目的:分析激素抵抗型支气管哮喘(哮喘)及普通哮喘患者外周血MIB1基因甲基化与糖皮质激素反应的相关性。方法:使用前瞻性病例对照研究。收集2017年1月至2019年1月就诊于新疆维吾尔自治区人民医院呼吸与危重症医学中心的20例激素抵抗型哮喘患者、20例普通哮喘患者及20名健康体检者的外周血进行MIB1基因CpG_1、CpG_2、CpG_3位点的甲基化率检测，分析是否存在差异。随后对激素抵抗型哮喘及普通哮喘患者的临床特征(发病年龄、体质量指数、血嗜酸粒细胞计数、血中性粒细胞计数)及CpG_1、CpG_2、CpG_3位点甲基化率进行危险因素的相关性分析。结果:3组间两两比较MIB1基因3个位点的甲基化率，差异均无统计学意义( χ2＝1.591、0.546、0.282， P值均>0.05)。二元Logistic回归分析显示CpG_1甲基化率和CpG_3甲基化率可能是哮喘患者发生激素抵抗的危险因素。激素抵抗型哮喘组与普通哮喘组间相关指标进行ROC曲线分析结果显示CpG_1甲基化率曲线下面积(AUC＝0.734，约登指数1.478)优于CpG_3甲基化率曲线下面积(AUC＝0.564，约登指数1.182)。 结论:CpG_1甲基化率及CpG_3甲基化率可能为哮喘患者发生激素抵抗的预测指标，且CpG_1甲基化率预测效能更优。

目的:探讨甲状腺透明变梁状肿瘤（HTT）的细针穿刺细胞病理学特征。方法:对5例HTT的临床、超声和细针穿刺细胞学形态进行观察，其中1例制备细胞蜡块，并行免疫组织化学检测。2例使用即时荧光定量PCR法进行BRAF V600E基因突变检测。结果:5例患者中女性4例，男性1例，发病年龄25~48岁。细针穿刺细胞涂片中可见肿瘤细胞呈放射状、梁状或巢状结构，肿瘤细胞与红染的玻璃样物质混杂。部分细胞胞质呈丝状，偶见黄色小体，细胞核圆形、卵圆形或梭形，可见多量核沟和核内假包涵体。1例细胞蜡块显示肿瘤细胞呈梁状结构，与玻璃样物质混合，细胞特征与涂片类似。Ki-67（MIB-1）免疫细胞化学染色肿瘤细胞呈特征性的膜质着色。2例使用即时荧光定量PCR法检测，均未发现BRAF V600E基因突变。结论:HTT是一种罕见的甲状腺肿瘤，细胞形态与其他甲状腺肿瘤有重叠，在细针穿刺细胞病理诊断中非常容易被误诊。正确诊断的关键在于提高对该肿瘤的细胞病理形态的认识，制备细胞蜡块并行免疫组织化学检测具有重要的辅助诊断作用。

目的 分析斑马鱼E3泛素蛋白连接酶1(MIB1)基因启动子区转录因子结合位点(TFBS),MIB1互作基因和互作蛋白的种类及其在信号通路中的作用,探讨MIB1基因的调控方式及潜在功能.方法 利用国家基因组科学数据中心(NGDC)预测非编码RNA(ncRNA),利用Alggen与AnimalTFDB在线网站预测MIB1基因TFBS种类,使用GeneMANIA与STRING分析MIB1的互作基因与互作蛋白;通过DAVID网站获取相关数据,进行基因本体(GO)可视化分析及京都基因与基因组百科全书(KEGG)代谢通路分析.结果 MIB1基因启动子区及5'非翻译区可转录出ncRNA;通过预测得到121种TFBS,并发现P53转录因子既可以结合到MIB1基因的启动子区又可与MIB1蛋白相互作用;在线预测出6种MIB1的共表达基因,筛选出20种互作基因;通过GO可视化分析发现,MIB1及其互作基因在生物过程方面具有调控细胞、组织、器官生长分化及调节NOTCH信号通路等功能,且主要在细胞质核周区、细胞膜和突触后密集区等部位被富集,具有结合NOTCH蛋白、PDZ结构域蛋白等分子功能;KEGG代谢通路分析发现,MIB1及其互作基因涉及4条代谢途径.结论 MIB1包含多种TFBS,并通过与特定转录因子的相互作用,影响细胞癌变、免疫调节等多种生物学过程.MIB1还可能通过其互作基因和互作蛋白的介导,在细胞生长调控、造血干细胞分化、胚胎发育及神经元信息的传递等方面发挥重要作用.

目的 探讨嗜铬细胞瘤/副神经节瘤(PHEO/PGL)中琥珀酸脱氢酶(SDH)B突变和核增殖指数MIB-1表达情况,以及二者作为预测恶性嗜铬细胞瘤指标的意义.方法 回顾性分析2008年8月至2016年4月收治的93例PHEO/PGL患者的临床资料,男57例,女36例.年龄34岁(8～73)岁.有高血压病史者79例,查体发现肾上腺肿瘤14例.PHEO 68例,PGL 25例.有典型高儿茶酚胺分泌症状者66例,功能静止性PHEO/PGL 27例.良性PHEO/PGL 77例,恶性PHEO/PGL16例.肿瘤位于左侧39例,右侧32例,多发22例.肿瘤直径(6.8±2.7)cm.术前24h尿儿茶酚胺测定:肾上腺素(42.6±5.1) μg/24 h,去甲肾上腺素(167.5±13.5) μg/24 h,多巴胺(246.4±71.2) μg/24 h.选取6例泌尿系统非肿瘤、非遗传性疾病患者作为对照组.所有患者留取外周血分别行SDHB、SDHAF2、SDHC、SDHD、VHL及RET基因突变检测.采用免疫组化染色法检测93例PHEO/PGL组织标本中SDHB、MIB-I、EPAS1、血管内皮生长因子-1受体(VEGF-1R)和嗜铬粒蛋白A(CgA)的表达情况.阳性颗粒状细胞质染色＞50％为强阳性(+++),11％ ～ 50％为中度阳性(++),1％ ～ 10％为弱阳性(+),＜1％为阴性(-).结果 93例PHEO/PGL患者中,SDHB、SDHAF2、SDHC、SDHD、VHL及RET基因突变27例(29.5％),其中SDHB基因突变9例,RET原癌基因突变8例,VHL基因突变3例.免疫组化染色检测示,9例SDHB基因突变者组织标本中MIB-1阳性表达7例.对照组行基因检测及MIB-1、EPAS1、CgA和VEGF-1R免疫组化染色检测均为阴性.EPAS1在PHEO/PGL中为中度阳性表达,在恶性PHEO/PGL中高表达.9例SDHB基因突变者中,7例EPAS1呈阳性染色,EPAS1阳性表达与CgA、MIB-1及VEGF-1R密切相关.结论 SDHB基因突变者常表现为PGL,9.8％的PGL与SDHB基因突变相关,其恶性危险性增加.SDHB突变者的组织标本中MIB-1表达增高,EPAS1、VEGF-1R阳性表达,与恶性PHEO/PGL侵袭和转移相关.

为了研究miRNA-195-5p在肝癌(liver hepatocellular carcinoma,LIHC)中的表达及对预后的影响,并对其潜在靶基因进行生物学信息学分析,评估miRNA-195-5p在LIHC中的临床意义和诊断价值,本文利用癌症基因组图谱(TCGA)数据库分析miRNA-195-5p在肝癌组织中的表达;利用Kaplan-Meierplotter数据库分析miR-NA-195与肝癌患者预后的相关性;利用miRWalk 2.0数据库获取预测的与实验数据支持的miRNA-195-5p的靶基因,同时采用DAVID 6.8数据库对靶基因进行GO和KEGG富集分析,以Cytoscape 3.6.1软件构建靶基因蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络并筛选PPI网络中的核心基因;通过公开访问的数据库进一步验证筛选出的核心基因.TCGA数据库分析结果显示,miRNA-195-5p在肝癌组织中的表达水平显著低于正常组织.Kaplan-Meier生存分析显示,miRNA-195低表达LIHC患者的总生存时间明显低于高表达患者.GO分析显示,miRNA-195-5p的靶基因主要显著富集到蛋白质磷酸化、RNA聚合酶II启动子转录的正调节、RNA聚合酶I1启动子转录的负调节等生物学过程.KEGG分析显示,miRNA-195-5p的靶基因显著富集于癌症相关通路.miRNA-195-5p潜在靶基因所编码蛋白质之间存在复杂的相互作用,其中POLR2A、MIB1、MAPK3、A CA CA、ASH1L以及MA P3K3是PPI网络中的核心基因.6个核心基因中,仅MA PK3的蛋白质与mRNA表达水平在LIHC组织中均显著上调.Kaplan-Meier生存分析进一步显示,MA PK3 mRNA水平升高预示LIHC患者总生存时间缩短.以上生物信息学分析结果初步表明,miRNA-195-5p表达下调在肝癌相关的生物学过程中起到重要调控作用,可能与其潜在靶基因MAPK3表达上调有关,这为肝癌的生物标志物研究提供了线索.

目的:探讨1例儿童系统性EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)阳性T细胞淋巴瘤的临床和病理特征,以加深医师对该病诊断及鉴别方法的认识.方法:综合分析1例儿童系统性EBV阳性T细胞淋巴瘤患者的临床表现、病理形态、免疫表型及基因检测结果,结合近年文献进行探讨.结果:患者为11岁男孩,表现为四肢及躯干皮疹4年余,以螨虫过敏治疗而迁延不愈.患儿近2个月反复发热,出现全身淋巴结肿大和噬血细胞综合征.淋巴结活检示小到中等大的淋巴样细胞弥漫增生;免疫组织化学检测显示,肿瘤细胞CD3(+++)、CD4(+)、TIA-1(+++)、颗粒酶B(+++)、MIB-1(80％+);EBV原位杂交示EBER(+++);T细胞受体(T cell receptor,TCR)基因克隆性重排显示TCRγ克隆性重排.患儿病理诊断为儿童系统性EBV阳性T细胞淋巴瘤.结论:儿童系统性EBV阳性T细胞淋巴瘤是一种少见的EBV感染活化的细胞毒性T细胞克隆性增殖性疾病,临床病程呈暴发性、侵袭性,常伴有噬血细胞综合征,病理需要与侵袭性自然杀伤细胞白血病/淋巴瘤、EBV感染相关淋巴增生性病变及皮肤原发性 γδT细胞淋巴瘤鉴别.

为了明确细胞增殖标记Ki-67和抗癌基因p53免疫反应性在皮肤鳞状细胞癌(CSCC)预后中的意义,作者运用单克隆抗体MIB-1(抗Ki-67)和DO-1(抗p53)免疫组化ABC法检测了160例CSCC患者175个肿瘤中Ki-67和p53的表达情况,并与多个具预后意义的组织病理学参数及临床指标作了比较。所有患者均存活,随访3年以上,平均5.2年,其中男123例,女37例,平均年龄67岁。

Pierre Robin序列征(Pierre Robin Sequence , PRS) ,曾被称为 Pierre Robin 综合征,该病是一种病因复杂的先天畸形,其特征性的临床表现为下颌骨发育不全(常表现为小下颌)、舌后坠及其所致的气道阻塞,常伴发先天性腭裂.报道PRS的发病率为1:20000～1:8500 ,且女童比男童更多见[1 ].若发现或处理不及时可因气道阻塞而导致缺氧,进而引发一系列并发症,包括脑损伤、肺损伤、心功能不全及生长发育停滞,甚至出现死亡[1-2 ].在受严重PRS影响的病例中,早期报告死亡率接近100％.在最近的一项研究中,据报道总体死亡率低至4.1％,早产及合并有相关联的畸形或综合征者死亡率更高[3 ].

目的 探讨泛素折叠修饰因子1特异性肽酶结构域蛋白(ZUP1)基因在乳腺癌中的表达情况及上下游机制.方法 使用基因表达汇编(GEO)、癌症基因组图谱(TCGA)和基因型-组织表达(GTEx)数据库,检索收集乳腺癌患者的基因信息和临床病理数据,通过χ2检验分析乳腺癌组织中ZUP1基因表达与临床病理因素的关系,使用Kaplan-Meier生存分析探讨乳腺癌患者生存状况与ZUP1表达的关系.用生物信息学方法预测潜在调控ZUP1的miRNA和泛素连接酶,最后进行基因集富集分析.结果 ZUP1基因在乳腺癌组织中的表达高于正常对照组织.ZUP1表达水平与乳腺癌T分期、PAM50分型、雌激素受体状态、孕激素受体状态、人表皮生长因子受体2状态和组织学类型有关(P均<0.01),ZUP1高表达组患者的总生存时间低于ZUP1低表达组(P=0.031).生物信息学预测结果显示,以ZUP1基因为靶点的差异表达最显著的10个miRNA为miRNA-10b-3p、miRNA-499a-5p、miRNA-181b-2-3p、miRNA-181b-3p、miRNA-4420、miRNA-548aw、miRNA-5680、miRNA-570-3p、miRNA-7156-5p和miRNA-8087,包括MARCH1、MARCH8、Mdm2、synoviolin和MIB1在内的E3泛素连接酶可能调节ZUP1蛋白表达.基因集富集分析结果表明ZUP1在乳腺癌中主要参与基础转录因子、泛素介导的蛋白质水解、卵母细胞减数分裂、RNA降解和极光激酶B等通路.结论 ZUP1在乳腺癌中表达上调,与患者预后具有相关性.ZUP1在乳腺癌发生、发展中的上下游机制与多种miRNA和多条信号通路有关.

目的:探究生物钟基因Bmal1调控T型钙离子通道(T-type calcium channel,TTCC)对慢性心衰(chronic heart failure,CHF)室性心律失常(ventricular arrhythmia,VA)昼夜节律的影响及可能的调控机制.方法:采用主动脉缩窄术(TAC)构建C57BL/6J小鼠慢性心力衰竭模型(CHF),设定假手术对照组(CON)及TTCC抑制剂米贝拉地尔(MIB)治疗组(CHF+MIB).使用心脏超声评估各组小鼠心功能,免疫组织化学染色(IHC)及蛋白免疫印迹法(WB)测定心肌TTCC表达.使用程序性电刺激(PES)诱发室性心律失常(VA),采用WB及实时定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测心肌组织Bmal1、TTCC昼夜节律变化及关系.使用染色质免疫共沉淀技术(ChIP)揭示Bmal1调控TTCC的分子机制.结果:与CON组相比,CHF小鼠心脏收缩功能显著降低,心腔扩大且伴有明显心肌肥厚,心肌中TTCC表达量明显增加,行PES检测发现CHF小鼠VA发作率明显增加,且有昼夜节律差异,使用MIB可一定程度降低CHF小鼠VA的发生.Western blot及qRT-PCR结果提示CHF小鼠心肌中Bmal1及TTCC表达呈昼夜节律性变化,ChIP检测提示Bmal1可直接结合到TTCC启动子区域的E-box位点调控TTCC的转录.结论:CHF小鼠中,TTCC通道重新高表达且呈昼夜节律性,使用MIB可降低CHF小鼠VA发作,Bmal1可通过直接结合TTCC启动子区域的E-box位点调控TTCC的转录.