目的:研究抗纤维化四肽N-乙酰基-丝氨酰-天冬氨酰-赖氨酰-脯氨酸（Ac-SDKP）对矽肺大鼠纤维化肺组织中磷酸化热休克蛋白27（P-HSP27）及锌指家族核转录因子1（SNAI1）表达的调控，以探讨Ac-SDKP抗矽肺纤维化作用。方法:于2014年12月，采用一次性支气管灌注二氧化硅（SiO 2）粉尘的方法制备大鼠矽肺动物模型，选取80只SPF级健康成年Wistar大鼠，根据随机数字表法将大鼠分为8组，每组10只。模型对照4周组（饲养4周）、模型对照8周组（饲养8周）：支气管灌注生理盐水1.0 ml/只；矽肺模型4周组（饲养4周）、矽肺模型8周组（饲养8周）：支气管灌注50 mg/ml的SiO 2混悬液1.0 ml/只；单独Ac-SDKP给药4周组（饲养4周）、单独Ac-SDKP给药8周组（饲养8周）：Ac-SDKP 800 μg·kg -1·d -1腹腔泵给药；Ac-SDKP预防治疗组：Ac-SDKP 800 μg·kg -1·d -1给药48 h后，支气管灌注SiO 2混悬液1.0 ml/只，饲养8周；Ac-SDKP抗纤维化治疗组：支气管灌注SiO 2混悬液1.0 ml/只4周后，给予Ac-SDKP 800 μg·kg -1·d -1治疗4周。蛋白免疫印迹（Western blotting）检测各组P-HSP27、SNAI1、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA），以及Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白的表达，免疫组织化学技术检测P-HSP27和SNAI1的表达，激光共聚焦显微镜检测P-HSP27和α-SMA共定位表达。 结果:与模型对照组比较，矽肺模型组大鼠矽肺纤维化区域P-HSP27、SNAI1、α-SMA、Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白表达增强，差异均有统计学意义（ P<0.05）。给予Ac-SDKP干预后，与矽肺模型8周组比较，Ac-SDKP预防和抗纤维化治疗组大鼠P-HSP27、SNAI1、α-SMAⅠ型和Ⅲ型胶原蛋白表达明显降低，差异均有统计学意义（ P<0.05）。而单独Ac-SDKP给药组与模型对照组P-HSP27、SNAI1、α-SMA、Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白表达无明显变化，差异均无统计学意义（ P>0.05）。激光共聚焦结果显示，矽肺模型组大鼠肺组织表达P-HSP27和α-SMA的阳性细胞多于模型对照组；与矽肺模型组比较，Ac-SDKP预防和抗纤维化治疗组表达P-HSP27和α-SMA的阳性细胞减少；与模型对照8周组比较，矽肺模型8周组结节中有部分P-HSP27和α-SMA表达的双阳性细胞。 结论:Ac-SDKP可能通过调节P-HSP27/SNAI1通路发挥抗矽肺纤维化的作用。

目的:通过Meta分析研究N-乙酰基-丝氨酰-天门冬氨酰-赖氨酰-脯氨酸（Ac-SDKP）对肺纤维化的抗纤维化作用。方法:于2021年5月，检索中国知网、万方数据库、维普、中国生物医学文献数据库、PubMed、OVID数据库，检索时间为2008年1月至2021年5月，筛选关于Ac-SDKP抑制肺纤维化的随机对照试验，其中对照组为肺纤维化模型组，实验组为Ac-SDKP治疗组。采用SYRCLE风险偏倚评估工具进行文献质量评价，并提取数据，采用RevMan5.4软件进行数据分析。结果:纳入文献18篇，总计动物模型428个。Meta分析结果显示：与对照组比较，实验组的α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、转化生长因子-β（TGF-β）及结节面积各指标含量均降低[SMD=-2.44，95% CI（-3.71~-1.17）， P=0.000]、[SMD=-5.36, 95% CI（-7.13~-3.59）， P=0.000]、[SMD=-3.07, 95% CI（-4.13~-2.02）； P= 0.000]、[SMD=-2.88, 95% CI（-3.63~-2.14）， P=0.000]、[SMD=-1.80, 95% CI（-2.42~-1.18）， P=0.000] ，羟脯氨酸含量更高[SMD=7.62 ，95% CI（4.90~10.33）， P=0.000]。 结论:Ac-SDKP对肺纤维化进程具有明显的抑制作用，并可能成为治疗肺纤维化的一种新的临床药物。

N-乙酰基-丝氨酰-天冬氨酰-赖氨酰-脯氨酸（Ac-SDKP）是由胸腺素β4通过内肽酶-α和脯氨酰寡肽酶连续水解后产生的内源性短肽，具有免疫调节、促进血管生成、肿瘤发生和拮抗器官纤维化的作用。本文根据我们部分研究结果和近年来相关的文献，就Ac-SDKP研究进展进行综述。

[目的]基于非靶向代谢组学技术,分析慢性萎缩性胃炎(chronic atrophic gastritis,CAG)肝胃气滞证和脾胃虚弱证患者的代谢组学特征,发现与CAG患者中医证型相关的血清代谢差异物,为中医辨证客观化提供参考依据.[方法]纳入60例CAG患者,其中肝胃气滞证及脾胃虚弱证各30例.收集2组患者空腹肘静脉血5 mL,采用超高效液相色谱-质谱技术检测血清代谢物含量,采用主成分分析(PCA)、正交偏最小二乘法判别分析(OPLS-DA)和聚类分析等多元统计方法筛选CAG肝胃气滞证和脾胃虚弱证患者之间的差异代谢物,最后利用KEGG数据库对筛选的差异代谢物进行代谢物通路分析.[结果]通过比较CAG肝胃气滞证和脾胃虚弱证患者血清代谢物,发现CAG肝胃气滞证和脾胃虚弱证之间N-乙酰基甘氨酸、组胺、O-磷酸丝氨酸、硒甲基硒代半胱氨酸、甲基间酪氨酸等氨基酸衍生物和酪氨酸-亮氨酸-苯丙氨酸、组氨酸-丙氨酸-谷酰胺-赖氨酸、L-天冬酰胺基-L-脯氨酰-L-丝氨酸、L-异亮氨酸-L-异亮氨酸等小肽类物质代谢具有显著性差异.[结论]CAG肝胃气滞证和脾胃虚弱证患者之间存在氨基酸代谢差异,N-乙酰基甘氨酸、甲基间酪氨酸、O-磷酸丝氨酸等代谢物可能是区别CAG肝胃气滞证和脾胃虚弱证的潜在生物标志物.

目的 探讨 N-乙酰基-丝氨酰-天冬氨酰-赖氨酰-脯氨酸(N-acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline,AcSDKP)对非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)细胞模型炎症反应、凋亡的影响及机制.方法 选取 LO2 肝细胞(对照组),以0.5 mmol/L的游离脂肪酸(free fatty acid,FFA)处理并建立 NAFLD细胞模型(模型组),并采用不同浓度 AcSDKP 处理细胞,分为低剂量组、中剂量组及高剂量组.油红 O染色实验检测细胞内脂肪沉积,ELISA 检测 ALT、AST、TG、TC、MAD、TNF-α 及 IL-6 水平,TUNEL染色、Annexin V-FITC/PI双染检测细胞凋亡,Western blotting 检测细胞 Bcl-2、Bax、cleaved caspase-3、AMPK、SREBP-1c、FAS的表达水平.结果 与对照组比较,模型组细胞内脂滴沉积增加,ALT、AST、TG、TC及 MDA表达水平增加;细胞上清液 TNF-α含量升高,IL-10 含量降低;细胞凋亡率升高,cleaved caspase-3、caspase-3、Bax、FAS 及 SREBP-1c 蛋白表达量升高,Bcl-2 蛋白表达量、p-AMPK/AMPK比值降低.与模型组比较,经不同浓度 AcSDKP 处理后的细胞内脂滴沉积降低,ALT、AST、TG、TC 及 MDA 表达水平降低;细胞上清液 TNF-α 含量降低,IL-10 含量升高;细胞凋亡率降低,cleaved caspase-3、caspase-3、Bax、FAS 及 SREBP-1c 蛋白表达量降低,Bcl-2 蛋白表达量、p-AMPK/AMPK比值升高.结论 AcSDKP 可抑制 NAFLD模型细胞的脂质沉积、凋亡及炎症反应,可能与 AMPK/SREBP-1c/FAS信号通路相关.

目的 研究Ac-SDKP调节p-CREB、p-Smad2/3信号抑制矽肺纤维化的作用.方法 Wistar大鼠随机分为:对照组、矽肺模型组、Ac-SDKP抗纤维化治疗组、Ac-SDKP预防治疗组.Van Gieson染色观察肺组织形态,Western Blot检测α-SMA、cAMP、PKA、p-CREB和p-Smad2/3蛋白表达;免疫荧光检测p-Smad2/3与α-SMA的共表达.结果 矽肺模型组,纤维化病变区域可见胶原沉积,α-SMA、p-Smad2/3蛋白表达明显增多,cAMP、PKA及p-CREB表达显著减少.经Ac-SDKP干预后,cAMP、PKA及p-CREB的表达显著增加,α-SMA、p-Smad2/3的蛋白表达明显降低,肺组织损伤减轻,胶原沉积减少.结论 Ac-SDKP可通过cAMP/PKA/p-CREB信号抑制p-Smad2/3的表达,发挥抑制矽肺纤维化的作用.

目的 探讨N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸(Ac-SDKP)对肺成纤维细胞分化过程中胞内氯离子通道蛋白4(CLIC4)表达的影响.方法 非暴露式支气管内灌注法制作大鼠矽肺模型,分为对照4周组、矽肺4周组、对照8周组、矽肺8周组、Ac-SDKP抗纤维化治疗组和Ac-SDKP预防治疗组,免疫组化法、Western blot法检测Ⅰ型胶原、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及CLIC4蛋白的表达.培养新生大鼠肺成纤维细胞,观察转化生长因子(TGF)-β1诱导肺成纤维细胞后Ⅰ型胶原、α-SMA、CLIC4蛋白表达变化,同时观察给予 Ac-SDKP、Smad2/3特异性抑制剂 LY364947、Rock -1特异性抑制剂 Y -27632、ERK1/2特异性抑制剂PD98059、JNK特异性抑制剂SP600125和P38特异性抑制剂SB203580干预后对Ⅰ型胶原、α-SMA、CLIC4蛋白的影响.结果 免疫组织化学染色结果显示矽肺大鼠矽结节内可见CLIC4阳性表达,给予Ac-SDKP抗纤维化治疗或预防治疗均能够抑制Ⅰ型胶原、α-SMA及CLIC4蛋白表达的上调.TGF-β1诱导肺成纤维细胞后CLIC4蛋白表达上调,而给予Ac-SDKP、LY364947、Y-27632或PD98059预处理均能够抑制该变化,SP600125和SB203580预处理后则无改变.结论 Ac-SDKP可能通过作用于TGF-β1介导的CLIC4激活途径,从而发挥抗矽肺纤维化的作用.

目的 通过对糖尿病肾病小鼠模型的研究,探讨N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸(N-acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline,AcSDKP)对糖尿病肾病小鼠肾组织的保护作用及可能机制.方法 将18只小鼠随机分为正常组(n=6)、模型组(n=12).通过一次性腹腔注射链脲佐菌素(streptocozin,STZ)建立糖尿病小鼠模型,糖尿病模型建立成功后再分为糖尿病组(n=6)、糖尿病+ AcSDKP组(n=6).糖尿病+AcSDKP组小鼠予AcSDKP口服(1 mg·kg-1·2 d-1,溶于饮用水瓶中),糖尿病组予常规饮用水.12周后测量小鼠血压、心率、血糖,收集小鼠血、尿标本用于检测生化指标及尿白蛋白/肌酐比值.处死大鼠后留取肾组织标本,通过普通光镜和电镜观察肾脏形态学及超微结构改变.采用免疫荧光法检测肾组织中足细胞蛋白(nephrin)的表达改变,采用免疫印迹法检测肾组织纤连蛋白(fibronectin)、旷平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,αt-SMA)的表达改变.结果 ①与对照组相比,糖尿病小鼠出现血糖明显升高,建模成功后12周出现明显白蛋白尿,足细胞出现足突融合、增宽,肾脏出现纤维化,肾小球表面面积及系膜区面积明显增加,肾小球nephrin表达明显减少,而糖尿病小鼠血压无明显改变.②AcSDKP可减少糖尿病小鼠蛋白尿,减轻足细胞足突融合及增宽,缓解肾小球肥大及系膜增殖,改善肾脏纤维化.③AcSDKP可减少肾组织fibronectin、α-SMA的表达,部分恢复肾脏nephrin的表达.结论 AcSDKP可减轻糖尿病小鼠肾组织病变,其保护作用与减轻足细胞nephrin表达有关,为糖尿病肾病提供新的治疗手段及理论依据.

目的 体外探讨肝星状细胞(HSC)脯氨酰寡肽酶(POP)的生物学功能,以进一步阐述其在肝脏炎症和纤维化发生发展中的作用.方法 取HSC-T6细胞,经不同浓度的POP抑制剂(S17092)处理,采用ELISA法检测HSC-T6细胞N- 乙酰基- 丝氨酸- 天冬氨酸- 赖氨酸- 脯氨酸(Ac-SDKP)水平,使用流式细胞术和CCK8检测HSC-T6凋亡和增殖水平,采用实时定量-PCR法检测相关炎症和肝纤维化基因转化生长因子-β1(TGF-β1)、α- 平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、Ⅰ型胶原(Col I)水平,采用Western blot法检测相关蛋白(POP、TGF-β1、α-SMA、Smad7、p-Smad2/3、PPAR-γ)表达.结果 与对照组比,POP抑制剂干预组细胞内Ac-SDKP水平显著下降(P<0.05);POP被抑制后对HSC-T6凋亡没有显著的影响(P>0.05),但可抑制其增殖(P<0.05);与对照组比,抑制剂组HSC内α-SMA蛋白表达显著升高(P<0.05),而Smad7和PPAR-γ蛋白表达显著下降(P均<0.05);抑制剂组HSC内MCP-1和α-SMA mRNA水平显著上调(P均<0.05).结论 POP在肝星状细胞内可能发挥重要的抗炎抗纤维化作用,其机制可能与其调节Ac-SDKP及Smad7和PPAR-γ的表达有关.

目的 探索成纤维生长因子受体1(fibroblast growth factor receptor 1,FGFR1)在调控内皮稳态时对上游分子N-乙酰基-丝氨酰-天冬氨酰-赖氨酰-脯氨酸(N-acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline、AcSDKP)的影响和下游微小RNA let-7(microRNA let-7、miR let-7)的诱导作用及与内皮细胞线粒体生源的关系,以期最终研究FGFR1在内皮稳态中的调控作用.方法 下调FGF/FGFR1信号通路,蛋白质印迹(Western印迹,WB)法和细胞免疫荧光(Immunofluorescence staining)技术检测线粒体融合蛋白MFN2(mitofusin-2)、OPA1(optic atrophy protein 1)和分裂蛋白DRP1(dynamin-related protein-1)的表达;应用线粒体染色(MitoTraker Green)检测线粒体的生成;运用实时荧光定量核酸扩增(Real-time Quantitative PCR、qPCR)检测技术检测microRNA let-7的表达.结果 FGFR1通过诱导microRNA let-7b-5p的生成促进AcSDKP维持线粒体的生源;AcSDKP修复细胞因子复合物Triple(TGF-β2、IL-1β和TNF-α)所引起microRNA let-7b-5p表达抑制与线粒体的生成密切相关;抑制microRNA let-7b-5p的表达后,AcSDKP失去促进线粒体生成的作用;上调microRNA let-7b-5p的表达后,可修复内皮细胞中因FGF/FGFR1底物FRS2(fibroblast growth factor receptor substrate)沉默所致通路缺失所致的线粒体生成障碍.结论 FGFR1通过上调microRNA let-7b-5p的表达,促进线粒体的生成,从而在内皮细胞的稳态中起着十分重要的作用.