近年来，我国终末期肾病（end-stage kidney disease，ESKD）发病率逐年增长并且增幅加快，每年约有2%的患者进入ESKD。腹膜透析（peritoneal dialysis，PD）以其简便、安全、有效和居家治疗，在全世界尤其是发展中国家的ESKD患者中得到了广泛的使用。自1978年中山大学附属第一医院率先将持续性不卧床PD（continuous ambulatory peritoneal dialysis，CAPD）的概念和技术引入中国后，我国肾科专业医护人员经过数十年的共同努力，PD管理取得显著成效，但仍面临诸多挑战。为了客观了解现阶段我国PD中心关键质量指标现状、中心建设情况、PD处方及调整、并发症诊疗、充分性评估、患者长期随访现状以及疾病负担和慢性肾脏病风险认知情况，《中国PD管理现状白皮书》项目组在全国范围内开展三轮问卷调查，对调查结果进行客观、全面地分析，并组织专家编写形成了这部《中国PD管理现状白皮书》。该白皮书清晰地回顾了目前中国PD的建设及管理现状，并发现了一些亟待解决的问题，仍然需要进一步规范PD中心的人员配备，加强对PD专业人员的培养，扩大专职医护人员队伍，注重质量管理，降低PD相关并发症的发生率，以提高PD患者的长期生存率及生活质量。

目的:寻找不同比例脂肪间充质干细胞（adipose-derived mesenchymal stem cells，ADMSCs）对甲状旁腺细胞增殖能力及甲状旁腺激素（PTH）分泌功能变化的影响及规律。方法:无菌条件下获取10只SD大鼠两侧甲状旁腺及腹股沟脂肪，经过消化分离分别获取甲状旁腺细胞和ADMSCs进行体外培养，采用流式检测方法对P3代ADMSCs表型进行检测。按照甲状旁腺细胞与ADMSCs比例为2∶1、1∶1、1∶2和1∶5进行共培养，观察不同共培养比例下两种细胞的生长状态，并取细胞上清进行PTH含量的测定。测定结果与对应数量单独培养的甲状旁腺细胞上清中PTH进行对比，利用细胞形态学和PTH检测结果综合判断ADMSCs对甲状旁腺细胞PTH分泌功能的影响。采用SPSS 11.0软件进行统计学分析。结果:可较稳定地完成体外单独甲状旁腺细胞与ADMSCs原代培养，且两种细胞不同比例的体外共培养显示出对PTH分泌的不同影响，其中甲状旁腺细胞与ADMSCs比例为1∶5时体现出较强的促PTH分泌作用，高于单独甲状旁腺细胞培养，其PTH含量在第2、4、6、8天分别为［（1.3±0.0）比（0.8±0.1）、（1.3±0.0）比（0.9±0.0）、（1.7±0.5）比（0.9±0.0）、（1.7±0.0）比（1.2±0.2）］ng/L，差异有统计学意义（ t值分别为25.46、64.30、3.32、7.16， P值均<0.05）；其次为比例为1∶2时，PTH水平呈上升趋势。 结论:甲状旁腺细胞与ADMSCs体外共培养具有可行性，且1∶5细胞比例下PTH分泌效果有着更显著的影响。

目的:从医学院校管理视角，分析科技成果转化形式及问题，探讨提高医学科技成果转化能力的策略。方法:对成果转化方式、转化中存在的问题、成因以及解决办法进行分析总结。结果:转化方式包括转让、许可、作价投资、共同开发、技术咨询及服务等，存在的问题包括科技研发产业化意识缺乏、考核激励机制有待完善、医学知识产权保护及成果转化专业机构严重缺乏等。结论:医学院校通过构建具有循环再造能力的科技成果转化生态圈，加强知识产权保护及培育保障，提升风险管控能力，注重专业服务机构建设及人才培养等，提升医学科技成果转化和应用成效。

目的:探究敲减角质形成细胞KRT5基因对共培养黑素细胞黑素含量的影响，以解释屈侧网状色素沉着症（DDD）的色素增加性皮损形成的机制。方法:通过成簇的规律间隔的短回文重复序列-相关蛋白9（CRISPR-Cas9）技术获得KRT5基因杂合突变的HaCaT细胞，将转染非靶向单向导RNA：Cas9蛋白复合物的HaCaT细胞设为对照组，分别与人原代黑素细胞HEMn体外共培养。免疫荧光观察共培养细胞中细胞角蛋白及黑素小体表达；差异胰酶消化获得不同共培养组中黑素细胞，检测细胞内黑素含量。免疫组化检测1例KRT5突变DDD患者皮损和正常对照皮肤中黑素细胞特异性前黑素小体蛋白17（Pmel17）的表达改变。结果:Sanger测序显示，实验组HaCaT细胞KRT5基因第1外显子起始密码子发生杂合突变（c.1delA），对照组HaCaT细胞KRT5基因未发生突变。Western印迹显示，实验组HaCaT细胞KRT5蛋白表达水平（0.60 ± 0.05）显著低于对照组（1.00 ± 0.00， t = 32.38， P = 0.001）。HEMn细胞与实验组HaCaT细胞共培养体系中Pmel17标记的黑素小体较与对照组共培养体系增多，且细胞内黑素含量增加52.5%，差异具有统计学意义（ t = -3.48， P = 0.025）。KRT5突变DDD患者皮损组织中Pmel17表达量较正常对照皮肤增加。 结论:本研究通过CRISPR-Cas9诱导KRT5基因突变的HaCaT细胞，与黑素细胞在体外建立共培养细胞模型，验证了其对共培养黑素细胞的影响，为进一步研究角质形成细胞与黑素细胞相互作用机制以及皮肤色素异常的发病机制提供了初级研究模型。

人类卵胞质内单精子注射（intracytoplasmic sperm injection，ICSI）技术开展至今已有30余年。其最初主要应用于针对严重少、弱、畸形精子症导致的男性不育患者的治疗，但随着未成熟卵体外培养、卵子冷冻、胚胎植入前遗传学检测等辅助生殖技术的开展，ICSI使用比例已大幅提升。虽然目前ICSI技术相对成熟，但仍有很多细节值得关注和完善。为规范与优化人类辅助生殖技术从业者的ICSI操作，由中国医师协会生殖医学专业委员会发起，并联合全国多家生殖医学中心共同编撰了本共识。

目的:探索骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cell，BMMSC）来源凋亡囊泡对小鼠巨噬细胞系RAW264.7极化状态的影响及对牙龈卟啉单胞菌（ Porphyromonas gingivalis，Pg）诱导的促炎状态巨噬细胞的调控，为牙周炎治疗提供依据。 方法:使用Operetta CLS高内涵分析系统动态观察星形孢菌素（staurosporine，STS）诱导的BMMSC的凋亡过程；使用场发射扫描电镜、动态光散射技术、流动电势法测量凋亡囊泡相关表征；使用Operetta CLS高内涵分析系统动态观察小鼠巨噬细胞系RAW264.7对5-羧基四甲基罗丹明琥珀酰亚胺酯（5-carboxy-tetramethylrhodamine，succinimidyl ester，5-TAMRA-SE）标记的凋亡囊泡的吞噬作用；采用实时荧光定量PCR检测精氨酸合酶-1（arginase-1，Arg-1）mRNA相对表达量；采用细胞免疫荧光、蛋白质印迹法检测凋亡囊泡对Pg来源的脂多糖（lipopolysaccharide from Pg，Pg-LPS）诱导的RAW264.7中诱导型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase，iNOS）表达的影响；采用酶联免疫吸附测定法检测Pg-LPS诱导的促炎状态RAW264.7培养上清液中肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factro-α，TNF-α）的分泌情况。结果:0.5 μmol/L STS处理12 h后小鼠BMMSC形态皱缩，周围有明显的凋亡囊泡产生；凋亡囊泡的粒径为100~1 000 nm，平均Zeta电势为-16.6 mV；RAW264.7可以通过伪足吞噬小鼠BMMSC来源的凋亡囊泡；小鼠BMMSC来源的凋亡囊泡联合白介素-4（interleukin4，IL-4）刺激的RAW 264.7 Arg-1 mRNA表达量（261.97±15.91）较单独IL-4刺激的 mRNA表达量（115.29±15.42）显著升高（ P<0.01）；凋亡囊泡与Pg-LPS共同作用下，RAW 264.7 iNOS阳性细胞数量［（39.33±4.70）个］显著低于Pg-LPS单独诱导的RAW 264.7 iNOS阳性细胞数量［（95.33±4.70）个］（ P=0.007），RAW264.7 iNOS蛋白相对表达量（5.84±1.05）显著低于Pg-LPS单独诱导的RAW 264.7 iNOS蛋白相对表达量（14.91±3.87）（ P<0.01），RAW264.7细胞培养上清液中TNF-α含量［（21 899.71±409.73） ng/L］显著低于Pg-LPS单独诱导下RAW264.7细胞培养上清液中TNF-α含量［（71 296.50±2 344.22） ng/L］（ P =0.003）。 结论:小鼠BMMSC来源的凋亡囊泡可以调控巨噬细胞极化状态，并可减轻Pg-LPS诱导下巨噬细胞的促炎状态。

目的:通过建立小胶质细胞-神经元共培养系统，制备体外神经细胞炎症模型。方法:选用小鼠BV-2小胶质细胞、NSC34运动神经元、HT-22海马神经元。实验Ⅰ　采用不同浓度LPS(10、100、500和1 000 ng/ml)刺激BV-2小胶质细胞，提取小胶质细胞培养上清液即条件培养基，分别培养两种神经元，采用CCK-8法选取导致神经元活力明显下降50%的LPS浓度用于Transwell共培养系统的建立。实验Ⅱ　将小胶质细胞接种于Transwell上室，神经元种于下室。采用随机数字表法分为2组( n＝12)：对照组和LPS组，小胶质细胞分别用细胞培养基、LPS培养或孵育6 h，随后更换新鲜培养基继续培养12 h，合并上、下室细胞继续培养。BV-2-NSC34 Transwell共培养系统共培养12 h，BV-2-HT-22 Transwell共培养系统共培养24 h。采用ELISA法检测神经元培养液IL-1β、IL-18浓度，采用流式细胞术检测神经元凋亡率，采用qRT-PCR检测神经元Bcl-2、Bax的mRNA表达，采用Western blot法检测神经元cleaved caspase-3、Bcl-2、Bax的表达。 结果:实验Ⅰ　BV-2-NSC34 Transwell共培养系统中LPS刺激浓度为10 ng/ml，BV-2-HT-22 Transwell共培养系统中LPS刺激浓度为1 000 ng/ml。实验Ⅱ　与对照组比较，LPS组神经元培养液IL-1β和IL-18浓度、神经元凋亡率升高，Bax及其mRNA表达上调，Bcl-2及其mRNA表达下调，cleaved caspase-3表达上调( P<0.05或0.01)。 结论:通过条件培养基技术与Transwell共培养技术成功建立小胶质细胞-神经元共培养系统，为术后认知功能障碍相关神经细胞炎症模型的建立提供实验方案。

目的:研究I型血红素加氧酶（HO-1）/一氧化碳（CO）介导的槲皮素对大鼠原代肝细胞酒精性氧化损伤保护作用及其潜在机制。方法:二步胶原酶技术分离培养大鼠原代肝细胞。在乙醇染毒同时，加入槲皮素（100 μmol/L）或/和血红蛋白（100 μmol/L），或不同剂量的CO释放分子（CORM-2，5～50 μmol/L）共同作用，作用结束后检测细胞培养上清液中乳酸脱氢酶（LDH）、天冬氨酸转氨酶（AST）活性，细胞丙二醛（MDA）和谷胱甘肽（GSH）水平。乙醇染毒肝细胞与槲皮素、CORM-2、血红蛋白、锌原卟啉Ⅸ单独或联合作用，检测细胞微粒体内CYP2E1的活性。数据统计分析采用方差分析（ANOVA）和组间比较（SNK-检验）。结果:乙醇染毒同时加入100 μmol/L的槲皮素，乙醇诱导的AST与LDH的释放明显减少，GSH消耗与MDA升高程度也明显下降；而血红蛋白（CO阻断剂）不仅使槲皮素的保护效应丧失，反而进一步加重了乙醇所致的脂质过氧化。CORM-2能减少乙醇诱导的肝细胞AST与LDH释放，GSH消耗与MDA生成也明显减轻，且这种保护作用呈剂量依赖性。乙醇导致细胞CYP2E1活性显著升高，槲皮素或CORM-2能抑制CYP2E1的活性，血红蛋白或锌原卟啉Ⅸ则消除了槲皮素的这种抑制效应，使CYP2E1活性升高。当槲皮素、CORM-2和锌原卟啉Ⅸ与乙醇共同孵育肝细胞时，CYP2E1活性并未升高，与乙醇组比较反而明显下降， P值均< 0.05，差异均有统计学意义。 结论:HO-1的代谢产物CO介导了槲皮素对肝细胞酒精性氧化损伤的保护作用，这种保护效应可能与其抑制CYP2E1活性有关。

目的:研究X射线辐射诱导非小细胞肺癌（NSCLC) A549细胞凋亡的适应性反应，并筛选适应性反应相关的微RNA (miRNA）。方法:将NSCLC A549细胞分为6组，包括50 mGy+20 Gy、200 mGy+20 Gy、20 Gy、50 mGy、200 mGy照射组及对照组（0 Gy），前2组细胞分别用50、200 mGy初始剂量进行照射，培养6 h后用20 Gy的效应剂量进行照射，20 Gy、50 mGy、200 mGy照射组同时进行照射。培养24 h后使用流式细胞仪检测细胞凋亡情况。利用小RNA测序技术筛选差异表达miRNA，并对其靶基因进行基因本体（GO）及京都基因与基因组百科全书（KEGG）通路的功能富集分析。采用实时荧光定量PCR (qRT-PCR）对部分差异表达miRNA进行验证。2组间数据的比较采用Welch t检验。 结果:50 mGy+20 Gy照射组和200 mGy+20 Gy照射组的A549细胞早期凋亡率分别为（1.81±0.11）%和（2.17±0.19）%，低于20 Gy照射组的（4.54±0.23）%，且差异均有统计学意义（ t=10.680、8.006，均 P<0.01）。与20 Gy照射组相比，50 mGy+20 Gy照射组和200 mGy+20 Gy照射组共同差异表达趋势miRNA有1个上调（miR-3662）、15个下调（miR-185-3p、miR-1908-5p、miR-1307-5p、miR-182-3p、miR-92a-3p、miR-582-5p、miR-501-3p、miR-138-5P、miR-1260b、miR-484、miR-378d、miR- 193b-3P、miR-127-3p、miR-1303及miR-654-5p）。GO富集分析结果显示，差异表达miRNA调控靶基因功能显著富集于细胞通讯调节、代谢过程的正向调节、代谢信号的调节、酶结合及催化活性等过程。KEGG富集分析结果显示，靶基因相关信号通路显著富集于溶酶体、丝裂原活化蛋白激酶、Ras和内吞作用等信号通路。qRT-PCR检测结果显示，miRNA表达情况与基因芯片结果趋势一致（10个miRNA表达水平得到验证）。 结论:X射线50、200 mGy照射剂量均能诱导NSCLC A549细胞凋亡的适应性反应，并筛选到一组共同差异表达的miRNA，可能在X射线辐射诱导细胞凋亡的适应性反应中发挥了重要作用，有可能成为调节电离辐射生物效应的潜在靶点。

目的:观察前列腺癌微环境中癌相关成纤维细胞(CAFs)对细胞缝隙连接通讯(GJIC)的影响。方法:取前列腺癌组织分离培养及鉴定CAFs，分别将(0、0.25、0.50、0.75、1.00 g/L)浓度的CAFs培养液与处于对数生长期的前列腺癌PC-3细胞(购自中国科学院上海生命科学研究院细胞资源中心)共同培养，采用荧光漂白恢复技术检测各组前列腺癌PC-3细胞缝隙连接(GJ)功能，蛋白质印迹法(Western blot)检测各组细胞间隙连接蛋白43(Cx43)蛋白的表达。组间比较采用方差分析。结果:成功分离培养CAFs，前列腺癌PC-3细胞与不同浓度CAFs(0.00、0.25、0.50、0.75、1.00 g/L)共培养后，细胞内荧光恢复程度逐渐减弱[(49.40±5.42)%、(45.36±3.23)%、(36.57±3.95)%、(29.18±5.51)%、(21.81±4.58)%， F＝18.067， P<0.05]，细胞GJIC水平逐渐减弱，呈明显的剂量-效应依赖关系，差异有统计学意义( t＝1.109、3.313、4.531、6.734， P<0.05)。同时，各组CAFs中的Cx43蛋白的表达水平分别为0.723±0.065、0.641±0.084、0.425±0.078、0.314±0.067、0.267±0.059。随着共培养CAFs浓度的增加，细胞内Cx43蛋白表达水平反而逐渐降低，差异有统计学意义( t＝1.337、5.084、7.589、8.997， P<0.05)。 结论:CAFs可下调前列腺癌PC-3细胞Cx43蛋白的表达水平，抑制前列腺癌PC3细胞的细胞间缝隙连接功能。