目的:探讨葡萄糖调节蛋白75（Mortalin）对棕榈酸诱导的MIN6细胞脂毒性的影响和机制。方法:无特定病原体（SPF）级雄性C57BL/6J小鼠，20只，6~8周，20~24 g。采用随机数字表法将小鼠分为标准饮食组（SD）和高脂饮食组（HFD），每组10只。使用免疫荧光染色法、免疫组织化学法检测小鼠胰腺组织中Mortalin的表达情况。通过慢病毒转染构建Mortalin敲低（Sh-Mortalin）的MIN6稳转细胞株，根据使用牛血清白蛋白（BSA）还是棕榈酸（PA）处理敲低和空载细胞将其分为Sh-Mortalin组、Mortalin敲低空载组（ShNC-Mortalin组）、Sh-Mortalin+PA组、ShNC-Mortalin+PA组，按应用细胞外调节蛋白激酶（ERK）抑制剂U0126还是二甲基亚砜（DMSO）将细胞分为Sh-Mortalin+DMSO组、Sh-Mortalin+PA+DMSO组、Sh-Mortalin+U0126组、Sh-Mortalin+PA+U0126组。使用5-乙炔基-2′-脱氧尿苷（EdU）法检测细胞增殖率，流式细胞仪检测细胞凋亡率和活性氧（ROS）水平，酶联免疫吸附测定法检测胰岛素水平，Western blotting检测ERK通路相关蛋白［磷酸化细胞外调节蛋白激酶1/2（p-ERK1/2）、磷酸化原癌基因丝苏氨酸蛋白激酶-1（p-Raf-1）］的表达。2组间比较采用 t检验，多组间比较采用单因素方差分析。 结果:体内实验结果表明，与SD组相比，HFD组小鼠胰腺的Mortalin表达明显增加（ P<0.01）。体外实验结果表明，与ShNC-Mortalin+PA组相比，Sh-Mortalin+PA组的细胞增殖水平更高，细胞凋亡率更低，细胞ROS水平更低，胰岛素水平更高（ P<0.05）。Western blotting结果显示，ShNC-Mortalin和Sh-Mortalin组p-ERK1/2、p-Raf-1蛋白表达均以PA时间梯度降低，且与ShNC-Mortalin组相比，Sh-Mortalin组的p-ERK1/2蛋白水平更高（ P<0.05）。与Sh-Mortalin+DMSO组相比，Sh-Mortalin+U0126组EdU阳性率和p-ERK1/2水平均更低，且细胞脂毒性损伤加重（ P<0.05）。 结论:Mortalin参与调控了MIN6细胞的脂毒性损伤过程，且敲低Mortalin可通过激活Raf-1/ERK信号通路减轻PA诱导的MIN6细胞脂毒性损伤。

Neurodegenerative diseases are the consequences of imbalance between the production of oxidative stress and its nullification by cellular defense mechanisms.Hydrogen peroxide (H2O2),a precursor of deleterious reactive oxygen species,elicits oxidative stress,resulting in severe brain injuries.Bacopa monnieri is well known for its nerve relaxing and memory enhancing properties.The present study was designed to evaluate the protective effects of extracts from Bacopa monnieri against H2O2 induced oxidative stress using a cellular model,neuroblastoma IMR32 cell line.The protective potential of methanolic,ethanolic,and water extracts of B.monnieri (BM-MEx,BM-EEx,and BM-WEx) was evaluated using MTT assay.Although,all the B.monnieri extracts were found to protect cells against H2O2-mediated stress but BM-MEx showed significantly greater protection.UPLC analysis of BM-MEx revealed various polyphenols,including quercetin,catechin,umbelliferone,and caffeic acid predominance.Further,BM-MEx was found to possess considerable greater neuroprotective potential in comparison to the standard polyphenols such as quercetin,catechin,umbelliferone,and caffeic acid.The levels of antioxidant enzymes were significantly elevated after the pretreatment of BM-MEx and quercetin.The expression levels of oxidative stress markers,such as NF200,HSP70,and mortalin,were significantly alleviated after the pretreatment of BM-MEx as shown by immunofluorescence and RT-PCR.In conclusion,the present study demonstrated the protective effects of BM-MEx,suggesting that it could be a candidate for the development of neuropathological therapeutics.

目的:探讨调强放疗联合局部热疗对晚期肝癌病灶中Mortalin表达的影响及其与细胞增殖 、EM T的关系.方法:选取在本院接受治疗的晚期肝癌患者82例作为研究对象,回顾治疗方案并将入组患者分为接受调强放疗的对照组43例 、接受调强放疗联合局部热疗的联合治疗组39例.治疗后经腹腔穿刺获取肝癌组织标本,对比组织中Mortalin基因及细胞增殖基因 、EM T基因表达量的差异.结果:治疗后,联合治疗组肝癌组织中Mortalin mRNA表达量低于对照组;肝癌组织中Fbxw7 mRNA的表达量高于对照组,NCX1、PRM T5、XBP1S mRNA的表达量低于对照组;肝癌组织中Twist、ZEB-1、ZEB-2、Snail、HOXB7 mRNA的表达量均低于对照组.Pearson检验发现,肝癌组织中Mortalin基因表达量与细胞增殖基因 、EM T基因直接相关.结论:调强放疗联合局部热疗可有效降低Mortalin基因表达量,进一步通过抑制肝细胞增殖及EM T活力等途径优化患者病情.

目的 探讨Mortalin蛋白过表达在胃腺癌(GAC)临床预后评估中的意义.方法 应用免疫荧光染色法观察Mortalin蛋白在人胃癌BGC-823细胞中的表达定位;对TCGA数据库和Oncomine数据库中的样本数据进行分析以确定Mortal-in在GAC中的表达水平;采用免疫组化检测Mortalin蛋白的表达,并分析其与临床病理参数之间的关系;分析Mortalin蛋白表达水平与GAC患者预后的关系.结果 Mortalin蛋白主要表达于GAC细胞质中,且在GAC中过表达.GAC组织中Mortalin阳性率、强阳性率均明显高于胃上皮内瘤变和正常胃黏膜组织.Mortalin蛋白表达水平与GAC分化程度、浸润深度、淋巴结转移密切相关.Mortalin蛋白高表达的GAC患者生存期更短.结论 Mortalin蛋白表达水平与GAC的发生、发展及预后密切相关.Mortalin蛋白过表达可成为GAC患者不良预后的重要指标之一.

目的:探讨寿命蛋白(mortalin)在子宫颈鳞癌组织中过表达的临床病理学意义及其与子宫颈鳞癌转移之间的关系.方法:应用免疫荧光染色在人子宫颈鳞癌SiHa细胞系中检测mortalin的定位情况,并采用免疫组化EnVision法检测mortalin在59例正常宫颈上皮组织和93例子宫颈鳞癌组织中的表达,分析mortalin表达与子宫颈鳞癌患者临床病理特征之间的关系;通过MTT实验筛选mortalin抑制剂MKT-077作用浓度及时间后,抑制SiHa细胞中mortalin表达并进行细胞划痕及迁移实验,Western blot检测参与上皮-间充质转化(EMT)相关蛋白的表达.结果:免疫荧光结果显示,mortalin定位于子宫颈鳞癌SiHa细胞质中.免疫组化结果表明,mortalin在子宫颈鳞癌组织中表达的阳性率和强阳性率分别为89.2％ (83/93)和62.4％ (58/93),显著高于正常宫颈上皮组织(23.7％和5.1％,P＜0.01);mortalin表达水平与子宫颈鳞癌患者肿瘤组织学分级、临床分期及淋巴结转移密切相关(P＜0.05).通过MKT-077抑制SiHa细胞中mortalin的表达后,细胞划痕及迁移实验结果显示SiHa细胞的迁移能力下调,Western blot结果表明E-cadherin的表达明显上调,vimentin及Snail的表达明显下调(P＜0.05).结论:mortalin的表达水平与子宫颈鳞癌的发生发展及转移密切相关,该蛋白有望成为子宫颈癌患者预后评估的分子指标.

目的 探讨寿命蛋白(Mortalin)在子宫内膜癌(EC)中过表达的临床病理学意义.方法 采用免疫组织化学EnVision法检测Mortalin蛋白在88例EC组织和37例正常子宫内膜组织中的表达,分析其过表达与EC临床病理特征之间的关系.应用UALCAN数据库分析Mortalin mRNA在EC组织中的表达水平,应用The Human Protein Atlas和The Cancer Genome Atlas(TCGA)数据库进行生存分析.结果 Mortalin蛋白主要表达于EC细胞的细胞质中;在EC组织中,Mortalin蛋白的阳性率和强阳性率分别为88.6％(78/88)和56.8％(50/88),高于正常子宫内膜组织(P<0.05).Mortalin蛋白的表达与EC患者的病理分级、TNM分期和淋巴结转移相关(P<0.05),但与年龄无关(P>0.05).UALCAN数据库分析显示,EC组织中的Mortalin mRNA表达高于正常子宫内膜组织(P<0.05).The Human Protein Atlas和TCGA数据库生存分析结果显示,Mortalin蛋白和mRNA高表达的EC患者总生存期低于Mortalin蛋白和mRNA低表达患者(P<0.05).结论 Mortalin的表达与EC的发生、发展及预后相关,其有望成为EC患者靶向治疗及预后评估的重要指标.

目的 探讨Mortalin蛋白在胰腺癌组织中的表达与患者临床病理特征和预后的关系.方法 选取2015年9月至2019年9月辽阳市中心医院收治的80例胰腺癌患者为研究对象,采用系统回顾性分析法分析所有患者的临床资料,分为研究组(80份癌组织标本)及对照组(80份癌旁组织标本,距肿瘤边缘4 cm处).所有组织标本均采用免疫组织化学染色检测Mortalin蛋白的表达,比较Mortalin蛋白表达与胰腺癌患者临床病理特征关系.采用多因素Cox比例风险回归模型分析影响胰腺癌患者预后的相关因素.结果 胰腺癌组织中Mortalin蛋白高表达率(77.50％)明显高于对照组(25.00％),差异有统计学意义(P<0.05).Mortalin蛋白表达与胰腺癌患者的年龄、性别无明显相关(P>0.05),但Mortalin蛋白表达与胰腺癌患者的肿瘤分化程度、淋巴结转移及TNM分期的比较有显著相关(P<0.05);对单因素分析结果 为:肿瘤低分化、淋巴结出现转移、TNMⅢ～Ⅳ期及Mortalin高表达患者生存时间均大幅度减少(P<0.05);对多因素Cox比例风险回归模型分析结果 为:低分化、淋巴结出现转移、TNMⅢ～Ⅳ期及Mortalin高表达均为影响胰腺癌患者预后的独立危险因素(P<0.05).结论 Mortalin蛋白在胰腺癌组织中的表达水平增高,其表达水平与胰腺癌患者的分化程度、淋巴结转移、TNM分期均有显著相关,与胰腺癌的发生和发展有重要意义.

目的 探讨超声成像特征联合寿命蛋白(Mortalin)、SPARC相关钙粘连分子2(SMOC-2)蛋白在子宫内膜癌诊断中的应用价值.方法 选择96例子宫内膜癌患者,均能完成经阴道超声检查;术中收集癌组织和正常子宫内膜组织,采用免疫组化染色法测定Mortalin蛋白、SMOC-2蛋白表达,分析Mortalin蛋白、SMOC-2蛋白表达与超声成像特点对子宫内膜癌的诊断价值.结果 子宫内膜癌患者超声成像主要见子宫内膜增厚和强回声,内膜与肌层分界模糊,受累肌层局部血流信号增多、血流供应丰富.经阴道彩超检查共确诊82例子宫内膜癌患者,诊断准确率85.42％,其中Ⅰb期检出准确率86.11％,Ⅱ期检出准确率87.50％,Ⅲ期检出准确率83.33％,Ⅳa期检出准确率80.00％.子宫内膜癌组织Mortalin、SMOC-2蛋白高表达率显著高于正常子宫内膜组织Mortalin、SMOC-2蛋白高表达率,差异有统计学意义(P<0.05).Mortalin、SMOC-2蛋白联合诊断的AUC大于Mortalin、SMOC-2蛋白单独诊断的AUC(P<0.05),联合诊断的特异性和阳性预测值更高(P<0.05).超声成像联合Mortalin、SMOC-2诊断子宫内膜癌的特异性和准确性均为96.88％(93/96).结论 Mortalin、SMOC-2蛋白在子宫内膜癌中高表达,对诊断子宫内膜癌具有重要价值;超声成像联合Mortalin、SMOC-2蛋白可提高对子宫内膜癌的诊断价值.

By controlling the proper folding of proteins imported into mitochondria and ensuring crosstalk between the reticulum and mitochondria to modulate intracellular calcium fluxes, Mortalin is a chaperone protein that plays crucial roles in neuronal homeostasis and activity. However, its expression and stability are strongly modified in response to cellular stresses, in particular upon altered oxidative conditions during neurodegeneration. Here, we report and discuss the abundant literature that has highlighted its contribution to the pathophysiology of Parkinson's disease, as well as its therapeutic and prognostic potential in this still incurable pathology.

目的 构建Mortalin慢病毒过表达载体和干扰载体,转染人神经胶质瘤细胞U87,探究Mortalin对U87细胞活力及增殖侵袭效应.方法 经PCR技术扩增得到Mortalin过表达片段,引物退火得到Mortalin干扰片段,连接线性表达载体并转染293T细胞后,从293T细胞上清液中获取Mortalin慢病毒载体.通过转染剂(感染增强液)转染U87细胞,在荧光显微镜下观察转染效果,qRT-PCR检测转染Mortalin慢病毒载体后在U87细胞中表达状况.CCK-8实验、克隆实验、划痕实验分别验证Mortalin对U87细胞活力、增殖、迁移的影响,Western blot验证PI3K/AKT蛋白表达.结果 成功构建Mortalin慢病毒载体,转染人神经胶质瘤(U87)细胞.与Control组相比,NC组变化差异无统计学意义(P>0.05).与NC组相比,过表达Mortalin可以提高U87细胞集落形成和迁移能力(P均<0.05),PI3K/AKT蛋白高表达(P<0.05),而干扰组U87细胞则低表达(P<0.05).结论 Mortalin能够提高U87细胞活力,并通过激活PI3K/AKT信号通路促进细胞增殖、迁移.