目的:探讨直肠癌患者组织中长链非编码核糖核酸C5orf66反义链1(lncRNA C5orf66-AS1)表达水平与患者临床病理参数及预后的关系。方法:选取2015年4月至2016年4月于南京医科大学第一附属医院确诊的74例直肠癌患者肿瘤组织作为直肠癌组，选取直肠癌患者相应癌旁正常组织(距离肿瘤>10 cm)作为癌旁对照组，随访5年记录患者生存情况。癌症基因组图谱(TCGA)数据库检索直肠癌中lncRNA C5orf66-AS1表达水平，采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测直肠癌患者组织lncRNA C5orf66-AS1表达水平；分析肿瘤组织lncRNA C5orf66-AS1表达水平与直肠癌患者临床病理参数及预后的关系；分析影响直肠癌患者预后的因素。采用 t检验及 χ2检验比较组间差异。 结果:TCGA数据库中直肠癌组织lncRNA C5orf66-AS1表达水平低于正常组织(0.44±0.12比0.95±0.21， t＝17.155， P<0.05)，差异有统计学意义。RT-qPCR检测结果显示，直肠癌组lncRNA C5orf66-AS1表达水平(0.48±0.19)低于癌旁对照组(1.01±0.23， t＝15.283， P<0.05)，差异有统计学意义。lncRNA C5orf66-AS1高表达组和lncRNA C5orf66-AS1低表达组肿瘤大小、淋巴结转移、TNM分期比较，差异有统计学意义( χ2＝0.041、0.012、0.605、1.655、0.962， P<0.05)。lncRNA C5orf66-AS1高表达的直肠癌患者术后5年生存率高于lncRNA C5orf66-AS1低表达患者( χ2＝12.404， P<0.05)，差异有统计学意义。淋巴结转移是影响直肠癌患者死亡的独立危险因素[风险比( HR)＝2.134，95%可信区间( CI)：0.850～1.524， P<0.05]，差异有统计学意义，lncRNA C5orf66-AS1是影响直肠癌患者死亡的保护因素( HR＝0.745，95% CI：0.610～0.910， P<0.05)，差异有统计学意义。 结论:lncRNA C5orf66-AS1表达水平与直肠癌患者病情进展及预后可能有密切联系。

目的:构建人β冠状病毒程序性核糖体移码效率评价系统，为筛选靶向核糖体移码的抗病毒宿主因子及药物提供工具。方法:比对分析冠状病毒开放阅读框（open reading frame，ORF）1a和1b之间的核糖体移码序列，构建真核细胞表达双荧光报告质粒，通过共转染报告质粒与宿主因子表达质粒，验证宿主因子对人β冠状病毒程序性核糖体移码的影响。结果:成功构建人β冠状病毒程序性核糖体移码真核细胞表达双荧光报告检测系统，通过该系统鉴定干扰素刺激基因产物C19orf66（称为"Shiftless"）是抑制新型冠状病毒（SARS-CoV-2）程序性核糖体移码的宿主因子。结论:感染人的5种β冠状病毒中程序性核糖体移码位点进化保守，本研究中程序性核糖体移码效率评价系统的构建策略可广泛应用于抗冠状病毒药物筛选及病毒宿主互作研究。

目的:探讨lncRNA C5orf66-AS1 对宫颈癌细胞增殖及迁移的影响及其作用机制.方法:通过TCGA筛选宫颈癌和癌旁组织中差异表达的lncRNA并采用qRT-PCR对候选lncRNA进行验证.采用qRT-PCR检测miR-149-5p和RING1 在宫颈癌组织和细胞中的表达水平.使用 CCK-8、克隆形成、Transwell和流式细胞术检测C5orf66-AS1 对细胞增殖、迁移和凋亡的影响.通过双荧光素酶测定和Western blot评估C5orf66-AS1 对miR-149-5p和RING1 表达的调控作用.进一步构建裸鼠成瘤模型通过肿瘤重量和体积验证C5orf66-AS1 对肿瘤生长的影响.结果:lncRNA C5orf66-AS1 在宫颈癌组织和细胞中显著上调(P＜0.05).与NC组比较,C5orf66-AS1 组能够促进宫颈癌细胞增殖和迁移(P＜0.05).RNA免疫沉淀(RNA immunoprecipitation,RIP)和双荧光素酶报告实验结果显示C5orf66-AS1 与miR-149-5p靶向结合.过表达miR-149-5p和RING1 能够逆转C5orf66-AS1 介导的宫颈癌细胞增殖和迁移能力.最后裸鼠体内实验显示,与NC组比较,C5orf66-AS1 组的肿瘤显著生长(P＜0.05).结论:lncRNA C5orf66-AS1 作为一种竞争性内源性RNA,通过吸附miR-149-5p调节RING1 对宫颈癌细胞增殖、凋亡和迁移的影响.

目的:探讨长链非编码RNA C5orf66-AS1 通过靶向miR-637 对胃癌(GC)细胞增殖、凋亡的影响,为GC临床治疗提供依据.方法:收集32 例GC病人的癌组织及其癌旁组织并体外培养人胃腺癌细胞系MKN28、MKN451、BGC823、MGC803、AGS及正常胃上皮细胞系GES-1,qRT-PCR实验检测其C5orf66-AS1 和miR-637 表达.将对数生长期的AGS细胞利用脂质体转染试剂进行转染并分为对照组、GV144 组、GV144-C5orf66-AS1 组、miR-NC组、miR-637 mimics组、GV144-C5orf66-AS1"miR-NC组、GV144-C5orf66-AS1"miR-637 mimics组.CCK-8 法检测细胞增殖能力;流式细胞术分析细胞凋亡情况;Western blotting实验测定细胞周期蛋白CyclinD1、B淋巴细胞瘤-2 基因(Bcl-2)及其同源蛋白Bax相对表达水平;RNA免疫共沉淀实验验证C5orf66-AS1 和miR-637 的作用关系.结果:与癌旁组织或正常胃上皮细胞系GES-1 相比,C5orf66-AS1 和miR-637 在GC组织和细胞系MKN28、MKN451、BGC823、MGC803、AGS中的表达水平均降低(P＜0.05),选择C5orf66-AS1 表达水平最低的AGS细胞进行转染实验.转染GV144-C5orf66-AS1 后,AGS细胞中C5orf66-AS1、miR-637 表达水平、凋亡率及Bax蛋白表达升高,细胞活性(48、72、96 h)及CyclinD1、Bcl-2 蛋白降低(P＜0.05).C5orf66-AS1 和miR-637 存在相互作用关系.miR-637 过表达可使C5orf66-AS1 过表达对AGS细胞增殖的抑制作用和凋亡的促进作用更明显(P＜0.05).结论:C5orf66-AS1 和miR-637 在GC组织和细胞中低表达,过表达C5orf66-AS1 和上调miR-637,可协同抑制GC细胞的增殖,促进凋亡.

目的:探讨长链非编码RNA C5orf66反义链1(lncRNA C5orf66-AS1)对胃癌细胞增殖和转移的影响.方法:以2019年6月-2021年6月收集的63例胃癌患者的癌组织与癌旁组织、人胃黏膜细胞GES-1及胃癌细胞BGC823、SGC7901、AGS、MKN28为研究对象,分别检测组织和细胞中C5orf66-AS1和细胞色素c1(CYC1z)蛋白表达情况.将AGS细胞分为7组,分别检测各组细胞增殖、迁移、侵袭以及细胞中C5orf66-AS1表达水平和CYC1、细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、MMP-9蛋白表达情况.结果:与癌旁组织比较,胃癌组织中C5orf66-AS1表达降低,CYC1蛋白表达升高(P＜0.05).与人胃黏膜细胞GES-1比较,胃癌细胞BGC823、SGC7901、AGS、MKN28中C5orf66-AS1表达降低,CYC1蛋白表达升高(P＜0.05),且AGS细胞中C5orf66-AS1表达最低,CYC1蛋白表达水平最高.沉默C5orf66-AS1促进AGS细胞增殖、迁移、侵袭及CYC1、Cy-clinD1、MMP-2、MMP-9蛋白表达;过表达C5orf66-AS1抑制AGS细胞增殖、迁移、侵袭及CYC1、CyclinD1、MMP-2、MMP-9蛋白表达;过表达CYC1可逆转C5orf66-AS1对AGS细胞增殖、迁移、侵袭的抑制作用.结论:过表达C5orf66-AS1可能通过下调CYC 1抑制AGS细胞增殖、迁移和侵袭.