目的:探究水痘-带状疱疹病毒(varicella-zoster virus, VZV)对人Schwann细胞(human Schwann cells, hSC)朊蛋白(cellular prion protein, PrP C)糖基化特征的影响，及甲钴胺(methylcobalamin, MeB 12)的调节作用。 方法:以感染复数1.0的VZV感染细胞48 h，加入250 μg/ml的MeB 12培养48 h，用抗体3F4分别包被上清和沉淀中PrP C，凝集素-ELISA法筛查PrP C的糖基化特征，并测定上清中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)活性与丙二醛(malondialdehyde, MDA)含量。 结果:VZV感染组细胞上清与沉淀中的PrP C聚糖比例与未感染组比较有明显变化，总聚糖比分别为1∶1.5和1∶2.6(F＝24.18， P<0.001, LSD-t＝8.27, P<0.001)，提示VZV感染后PrP C稳定性下降，相应的SOD活性(4.43±2.05 U/mg)与未感染组(14.23±1.27 U/mg)比较明显下降(F＝18.19, P＝0.001, LSD-t＝6.54, P<0.001)，MDA水平(11.17±1.89 nmol/mg)与未感染组(3.73±0.35 nmol/mg)比较明显升高(F＝30.70, P<0.001, LSD-t＝8.25, P<0.001)，差异均有统计学意义。加入MeB 12后，VZV感染细胞沉淀中的聚糖较VZV感染未加药组有明显增加，总聚糖比为1∶2.4，提示MeB 12增强了PrP C的稳定性，相应地SOD活性明显增高(11.07±2.07 U/mg, LSD-t＝4.42, P ＝0.002)，MDA水平明显下降(5.23±0.96 nmol/mg, LSD-t＝6.58, P<0.001)，与感染未加MeB 12组比较差异有统计学意义。 结论:VZV可改变hSC中PrP C的糖基化特征，而MeB 12可调节PrP C的糖基化特征，增强PrP C的稳定性，从而提高hSC的抗氧化能力。

目的:探究咖啡酸苯乙酯（CAPE）对朊病毒（PrP Sc）复制、扩增及纤维形成的影响及可能的机制。 方法:通过CCK8实验检测CAPE处理3、7 d后朊病毒感染细胞模型SMB-S15的细胞活力，得出CAPE对SMB-S15的最大安全浓度；选取安全范围内的浓度处理细胞，利用蛋白质免疫印迹方法分析CAPE处理前后细胞内PrP Sc的含量变化。利用蛋白质错误折叠循环扩增（PMCA）技术和蛋白质免疫印迹方法检测CAPE处理前后扩增产物中PrP Sc的含量变化。利用实时震动蛋白诱导扩增（RT-QuIC）技术检测CAPE处理前后朊蛋白纤维形成的变化情况。通过分子相互作用检测CAPE与小鼠重组全长朊蛋白的结合能力。 结果:CCK8细胞活力实验结果显示：1 μmol/L CAPE处理细胞3、7 d时细胞存活率与对照组相比，差异无统计学意义（均 P>0.05），当CAPE浓度超过1 μmol/L时，CAPE处理细胞3、7 d细胞存活率降低，与对照组之间差异均存在统计学意义（均 P<0.05），因此1 μmol/L为CAPE处理SMB-S15细胞的最大安全浓度。蛋白质免疫印迹实验结果显示：CAPE处理3、7 d均可检测到SMB-S15细胞中PrP Sc含量的降低（均 P<0.05）。PMCA实验产物通过蛋白质免疫印迹方法检测结果显示：经CAPE处理后，适应株SMB-S15、139A、ME7的PMCA扩增产物中PrP Sc含量（相对灰度值）降低，与对照组相比差异有统计学意义（均 P<0.05）。RT-QuIC实验结果显示：CAPE处理后139A、ME7、SMB-S15小鼠适应株和朊病毒感染细胞SMB-S15在反应中形成朊蛋白纤维（ThT峰值）均降低，且CAPE对不同种子朊蛋白纤维的抑制程度差异有统计学意义（均 P<0.05），其中对ME7的抑制作用更明显。分子相互作用结果显示：CAPE与鼠源重组朊蛋白存在明显的分子结合，平衡解离常数KD为（2.92±0.41）×10 -6 mol/L。 结论:CAPE对PrP Sc体外复制、扩增和纤维形成均具有抑制作用，可能与CAPE和朊蛋白特异性结合有关。

克-雅病是一种罕见的致命性中枢神经系统退行性疾病。克-雅病临床早期症状不典型，症状多样且异质性较大，给该病早期识别和诊断带来了很大困难。为了提高中国临床医师对于克-雅病的早期识别和诊断的能力，中华医学会神经病学分会神经感染性疾病与脑脊液细胞学学组成立朊蛋白病诊断指南制订专家委员会，在国内外克-雅病相关指南和临床实践标准的基础上，全面分析国人克-雅病的临床特征和辅助检查结果，同时结合国内外现有证据，编制适合国人的克-雅病诊断指南。

致死性家族性失眠症（FFI）是一种遗传性朊蛋白病，以药物治疗无效的失眠为主要特征。该病罕见，容易被误诊为脑炎或其他类型朊蛋白病。为提高临床医生对FFI的认识和规范化诊断，中华医学会神经病学分会神经感染性疾病与脑脊液细胞学学组联合睡眠障碍学组在2018版FFI英文诊断标准的基础上，通过全面分析中国人FFI的临床特征，制定出适合中国人的FFI诊断标准。

帕金森病是最常见的与年龄相关的神经退行性病，影响患者的生活质量，给社会和家庭带来巨大负担。帕金森病典型的病理学特征为α-突触核蛋白（α-syn）在中脑黑质-纹状体区的异常聚集，造成多巴胺能神经元死亡。然而，随着研究的深入，发现α-syn介导星形胶质细胞功能异常导致血脑屏障破坏和小胶质细胞介导炎性因子的释放与帕金森病的发病机制有关。因此，将神经元、胶质细胞、血管作为一个神经血管单元整体开展研究能够更好地反映疾病的病理生理环境，揭示其发病机制。已有研究发现α-syn可通过朊蛋白样、隧道纳米管、外泌体等方式传播，与帕金森病的发生发展密切相关。随着Braak病理分期的提出和早期帕金森病前瞻性队列研究结果的公布，提示外周α-syn向中枢传播可能是介导帕金森病发生发展的另一重要途径。针对α-syn异常聚集和传播的研究可为帕金森病的发病机制提供新的思路，为帕金森病的疾病修饰治疗提供新的靶点。文中就α-syn的异常聚集与传播在帕金森病发病机制中的作用进行综述。

背景:环状RNA(circRNA)是一种新型的RNA,与线性RNA不同,它形成共价闭合的连续环,并且在真核转录组中高度表达.它的生物学功能被忽视多年.最近的研究已经在哺乳动物细胞中发现了数千种内源性circRNA.目的:综述circRNA的形成、性质、功能,以及在疾病中的潜在意义.方法:第一作者应用计算机检索2000年1月至2016年12月PubMed数据库、中国期刊全文数据库关于circRNA的文章,英文检索词“CircRNA,miRNA,function,mechanision”;中文检索词“CircRNA,microRNA,功能,机制”.对纳入的62篇文献进行分析讨论.结果与结论:①CircRNA主要从外显子或内含子序列产生,并且反向互补序列或RNA结合蛋白是circRNA生物发生所必需的;②大多数circRNAs是跨物种保守,对核糖核酸R稳定的和耐,并经常表现出组织/发育阶段特异性表达;③最近的研究表明,circRNAs可以作为微小RNA(miRNA)海绵体,剪接和转录的调节器和亲代基因表达的修饰;④新的证据表明circRNAs可能在动脉粥样硬化血管疾病,神经系统疾病,朊病毒疾病和癌症中发挥重要作用;在结肠直肠癌中异常表达;并用作一些疾病的诊断或预测性生物标志物;⑤类似于miRNA和长非编码RNA,circRNAs成为RNA领域的新研究热点,可以广泛参与生命过程.

目的 观察海马内注射PrPC抗体后,对APPswe/PSEN1dE9转基因小鼠认知缺陷的影响.方法 选8月龄雄APPswe/PSEN1dE9转基因小鼠双侧海马内注射PrPC抗体EP1802Y 2 μL或PBS 2 μL,C57Bl/6J野生型小鼠为正常对照.2月后,通过旷场实验、新物体识别实验、Morris水迷宫实验、条件性恐惧测试及免疫组化,观察APPswe/PSEN1dE9转基因小鼠行为学及海马内Aβ1-42表达的变化.结果 旷场实验中,假手术组与实验组相比,中央活动时间和活动总路程均无明显差异(P>0.05);新物体识别实验中,假手术组分辨指数与实验组分辨指数相比,无显著性差异(P>0.05);在Morris水迷宫实验的空间探索测试中,与正常组相比,假手术组和实验组穿越平台次数显著性减少(P<0.05).并且假手术组与实验组游泳路程相比,具有显著性差异(P<0.05);在条件恐惧实验中,各组之间无显著性差异;免疫组化的结果显示,实验组小鼠海马内Aβ1-42表达下调.结论 PrPC抗体可以部分改善APPswe/PSEN1dE9转基因小鼠的认知能力,提示海马内封闭PrPC蛋白与Aβ寡聚体结合的位点后,或许可以降低Aβ寡聚体毒性.

目的 探讨小鼠正常昼夜节律下以及睡眠剥夺后大脑海马组织细胞型朊蛋白(PrPC)和β-淀粉样前体蛋白(Aβ)表达水平的变化及PrPC在睡眠剥夺诱导的认知损害中发挥的作用.方法 成年C57BL/6小鼠置于光照和黑暗交替环境中饲养2周后分别在开灯后4、8、12、16、20、24 h等6个时间点处死小鼠,每个时间点各8只,分别取海马、皮层2个部位的组织样本,采用酶联免疫吸附法检测PrPc和Aβ的表达水平.成年小鼠按体重大小排序,完全随机分成3组,分别为正常对照组、环境对照组、睡眠剥夺组,采用改良水平台法对小鼠进行72h快速眼动睡眠剥夺,断头处死小鼠获取海马,分别采用Western Blot法和酶联免疫吸附法检测PrPC和Aβ的表达水平变化.Halberg余弦分析PrPC和Aβ在海马与皮层的昼夜节律变化特征.结果 单余弦分析显示PrPC在皮层具有昼夜节律性(F=11.22,P＜0.05).Aβ在海马具有昼夜节律性(F=26.72,P＜0.05);睡眠剥夺后睡眠剥夺组海马PrPC的表达水平(0.22 ± 0.05)较正常对照组(0.64 ± 0.16)和环境对照组(0.58±0.09)明显下调(F=4.366, P＜0.05),睡眠剥夺组Aβ的表达水平(13.03 ± 0.71)较正常对照组(8.22 ±0.8)和环境对照组(8.6 ±0.57)明显上调(F=14.511,P＜0.05).结论 正常小鼠大脑PrPC和Aβ具有昼夜节律特征,快速眼动睡眠剥夺后PrPC的表达水平下调,而Aβ表达水平上调,且这可能是睡眠剥夺后认知功能障碍的潜在机制之一.

肿瘤的发生发展、侵袭转移都是由多种基因、多个蛋白信号转导通路调控及多步骤协同发生的生物学过程,近年来消化道恶性肿瘤发病率有逐渐上升趋势,且死亡人数增加,因此,寻找新的消化系统肿瘤标志物以及控制恶性肿瘤的恶化及转移,对其早期发现、诊断、治疗及预后判断有重要意义.近几年的研究表明细胞型朊蛋白对癌症细胞的生长、爬行和抗药性都有作用,提示细胞型朊蛋白可能与恶性肿瘤的发生、发展、侵袭以及转移等有着密切的关系[1-2].本研究对细胞型朊蛋白在胰腺癌、胃腺癌及结直肠腺癌中的表达使用免疫组织化(ELISA)检测,初步探讨其在胰腺癌、胃腺癌及结直肠腺癌中发生发展、浸润转移中的作用.

克雅氏病(Creutzfeld-Jakob disease,CJD)是人类朊蛋白病(Prion disease)的主要类型,是由于体内正常细胞型朊蛋白(PrPc)发生构象变化,转变为致病性朊病毒(PrPsc)而引起的一种传染性、致死性海绵状退行性脑病,也称为皮质-纹状体-脊髓变性.按发病机制可分为散发型(sCJD)、获得型(包括医源型、iCJD或变异型、vCJD)、遗传型(fCJD),其中散发型占绝大多数.该病的特征性临床症状为快速进展性认知障碍,其他主要临床表现包括小脑性共济失调、肌阵挛、视觉症状及无动性缄默.除此之外患者在出现明显的认知障碍之前,常常出现头晕、抑郁、性格改变、睡眠障碍等现象.目前对该病的确诊仍依赖组织病理学检查,由于该病临床症状多变,临床诊断对于临床医生仍是一大难题.近年来,随着辅助检查手段的发展,多导睡眠监测(PSG)对朊蛋白病的诊断起到了不可替代的作用,特别是对致死性家族性失眠(FFI)的诊断,PSG表现特征性早期睡眠纺锤波和K复合波的消失,快眼动和非快眼动睡眠生理循环的破坏[1].此外,不少国内外学者发现,进行了多导睡眠监测的克雅氏病患者,均有不同程度的睡眠结构的异常.有学者提出,PSG应成为克雅氏病的辅助检查手段之一.