藓结皮是荒漠生物土壤结皮的重要类型,在荒漠生态系统碳固定与碳排放过程中具有重要作用.研究长期氮添加对藓结皮光合生理活性和土壤有机碳(SOC)组分的影响,有助于理解藓结皮光合生理活性特征与荒漠生态系统土壤碳固存之间的关系及其调控因子.为此,研究依托古尔班通古特沙漠野外长期(13a)氮添加实验,以齿肋赤藓形成的藓结皮为研究对象,选取0(N0)、1.0(N1)、3.0 g N m-2 a-1(N3)三种氮处理,阐明长期氮添加对藓结皮光合生理活性和SOC组分的影响.结果表明:(1)相比对照,长期氮添加对结皮层颗粒有机碳(POC)与矿物结合态有机碳(MAOC)含量无显著影响,但显著减少了 0-5 cm 土层POC和MAOC含量的积累;(2)N1处理显著提高了叶绿素和非结构性碳水化合物(NSC)含量,而N3处理叶绿素a、叶绿素b、总叶绿素及NSC的含量分别显著降低了 50.94％、42.49％、46.71％和50.85％;(3)可溶性糖的含量在N1处理下显著增加,N3处理则显著抑制了其积累,脯氨酸的含量随氮浓度呈显著下降的趋势,长期氮添加对可溶性蛋白含量无显著影响;(4)相关性分析表明,长期氮添加、光合生理活性与POC和MAOC含量无显著相关性,酸碱度、微生物量碳氮、电导率、硝态氮和铵态氮皆显著影响POC和MAOC的含量积累.研究揭示了长期氮添加对藓结皮的光合生理活性和SOC组分的影响,且光合生理活性的响应无法有效反映SOC组分变化,为理解荒漠生态系统中氮沉降对生物土壤结皮的影响提供数据支持.

为了解林分密度对樟子松非结构性碳水化合物(NSC)分布的影响,以39年生不同密度(490、750、1110、1550、1800、1930、2560和3520株.hm-2)樟子松人工林为研究对象,分析樟子松不同器官中NSC及其组分(可溶性糖和淀粉)浓度,探讨不同密度下樟子松NSC变化规律.结果表明:樟子松叶、枝和根中NSC浓度变化范围分别为50.51～82.12、58.24～76.28和13.90～56.82 mg·g-1.随着樟子松林分密度增加,在490～1550株·hm-2范围,新叶可溶性糖浓度降低,淀粉浓度增加,NSC浓度保持稳定;在1550～3520株·hm-2范围,新叶可溶性糖、淀粉和NSC浓度均呈下降趋势.随着林分密度增加,老叶可溶性糖、淀粉和NSC浓度先增加后减少;新枝和老枝可溶性糖及NSC浓度呈先升高后下降再升高的趋势;根系可溶性糖、淀粉和NSC浓度呈先下降后上升的趋势.在林分密度为1110株·hm-2时,可溶性糖及NSC浓度在新叶和新枝较高,在老叶和老枝达到最大.该密度有利于生产更多碳水化合物,促进枝条快速生长,为成年樟子松人工林的适宜经营密度.

目的:探讨神经元特异度烯醇化酶（neuron specific enolase，NSE）和脑电双频指数（bispectral index，BIS）对重症脑出血患者神经功能预后的预测价值。方法:选取2019年1月至2020年12月期间本医院ICU收治的重症脑出血患者，早期进行血清NSE检测和BIS监测，根据脑出血后90 d患者格拉斯哥预后评分（Glasgow outcome scale，GOS）分为神经预后良好组（定义为GOS 4~5分）和神经预后不良组（定义为GOS 1~3分），比较分析组间NSE和BIS水平，采用受试者工作特征(ROC)曲线及曲线下面积(AUC)评价NSE、BIS以及两者联合预测神经预后的效能。结果:共126例重症脑出血患者入选本研究，脑出血后90 d神经功能评估为神经预后不良者有32例（25.4%）。神经预后不良组NSE水平明显高于神经预后良好组[28(13.7,50.4) ng/mL vs. 13.5 (9.6,18.5) ng/mL]，而BIS水平明显低于神经预后良好组[32(25.2,45) vs. 55 (48,62.2)]，差异有统计学意义（ P<0.05）。NSE及BIS预测神经不良预后的AUC分别为0.768(0.685,0.839)和0.866(0.793,0.920)，截断值分别为21.7 ng/mL和47；两者联合预测神经不良预后的AUC为0.927(0.867,0.966)，明显高于单一指标（ P<0.05）。 结论:早期监测NSE和BIS能有效预测重症脑出血患者的神经预后，两者联合后可进一步提高其预测效能。

目的:观察对比神经干细胞（NSC）在Matrigel水凝胶培养和悬浮培养的神经干细胞的生长形态、增殖、分化潜能、细胞产量及存活率等情况。方法:分离提取孕12~13 d胎鼠大脑组织中的神经干细胞，用悬浮培养、三维Matrigel水凝胶支架培养2种培养方案传代神经干细胞，分别进行形态学观察分析，免疫组织化学荧光术鉴定巢蛋白（Nestin）和Sox-2的表达，及流式细胞术鉴定免疫表型；用10%的胎牛血清诱导分化培养基诱导神经干细胞分化后，行免疫荧光染色鉴定神经干细胞的终末分化细胞：神经元、少突胶质细胞、星形胶质细胞，对应特异性标记物分别为NeuN、CNPase、GFAP。结果:免疫荧光鉴定P1代NSC，Nestin和Sox-2双阳性表达；P2代流式细胞鉴定Nestin∶90%，证明从胎鼠大脑能够获取纯度较高的神经干细胞；台盼蓝染色计数表明Matrigel基质胶三维培养方案细胞产量明显升高，是悬浮培养方案的5~10倍，收取的神经干细胞的存活率较悬浮培养稍增高，但无统计学差异意义（ P=0.0812）。本试验两种方法培养的NSC均具多向分化性能，均能分化成神经元、星形胶质细胞及少突胶质细胞，分化后各终末细胞所占比例基本一致（ P值分别为：0.1302；0.1108；0.1605）。 结论:相比于悬浮培养，三维Matrigel水凝胶支架方案培养出的NSC，具有活性高，增殖能力强，消化后死亡率低，细胞产量大，能达到悬浮培养的5倍以上，能稳定传代及便于细胞形态学观察等优点，并在连续传至多代后仍能保持NSC的基本特性和多向分化潜能。

颅缝早闭是一条或多条颅缝过早融合造成的先天性骨骼疾病，根据是否伴随除了颅面部畸形之外的其他器官系统的损害分为综合征型和非综合征型，大约85%的颅缝早闭是非综合征型，综合征型仅占15%，综合征型会导致更加严重的临床症状。颅缝早闭的发生由环境和遗传因素共同影响，其中遗传因素包括单基因突变、染色体异常和基因多态性，常见相关基因包括 FGFR1、 FGFR2、 FGFR3、 TWIST1、 MSX1、 ERF、 TCF12等。综合征型与非综合征型颅缝早闭的遗传致病模式具有差异性，目前绝大部分颅缝早闭遗传学研究集中在欧洲人群。颅缝早闭的分子遗传学研究对疾病的临床诊断、治疗以及遗传咨询有着重要作用。该文通过对颅缝的发育，以及综合征型和非综合征型颅缝早闭的遗传学研究的回顾，对颅缝早闭的致病机制的研究现状和进展进行了综述。

目的:本研究通过提取常氧及低氧预处理的神经干细胞来源外泌体治疗脊髓损伤小鼠，对比小鼠运动功能、损伤区脊髓微环境和神经炎症的改善情况探讨两者治疗效果差异。方法:收集常氧或低氧条件下培养的神经干细胞的外泌体（NSC-EXOS/NSC-HEXOS），采用透射电镜、纳米颗粒跟踪分析和免疫印迹的方法对外泌体进行鉴定；采用改良Allen法构建挫伤型脊髓损伤小鼠模型，将15只造模成功的小鼠随机分为PBS组、EXOS组和HEXOS组，分别予注射PBS、NSC-EXOS和NSC-HEXO治疗，采用BMS和BBB评分评价小鼠运动功能恢复情况，HE染色观察损伤区脊髓微环境变化，ELISA法检测损伤区脊髓组织炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α的水平，通过免疫印迹、免疫荧光检测损伤区脊髓组织中iNOS、Arg1的表达观察小胶质细胞产生的变化。结果:NSC-EXOS和NSC-HEXOS均鉴定成功，两者直径范围均为50~150 nm。NSC-EXOS和NSC-HEXOS均促进了SCI小鼠运动功能恢复，NSC-HEXOS治疗后的小鼠BBB及BMS评分最高（ P<0.05）。HE染色结果显示NSC-EXOS和NSC-HEXOS均能改善损伤区脊髓微环境；ELISA结果显示NSC-EXOS和NSC-HEXOS可降低损伤区脊髓组织中炎症因子水平（ P<0.05），NSC-HEXOS治疗后降低幅度最大（ P<0.05）；免疫印迹及免疫荧光染色结果显示NSC-EXOS和NSC-HEXOS可减少损伤区脊髓组织中M1型小胶质细胞数量而增加M2型小胶质细胞数量（ P<0.05），其中NSC-HEXOS治疗组效果最明显（ P<0.05）。 结论:低氧预处理是一种优化神经干细胞来源外泌体对脊髓损伤治疗作用的有效方法。

目的:研究抑制高迁移率族蛋白B1（HMGB1）/信号转导及转录激活因子3（STAT3）轴活性对大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响。方法:建立大鼠心肌缺血再灌注损伤的体内和体外模型，SD大鼠随机分为假手术组、模型组、甘草酸组和NSC74859组，每组6只。假手术组不结扎，假手术组和模型组不给药，甘草酸组和NSC74859组大鼠在缺血/再灌注前12 h 30 min和缺血后30 min分别尾静脉注射HMGB1拮抗剂甘草酸或STAT3抑制剂NSC74859 5 mg/kg。采用超声心动图评价心功能指标左心室缩短分数（FS）和左心室射血分数（EF），采用苏木精-伊红（HE）染色和TUNEL染色评估心肌细胞的凋亡，采用实时荧光定量PCR反应和Western Blot法检测HMGB1、STAT3和磷酸化STAT3（p-STAT3）的表达水平。MTS法测定H9C2细胞活力，通过细胞内腺苷三磷酸（ATP）含量测定和流式细胞术检测H9C2细胞的线粒体膜电位评估心肌细胞的存活。采用免疫沉淀法研究HMGB1/STAT3的作用方式。采用免疫染色法检测HMGB1/STAT3在细胞核和细胞质中的表达和迁移情况。结果:抑制HMGB1或STAT3的表达后，大鼠EF和FS均升高，心肌细胞免疫浸润和凋亡下降；抑制HMGB1表达可降低STAT3的表达，但抑制STAT3表达不影响HMGB1的表达。缺氧导致HMGB1、p-STAT3表达升高，STAT3表达降低，在缺氧8 h时，STAT3表达水平突然升高。复氧后HMGB1、STAT3表达降低，p-STAT3表达升高，但p-STAT3（Ser 727）未参与该过程。缺血再灌注损伤后，HMGB1和STAT3在心肌细胞中牢固结合，但抑制STAT3或HMGB1会减弱这种结合。抑制HMGB1或STAT3表达可减轻心肌缺血再灌注损伤。缺氧后再复氧心肌细胞HMGB1表达增加，HMGB1从细胞核向细胞质迁移。结论:抑制HMGB1/STAT3轴活性可有效降低大鼠心肌缺血再灌注损伤。

目的:观察尾静脉注射牙龈卟啉单胞菌（ Porphyromonas gingivalis，Pg）对野生成年大鼠海马神经干细胞和神经元标志分子表达水平的影响，初步探讨Pg入血对海马神经发生的作用。 方法:建立尾静脉注射Pg大鼠模型：18只雄性Sprague-Dawley（SD）大鼠按随机数字表法随机分为3组（每组6只）。低剂量组、高剂量组大鼠分别经尾静脉注射1.0×10 3 和1.0×10 8菌落形成单位（colony forming unit，CFU）的Pg菌液200 μl，假手术组大鼠注射等体积磷酸盐缓冲液（phosphate buffer saline，PBS），3组大鼠均每周注射3次，连续8周。行为学检测：应用莫里斯水迷宫（Morris water maze，MWM）定位航行实验、空间探索实验检测大鼠学习和记忆能力。免疫组织化学法检测各组大鼠海马颗粒下区（subgranular zone，SGZ）神经干细胞标志分子神经上皮干细胞蛋白（nestin）、神经母细胞和未成熟神经元标志分子双皮质素（doublecortin，DCX）、成熟神经元标志分子神经元核抗原（neuronal nuclei，NeuN）的阳性细胞分布。蛋白质印迹法检测各组大鼠海马组织nestin、DCX、NeuN的表达水平。 结果:学习和记忆能力：MWM定位航行实验结果显示，第5天到达平台时间高剂量组［22.83（16.00，38.34）s］显著长于假手术组［5.59（5.41，6.17）s］（ t=-11.17， P<0.001），低剂量组［9.85（8.75，21.01）s］与假手术组相比差异无统计学意义（ t=-6.83， P=0.080）；MWM空间探索实验中60 s内穿越原平台位置次数，高剂量组［1.50（1.00，2.00）次］显著少于假手术组［4.00（2.75，4.00）次］（ t=9.75， P=0.003），低剂量组［2.50（2.00，3.00）次］与假手术组相比差异无统计学意义（ t=4.50， P=0.382）。免疫组织化学法结果显示，对于nestin阳性细胞密度，低剂量组［（35.36±4.32）个/mm 2］和高剂量组［（26.51±5.89）个/mm 2］均显著低于假手术组［（59.58±14.15）个/mm 2］（ t=24.21， P=0.018； t=33.07， P=0.005）；DCX阳性细胞平均吸光度值，低剂量组（0.007±0.002）和高剂量组（0.006±0.002）均显著低于假手术组（0.011±0.001）（ t=0.004， P=0.018； t=0.006， P=0.005）；NeuN阳性神经元密度，高剂量组［（0.75±0.08）×10 3个/mm 2］显著低于假手术组［（1.13±0.14）×10 3个/mm 2］（ t=0.38， P=0.017），低剂量组［（0.88±0.19）×10 3个/mm 2］与假手术组相比差异无统计学意义（ t=0.25， P=0.075）。蛋白质印迹法结果显示，与假手术组相比，高剂量组海马中nestin、DCX、NeuN表达水平均显著降低（ t=0.74， P<0.001； t=0.18， P=0.014； t=0.35， P=0.008），低剂量组上述3个指标与假手术组相比差异均无统计学意义（ t=0.18， P=0.108； t=0.08， P=0.172； t=0.19， P=0.077）。 结论:尾静脉注射Pg后呈剂量依赖性降低野生大鼠学习和记忆能力，并显著降低大鼠海马神经干细胞和神经元标志分子nestin、DCX、NeuN阳性表达细胞数量和表达水平。

目的:通过建立小胶质细胞-神经元共培养系统，制备体外神经细胞炎症模型。方法:选用小鼠BV-2小胶质细胞、NSC34运动神经元、HT-22海马神经元。实验Ⅰ　采用不同浓度LPS(10、100、500和1 000 ng/ml)刺激BV-2小胶质细胞，提取小胶质细胞培养上清液即条件培养基，分别培养两种神经元，采用CCK-8法选取导致神经元活力明显下降50%的LPS浓度用于Transwell共培养系统的建立。实验Ⅱ　将小胶质细胞接种于Transwell上室，神经元种于下室。采用随机数字表法分为2组( n＝12)：对照组和LPS组，小胶质细胞分别用细胞培养基、LPS培养或孵育6 h，随后更换新鲜培养基继续培养12 h，合并上、下室细胞继续培养。BV-2-NSC34 Transwell共培养系统共培养12 h，BV-2-HT-22 Transwell共培养系统共培养24 h。采用ELISA法检测神经元培养液IL-1β、IL-18浓度，采用流式细胞术检测神经元凋亡率，采用qRT-PCR检测神经元Bcl-2、Bax的mRNA表达，采用Western blot法检测神经元cleaved caspase-3、Bcl-2、Bax的表达。 结果:实验Ⅰ　BV-2-NSC34 Transwell共培养系统中LPS刺激浓度为10 ng/ml，BV-2-HT-22 Transwell共培养系统中LPS刺激浓度为1 000 ng/ml。实验Ⅱ　与对照组比较，LPS组神经元培养液IL-1β和IL-18浓度、神经元凋亡率升高，Bax及其mRNA表达上调，Bcl-2及其mRNA表达下调，cleaved caspase-3表达上调( P<0.05或0.01)。 结论:通过条件培养基技术与Transwell共培养技术成功建立小胶质细胞-神经元共培养系统，为术后认知功能障碍相关神经细胞炎症模型的建立提供实验方案。

目的:探讨伴海马硬化的颞叶癫痫（TLE-HS）患者成簇癫痫发作与皮质醇节律改变的关系，从神经内分泌调节角度了解其发生机制。方法:纳入2012年5月1日至2020年12月31日在青海省人民医院确诊的57例单侧TLE-HS患者，根据入院1个月前是否有成簇癫痫发作的病史，将其分为伴有成簇癫痫组（即成簇癫痫组，共纳入27例）和不伴成簇癫痫组（NSC组，共纳入30例）。检测两组的患者同日不同时段的血浆皮质醇浓度，并通过磁共振波谱（MRS）分析海马代谢物浓度，采用独立样本 t检验、卡方检验、重复测量方差分析、协方差分析及多因素Logistic回归分析进行两组间数据的统计学分析。 结果:重复测量方差分析结果显示皮质醇水平的时间效应、组间效应及时间与组间的交互效应均有统计学意义。以年龄为协变量，采用协方差分析发现成簇癫痫组的3个不同时间点（8：00、16：00以及次日0：00）的皮质醇：皮质醇16［（126.22±19.98）μg/L］、皮质醇0［（51.63±21.43）μg/L］及皮质醇8-16浓度变化率（以斜率表示，为-7.78±4.54）高于NSC组［分别为（97.70±18.55）、（31.90±10.73）μg/L和-12.40±4.16］，差异有统计学意义（ F=5.587、4.320、4.013，均 P<0.05）。成簇癫痫组的皮质醇0-8变化率（以斜率表示，17.11±6.32）低于NSC组（20.62±6.54），差异有统计学意义（ F=-2.065， P<0.05）。两组不同侧别的海马硬化之间比较差异无统计学意义，且两组病侧海马区的N-乙酰天冬氨酸（NAA）/（胆碱+肌酸）的比值比较差异无统计学意义，但成簇癫痫组病灶对侧海马NAA/（胆碱+肌酸）比值（0.71±0.03）低于NSC组（0.76±0.06），差异有统计学意义（ t=4.999， P=0.029）。多因素Logistic回归分析显示，皮质醇16（ OR=1.328，95% CI 1.073~1.642， P=0.009）、皮质醇8-16（ OR=3.657，95% CI 1.404~9.525， P=0.008）是TLE-HS患者成簇癫痫发作的独立危险因素。 结论:日间皮质醇节律紊乱可能是TLE-HS患者成簇癫痫发作产生的神经生物学基础。