抑制NogoA及NgR/p75NTR/LINGO-1受体复合物的表达,并上调cAMP/PKA通路,减少APP/PS1小鼠脑组织中Aβ沉积,减轻神经元损伤,从而改善认知功能和缓解学习障碍.

目的 探讨TgAPPswePS1转基因小鼠角膜上皮的病理学和超微结构改变.方法 TgAPPswePS1转基因小鼠分为实验组及对照组,其中实验A组为15 ～18月龄APPswe(+)和PSEN1dE9(+)的阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)转基因鼠15只,实验B组为8月龄APPswe(+)和PSEN1dE9(+)的AD转基因小鼠15只,对照组为8月龄野生型小鼠10只.分别观察各组小鼠角膜上皮细胞的病理学改变、超微结构改变、β淀粉样蛋白(amyloidβ-protein,Aβ)的表达情况,并行TUNEL染色检测角膜上皮细胞凋亡情况.结果 实验B组和实验A组角膜上皮厚度分别为(20.104±1.763) μm和(15.456±1.439)μm,均较对照组的(23.567±2.123) μm减少,差异均有统计学意义(均为P＜0.05).实验B组和实验A组均较对照组角膜上皮细胞数减少,层数减少,细胞形态不规则.透射电子显微镜检测示,实验B组和实验A组均较对照组角膜上皮表面微绒毛明显减少,平坦.实验B组和实验A组角膜上皮铺片Aβ免疫阳性反应产物均较对照组明显增多、增强.TUNEL染色结果示,实验B组角膜上皮细胞凋亡数为(5.631±2.471)个,少于实验A组的(16.329±3.542)个,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 TgAPPswePS1转基因小鼠较野生型小鼠角膜上皮病理学、超微结构及角膜上皮细胞内Aβ的表达均有改变,以上变化与小鼠月龄有相关性.

目的 观察海马内注射PrPC抗体后,对APPswe/PSEN1dE9转基因小鼠认知缺陷的影响.方法 选8月龄雄APPswe/PSEN1dE9转基因小鼠双侧海马内注射PrPC抗体EP1802Y 2 μL或PBS 2 μL,C57Bl/6J野生型小鼠为正常对照.2月后,通过旷场实验、新物体识别实验、Morris水迷宫实验、条件性恐惧测试及免疫组化,观察APPswe/PSEN1dE9转基因小鼠行为学及海马内Aβ1-42表达的变化.结果 旷场实验中,假手术组与实验组相比,中央活动时间和活动总路程均无明显差异(P>0.05);新物体识别实验中,假手术组分辨指数与实验组分辨指数相比,无显著性差异(P>0.05);在Morris水迷宫实验的空间探索测试中,与正常组相比,假手术组和实验组穿越平台次数显著性减少(P<0.05).并且假手术组与实验组游泳路程相比,具有显著性差异(P<0.05);在条件恐惧实验中,各组之间无显著性差异;免疫组化的结果显示,实验组小鼠海马内Aβ1-42表达下调.结论 PrPC抗体可以部分改善APPswe/PSEN1dE9转基因小鼠的认知能力,提示海马内封闭PrPC蛋白与Aβ寡聚体结合的位点后,或许可以降低Aβ寡聚体毒性.

目的 应用三维增强磁敏感成像(3D-enhanced susceptibility weighted angiography,ESWAN)技术检测APPswe/PSEN1de9基因突变型小鼠(购自美国Jackson Laboratory,简称为APP/PS1转基因小鼠)脑不同部位的平均相位值(mean phase value,MPV),并探讨其与铁蛋白及淀粉样斑块分布的相关性.材料与方法 APP/PS1转基因小鼠及野生型对照组小鼠行T1WI、T2WI和ESWAN序列扫描,测量小鼠脑皮质区、海马区及丘脑区MPV.对鼠脑组织进行铁蛋白和Aβ蛋白的免疫组化染色,并分别计数感兴趣区内染色斑块数量和面积所占百分比.对感兴趣区MPV与斑块数量、斑块面积百分比采用Pearson检验进行相关分析.结果 APP/PS1转基因小鼠与对照组小鼠皮质区(t=-2.201,P=0.045)和海马区(t=-2.524,P=0.024)的MPV值差异均具有统计学意义.APP/PS1转基因小鼠与对照组小鼠丘脑区的MPV差异不具有统计学意义(t=-2.094,P=0.055).APP/PS1转基因小鼠每组中的MPV与铁蛋白斑块数量与范围分别具有显著相关性(P<0.05);淀粉样斑块与铁蛋白的数量与范围分别具有相关性(P<0.05).结论 APP/PS1转基因小鼠脑内MPV与脑内铁沉积具有显著相关性.APP/PS1转基因小鼠脑内皮质区、海马区及丘脑区的铁沉积持续进行,并且与淀粉样斑块的形成具有相关性.