目的:探讨自然杀伤细胞免疫球蛋白样受体（KIR）与人类白细胞抗原（HLA）受配体模式对血液病患者单份非血缘脐血移植（sUCBT）预后的影响。方法:回顾性分析2012年7月至2018年6月270例接受sUCBT的血液病患者。移植前脐血及患者均进行HLA12个位点高分辨配型，选择移植物（脐血）的KIR均同时表达2DL1和2DL2/2DL3抑制性基因，根据患者KIR配体情况分为缺失组（C1/C1或C2/C2）和无缺失组（C1/C2）。结果:270例血液病患者中男146例（54.1%），女124例（45.9%），中位年龄13（1~62）岁；缺失组174例（64.4%），无缺失组96例（35.6%）。全部患者均采用不含抗胸腺细胞球蛋白（ATG）清髓性预处理方案。缺失组、无缺失组粒细胞植入率均为98.9%（172/174、95/96），中位植入时间分别为16（10~41）d、17（11~33）d（ P=0.705）；血小板植入率分别为88.5%（154/174）、87.5%（84/96），中位植入时间分别为35（11~113）d、38.5（13~96）d（ P=0.317）；缺失组、无缺失组Ⅱ~Ⅳ级急性GVHD发生率分别为38.7%（95% CI 31.4%~45.9%）、50.0%（95% CI 39.6%~59.6%）（ P=0.075），多因素分析显示KIR配体缺失是影响Ⅱ~Ⅳ度急性GVHD发生的独立保护性因素（ P=0.036）。移植后3年累积复发率分别为17.7%（95% CI 11.7%~24.9%）、22.7%（95% CI 14.4%~32.2%）（ P=0.288）。中位随访时间742（335~2 512）d，缺失组、无缺失组3年总生存率分别为72.1%（95% CI 64.1%~78.6%）、60.5%（95% CI 47.9%~69.2%）（ χ2=3.629， P=0.079），3年无病生存率分别为64.9%（95% CI 56.2%~72.3%）、55.4%（95% CI 44.4%~65.0%）（ χ2=3.027， P=0.082），移植后180 d非复发死亡率分别为12.1%（95% CI 7.7%~17.4%）、16.7%（95% CI 10.0%~24.8%）（ P=0.328）。 结论:在不含ATG清髓性预处理sUCBT血液病治疗体系中，缺失抑制性KIR配体患者移植后急性GVHD发生率更低。

目的:应用cDNA分子克隆测序方法，鉴定中国南方汉族1个 KIR3DL3新等位基因。 方法:采集1例 KIR3DL3基因测序结果异常的无偿志愿捐血者的外周血样，提取mRNA并逆转录为cDNA。设计1对具有 KIR3DL3基因特异性的PCR引物对cDNA进行扩增，扩增产物纯化后进行分子克隆测序。 结果:经分子克隆测序，检出1个正常的 KIR3DL3*00802等位基因和1个 KIR3DL3*064新变异等位基因。 KIR3DL3*064与 KIR3DL3*00601等位基因的序列最为接近，仅有编码区存在nt1184 C>T错义变异，导致第9外显子中的第374密码子由ACT变为ATT，所编码的苏氨酸(Thr)变为异亮氨酸(Ile)。该等位基因被世界卫生组织HLA因子命名委员会KIR分委会正式命名为 KIR3DL3*064。 结论:cDNA分子克隆测序法能够鉴别常规测序分型中的异常结果，可用于鉴定 KIR3DL3新等位基因。

目的:探讨杀伤细胞免疫球蛋白受体(killer cell immunoglobulin receptor，KIR)基因多态性与烟台地区汉族无偿献血女性妊娠遗传易感性关系及与妊娠女性免疫球蛋白G ( immunoglobulin G，IgG )抗A(B)抗体效价的相关性。方法:收集2016年1月至2016年12月烟台地区无偿献血女性外周血样本，随访样本2017年1月至2018年12月间妊娠状态，分为妊娠组(160例)和未妊娠组(126例)。通过聚合酶链反应-序列特异性引物(polymerase chain reaction-sequence specific primer，PCR-SSP)法进行KIR基因分型。微柱凝胶法检测妊娠女性血清中其血清IgG抗A(B)抗体的效价。统计分析KIR基因频率及单倍型与妊娠遗传易感性的关系，以及与妊娠女性IgG抗A(B)抗体效价的关系。结果:在KIR基因水平，与未妊娠对照组比较，妊娠组KIR2DL5A基因频率高(48.1%比33.3%， χ2＝6.348， P<0.05)，而KIR3DL1、KIR2DS4*FUL基因频率低(86.3%比93.7%，66.9%比80.2%， χ2值分别为4.112和6.271， P值均<0.05)，差异有统计学意义。在KIR单倍型水平，与未妊娠对照组比较，妊娠组单倍型A比例低，而单倍型B比例高(41.3%比56.4%，58.8%比43.7%， χ2值均为6.440， P值均<0.05)，差异有统计学意义。KIR2DL2、KIR2DL5A、KIR2DL5B、KIR2DS1、KIR2DS2、KIR2DS4*DEL、KIR2DS5、KIR3DS1、KIR3DP1*FUL在血清IgG抗A(B)抗体低效价组(<64)基因频率高于高抗体效价组(≥64)(20.9%比5.4%，60.5%比33.8%，15.1%比5.4%，62.8%比37.8%，25.6%比5.4%，55.8%比33.8%，48.8%比20.3%，60.5%比33.8%，23.3%比4.1%， χ2值分别为8.084，11.342，3.950，9.912，11.897，7.781，14.154，11.342，11.915， P值均<0.05)，而KIR2DS4*FUL基因频率在低效价组低于高效价组(51.2%比85.1%, χ2＝20.722， P<0.05)，差异有统计学意义。在KIR单倍型水平，单倍型A在低抗体效价组的比例低于高抗体效价组(18.6%比55.4%， χ2＝23.488， P<0.05)，而单倍型B在低抗体效价组比例高于高抗体效价组(81.4%比44.6%, χ2＝23.488， P<0.05)。 结论:KIR基因频率及单倍型与烟台地区汉族无偿献血女性妊娠及妊娠后IgG抗A(B)抗体效价相关，可为妊娠的遗传易感性和ABO系统新生儿溶血病的遗传筛查提供了新的方向。

目的:探讨供体特异性抗人类白细胞抗原抗体（DSA）和杀伤细胞免疫球蛋白样受体（KIR）对异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）治疗的急性髓系白血病（AML）预后的影响。方法:回顾性分析10例接受过allo-HSCT的AML患者资料，总结患者KIR3DL1、DSA检测结果，分析不同KIR3DL1、DSA基因水平患者allo-HSCT后造血免疫重建、移植物抗宿主病（GVHD）等方面的差异。结果:移植前供者预存DSA阳性的7例患者allo-HSCT后均未获得造血免疫重建，移植前供者预存DSA阴性的3例患者allo-HSCT后均获得造血免疫重建。供者预存DSA阳性的7例患者移植后均发生GVHD，预存DSA阴性3例患者中2例发生GVHD；供者预存KIR3DL1阳性的7例患者中1例发生GVHD，预存KIR3DL1阴性的3例患者中2例发生GVHD。结论:移植前供者预存DSA阳性的AML患者allo-HSCT后造血重建延迟，易发生GVHD，而移植前供者预存KIR3DL1阳性的AML患者allo-HSCT后较少发生GVHD。

目的:探讨烟台地区汉族无偿献血人群杀伤细胞免疫球蛋白受体(killer cell immunoglobulin receptor，KIR)基因多态性及基因型的特征。方法:收集2019年6月至2019年12月烟台市中心血站检测合格的无偿献血者外周血样本95例，采用聚合酶链反应序列特异性引物(polymerase chain reaction-sequence specific primer，PCR-SSP)对入组人群进行KIR基因低分辨率检测和基因型分析，统计分析KIR基因频率特点，并与其它地区汉族人群KIR基因分布进行比较。结果:在KIR基因水平，目前已知的16个KIR基因均在烟台汉族无偿献血人群中检出，2DL1、2DL3、2DL4、3DL2、3DL3、2DP1和3DP1基因存在于所有个体中，3DL1、2DS4、2DL5、2DS1、3DS1、2DS5基因频率较高，而2DL2、2DS2、2DS3基因频率较低。在KIR基因水平，烟台汉族无偿献血人群与其他地区汉族人群KIR基因分布比较，2DL3、2DS1在烟台汉族无偿献血人群基因频率高于吉林汉族人群(100.00%比95.92% ，49.47%比34.69%)，差异有统计学意义( χ2值分别为3.960、4.327， P值分别为0.047、0.038)；2DS1、2DS5在烟台汉族无偿献血人群基因频率高于河北汉族人群(49.47%比36.46，40.00%比25.35%)，差异有统计学意义( χ2值分别为5.056、7.452， P值分别为0.025、0.006)；2DL1、2DL5、2DS1、2DS5、3DS1、2DP1在烟台汉族无偿献血人群基因频率高于江西(100.00%比80.66%，50.53%比32.00%，49.47%比26.00%，40.00%比24.66%，45.26%比27.33%，100.00%比95.33%)，差异有统计学意义( χ2值分别为20.833、8.377、14.069、6.438、8.299、4.564， P值分别为0.000、0.004，0.000、0.011、0.004、0.033)；3DL1在烟台汉族无偿献血人群基因频率低于四川汉族人群(88.42%比96.50%)，差异有统计学意义( χ2＝8.945， P＝0.003)，而2DS5基因频率高于四川汉族人群(40.00%比26.57%)，差异有统计学意义( χ2＝6.131， P＝0.013)；2DL5、2DS1、2DS5在烟台汉族无偿献血人群基因频率高于浙江汉族人群(50.53%比35.58%，49.47%比33.65%，40.00%比23.08%)，差异有统计学意义( χ2值分别为4.535、5.129、6.629， P值分别为0.033，0.024，0.010)；2DL5、2DS5、3DS1在烟台汉族无偿献血人群基因频率高于云南汉族人群(50.53%比36.67%，40.00%比26.66%，45.26%比32.00%)，差异有统计学意义( χ2值分别为4.585、4.765、4.382， P值分别为0.032、0.029、0.036)，3DL1基因频率低于云南汉族人群(88.42%比95.33%)，差异有统计学意义( χ2＝4.082， P＝0.043)；2DL1、2DL3、2DL5、2DS1、2DS3、2DS5、3DS1在烟台汉族无偿献血人群基因频率高于广东汉族人群(100.00%比85.41%，100.00%比58.33%，50.53%比23.96%，49.47%比10.42%，18.95%比2.08%，40.00%比18.75%，45.26%比22.92%)，差异有统计学意义( χ2值分别为14.950、50.069、14.431、34.789、14.485、10.405、10.621， P值分别为0、0、0、0、0、0.001、0.001)，2DS2基因频率低于广东汉族人群(16.84%比30.21%)，差异有统计学意义( χ2＝4.737， P＝0.03)。其他基因分布频率在烟台与其他地域间无显著性差异；在KIR基因型水平，共发现23种基因型，其中以AF和AJ型最为常见；其次为AH、AI和NN6，另外有10种基因型C、E、I、Q、NN3、NN4、NN9、NN11、NN12、NN13频数较低。 结论:烟台地区汉族无偿献血人群有其独特的KIR基因频率和基因型分布。

目的:分析浙江汉族人群 KIR3DL2等位基因分布。 方法:基因组DNA提取采用磁珠法。应用PCR技术通过4对引物扩增 KIR3DL2基因的全长序列，利用BigDye terminator v3.1测序试剂盒对208名无血缘关系的汉族无偿献血者的全部外显子序列进行测序分析。根据 KIR3DL2基因碱基多态性指定标本基因型。 结果:在检测的208份样本中，133份的 KIR3DL2基因型为杂合子，75份的基因型为纯合子；共检出了46种基因型，常见的基因型为 KIR3DL2*00201/KIR3DL2*00201、KIR3DL2*00201/KIR3DL2*00701和 KIR3DL2*00201/KIR3DL2*01001，分别有70例、33例和23例。共检测到22个等位基因，频率较高的是 KIR3DL2*00201、KIR3DL2*00701、KIR3DL2*01001，分别为57.45%、13.46% 、9.13%。 结论:浙江汉族人群 KIR3DL2等位基因分布具有多态性。

目的:探讨中国南方汉族人群KIR-HLA系统分子遗传多态性与急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblastic leukemia, ALL)、急性髓系白血病(acute myelocytic leukemia, AML)的相关性。方法:对323份成年ALL、350份成年AML患者以及745份随机健康对照的样本，采用PCR-序列特异性引物(sequence specific primer，SSP)方法检测KIR基因，采用测序分型法进行HLA-A、-B、-C基因分型。从KIR基因、KIR基因组合型、HLAⅠ类配体、已知的KIR+HLA受-配体组合等4个方面比较各病例组与对照组分子遗传多态性的差异。结果:ALL及AML病例组中分别检出了32种、33种KIR基因组合型，与对照组中检出的35种KIR基因组合型相比，AA1在ALL组和AML组的检出频率均显著低于健康对照组(ALL组：45.79% vs. 55.30%， Pc＝0.004；AML组：48.27% vs. 55.30%， Pc＝0.030)，为急性白血病保护性因素；ALL组中2DL2及其受-配体组合2DL2+HLA-C1、2DS2及其受-配体组合2DS2+HLA-C1的检出频率均显著高于健康对照组，而2DL3基因、HLA-A3/A11配体及3DL2+HLA-A3/A11受-配体组合的检出频率均显著低于健康对照组( P<0.05)，但经过Bonferroni校正后差异显著性均丢失( Pc>0.05)；AML组2DS1和2DL5的检出频率均显著高于健康对照组，而HLA-C2配体及2DL1+HLA-C2受-配体组合的检出频率均显著低于健康对照组( P<0.05)，但经过Bonferroni校正后差异显著性均丢失( Pc>0.05)。 结论:本文获得了南方汉族KIR-HLA系统中与急性白血病相关的潜在易感或保护性因素，尤其是保护性因素AA1基因组合型，可为急性白血病发病机制和个体化免疫治疗提供新的线索及理论依据。

目的 研究血小板输注效果与KIR受配体的关联性.方法 33例HLA抗体检测阳性白血病患者与供者血小板进行交叉配型试验,选取合适供者的血小板输注,以24 h血小板校正计数指数(CCI)判定输注效果.采用PCR-SSP方法分别对患者和供者的血液标本进行KIR及配体基因分型,分析血小板输注效果和受者KIR、供者HLA配体的相关性.结果 在74次血小板输注中,输注无效42人次,输注有效32人次.供者存在C2基因、HL-BBw480T基因,受者输注血小板无效的频率分别为69.0％(29/42),52.4％(22/42),显著高于有效组25.0％(8/32),25.0％(8/32).供者存在C1基因,受者输注血小板有效的频率分别为100.0％(32/32),高于无效组83.3％(35/42).当受者-供者匹配模式为KIR2DL1-C2和KIR3DL1-(HLA-BBw4-80T)受者输注血小板发生无效的频率为69.0％(29/42)和40.5％(22/42),高于有效组的频率25％(8/32)和18.8％(6/32).当受者-供者匹配模式为KIR2DL3-C1,受者输注血小板发生有效为32例(100.0％)高于无效组35例(83.3％).受者iKIR与供者HLA配体发生错配,错配模式为KIR2DL1-C2错配,受者输注血小板有效的频率为78.1％(25/32),远高于无效组的31.0％(13/42).当错配模式为KIR3DL1-(HLA-B Bw4-80T)错配,受者血小板输注有效的频率为68.8％(22/32)高于无效组的42.9％(18/42).以上各组比较差异均具有统计学意义,P＜0.05.结论 在血小板输注中HLA-C1和HL4-C2基因是影响血小板输注效果的关键性因素,HLA-C1是血小板输注无效的保护性基因,而HLA-C2和HLA-B Bw4-80T是血小板输注无效的易感性基因,受者iKIR+供者HLA的受配体模式可能在血小板输注无效中的扮演重要作用.

目的 研究流式磁珠序列特异性寡核苷酸探针(Flow-rSSO)杂交及测序分型(PCR-SBT)方法鉴定KIR基因有无的一致性.方法 对131例汉族人群的DNA标本采用Flow-rSSO方法鉴定全部16种KIR基因的有无,并采用本实验室建立的PCR-SBT方法对14种功能性KIR基因进行高分辨水平基因检测;分析Flow-rSSO及PCR-SBT两种方法鉴定14种功能性KIR基因有无的一致性.对初检结果不一致的标本,采用同一厂家、不同批号的Flow-rSSO试剂盒进行复检,并采用序列特异性引物-PCR(PCR-SSP)方法进行检测.结果 131例标本中有129例完全一致,2例不一致,占1.5％(2/131).不一致的两例标本,1例标本3DL1基因、另1例标本2DS3及2DS5基因,其Flow-rSSO初检结果均为阴性,而PCR-SBT结果均为阳性.更换新的批号Flow-rSSO试剂盒复检,两例标本的结果均为阳性;采用PCR-SSP方法检测的结果亦为阳性.结论 经Flow-rSSO试剂盒检测KIR基因有无,出现2例标本初检结果错误,提示检测KIR基因有无时,试剂的质控工作至关重要.

目的 调查河北地区汉族人群杀伤细胞免疫球蛋白样受体(KIR)的基因频率分布情况.方法 收集河北地区无血缘关系汉族人群血液样本288份,采用PCR-SSP法检测KIR基因型,统计基因频率.结果 河北地区汉族人群中KIR框架基因2DL4、3DL2、3DL3、3DP1的基因频率均为100.00%,2DL1、2DL3、3DL1、2DS4、2DP1的频率较高,均>92.00%,而2DL2、2DS2、2DS3、2DS5的频率则较低;在河北汉族人群中共发现51种组合型,KIR组合型2DL4+3DP1+3 DL2+3DL3+2DL1+2DL3+2DP1+3DL1+2DS4所占比例最大,约为43.75%.结论 河北汉族人群中KIR基因频率与其他亚洲人群相似,不同于其他民族.KIR组合型2DL4+3DP1+3DL2+3DL3+2DL1+2DL3+2DP1+3DL1+2DS4所占比例最大.