目的:探讨轴突生长抑制因子(Nogo)-少突胶质细胞髓鞘糖蛋白(Omgp)/Ras同源基因(Rho)-Rho相关螺旋卷曲蛋白激酶(Rock)信号通路在一氧化碳(CO)中毒急性脑损伤中的作用，以及Rock抑制剂盐酸法舒地尔对其治疗的可行性。方法:将135只健康雄性SD大鼠按随机数字表法分为正常对照组、CO中毒组和盐酸法舒地尔组，每组45只。后2组大鼠采用高压氧舱吸入法建立急性重症CO中毒模型。各组大鼠均接受高压氧治疗2周，其中盐酸法舒地尔组大鼠同时给予腹腔注射盐酸法舒地尔[15 mg/(kg·d)，1次/d，共2周]，CO中毒组和正常对照组大鼠给予相同体积的生理盐水注射。于造模后1周时应用透射电镜观察各组大鼠海马组织超微结构的改变，于造模后1 d、1周、1个月、2个月时采用免疫组化染色或免疫荧光染色检测各组大鼠脑组织中Nogo、OMgp及Rock阳性细胞染色强度，采用Western blotting检测各组大鼠脑组织中Nogo、OMgp及Rock蛋白的表达水平。结果:CO中毒组大鼠海马组织超微结构及血脑屏障损伤明显，以细胞核、线粒体及突触结构改变显著，而盐酸法舒地尔治疗能有效地维持海马组织超微结构及功能的完整性，减轻脑水肿。造模后1 d、1周、1个月、2个月时，CO中毒组大鼠脑组织中Nogo、OMgp、Rock阳性细胞染色强度及Nogo、OMgp、Rock蛋白表达水平均明显高于同一时间点的正常对照组，盐酸法舒地尔组大鼠脑组织中Nogo、OMgp、Rock阳性细胞染色强度及Nogo、OMgp、Rock蛋白表达水平均明显低于同一时间点的CO中毒组，差异均有统计学意义( P<0.05)。 结论:Nogo-OMgp/Rho-Rock信号通路相关分子的激活与CO中毒急性脑损伤密切相关，而盐酸法舒地尔能有效下调Nogo、OMgp和Rock蛋白的表达水平，从而明显减轻CO中毒后脑损伤程度。

钙化性主动脉瓣疾病（CAVD）是常见的心脏瓣膜病，目前唯一有效的治疗方法是主动脉瓣置换术，但围手术期和长期死亡率仍居高不下。主动脉瓣暴露于复杂的机械环境中，异常血流动力学在主动脉瓣钙化的疾病进程中发挥重要作用。Rho A/ROCK作为一机械敏感通路，与CAVD的起始及进展阶段均密切相关。该文对Rho A/ROCK信号通路在主动脉瓣钙化各阶段中发挥的病理生理作用作一综述。

目的:评价Rho亚家族蛋白A(RhoA)/Rho相关的卷曲连接蛋白激酶2(ROCK2)信号通路在三叶苷减轻大鼠脑缺血再灌注损伤中的作用。方法:清洁级健康雄性SD大鼠80只，6~8周龄，体重230~280 g，采用随机数字表法分为4组( n＝20)：假手术组(S组)、脑缺血再灌注组(IR组)、脑缺血再灌注+三叶苷组(T组)和脑缺血再灌注+三叶苷+RhoA/ROCK2信号通路激动剂AA组(A组)。采用大脑中动脉栓塞法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型。T组和A组大鼠于缺血前3 d给予三叶苷15 mg/kg灌胃，2次/d，连续3 d，A组大鼠于每次灌胃前腹腔注射RhoA/ROCK2信号通路激动剂AA 10 mg/kg。于再灌注24 h时行神经行为学评分，随后处死大鼠取海马组织，采用流式细胞术检测海马神经元凋亡率，TTC染色确定脑梗死体积，采用Western blot法检测磷酸化RhoA(p-RhoA)、ROCK2和裂解的caspase-3(cleaved caspase-3)的表达，透射电镜下观察海马神经元超微结构。 结果:与S组比较，IR组大鼠神经行为学评分和海马神经元凋亡率升高，脑梗死体积增加，p-RhoA、ROCK2和cleaved caspase-3表达上调( P<0.05)，海马神经元病理学损伤加重；与IR组比较，T组大鼠神经行为学评分和海马神经元凋亡率降低，脑梗死体积减少，p-RhoA、ROCK2和cleaved caspase-3表达下调( P<0.05)，海马神经元病理学损伤减轻；与T组比较，A组大鼠神经行为学评分和海马神经元凋亡率升高，脑梗死体积增加，p-RhoA、ROCK2和cleaved caspase-3表达上调( P<0.05)，海马神经元病理学损伤加重。 结论:RhoA/ROCK2信号通路参与了三叶苷减轻大鼠脑缺血再灌注损伤的过程，可能与抑制海马神经元凋亡有关。

目的:探讨过表达破骨细胞刺激性转膜蛋白（osteoclast stimulatory transmembrane protein，OC-STAMP）对上皮-间质转化的作用及机制。方法:于2021年4月，将小鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞MLE-12细胞分为过表达对照组（NC组）、 Ocstamp过表达组（over- Ocstamp组）、法舒地尔（Fasudil）干预组（over- Ocstamp+Fasudil组）、沉默对照组（si-NC组）、 Ocstamp沉默组（si- Ocstamp组）。采用蛋白免疫印迹（Western blotting）法、免疫细胞化学染色法检测OC-STAMP、上皮标志蛋白E-钙黏蛋白（E-cadherin，E-cad）、间质标志蛋白α-平滑肌肌动蛋白（α-smooth muscle actin，α-SMA）、Ras基因家族成员A（Ras homolog gene family member A，RhoA）、Rho GDP解离抑制因子α（Rho GDP dissociation inhibitor α，Rho GDIα）、Rho相关蛋白激酶（Rho-associated protein kinase，ROCK）、磷酸化肌球蛋白磷酸酶（phosphate myosin phosphatase，p-MYPT）蛋白表达，采用鬼笔环肽法检测细胞骨架肌动蛋白（filamentous actin，f-actin）的变化。采用 t检验比较两组间各蛋白的相对表达量。 结果:Western blotting及免疫细胞化学染色法结果显示，与NC组比较，over- Ocstamp组E-cad蛋白表达下调，α-SMA、Rho GDIα、RhoA、ROCK、p-MYPT蛋白表达增加，F-actin表达增强，差异均有统计学意义（ P<0.05）；与si-NC组比较，si- Ocstamp组E-cad和α-SMA蛋白表达差异均无统计学意义（ P>0.05）；与over- Ocstamp组比较，over- Ocstamp+Fasudil组E-cad蛋白表达上调，α-SMA、Rho GDIα、RhoA、ROCK、p-MYPT蛋白表达下降，F-actin表达减弱，差异均有统计学意义（ P<0.05）。 结论:肺泡Ⅱ型上皮细胞过表达OC-STAMP，可能通过激活Rho GDIα/RhoA/ROCK信号通路，诱导肌动蛋白细胞骨架重塑，进而促进上皮-间质转化。

目的:探讨法舒地尔通过Rho/ROCK信号通路调控转化生长因子TGF-β1(TGF-β1)诱导的尿道瘢痕成纤维细胞表型转化及细胞外基质合成的机制。方法:体外分离培养人尿道瘢痕组织来源成纤维细胞，将其分为对照组、TGF-β1诱导模型组及法舒地尔组；采用CCK-8测定各组细胞的增殖情况，采用ELISA法测定细胞分泌Ⅲ型胶原蛋白(Col Ⅲ)及纤维结合素蛋白(FN)的表达情况，采用Western blot法检测Rho相关蛋白激酶1、2(ROCK-1、ROCK-2)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达情况。再用梯度浓度法舒地尔处理TGF-β1诱导的尿道瘢痕成纤维细胞模型，采用同样方法检测评估尿道瘢痕成纤维细胞表型转化及细胞外基质合成情况。结果:TGF-β1诱导的细胞培养液随着TGF-β1浓度增加作用时间延长，其增殖活性增高，且5和10 ng/mL TGF-β1诱导的细胞增殖率均显著高于0 ng/mL(均 P<0.01)。Col Ⅲ、FN含量随TGF-β1浓度和作用时间的增加而增高，与浓度、时间呈相关性(均 P<0.01)。12.5、25.0、50.0 μmol /L法舒地尔组的活细胞增殖减少。各组细胞的Col Ⅲ、FN含量随法舒地尔的浓度增加而降低，与浓度、时间有相关性(均 P<0.01)。随着不同浓度法舒地尔梯度干预后，细胞中ROCK-1、ROCK-2、α-SMA表达逐步降低(均 P<0.01)。 结论:TGF-β1可体外诱导人尿道瘢痕成纤维细胞表型转化及细胞外基质过度合成；法舒地尔可通过下调ROCK-1、ROCK-2、α-SMA的表达水平，从而抑制尿道瘢痕成纤维细胞的表型转化，降低细胞外基质Col Ⅲ及FN的分泌。

目的:探究miR-451通过调控Rho/ROCK1信号通路对乳腺癌细胞糖酵解及凋亡的影响。方法:将乳腺癌MCF7细胞分为乳腺癌细胞（BC）组、乳腺癌细胞+miR-451-NC（MN）组、乳腺癌细胞+miR-451 inhibitor（MI）组、乳腺癌细胞+miR-451 mimic（MM）组、乳腺癌细胞+溶血磷脂酸（BL）组、乳腺癌细胞+法舒地尔（BF）组、乳腺癌细胞+miR-451 mimic+法舒地尔（MF）组。用葡萄糖摄取检测试剂盒和乳酸检测试剂盒检测细胞糖酵解，DAPI染色法检测细胞凋亡，蛋白质印迹法检测Rho/ROCK1通路蛋白表达，双荧光素酶报告实验证实miR-451和Rho/ROCK1的相互作用。结果:BC组、MN组、MI组、MM组细胞葡萄糖摄取量分别为（14.22±2.36）×10 5 mg/h、（14.20±2.37）×10 5 mg/h、（21.55±2.43）×10 5 mg/h、（6.19±1.34）×10 5 mg/h（ F=5.30， P<0.001），乳酸生成量分别为（1.52±0.21）×10 5 μg/h、（1.53±0.22）×10 5 μg/h、（2.05±0.32）×10 5 μg/h、（0.54±0.12）×10 5 μg/h（ F=3.28， P=0.008），凋亡率分别为（10.13±1.35）%、（10.16±1.37）%、（5.36±1.24）%、（28.47±2.56）%（ F=6.36， P<0.001），Rho蛋白相对表达量分别为2.31±0.46、2.32±0.41、2.95±0.35、1.05±0.25（ F=2.86， P=0.017），ROCK1蛋白相对表达量分别为2.51±0.41、2.52±0.42、3.05±0.33、1.15±0.13（ F=2.43， P=0.035），MN组和MI组、MN组和MM组、MI组和MM组间差异均有统计学意义（均 P<0.05）。BC组、BL组、BF组细胞葡萄糖摄取量分别为（14.22±2.36）×10 5 mg/h、（21.54±2.40）×10 5 mg/h、（6.20±1.35）×10 5 mg/h（ F=5.33， P<0.001），乳酸生成量分别为（1.52±0.21）×10 5 μg/h、（2.01±0.30）×10 5 μg/h、（0.55±0.12）×10 5 μg/h（ F=3.28， P=0.008），凋亡率分别为（10.13±1.35）%、（5.34±1.22）%、（28.44±2.54）%（ F=6.45， P<0.001），Rho蛋白相对表达量分别为2.31±0.46、2.94±0.45、1.01±0.24（ F=2.40， P=0.037），ROCK1蛋白相对表达量分别为2.51±0.41、3.08±0.42、1.13±0.12（ F=2.38， P=0.039），3组间两两比较差异均有统计学意义（均 P<0.05）。MF组细胞葡萄糖摄取量为（3.21±0.89）×10 5 mg/h，乳酸生成量为（0.33±0.04）×10 5 μg/h，凋亡率为（38.01±2.87）%，Rho蛋白相对表达量为0.55±0.14，ROCK1蛋白相对表达量为0.51±0.10，MM组、BF组、MF组3组间差异均有统计学意义（ F=4.53， P=0.001； F=4.26， P=0.002； F=6.12， P<0.001； F=4.06， P=0.002； F=9.72， P<0.001），MF组与BF组间差异均有统计学意义（均 P<0.05）。双荧光素酶报告结果显示，转染miR-451后可显著降低ROCK1-3′-UTR-WT的荧光素酶活性（0.59±0.03比1.01±0.05， t=17.64， P<0.001），但对突变基因无显著影响（1.01±0.07比1.02±0.04， t=0.30， P=0.767）。 结论:过表达miR-451可显著抑制乳腺癌细胞糖酵解，并促进乳腺癌细胞凋亡，其机制可能与抑制Rho/ROCK1信号通路有关。

目的:探讨Rho激酶抑制剂对脓毒症大鼠肠损伤的影响及其可能机制。方法:将32只成年雄性SD大鼠按随机数字表法分为假手术组（Sham组）、Rho激酶抑制剂Y-27632对照组（Y+Sham组）、脓毒症模型组〔盲肠结扎穿孔术（CLP）组〕及Y-27632预处理组（Y+CLP组），每组8只。采用CLP法制备大鼠脓毒症模型；Sham组和Y+Sham组只游离拨动盲肠、不进行结扎穿孔。Y+Sham组和Y+CLP组大鼠于术前15 min腹腔注射Y-27632溶液5 mg/kg进行预处理；Sham组及CLP组大鼠则腹腔注射等量磷酸盐缓冲液（PBS）。于术后24 h取大鼠心脏血，采用酶联免疫吸附试验（ELISA）测定血清二胺氧化酶（DAO）含量。收集小肠组织，苏木素-伊红（HE）染色后，光镜下观察肠组织病理学变化，并进行肠黏膜损伤评分（Chiu's评分）；采用免疫组化法检测肠组织Rho相关卷曲螺旋激酶1（ROCK1）和核转录因子-κB（NF-κB）阳性表达；采用ELISA法检测肠组织肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白细胞介素-10（IL-10）的含量。结果:Sham组和Y+Sham组肠组织结构完整，黏膜纤毛排列整齐；与Sham组相比，CLP组肠道黏膜纤毛排列紊乱，大量炎症细胞浸润，Chiu's评分显著升高（分：3.83±0.27比0.12±0.11， P<0.05），说明大鼠发生了脓毒症肠损伤；与CLP组相比，Y+CLP组大鼠肠上皮细胞坏死程度减轻，可见少量炎症细胞浸润，Chiu's评分显著降低（分：2.85±0.21比3.83±0.27， P<0.05），说明Y-27632预处理可以减轻脓毒症大鼠肠损伤。与Sham组相比，CLP组肠组织ROCK1和NF-κB阳性表达、血清DAO及肠组织TNF-α含量显著增加〔ROCK1表达（ A值）：0.19（0.18，0.22）比0.10（0.09，0.11），NF-κB表达（ A值）：0.40±0.02比0.15±0.01，DAO（ng/L）：287.81±23.31比144.92±17.72，TNF-α（ng/L）：101.08±5.62比74.81±5.56，均 P<0.05〕，而肠组织IL-10含量显著降低（μg/L：55.16±5.20比95.95±7.53， P<0.05）；与CLP组相比，Y+CLP组肠组织ROCK1和NF-κB的阳性表达、血清DAO及肠组织TNF-α的含量均显著降低〔ROCK1表达（ A值）：0.15（0.13，0.18）比0.19（0.18，0.22），NF-κB表达（ A值）：0.28±0.01比0.40±0.02，DAO（ng/L）：243.34±19.76比287.81±23.31，TNF-α（ng/L）：90.41±8.79比101.08±5.62，均 P<0.05〕，而肠组织IL-10的含量则显著增加（μg/L：66.15±5.74比55.16±5.20， P<0.05），说明Y-27632预处理对脓毒症肠损伤大鼠的保护作用可能与调节RhoA/ROCK1/NF-κB信号通路有关。 结论:Rho激酶抑制剂可以减轻脓毒症大鼠肠损伤，其机制可能与抑制肠道RhoA/ROCK1/NF-κB信号通路，减轻肠道炎症反应有关。

目的:探索微小RNA(miR)-340-5p在胰腺导管腺癌细胞(PDAC)中表达及影响其生物学行为的机制。方法:实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测40例胰腺导管腺癌与正常细胞中miR-340-5p的表达，研究其表达水平与临床特征之间的联系。检测不同胰腺导管腺癌细胞及人胰腺导管上皮细胞中miR-340-5p水平。miR-340-5p模拟物转染PDAC细胞株PANC-1；甲基噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞增殖活性；划痕实验、Transwell侵袭实验检测细胞侵袭迁移能力。RT-qPCR及蛋白质印迹法(Western blot)检测N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达。双荧光素酶报告基因分析实验检测miR-340-5p对RhoA的调控功能。结果:PDAC组织中miR-340-5p水平低于正常胰腺组织(0.362 4±0.083 7、0.965 2±0.129 9， t＝21.272， P<0.01)；PDAC中miR-340-5p表达降低与胰腺癌淋巴结转移( χ2＝7.782， P<0.01)、肝转移( χ2＝17.109， P<0.01)有相关。双荧光素酶报告基因分析结果表明，野生型RhoA的荧光素酶活性在转染miR-340-5p模拟物后低于对照组(0.992 5±0.099 8比0.177 5±0.019 0， t＝18.496， P<0.01)。转染后，转染组细胞增殖活性降低(0.505 2±0.077 1比1.031 0±0.069 1、1.029 5±0.113 5， t＝38.012、7.637， P<0.01、迁移距离减少(0.753 3±0.050 1、0.725 0±0.071 5比0.338 3±0.087 7， t＝11.098、7.031， P<0.01)、迁移细胞数减少(57.000 0±4.290 0、52.666 7±5.785 0比19.833 3±2.994 0， P<0.01)。Western blot及RT-qPCR结果显示，与空白对照组(NC)及阴性对照组(Scramble)比较，miR-340-5p模拟物转染组N-cadherin(1.048 3±0.076 9、1.040 7±0.079 2比0.457 3±0.074 5， t＝11.800、11.585， P<0.01)、Vimentin(1.045 3±0.062 8、0.993 3±0.068 6比0.521 7±0.057 9， t＝10.982、9.585， P<0.05)、MMP-9(1.047 0±0.069 6、1.154 3±0.101 1比0.560 3±0.457 1， t＝32.803、18.559， P<0.01)表达显著降低，E-cadherin(1.053 3±0.100 3、0.987 7±0.083 4比1.976 0±0.154 2， t＝－29.502、－24.203， P<0.01)表达升高。 结论:胰腺导管腺癌中miR-340-5p表达降低，过表达miR-340-5p后能明显抑制PANC-1细胞的体外增殖和转移。其对RhoA信号通路介导的上皮-间充质转化(EMT)进程具有潜在抑制作用。

目的:探讨成纤维细胞生长因子10(FGF10)对神经元损伤的保护作用及其潜在的分子机制。方法:剥离新生SD乳鼠的脑组织并提取其中的皮层神经元，将其种植于含L-多聚赖氨酸的孔板上进行培养，并分为正常组、髓鞘碎片组和髓鞘碎片+FGF10组，其中髓鞘碎片组神经元在培养4 h后添加一定含量的髓鞘碎片溶液(终浓度为10 μg/mL)，而髓鞘碎片+FGF10组神经元同时在培养基内添加髓鞘碎片和FGF10溶液(终浓度为4.3 nmol/L)。培养1周后，应用TUNEL染色、流式细胞术检测各组神经元的凋亡情况，应用活/死细胞染色、CCK-8法检测各组神经元的生存情况，应用Western blotting、免疫荧光双标染色检测各组神经元内凋亡相关蛋白、微管相关蛋白和RAS同源基因家族成员A(Rho A)/Rho A相关蛋白激酶(ROCK)信号通路相关蛋白的表达。结果:与正常组相比，髓鞘碎片组中TUNEL染色所示神经元凋亡率明显升高，流式细胞术所示早期神经元凋亡率明显升高，活化半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)蛋白表达明显升高，Bcl-2/Bax值明显降低，活/死细胞染色所示神经元死亡率明显升高，CCK-8法所示神经元生存率明显降低，乙酰化微管蛋白/酪氨酸微管蛋白(Ace/Tyr-tubulin)值明显降低，Tau蛋白表达明显降低，Ace/Tyr-tubulin荧光强度比值明显降低，Rho A、ROCK蛋白表达明显升高，Rho A荧光强度值明显升高，差异均有统计学意义( P<0.05)。与髓鞘碎片组相比，髓鞘碎片+FGF10组中TUNEL染色所示神经元凋亡率明显降低，流式细胞术所示早期神经元凋亡率明显降低，活化caspase-3蛋白表达明显降低，Bcl-2/Bax值明显升高，活/死细胞染色所示神经元死亡率明显降低，CCK-8法所示神经元生存率明显升高，Ace/Tyr-tubulin值明显升高，Tau蛋白表达明显升高，Ace/Tyr-tubulin荧光强度比值明显升高，Rho A、ROCK蛋白表达明显降低，Rho A荧光强度值明显降低，差异均有统计学意义( P<0.05)。 结论:FGF10可能通过抑制Rho A/ROCK信号通路进而促进神经元内微管稳定，从而对抗神经元在髓鞘碎片环境下发生的凋亡并提高其生存率。

急性一氧化碳中毒迟发性脑病（DEACMP）是急性一氧化碳中毒经救治恢复至正常后，逐渐出现的脑神经功能障碍，表现为智力障碍、锥体外系症状。本文介绍DEACMP和Rho/ROCK信号通路，并分析了DEACMP的病理生理机制与Rho/ROCK信号通路相关研究进展。Rho/ROCK通路在介导脑缺氧、细胞凋亡、免疫调节反应、氧自由基、神经细胞损伤等DEACMP发病机制中具有重要的作用，值得进一步深入研究。