目的 探究肺鳞状细胞癌组织聚(rC)结合蛋白1(PCBP1)、G蛋白信号调控因子2(GPSM2)表达与上皮-间质转化(EMT)、临床病理特征和预后的关系.方法 收集2019年1月至2023年1月联勤保障部队第九八四医院、火箭军特色医学中心及池州市人民医院收治的92例肺鳞状细胞癌患者活检或手术标本.采用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)法检测并比较肺鳞状细胞癌组织、癌旁组织PCBP1、GPSM2 mRNA表达,分析肺鳞状细胞癌组织中PCBP1、GPSM2表达与EMT相关蛋白(β-catenin)、临床病理特征关系.随访1年后将患者分为预后良好组和预后不良组,比较两组肺鳞状细胞癌组织中PCBP1、GPSM2 mRNA表达,绘制ROC曲线评估PCBP1、GPSM2表达对肺鳞状细胞癌患者预后不良的预测价值.结果 肺鳞状细胞癌组织中PCBP1表达显著低于癌旁组织,差异有统计学意义(t=6.502,P<0.05);GPSM2表达显著高于癌旁组织,差异有统计学意义(t=8.401,P<0.05).β-catenin胞膜阳性见于肺鳞状细胞癌及癌旁组织,核阳性仅见于癌组织,且为灶状阳性表达.(P<0.05).spearman相关性分析,肺鳞状细胞癌组织中PCBP1与 β-catenin表达呈负相关,GPSM2与β-catenin表达呈正相关(r=-0.3286、0.445,P<0.05).肺鳞状细胞癌组织中PCBP1低表达、GPSM2高表达与分化程度、N分期、M分期、肺内转移相关(P<0.05).预后不良组PCBP1mRNA水平低于预后良好组,而GPSM2 mRNA水平均高于预后良好组,差异有统计学意义(t=6.639、4.768,P<0.05).ROC曲线显示,PCBP1联合GPSM2预测肺鳞状细胞癌患者预后不良的曲线下面积(AUC)最大,为0.924.结论 肺鳞状细胞癌组织中PCBP1低表达、GPSM2高表达与EMT相关蛋白、肿瘤分化程度、N分期、M分期、肺内转移及预后相关.

探讨长链非编码RNA（LncRNA） PCBP1-AS1对口腔鳞癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响及其对微RNA-196a（miR-196a）的靶向调控作用。研究发现PCBP1-AS1在口腔鳞癌组织中低表达，而miR-196a表达上调；转染pcDNA-PCBP1-AS1或转染anti-miR-196a均可抑制细胞增殖、迁移及侵袭，并可诱导细胞周期停滞于G0-G1期；PCBP1-AS1可靶向调控miR-196a；miR-196a过表达可逆转PCBP1-AS1对细胞生物学行为的作用。PCBP1-AS1可通过下调miR-196a的表达从而抑制口腔鳞癌细胞增殖、迁移及侵袭。

目的:探索聚(rC)结合蛋白1(PCBP1)在胰腺导管腺癌(PDAC)中的临床价值及对胰腺癌细胞功能的影响。方法:通过GEPIA2、K-M Plotter、GENEMANIA、STRING、LinkedOmics数据库进行差异表达、预后分析、分子网络构建及潜在机制探索，使用胰腺癌细胞株ASPC-1和Panc-1进行PCBP1的功能实验及铁死亡相关蛋白谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX-4)和核因子样2(NRF2)表达变化检测。结果:PCBP1在PDAC中表达显著上调( P<0.05)，高表达PCBP1的患者无疾病生存差(Log-rank P<0.05)，分层分析发现男性高PCBP1表达预后差(Log-rank P<0.05)，低突变状态高PCBP1表达预后差(Log-rank P＝0.026)，分子互作网络发现PCBP1与聚(rC)结合蛋白3、剪接因子3a亚基2等基因，与异质核核糖核蛋白K、基本同源物增强子等蛋白存在相互作用，富集分析发现PCBP1可能参与到细胞凋亡、坏死性凋亡、程序性细胞死亡等途径，PCBP1表达下调后，细胞迁移、侵袭、增殖能力显著下降(所有 P<0.05)，GPX-4和NRF2表达显著升高。 结论:PCBP1在PDAC中发挥癌基因作用并通过调控铁死亡通路而影响PDAC预后。

目的：:研究原发性干燥综合征（PSS）相关干眼患者泪液中多聚胞嘧啶结合蛋白1（PCBP1）的表达水平及其与临床干眼指标之间的相关性。方法：:病例对照研究。选取2023年7—10月在浙江中医药大学附属第二医院眼科确诊为PSS伴干眼的患者6例（12眼）为SS干眼组，同期选取健康人6例（12眼）为正常组，选取同家医院非SS干眼患者6例（12眼）为非SS干眼组，分别完成3组研究对象的眼表疾病指数问卷（OSDI）、泪河高度（TMH）、非侵入式泪膜破裂时间（NIBUT）、角膜荧光素染色（CFS）、睑板腺缺失度评分（MGL）、眼红指数（ORI）、Schirmer试验（SIt）和泪液采集。ELISA检测3组泪液中PCBP1的表达水平，并分析其与临床干眼指标的相关性，采用单因素方差分析、Pearson相关分析、受试者工作特征曲线进行数据分析。结果：:OSDI评分：正常组<非SS干眼组非SS干眼组>SS干眼组，差异均有统计学意义（均 P<0.05）。CFS：正常组<非SS干眼组0.05）。ORI：正常组0.05）。受试者工作特征曲线分析显示，泪液PCBP1表达水平诊断PSS干眼症的曲线下面积为0.944，得到最大约登指数为0.817，最大阈值为1.201，此时灵敏度和特异度分别为0.956和0.861。ELISA定量测定泪液PCBP1结果显示正常组<非SS干眼组

目的 探讨儿童伯基特淋巴瘤(Burkitt lymphoma,BL)的临床病理学特征及PCBP1表达意义.方法 收集47例儿童BL的临床资料,免疫组化检测PCBP1、MUM1、CD38、c-myc和LMO2,原位杂交检测EBER,荧光原位杂交检测c-myc、11q23.3/11q24.3基因.统计学分析PCBP1与临床参数及MUM1的表达关系.结果 47例患者中男性36例、女性11例,平均就诊年龄6岁2月(2岁1月～13岁),发病部位腹腔35例、头颈部11例、鼻腔1例;临床分期为Ⅱ期10 例、Ⅲ～Ⅳ期 37 例.免疫表型 PCBP1、MUM1、CD38、c-myc 和 LMO2 的阳性表达率分别为 100％(47/47)、63.8％(30/47)、100％(47/47)、97.9％(46/47)、0％(0/47);EBER 阳性率为 27.7％(13/47),c-myc 基因重排率为 100％(47/47),无11q23.3/11q24.3基因异常(0/15).47例BL中PCBP1细胞核和细胞质同时阳性表达38例,9例仅为细胞质阳性表达.PCBP1阳性表达模式与性别、发病年龄、发病部位、临床分期、MUM1和EBER表达均无关(P＞0.05).结论 儿童伯基特淋巴瘤主要与伴11q异常的高级别B细胞淋巴瘤、弥漫性大B细胞淋巴瘤进行鉴别,联合检测CD38、c-myc、LMO2和EBER具有诊断和鉴别诊断价值.PCBP1在儿童伯基特淋巴瘤中高表达,其表达模式的具体意义和机制有待进一步研究.

目的:本研究旨在探讨lncRNA PCBP1-AS1在肝细胞癌EMT转化中的调控作用及其机制,为肝细胞癌的防治提供新靶点.方法:收集了21例肝细胞癌患者的肝癌组织和相应的癌旁正常组织作为细胞检测标本.采用Real-Time PCR检测和蛋白免疫印迹法检测细胞中lncRNA PCBP1-AS1,miR-199,XBP1等基因的表达;使用皮尔逊相关系数法分析lncRNA PCBP1-AS1表达水平与肝细胞癌TNM分期的相关性;并利用生物信息学预测及荧光素酶报告基因实验验证lncRNA PCBP1-AS1与miR-199间的相互作用;通过转染miR-199 mimc或inhibitor构建miR-199 mimc或inhibitor的Hep3B细胞模型;Transwell实验检测细胞的侵袭能力;划痕实验检测细胞的迁移能力;CCK-8法检测细胞活力;LDH释放实验检测细胞毒性.结果:与癌旁组织相比,肝癌组织中LncRNA PCBP1-AS1表达明显增加,其水平与肝细胞癌的TNM分期呈正相关;信息学预测lncRNA PCBP1-AS1与miR-199存在相互作用;miR-199 mimic可以显著减少转染lncRNA PCBP1-AS1-wt报告基因质粒的Hep3B细胞荧光素酶活性;转染lncRNA PCBP1-AS1质粒可明显上调Hep3B细胞中lncRNA PCBP1-AS1、XBP1、Snai1、Vimentin mRNA及蛋白的表达,下调miR-199、E-cadherin mRNA及蛋白的表达,增加Hep3B细胞的活力、迁移、侵袭能力,减少Hep3B细胞LDH的释放,而上述作用可被miR-199 mimic抑制或被miR-199 inhibitor促进.结论:lncRNA PCBP1-AS1通过结合miR-199并减少其表达水平,可上调肝癌细胞中XBP1Snai1、Vimentin的表达,同时下调E-cadherin基因的表达,从而促进了上皮-间充质转化(EMT),是肝细胞癌的潜在靶点.

Infection of H5N1 influenza virus causes the highest mortality among all influenza viruses.The mechanisms underlying such high viral pathogenicity are incompletely understood.Here,we report that the H5N1 influenza virus encodes a microRNA-like small RNA,miR-HA-3p,which is processed from a stem loop-containing viral RNA precursor by Argonaute 2,and plays a role in enhancing cytokine production during H5N1 infection.Mechanistic study shows that miR-HA-3p targets poly(rC)-binding protein 2 (PCBP2) and suppresses its expression.Consistent with PCBP2 being an important negative regulator of RIG-I/MAVS-mediated antiviral innate immunity,suppression of PCBP2 expression by miR-HA-3p promotes cytokine production in human macrophages and mice infected with H5N1 virus.We conclude that miR-HA-3p is the first identified influenza virus-encoded microRNA-like functional RNA fragment and a novel virulence factor contributing to H5N1-induced'cytokine storm'and mortality.

目的 研究低氧微环境下胶质瘤干细胞表型变化与RNA结合蛋白表达之间的关系.方法1% O2的低氧条件培养胶质瘤干细胞U87MG-SLC和GSC5,20% O2为常氧对照.分别利用MTS实验和肿瘤球形成实验检测其增殖能力和自我更新能力;Western blot检测干性相关蛋白和RNA结合蛋白表达水平的变化;通过吸光度扫描进行统计分析.结果 低氧条件下肿瘤干细胞的增殖能力下降(P<0.05),自我更新能力上升(P<0.05),HIF-1α和干性标志物Nestin和SOX2上调(P<0.01;P<0.05).与常氧组相比,低氧组胶质瘤干细胞的多种RNA结合蛋白表达水平发生变化:hnRNPF、UNRIP以及HuD表达水平上调(P<0.05),PCBP2和UNR表达水平下调(P<0.01;P<0.05),而其他RNA结合蛋白(hnRNPK、ADAR1、PCBP1、CIRP、EBP1、eEF1A、PTBP1、PTBP2)表达水平没有显著性变化.结论 低氧微环境下,胶质瘤干细胞的表型变化与RNA结合蛋白hnRNPF、UNRIP、HuD、PCBP2和UNR表达水平相关.

Poly(rC)-结合蛋白[poly (C)-binding proteins,PCBPs]具有高度亲和力,以及与多聚胞嘧啶结合的特殊序列.PCBPs在哺乳动物细胞中广泛表达,其包含4种亚型:PCBP1-4.在真核细胞中,PCBP1通过与基因启动子的特殊位点结合来发挥信号依赖与协调转录调控作用.PCBPs功能多样,通过酵母双杂交研究发现PCBP1在蛋白-RNA,蛋白-蛋白相互作用的层面更是参与多个功能环路,发挥了多种胞内作用.目前PCBP1在各个系统肿瘤,病毒感染,铁离子的转运等方面成为研究热点.本文就PCBP1的重要生物学功能进行相关综述.

目的 研究核不均一核糖核蛋白(PCBP1)对6-OHDA作用的神经母细胞瘤细胞系SH-SY5Y细胞凋亡的影响.方法 构建含PCBP1的真核表达载体pEGFP/N1-PCBP1,转染SH-SY5Y细胞,用不同浓度6-OHDA对转染后SH-SY5Y细胞刺激不同时间后,流式细胞仪检测分析细胞凋亡率.结果 不同浓度的6-OHDA对转染PCBP1重组质粒的实验组和转染空质粒的对照组细胞作用24h后,实验组细胞早期凋亡率低于对照组细胞,差异有统计学意义(P＜0.05);但实验组和对照组细胞晚期凋亡率比较,差异无统计学意义(P＞0.05).另外,25μmol/L 6-OHDA分别对实验组和对照组细胞作用不同时间后,同样,实验组细胞早期凋亡率低于对照组细胞,差异有统计学意义(P＜0.05);该浓度6-OHDA作用不同时间后,实验组和对照组细胞晚期凋亡率比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 过表达PCBP1基因可抵抗6-OHDA对SH-SY5Y细胞的早期凋亡作用,降低细胞凋亡率.