目的:探讨Brahma相关基因1（BRG1）在皮肤鳞状细胞癌（cSCC）组织及细胞中的表达，及其与激活转录因子2（ATF2）相互作用调控cSCC细胞增殖、迁移、侵袭的分子机制。方法:收集2015—2021年南通大学第二附属医院皮肤科经病理确诊为日光性角化病（AK）、cSCC（含原位鳞癌）患者的石蜡组织标本分别66例和80例，同时收集皮肤美容手术修整下的正常皮肤组织石蜡标本35例作为正常对照组。采用免疫组化染色法检测BRG1在cSCC、AK及正常皮肤组织中的表达，分析BRG1表达与cSCC患者临床病理参数之间的相关性。收集cSCC患者和健康对照新鲜组织标本各12例，常规培养cSCC细胞株A431和Scl-1及人永生化角质形成细胞株HaCaT，实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测组织及细胞中BRG1 mRNA的表达，通过免疫共沉淀和细胞免疫荧光染色分析BRG1与ATF2的相互作用。通过RNA干扰法敲低A431、Scl-1细胞中BRG1（BRG1 siRNA1 ~ 5组）和ATF2表达（ATF2-shRNA组），并分别转染阴性对照siRNA或shNC作为对照（control siRNA组、shNC组），采用细胞计数（CCK8）实验、克隆形成实验、细胞划痕实验和Transwell实验分别检测敲低BRG1、ATF2对cSCC细胞增殖、迁移及侵袭的影响。多组间计量资料的比较采用单因素方差分析，两两多重比较采用Dunnett- t检验。 结果:免疫组化染色显示，BRG1蛋白在cSCC、AK组织中的表达强度显著低于正常皮肤组织（ χ2 = 44.40， P < 0.001）。qRT-PCR显示，cSCC组织中BRG1 mRNA表达水平（1.345 ± 0.956）显著低于正常皮肤组织（2.499 ± 1.501， t = 2.25， P = 0.035），A431、Scl-1细胞中BRG1 mRNA表达水平（0.041 ± 0.002、0.026 ± 0.003）亦显著低于HaCaT细胞（0.135 ± 0.033， t = 4.95、5.73， P = 0.008、0.005）。BRG1的低表达与cSCC患者癌组织位于曝光部位（ P = 0.041）、肿瘤低分化程度（ P = 0.001）、Broder高分级（ P < 0.001）有关。BRG1 siRNA1组和BRG1 siRNA2组A431、Scl-1细胞克隆形成数、迁移细胞数、侵袭细胞数及细胞迁移率均显著高于control siRNA组（均 P < 0.05）。免疫共沉淀实验表明，在A431、Scl-1细胞中BRG1蛋白与ATF2蛋白能相互结合，免疫荧光法显示二者存在共定位；与control siRNA组相比，A431（BRG1 siRNA1、2组）和Scl-1细胞（BRG1 siRNA1组）中敲低BRG1表达可促进ATF2磷酸化激活（均 P < 0.05）；与shNC组相比，shATF2组A431、Scl-1细胞克隆形成数（均 P = 0.001）、24 ~ 96 h细胞增殖活性（均 P < 0.001）、迁移细胞数及侵袭细胞数均显著降低（均 P ≤ 0.001）。 结论:BRG1在cSCC及AK组织中低表达，且BRG1可抑制cSCC细胞增殖、迁移及侵袭；ATF2促进cSCC细胞增殖、迁移及侵袭；BRG1可能通过与ATF2蛋白相互作用并抑制ATF2磷酸化激活，从而发挥抑癌作用。

交配型转换/蔗糖不发酵(SWI/SNF)染色质重塑复合物成员基因在近20%的人类肿瘤中发生突变，大多作为抑癌基因发生失活突变，无法直接成为靶向药物治疗的靶点。针对这些突变基因，利用合成致死效应原理，找到并抑制缺陷基因的合成致死靶标，可实现以突变基因作为生物标志物的精准治疗。本文对基于SWI/SNF复合物成员失活突变的合成致死效应在肿瘤治疗中取得的研究进展及应用前景展开综述。目前针对AT丰富结合域1A(ARID1A)、多溴蛋白1(PBRM1)、Brahma相关基因1/Brahma(BRG1/BRM)、蔗糖不发酵蛋白5(SNF5)等亚基失活突变开展了一系列基于合成致死理论的临床前研究，并在多种恶性肿瘤治疗中取得了一定成果，显示出良好的应用前景。

目的:探讨微小核糖核酸(RNA)-221(miR-221)对结肠癌细胞侵袭转移能力的影响及其分子机制。方法:以人结肠癌SW48细胞作为研究对象，设置高表达对照组(miR-NC组)，高表达miR-221组(miR-221组)，低表达对照组(lnh-NC组)，低表达miR-221组(lnh-221组)，通过增加或降低miR-221表达，采用细胞迁移及侵袭试验(Transwell实验)，检测miR-221对结肠癌细胞侵袭转移能力的影响；通过使用蛋白质印迹法(Western blot)检测miR-221对Brahma相关基因-1(BRG1)表达的影响。通过荧光素酶报告基因(Luciferase)实验，检测miR-221在SW48细胞中对BRG1转录活性的影响。通过在miR-221高表达的SW48细胞中高表达BRG1，检测BRG1在miR-221调控结肠癌细胞侵袭转移中的作用。组间比较采用 t检验。 结果:在SW48细胞中，迁移和侵袭实验结果显示，miR-221组细胞的迁移和侵袭能力高于miR-NC组(迁移，miR-NC 110.30±7.79比miR-221 193.00±4.73， t＝9.071， P<0.01；侵袭，miR-NC 62.67±8.45比miR-221 122.00±21.17， t＝2.603， P<0.01)；与lnh-NC组比较，lnh-221组细胞的迁移和侵袭能力低于lnh-NC组(迁移，lnh-NC 104.70±11.29比lnh-221 73.67±6.12， t＝2.410， P<0.01；侵袭，lnh-NC 55.67±8.11比lnh-221 32.67±4.05， t＝2.545， P<0.01)。在结肠癌LoVo细胞和SW48细胞中分别高表达和低表达miR-221，Western blot结果显示miR-221高表达可以使BRG1表达量降低，miR-221低表达可以使BRG1表达量升高。Luciferase实验中，miR-221高表达组BRG1 mRNA的转录活性低于miR-NC组(miR-NC 1.10±0.08比miR-221 0.62±0.05， t＝4.862， P<0.01)，这提示miR-221可能直接与BRG1 mRNA 3’端非编码区(3’UTR)结合，发挥对BRG1的调控作用。在迁移和侵袭实验中，同时高表达miR-221和BRG1组(miR-221/Ad-BRG1组)细胞迁移和侵袭能力低于高表达miR-221组(miR-221/Ad-GFP组)(迁移，miR-221/Ad-GFP 163.30±9.39比miR-221/Ad-BRG1 27.33±2.33， t＝14.063， P<0.01；侵袭，miR-221/Ad-GFP 75.33±8.19比miR-221/Ad-BRG1 11.67±1.33， t＝7.674， P<0.01)，这提示高表达BRG1可减弱miR-221促进结肠癌细胞侵袭转移的能力。 结论:miR-221可促进结肠癌细胞侵袭转移，这种作用的发挥可能部分依赖于BRG1。

目的:观察交配型转换/蔗糖不发酵(SWI/SNF)复合体调节亚基Brahma相关基因-1(Brg-1)对结直肠癌血管生成的影响。方法:对结肠癌细胞系LoVo细胞感染sh-Brg-1慢病毒(Lenti-sh-Brg-1组)和对照病毒(Lenti-con组)，通过蛋白质印迹法(Western blot)及实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测常氧及乏氧状态下乏氧诱导因子-1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子-A(VEGF-A)的蛋白和mRNA水平的变化，运用体外微管形成实验观察低表达Brg-1对结直肠癌血管形成的影响，组间比较采用 t检验。 结果:Western blot结果证明，与Lenti-con组比较，Lenti-sh-Brg-1组细胞中Brg-1蛋白表达量明显降低。在常氧及乏氧状态下低表达Brg-1可以明显降低HIF-1α及VEGF-A在蛋白表达量。在常氧状态下，Lenti-sh-Brg-1组细胞Brg-1(con 1.00±0比sh-Brg-1 0.53±0.08， t＝5.292， P<0.01)，HIF-1α(con 1.00±0比sh-Brg-1 0.61±0.07， t＝5.380， P<0.01)，VEGF-A mRNA水平低于Lenti-con组(con 1.00±0比sh-Brg-1 0.38±0.10， t＝6.169， P<0.01)；在乏氧状态下，Lenti-sh-Brg-1组细胞Brg-1(con 1.00±0比sh-Brg-1 0.07±0.02， t＝44.680， P<0.01)，HIF-1α(con 1.00±0比sh-Brg-1 0.21±0.05， t＝14.280， P<0.01)，VEGF-A mRNA水平低于Lenti-con组(con 1.00±0比sh-Brg-1 0.15±0.06， t＝13.960， P<0.01)。最后证实在常氧和乏氧条件下，Brg-1低表达细胞条件培养基组的人脐静脉内皮细胞体外成管数目低于对照组(常氧，con 55.67±7.22比sh-Brg-1 22.33±5.36， t＝3.706， P<0.05；乏氧，con 66.33±7.62比sh-Brg-1 35.68±4.91， t＝3.382， P<0.05)。 结论:在LoVo细胞系中低表达Brg-1可以通过下调HIF-1α抑制血管形成。

目的 研究染色质重构复合物核心催化亚基(Brahma-related gene 1,Brg1)对C57BL/6小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞数量和功能的影响及其可能的机制.方法 取6 ～ 8周龄雌性野生型C57BL/6小鼠(Wild type,WT)及Ⅱ型肺泡上皮细胞(alveolar epithelial cellⅡ,AECⅡs)上特异性敲除Brgl的C57BL/6小鼠(Brg1fl/fl)作为实验对象,每组选取8只小鼠,收取标本,利用免疫组化及免疫荧光分析肺组织中表面活性物质相关蛋白C(surfactant-associated protein C,SFTPC)阳性的细胞率,流式细胞术分析小鼠肺组织中表面活性物质蛋白C前体蛋白(prosurfactant protein C,pro SP-C)阳性的细胞(即AECⅡs)数量.Western blot检测各组小鼠肺组织中pro SP-C、SFTPC、表面活性物质相关蛋白A(surfactant-associated protein A,SFTPA)、表面活性物质相关蛋白D(surfactant-associated protein D,SFTPD)的表达水平.Western blot检测细胞周期蛋白D1(CyclinD1)表达及增殖相关信号转导途径中关键蛋白EGFR、p-EGFR、PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT及NF-κB p65的活化水平.结果 抗SFTPC免疫组化、免疫荧光显示其在肺泡上皮表达较WT小鼠增多(P＜0.05);流式细胞术显示Brg1 dl/dl组小鼠肺组织中pro SP-C+的细胞百分比较WT小鼠明显增高(P＜0.05),Western blot检测结果显示AECⅡs的功能性蛋白pro SP-C、SFTPC、SFTPA及SFTPD在Brg1 fl/fl小鼠中明显增多;Brg1fl/fl组小鼠肺组织中NF-κB p65及周期蛋白CyclinD1的表达增加,且p-EGFR/EGFR、p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT百分比显著提高,且差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 特异性敲除C57BL/6小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞中的Brg1可促使AECⅡs数量和分泌功能的增加,其可能机制与敲除Brg1促进EGFR/PI3K/AKT/NF-κB信号通路的激活,且与增殖周期蛋白CyclinD1表达的增加有关.

非编码RNA(ncRNA)曾被认为是"基因组噪声",随着分子生物学技术的发展,ncRNA在主动脉疾病中的发病机制成了研究热点.ncRNA的表达具有细胞和组织特异度,并存在与疾病发病相关的特异性ncRNA,对某些疾病筛查具有高敏感性和稳定性,有潜力成为心血管疾病危险分层、诊断及预后的生物标志物.如FDA已批准lncRNA前列腺癌抗原-3用于前列腺癌的临床常规筛查.在治疗方面,已有研究以miRNA-21和miRNA-34等为靶向的多种药物进入临床试验阶段.主动脉疾病常可分为先天性和获得性两类,获得性主动脉疾病包括主动脉夹层、主动脉瘤、多发性大动脉炎等.多种ncRNA参与调控获得性主动脉疾病的发生和发展,如lnc-Ang362的敲除可抑制血管平滑肌细胞的增殖;主动脉夹层患者中Brahma相关基因1(BRG-1)mRNA和相应蛋白的表达水平显著升高.希望通过进一步研究发现主动脉疾病发病机制中的关键分子,以寻找此类疾病早期诊断的标志物及潜在的治疗靶点.本文重点对miRNAs、lncRNAs、circRNAs参与的获得性主动脉疾病相关研究进行综述.

目的 探究ATR抑制剂联合卡铂对裸鼠乳腺癌移植瘤的作用及其对组织BRG1、RAD51、PALB2的影响.方法 将40只乳腺癌移植瘤模型裸鼠随机分为对照组、卡铂组、ATR抑制剂M6620组和卡铂+M6620组(n=10).记录肿瘤体积和质量,RT-qPCR和Western印迹检测肿瘤组织中Ki67、MMP2、N-cad-herin、E-cadherin mRNA和蛋白表达量,免疫组化检测Brahma相关基因1(Brahma related gene 1,BRG1)、重组酶51(recombinase 51,RAD51)、乳腺癌易感基因2定位协作蛋白(breast cancer susceptibility gene 2 localization collaboration protein,PALB2)蛋白水平.结果 卡铂组和M6620组的肿瘤质量、体积、Ki67、MMP2、N-cadherin mRNA和蛋白水平,以及BRG1、RAD51、PALB2蛋白水平显著低于对照组,E-cadherin-mRNA和蛋白显著高于对照组(P<0.05).卡铂+M6620组的肿瘤质量、体积、Ki67、MMP2、N-cadherin mRNA和蛋白水平,以及BRG1、RAD51、PALB2蛋白水平显著低于卡铂组和M6620组,而E-cadherin mR-NA和蛋白显著高于卡铂组和M6620组(P<0.05).结论 ATR抑制剂联合卡铂可抑制裸鼠乳腺癌移植瘤的生长和组织中BRG1、RAD51、PALB2的表达.