目的:评价胰高血糖素样肽-1受体(GLP-1R)信号通路在七氟烷后处理减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤中的作用。方法:SPF级健康雄性SD大鼠80只，8~10周龄，体重300~340 g，采用随机数字表法分为4组( n＝20)：假手术组(S组)、心肌缺血再灌注组(I/R组)、心肌缺血再灌注+七氟烷后处理组(ISP组)、心肌缺血再灌注+七氟烷后处理+GLP-1R拮抗剂组(ISPE组)。采用结扎冠状动脉左前降支40 min、再灌注2 h的方法制备大鼠心肌缺血再灌注损伤模型。ISP组于再灌注即刻吸入2.4%七氟烷15 min；ISPE组于造模前28 d时开始，腹腔注射GLP-1R拮抗剂Exendin9-39 50 μg/kg(溶于1 ml 0.9%生理盐水中)，1次/d，并于吸入七氟烷前40 min时最后腹腔注射1次，其余处理同ISP组。再灌注结束即刻采集腹主动脉血样，检测血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)和乳酸脱氢酶(LDH)水平；然后处死大鼠取心脏，采用HE染色法于光镜下观察心肌组织病理学结果，透射电镜下观察心肌细胞超微结构；TTC染色法测定心肌梗死体积，免疫组化染色法检测心肌GLP-1R表达；Western blot法检测心肌GLP-1R、环磷酸腺苷(cAMP)、蛋白激酶A(PKA)、环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(CREB)、磷酸化CREB(p-CREB)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)和Bcl-2相关x蛋白(Bax)的表达，并计算p-CREB/CREB比值和Bcl-2/Bax比值。 结果:与S组比较，I/R组血清CK-MB和LDH水平升高，心肌梗死体积百分比升高，心肌组织GLP-1R表达上调，cAMP和PKA表达下调，p-CREB/CREB比值和Bcl-2/Bax比值降低( P<0.05)；与I/R组比较，ISP组血清CK-MB和LDH水平降低，心肌梗死体积百分比降低，心肌组织GLP-1R、cAMP和PKA表达上调，p-CREB/CREB比值和Bcl-2/Bax比值升高( P<0.05)；与ISP组比较，ISPE组血清CK-MB和LDH水平升高，心肌梗死体积百分比升高，心肌组织GLP-1R、cAMP和PKA表达下调，p-CREB/CREB比值和Bcl-2/Bax比值降低( P<0.05)。 结论:七氟烷后处理可通过激活GLP-1R信号通路，抑制心肌细胞凋亡，减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤。

基于GLP-1R/cAMP/PKA/CREB探讨泽泻汤(Zexie Decoction,ZXD)体内外促进白色脂肪棕色化/激活棕色脂肪的作用机制.西式饮食(western diet,WD)诱导高脂血症小鼠模型,设置对照组,WD组(模型组),ZXD低、中、高剂量组;体外诱导3T3-L1 细胞成脂分化模型,以毛喉素(forskolin,FSK)作为阳性对照,设置ZXD低、中、高剂量组.免疫组化与免疫荧光结果提示,与WD组相比,泽泻汤促进白色和棕色脂肪组织中UCP1 表达;同时泽泻汤上调了细胞中UCP1、CPT1β、PPARα等基因;Western blot检测PGC-1α、UCP1、PPARα的蛋白表达也表现出随泽泻汤剂量依赖性升高,表明泽泻汤促进白色脂肪棕色化/激活棕色脂肪.苏木素-伊红(HE)染色结果显示,相较于WD组,泽泻汤处理后,白色和棕色脂肪细胞明显缩小,ATGL、HSL、MGL、PLIN1 的mRNA表达显著上调;油红O染色和生化试剂盒检测细胞TC、TG水平均提示泽泻汤改善脂质蓄积,促进脂肪分解.p-CREB免疫组化和免疫荧光发现,泽泻汤处理逆转了WD导致的p-CREB表达降低;在泽泻汤的体外干预下,CREB、p-CREB、p-PKA substrate的蛋白表达均明显增加,CREB的mRNA水平增加;ELISA检测发现泽泻汤增加细胞内cAMP浓度;分子对接分析结果显示泽泻、白术中多个活性成分可与GLP-1R形成氢键稳定结合.综上所述,泽泻汤在体内外均能促进白色脂肪棕色化/激活棕色脂肪,其作用机制可能与GLP-1R/cAMP/PKA/CREB通路有关.

目的 探讨西格列汀对2型糖尿病(T2DM)大鼠胰岛素分泌的影响.方法 SD大鼠60只随机分为三组,每组20只.正常对照组采用基础饲料喂养,模型对照组和西格列汀组采用高糖、高脂饲料喂养.喂养8周后,模型对照组和西格列汀组予腹腔注射链脲佐菌素40mg/kg建立T2DM大鼠模型.西格列汀组予西格列汀30 mg·kg-1·d-1连续灌胃治疗4周,正常对照组和模型对照组予等容量生理盐水灌胃.比较各组大鼠TC、TG、FBG、FIns水平和HOMA-IR;免疫组化染色观察大鼠胰岛素的分泌情况;实时荧光定量PCR法检测大鼠胰腺组织胰高血糖素样肽1受体(GLP-1R)、环磷酸腺苷(cAMP)、蛋白激酶A(PKA)、cAMP反应元件结合蛋白(CREB)、胰十二指肠同源盒1(PDX-1)和胰岛素mRNA表达;Western blot法检测大鼠GLP-1R、cAMP、PKA、磷酸化PKA、CREB、磷酸化CREB、PDX-1和胰岛素蛋白表达.结果 与正常对照组相比,模型对照组TC、TG、FBG、FIns水平和HOMA-IR升高,胰岛素阳性表达面积减少,GLP-1R、cAMP、PKA、CREB、PDX-1和胰岛素mRNA表达下调,GLP-1R、cAMP、磷酸化PKA、磷酸化CREB、PDX-1和胰岛素蛋白表达下调(P＜0.01).与模型对照组相比,西格列汀组TC、TG、FBG、FIns水平和HOMA-IR降低,胰岛素阳性表达面积增加,GLP-1R、cAMP、PKA、CREB、PDX-1和胰岛素mRNA表达上调,GLP-1R、cAMP、磷酸化PKA、磷酸化CREB、PDX-1和胰岛素蛋白表达上调(P＜0.05或P＜0.01).结论 西格列汀能改善T2DM大鼠分泌胰岛素,其机制可能与上调GLP-1R/cAMP信号通路有关.