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消毒剂对高病毒载量患者所用内镜的消毒效果及安全性研究
编辑人员丨2天前
目的:对比新型过氧乙酸复合消毒剂与戊二醛对高病毒载量慢性乙型肝炎、丙型肝炎及艾滋病患者所用消化内镜残留病毒及细菌的杀灭效果。方法:选取血清中乙型肝炎病毒(hepatitis virus,HBV)DNA≥10 5 IU/mL,丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)RNA≥10 5 IU/mL或人类免疫缺陷病毒(humanimmuno deficiency virus,HIV)RNA≥10 4 copies/mL的接受消化内镜诊疗的24名患者,将同一病种患者随机分组至实验组(过氧乙酸消毒组)或对照组(戊二醛消毒组),检测4个不同时点消化内镜HBV-DNA、HCV-RNA、HIV-RNA、细菌染菌量及三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)生物荧光定量数值。 结果:实验组与对照组消毒后消化内镜内、外表面均未检出HBV-DNA、HCV-RNA及HIV-RNA。实验组与对照组消毒后细菌菌落数差异无统计学意义( Z=0.718, P=0.473),消毒合格率均为100%。实验组与对照组清洗消毒前后ATP含量变化差异无统计学意义( Z=1.334, P=0.182)。实验组的内镜处置人员对消毒剂产生的不良反应少于对照组。 结论:新型过氧乙酸复合消毒剂与戊二醛均能达到国家标准规定的高水平消毒要求,过氧乙酸消毒时间更短,对消人员造成的不良影响更小。
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编辑人员丨2天前
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ctDNA和CTC检测微小残留病灶在性腺生殖细胞肿瘤中应用的研究进展
编辑人员丨2天前
生殖细胞肿瘤多见于青少年,发现时多为早期,手术结合化疗通常可以达到治愈的效果。但由于患者的年龄较小,化疗可能严重影响其生长发育,另外,即使采用规范化手术并结合化疗,仍有约20%的患者复发,复发患者极易出现化疗耐药,预后受到影响。目前,临床上使用的评估生殖细胞肿瘤患者预后的主要因素包括年龄、分期、残留灶大小、化疗耐药以及卵黄囊瘤成分等,但仍需要更为精准的指标来指导术后化疗和评估预后。微小残留病灶(MRD)的概念起源于血液系统肿瘤,近年来逐渐延伸至实体肿瘤领域,是指肿瘤患者经过治疗达到完全缓解后仍然有残留的肿瘤成分,与复发及预后相关,可以通过循环肿瘤DNA(ctDNA)和循环肿瘤细胞(CTC)等方法检测残留的肿瘤成分。本文就MRD的概念、检测方法及ctDNA和CTC检测MRD在性腺生殖细胞肿瘤中的应用作一综述。
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编辑人员丨2天前
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单倍体异基因外周血干细胞移植治疗AML1-ETO、FLT3-TKD阳性及-Y的急性髓系白血病一例并文献复习
编辑人员丨2天前
患者男,19岁,未婚,因"腹胀伴纳差半月余,间断发热4天"于2018年11月26日入院。患者于2018年11月无诱因出现腹胀、纳差,后受凉出现发热、咳嗽等症状,就诊于当地医院查血常规提示白细胞升高伴贫血及血小板减低。11月26日转诊我院查血常规:白细胞计数14.39×10 9/L,血红蛋白54 g/L,红细胞平均体积122.1 fL,血小板计数9×10 9/L。胸部CT:两肺片絮影,下叶为著,多考虑感染;两侧胸膜局限性增厚、粘连;两侧胸腔少量积液;两侧腋窝数枚稍大淋巴结。骨髓细胞形态学示:骨髓有核细胞增生极度活跃;粒:红=78∶1;原粒+早幼粒占72.4%,Auer小体可见。白血病免疫分型示:本次检测范围内,约30.6%(占有核细胞比例)的细胞为恶性原始幼稚髓系细胞,多考虑急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)。白血病43种融合基因示:AML1-ETO融合基因阳性。预后基因:FLT3-TKD突变型。染色体核型:45,X,-Y,t(8;21)(q22;q22)[18]/46,XY[2]。明确诊断为:急性非淋巴细胞白血病-M2 AML1-ETO(+) FLT3-TKD(+)。11月28日开始行DA方案化疗,12月28日复查骨髓细胞形态学:AML-M2-NR(原始粒细胞占48.4%)。12月30日开始行IA方案化疗,复查骨髓细胞形态学:AML-M2-NR(原始粒细胞占75.6%)。2019年1月30日行开始行HAG方案化疗,3月4日复查骨髓细胞形态学:AML-M2-NR(原始粒细胞占9.2%)。给予HAG方案化疗,4月9日复查骨髓细胞形态学:AML-NR(原始粒细胞占28%)。给予FLAG方案化疗,5月7日复查骨髓细胞形态学:粒:红=11.3:1;粒系增生,中幼粒比例增高;AML-CR。随后行大剂量阿糖胞苷强化治疗。患者无全相合供者,与其胞妹为7/10半相合。6月3日复查骨髓:ANLL-CR治疗后骨髓象。微小残留病变(minimal residual disease,MRD)阴性。FLT3-TKD阴性。AML1-ETO阴性、AML1-ETO/ABL1 0.0168%。脑脊液:白细胞计数65×10 6/L、脑脊液蛋白3 990.0 mg/L、蛋白定性阳性。6月24日入无菌间行CBA方案预处理,预处理过程基本顺利,6月30日至7月1日行妹供兄单倍体异基因外周血干细胞移植(A供A),输注外周血干细胞结束后6小时输注间充质干细胞100 mL。两天共移植MNC 495.2×10 8个,平均7.68×10 8/kg,CD34 +为5.55×10 6/kg。术后给予CSA+MMF+短程MTX预防移植物抗宿主反应(graft versus host disease,GVHD),哌拉西林他唑巴坦钠+阿昔洛韦+伏立康唑预防性抗感染治疗。+2天出现腹泻及肝功能异常。+19天粒细胞植活。+20天血小板植活。+29天复查骨髓涂片:AML-异基因造血干细胞移植(allogeneic hematopoietic stem cell transplantation,allo-HSCT)术后恢复期骨髓象,GVHD预测为低风险。MRD、AML1-ETO及FLT3-TKD定量阴性,呈完全嵌合状态。+36天出院休养。院外患者服用环孢素、吗替麦考酚酯胶囊治疗,病情平稳。移植后多次复查骨髓均为AML-HSCT术后骨髓象。T、B、NK及全血细胞均为完全嵌合。MRD阴性。AML1/ETO基因定量为0。白血病微小残留阴性。病毒定量(CMV-DNA+EBV-DNA)为0。目前仍在后续治疗随访中。
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编辑人员丨2天前
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尿液DNA甲基化检测在膀胱癌无创诊断中的研究进展
编辑人员丨2天前
目前膀胱癌的诊断和复发监测主要通过有创性的膀胱镜检查实现,而尿液无创诊断技术如脱落细胞学、荧光原位杂交(FISH)和膀胱肿瘤抗原(BTA)等敏感性和/或特异性不高,容易出现漏诊和误诊。因此,开发高灵敏度的膀胱癌无创诊断技术可在降低患者痛苦的同时改善其诊疗现状。近日,国际著名杂志《Journal of Clinical Investigation》发表了我国学者的研究成果,黄健/林天歆团队开发了一项基于尿液DNA甲基化的膀胱癌无创诊断技术,其敏感性明显优于目前临床常用的脱落细胞学和FISH检查,尤其在早期、微小、残留和复发膀胱癌诊断中展示出显著优势,明显提高了膀胱癌的检出率。该技术有望减少膀胱镜的使用,为膀胱癌精准诊疗提供新方案。本文对膀胱癌的无创诊断技术现状、尿液DNA甲基化检测在膀胱癌诊断中的优势,以及尿液无创诊断的发展趋势进行阐述。
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编辑人员丨2天前
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微小残留病检测在淋巴系统恶性肿瘤精准医学中的研究进展
编辑人员丨2天前
随着淋巴系统恶性肿瘤精准治疗的不断进步,微小残留病(MRD)在其疗效评价、预后判断、治疗决策指导和复发预测等方面发挥着越来越重要的作用。目前,每年发表的涉及MRD检测相关血液系统恶性肿瘤文章近千篇。2023年第65届美国血液学会(ASH)年会上,涉及MRD检测在淋巴系统恶性肿瘤诊疗中应用的投稿近500篇,涵盖的内容非常广泛。文章遴选MRD检测在急性淋巴细胞白细胞、慢性淋巴细胞白细胞、多发性骨髓瘤和淋巴瘤中相关研究的口头报告作一介绍。
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编辑人员丨2天前
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融合C3Fab抗PD-L1纳米抗体的制备及其对血浆半衰期的影响
编辑人员丨2天前
目的:制备融合C3Fab的抗程序性死亡-配体1(PD-L1)纳米抗体P3C8-C3Fab,并研究其对血浆半衰期的影响。方法:将来源于蛋白G的C3Fab肽段,通过DNA重组技术与纳米抗体P3C8进行分子融合,并构建重组质粒pET21a-P3C8-C3Fab,在大肠杆菌BL21菌株中进行诱导表达和纯化,并采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测P3C8-C3Fab与PD-L1蛋白、小鼠IgG和表达PD-L1肿瘤细胞的结合,利用双抗夹心ELISA检测不同时间小鼠血清中残留P3C8-C3Fab,以评估C3Fab对PD-L1纳米抗体血浆半衰期的延长作用。结果:成功构建了融合C3Fab的抗PD-L1纳米抗体P3C8-C3Fab,其在BL21菌中以可溶形式高效表达,经纯化获得质量分数约为90%的NbP3C8-C3Fab蛋白,得率为7.18 mg/L。P3C8-C3Fab随着质量浓度的增加,对PD-L1蛋白和小鼠IgG亲和力也逐渐升高,且呈现浓度相关性;P3C8-C3Fab与肺癌A549细胞的结合呈浓度相关性。小鼠血清中P3C8-C3Fab的浓度标准曲线呈典型的S型浓度相关性;P3C8血浆半衰期仅为0.44 h,而P3C8-C3Fab的血浆半衰期达到9.36 h,血浆半衰期延长了21.27倍。结论:C3Fab与纳米抗体P3C8连接可以显著延长其血浆半衰期,对改善纳米抗体的体内作用具有应用价值。
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编辑人员丨2天前
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局部晚期非小细胞肺癌微小残留病灶的研究进展
编辑人员丨2天前
局部晚期不可手术非小细胞肺癌(NSCLC)的标准治疗为同步放化疗(CCRT)后巩固免疫治疗,但后续可能复发。影像学检查只能被动识别复发、无法提前预测风险,基于循环肿瘤DNA(ctDNA)检测的微小残留病灶(MRD)则成为新兴的肿瘤标志物。研究表明,ctDNA在NSCLC放(化)疗后先升后降,不仅可以预测复发,还可能指导巩固免疫治疗、评估疗效和判断预后,甚至有助于探索其他有效的治疗方案。目前将ctDNA-MRD用于指导巩固治疗相关的临床研究较少、样本量较小、证据等级较低,其临床价值仍需前瞻性随机研究进一步验证。
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编辑人员丨2天前
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异基因造血干细胞移植后Wernicke脑病1例
编辑人员丨2天前
患者,女,40岁,2020年1月诊断为"骨髓增生异常综合征EB-2(WPSS评分3分)",分别于2020年1月、2020年3月和2020年5月应用地西他滨去甲基化治疗。移植前骨髓原始粒细胞占0.020,微小残留病(MRD)0.77%,WT1基因定量18.658%,NPM1-A基因突变定量1.244%。预处理方案:阿糖胞苷4 g·m -2·d -1,移植前10 d(-10 d)、-9 d,地西他滨20 mg·m -2·d -1,-10 d~-6 d,白消安3.2 mg·kg -1·d -1,-8 d~-6 d,环磷酰胺1.8 g·m -2·d -1,-5 d、-4 d,兔抗人胸腺细胞球蛋白2.5 mg·kg -1·d -1,-5 d~-2 d,司莫司汀250 mg/m 2,-3 d,移植物抗宿主病(GVHD)预防方案:西罗莫司、霉酚酸酯联合短程甲氨蝶呤。患者于2020年8月18日行单倍型造血干细胞移植(女供母,HLA 6/12,AB+供A+),回输供者外周血干细胞单个核细胞(MNC)9.63×10 8/kg,CD34 +细胞3.84×10 6/kg。移植后11 d(+11 d)粒细胞及血小板植活。+3 d患者发生呕血,给予禁食水、抑酸治疗。患者高热,血培养、病毒、细菌、真菌筛查均为阴性,给予广谱抗生素抗感染治疗后体温未降。+8 d,患者出现皮疹。+9 d,患者发生上腹部烧灼感伴腹泻,考虑急性GVHD,加用甲泼尼龙2 mg·kg -1·d -1,体温降至正常。+13 d,患者血脂明显升高(甘油三酯38.18 mmol/L,总胆固醇8.65 mmol/L)。患者间断恶心、呕吐伴上腹不适,+14 d,患者出现乳糜血(甘油三酯41.70 mmol/L,总胆固醇7.49 mmol/L),停西罗莫司(此时西罗莫司浓度17.7 μg/L),改为环孢素A治疗GVHD,甘油三酯降至3.80 mmol/L,总胆固醇降至6.15 mmol/L。+25 d,患者出现嗜睡,恶心、呕吐好转,血巨细胞病毒、EB病毒DNA阴性,环孢素A浓度165.5 μg/L。+26 d,患者昏睡,定向力、计算力障碍、四肢肌力下降,腰穿脑脊液压力100 mmH 2O,氯114.3 mmol/L,葡萄糖8.30 mmol/L,蛋白0.55 g/L。脑脊液细菌培养、真菌培养及抗酸杆菌均阴性,脑脊液神经免疫病检测:血清和脑脊液中AQP4、MOG、MBG抗体均为阴性。脑脊液和外周血病毒PCR筛查均阴性,脑脊液病原体二代测序(NGS)阴性。TMA筛查阴性。头颅平扫+增强磁共振成像(MRI):双侧颞叶深部(海马区)及室管膜下区、左侧颞叶皮层多发异常信号并下丘对侧斑片明显强化灶。右侧小囊幕增厚并明显强化。结合患者近1个月进食差,伴有恶心、呕吐、腹泻,考虑不除外Wernicke脑病,给予维生素B 1 200 mg每8 h 1次治疗,+27 d患者神志转清,肢体肌力明显好转。患者维生素B 1<1.0 μg/L,明确诊断为Wernicke脑病,继续补充维生素B 1治疗。复查头颅MRI:双侧颞叶(及海马区)及室管膜下区多发异常信号并双侧下丘、右侧小脑幕明显强化灶,较前部分病变信号明显减低,范围减小。+30 d,复查骨髓完全缓解(CR),MRD阴性,NPM1基因突变阴性,短串联重复序列-聚合酶链反应(STR-PCR)完全供者型。+36 d,间断谵妄,给予奥氮平对症治疗后好转,+50 d,患者谵妄好转,停用奥氮平。随访至移植后8个月,患者无明显神经、精神症状及体征,环孢素A血浓度50 μg/L,原发病处于完全缓解状态,MRD阴性,STR-PCR完全供者型。头颅MRI:双侧颞叶(及海马区)及室管膜下区多发异常信号并双侧下丘脑、右侧小脑幕病变强化灶明显减低,范围明显缩小。
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编辑人员丨2天前
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肺癌术后放射治疗的适应证及参数设置
编辑人员丨2天前
局部晚期的非小细胞肺癌患者切除后复发风险很高。尽管基于铂类药物的辅助化疗已成为标准治疗,但术后放疗(PORT)的作用多年来一直存在争议。对于切除不完全的患者,尽管缺乏随机证据,但应在共识的基础上强烈建议进行术后放疗。在完全切除(R0)的非小细胞肺癌患者中,一项荟萃分析显示,在没有纵隔受累(pN0和pN1)的情况下,PORT的预后较差。在pN2患者中,PORT的作用尚不清楚,需要进一步研究。但该荟萃分析包括与当今标准相比较而言较旧的放射技术和较差的手术质量的试验,并且患者的选择不是基于正电子发射断层扫描。更新的回顾性和非随机研究,以及评估辅助化疗的随机试验的亚组分析表明,PORT可以使pN2 R0患者有生存获益。最近的两项随机试验(Lung ART和PORT-C)评估了适形PORT与非PORT对ⅢA-N2期患者的无病生存优势,尽管PORT显著降低了纵隔复发率。PORT对生存期没有影响,这可能是因为考虑到远处复发率高和额外的心肺毒性风险。计划在Lung ART中进行持续和未来的分析,以确定可推荐使用PORT的患者。在新辅助和(或)辅助治疗环境中,正在纳入新的全身治疗(免疫检查点抑制剂或癌基因依赖患者的靶向治疗)。在未来的研究中,在检测术后微小(或分子)残留疾病的基础上,通过分析循环肿瘤细胞DNA,更好地识别疾病复发风险高的患者是有必要的。
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编辑人员丨2天前
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输尿管脱细胞基质涂层诱导脂肪干细胞分化的研究
编辑人员丨2天前
目的:探讨输尿管脱细胞基质(UDM)涂层对脂肪干细胞分化的影响。方法:2018年1月至2019年10月利用灌注法制备犬UDM,为UDM组,以正常犬输尿管为正常输尿管组。采用HE染色、DAPI染色和DNA定量检测评估UDM组和正常输尿管组中细胞成分的残留情况;Masson三色染色和胶原定量检测评估UDM组和正常输尿管组中胶原的保留情况;阿尔新蓝染色和糖胺聚糖定量检测评估UDM组和正常输尿管组中糖胺聚糖的分布及含量。分离培养犬脂肪间充质干细胞(cADMSCs)并用流式细胞仪鉴定。用胃蛋白酶消化法制备UDM涂层作为实验组,Ⅰ型鼠尾胶原涂层作为对照组,将cADMSCs种植在不同涂层上,免疫荧光染色和蛋白质印迹法检测cADMSCs的分化情况。结果:HE和DAPI染色结果显示UDM组未见明显的细胞核残留;DNA定量检测结果显示UDM组中DNA含量[(38.87 ± 3.40) ng/mg]明显低于正常输尿管组[(1 694.63 ± 169.83) ng/mg, P<0.05]。Masson三色染色和胶原定量检测结果显示UDM组中胶原含量[(265.89 ± 16.40) μg/mg]与正常输尿管组[(288.73 ± 16.32) μg/mg]的差异无统计学意义( P>0.05)。阿尔新蓝染色结果显示UDM组中有糖胺聚糖分布;糖胺聚糖定量检测结果显示UDM组中糖胺聚糖含量[(1.57±0.19) μg/mg]低于正常输尿管组[(3.43±0.12) μg/mg] ( P<0.05)。蛋白质印迹法检测结果显示,实验组培养3、7、10 d的α-SMA的表达量(2.51 ± 0.27、3.68 ± 0.33、4.91 ± 0.45)均高于相应对照组(0.97 ± 0.09、1.02 ± 0.10、1.00 ± 0.11),差异均有统计学意义( P < 0.05);随着培养时间增加,实验组α-SMA的表达量逐渐增加,差异均有统计学意义( P<0.05),而对照组随着培养时间增加,α-SMA的表达量差异均无统计学意义( P > 0.05)。免疫荧光染色检测结果示实验组和对照组α-SMA的表达趋势与蛋白质印迹法检测结果一致。 结论:制备的UDM去除了细胞成分,且很好地保留了胶原结构和生物活性成分;UDM涂层可促进cADMSCs向平滑肌细胞分化。
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编辑人员丨2天前
