目的:探讨多聚嘧啶区结合蛋白1(PTBP1)在胃癌组织和人胃癌细胞株中的表达，以及PTBP1对胃癌细胞增殖与转移的作用机制。方法:收集2019年1至6月于西安交通大学第一附属医院行外科手术切除的胃癌患者的癌组织与对应的癌旁组织。运用Kaplan-Meier Plotter数据库分析胃癌患者的生存情况。选择PTBP1表达水平相对较高的人胃癌细胞株SGC7901和AGS进行小干扰RNA(siRNA)转染下调PTBP1表达，实验分为空白对照组、阴性对照组和 PTBP1敲低组。分别运用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测胃癌细胞中 PTBP1 mRNA和PTBP1的表达。通过MTT法转染24、48、72、96 h后，观察PTBP1对胃癌细胞增殖的作用；Transwell实验检测下调PTBP1后胃癌细胞侵袭和迁移的变化，蛋白质印迹法检测下调PTBP1后胃癌细胞上皮-间质转化(EMT)标志物E-钙黏蛋白、N-钙黏蛋白和波形蛋白的改变。采用独立样本 t检验、方差分析和秩和检验进行统计学分析。 结果:Kaplan-Meier Plotter预后分析显示，高表达PTBP1胃癌患者总生存期短于低表达PTBP1胃癌患者[9.2个月(6.2个月，17.2个月)比19.0个月(14.5个月，28.4个月)]，差异有统计学意义( Z＝5.31， P<0.05)。实时荧光定量PCR检测结果显示，人胃癌细胞株SGC7901和AGS中， PTBP1敲低组 PTBP1 mRNA表达水平均低于空白对照组和阴性对照组(SGC7901：0.78±0.11比3.10±0.19、2.99±0.23。AGS：0.80±0.09比3.55±0.24、3.50±0.18)，差异均有统计学意义( tSGC7901＝10.57、8.08， tAGS＝10.91、13.42； P均<0.01)。蛋白质印迹结果显示，人胃癌细胞株SGC7901和AGS中， PTBP1敲低组PTBP1表达水平均低于空白对照组和阴性对照组(SGC7901：0.38±0.04比1.42±0.05、1.35±0.09。AGS：0.17±0.02比1.52±0.08、1.38±0.45)，差异均有统计学意义( tSGC7901＝15.94、10.57， tAGS＝16.60、20.80； P均<0.01)。MTT结果显示，转染48、72、96 h后， PTBP1敲低组的吸光度值较阴性对照组分别下降了0.25±0.01、0.38±0.02、0.84±0.04，其中转染96 h后的差值最显著，差异有统计学意义( t＝10.21、14.32， P均<0.01)。Transwell实验结果显示，人胃癌细胞株SGC7901和AGS中， PTBP1敲低组发生侵袭和迁移的细胞数均少于空白对照组和阴性对照组(SGC7901：42.00±5.91比116.40±10.23、114.40±10.43；39.60±6.77比125.80±11.51、122.40±5.90。AGS：40.20±7.25比115.60±14.63、117.40±9.12；36.00±5.20比122.40±12.10、125.40±12.74)，差异均有统计学意义( tSGC7901＝14.07、13.50、14.43、20.62， tAGS＝10.27、14.75、14.68、16.76； P均<0.01)。蛋白质印迹结果显示， PTBP1敲低组E-钙黏蛋白表达水平均高于空白对照组和阴性对照组(SGC7901：1.42±0.05比0.53±0.05、0.57±0.03。AGS：1.34±0.04比0.54±0.03、0.61±0.01)，而N-钙黏蛋白和波形蛋白的表达水平均低于空白对照组和阴性对照组(SGC7901：0.50±0.03比1.64±0.05、1.46±0.07，0.32±0.07比1.42±0.07、1.33±0.07。AGS：0.37±0.06比1.47±0.04、1.36±0.04，0.41±0.04比1.53±0.06、1.37±0.04)，差异均有统计学意义( tSGC7901＝11.63、13.19、18.83、11.68、11.43、10.43， tAGS＝15.02、16.23、14.67、12.97、14.45、17.18； P均<0.01)。 结论:胃癌组织和细胞中PTBP1表达水平均升高，并且参与调控胃癌细胞的增殖、转移和EMT。

目的:探讨微小RNA(miR)-133b靶向调控多聚嘧啶通道结合蛋白1(PTBP1)调控乳腺癌细胞生物学的行为机制。方法:选取乳腺癌及癌旁组织标本83例，收集患者临床病理资料，同时选取乳腺癌细胞系(MCF-7)、正常乳腺上皮细胞系(MCF-10A)，实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测miR-133b和PTBP1 mRNA表达，分析与临床病理特征的关系，MCF-7细胞分为阴性对照组、miR-133b模拟物(mimic)组、miR-133b inhibitor组、miR-133b mimic+PTBP1沉默组和miR-133b inhibitor+和PTBP1沉默组，噻唑蓝(MTT)实验与流式细胞术分别检测MCF-7细胞增殖及周期的变化，划痕实验和Transwell小室检测细胞迁移及侵袭，蛋白质印迹法(Western blot)检测B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)、bcl-2相关X蛋白(bax)和PTBP1蛋白表达，双荧光素酶实验验证miR-133b对PTBP1的靶向调控机制。多组间比较采用单因素方差分析，两两比较采用LSD- t检验，计数资料采用 χ2检验和Fisher精确检验进行分析。 结果:miR-133b和PTBP1 mRNA在乳腺癌组织(0.94±0.18、4.28±0.27)及乳腺癌细胞的表达水平(1.09±0.22、3.65±0.19)分别明显低于和高于癌旁组织(2.12±0.09、 t＝4.343， P<0.05；1.37±0.21、 t＝6.006， P<0.05)及MCF-10A细胞(1.99±0.11、 t＝5.223， P<0.05；1.15±0.09、 t＝5.774， P<0.05)。miR-133b和PTBP1均与TNM分期(1.204±0.057、3.865±0.172， χ2＝6.217， P<0.001)和淋巴转移(0.489±0.041、1.632±0.147， χ2＝7.031， P<0.001)等明显相关，而与年龄(0.601±0.052、2.008±0.187， χ2＝0.261， P>0.05)、分化程度(0.592±0.057、1.994±0.187， χ2＝0.274， P>0.05)和病理分级无关(0.587±0.059、1.921±0.172， χ2＝0.257， P>0.05)。与阴性对照组比较，miR-133b mimic组增殖率[(35.43±1.74)%、(8.43±0.35)%， F＝166.465， P<0.05]、迁移、侵袭细胞数(109±10.562、77±5.751， t＝4.663， P<0.05；128±11.624、81±7.251， t＝7.453， P<0.05)、bcl-2(2.78±0.32、0.76±0.11， t＝4.122， P<0.05)和PTBP1表达(3.45±0.33、0.89±0.26， t＝3.154， P<0.05)明显降低，G 1期阻滞明显延长( F＝276.872， P<0.05)，bax表达明显增加(1.22±0.12、3.39±0.46， t＝9.123， P<0.05)，miR-133b mimic+PTBP1沉默组变化更为明显(1.22±0.12、7.71±0.23， t＝6.009， P<0.05)，miR-133b inhibitor组明显逆转上述指标变化(1.22±0.12、0.76±0.11， t＝3.334， P<0.05)，miR-133b inhibitor+PTBP1沉默组逆转更为明显(1.22±0.12、0.33±0.11， t＝5.098， P<0.05)。双荧光素酶实验显示miR-133b可靶向调控PTBP1。 结论:miR-133b靶向调控PTBP1从而抑制乳腺癌细胞增殖、迁移、侵袭并促进细胞凋亡。

目的:探讨长链非编码RNA（lncRNA） DIO3OS对氯胺酮诱导的小鼠海马神经元细胞毒性的影响及其作用机制。方法:（1）分离并培养原代小鼠海马神经元，应用CCK-8法检测不同浓度（0、25、50、100、200 μmol/L）氯胺酮对细胞活力的影响，qPCR法检测 DIO3OS mRNA的表达。（2）将海马神经元分为对照组、氯胺酮组（50 μmol/L氯胺酮培养24 h）、氯胺酮+pc组（转染pcDNA3.1质粒48 h后加50 μmol/L氯胺酮培养24 h）、氯胺酮+DIO3OS组（转染pcDNA3.1-DIO3OS质粒48 h后加50 μmol/L氯胺酮培养24 h），应用CCK-8法检测各组细胞活力，乳酸脱氢酶（LDH）细胞毒性检测试剂盒检测LDH释放量，流式细胞术检测细胞凋亡情况，qPCR法检测 DIO3OS、脑源性神经营养因子（ BDNF） mRNA的表达，Western blotting实验检测多聚嘧啶区结合蛋白1（PTBP1）、BDNF蛋白的表达。（3）提取正常海马神经元的总蛋白，应用RNA沉降实验检测 DIO3OS mRNA及 BDNF mRNA与PTBP1蛋白的结合能力。（4）将海马神经元分为氯胺酮+DIO3OS+si-NC组（同时转染pcDNA3.1-DIO3OS和si-NC质粒48 h后加50 μmol/L氯胺酮培养24 h）、氯胺酮+DIO3OS+si-PTBP1组（同时转染pcDNA3.1-DIO3OS和si-PTBP1质粒48 h后加50 μmol/L氯胺酮培养24 h），应用qPCR法检测DIO3OS、 BDNF mRNA的表达，Western blotting实验检测PTBP1、BDNF蛋白的表达。（5）将海马神经元分为氯胺酮组（50 μmol/L氯胺酮培养24 h）、氯胺酮+si-DIO3OS组（转染si-DIO3OS质粒48 h后加50 μmol/L氯胺酮培养24 h）、氯胺酮+si-PTBP1组（转染si-PTBP1质粒48 h后加50 μmol/L氯胺酮培养24 h）、氯胺酮+si-DIO3OS+si-PTBP1组（同时转染si-DIO3OS和si-PTBP1质粒48 h后加50 μmol/L氯胺酮培养24 h），应用qPCR法检测 DIO3OS、 BDNF mRNA的表达，Western blotting实验检测BDNF蛋白的表达。（6）将海马神经元分为氯胺酮+DIO3OS+si-NC组（同时转染pcDNA3.1-DIO3OS和si-NC质粒48 h后加50 μmol/L氯胺酮培养24 h）、氯胺酮+DIO3OS+si-BDNF组（同时转染pcDNA3.1-DIO3OS和si-BDNF质粒48 h后加50 μmol/L氯胺酮培养24 h），应用CCK-8法检测细胞活力，LDH细胞毒性检测试剂盒检测LDH释放量，流式细胞术检测细胞凋亡情况。 结果:（1）25、50、100、200 μmol/L氯胺酮组海马神经元细胞活力、 DIO3OS mRNA表达均较0 μmol/L氯胺酮组明显降低，差异均有统计学意义（ P<0.05）。（2）与对照组相比，氯胺酮组海马神经元中 DIO3OS mRNA表达、细胞活力明显降低，LDH释放量明显增加，凋亡率明显增加，BDNF mRNA和蛋白表达明显降低，PTBP1蛋白表达明显降低，差异均有统计学意义（ P<0.05）；与氯胺酮+pc组相比，氯胺酮+DIO3OS组海马神经元中 DIO3OS mRNA表达、细胞活力明显增加，LDH释放量明显降低，凋亡率明显降低，BDNF mRNA和蛋白表达明显增加，差异均有统计学意义（ P<0.05）。（3）RNA沉降实验显示生物素化标记的DIO3OS、BDNF均可吸附PTBP1蛋白，但生物素化标记的DIO3OS、BDNF反义链均不能吸附PTBP1蛋白。（4）与氯胺酮+DIO3OS+si-NC组相比，氯胺酮+DIO3OS+si-PTBP1组海马神经元中BDNF mRNA和蛋白表达均明显降低，PTBP1蛋白表达明显降低，差异均有统计学意义（ P<0.05）；2组间 DIO3OS mRNA表达的差异无统计学意义（ P>0.05）。（5）与氯胺酮组相比，氯胺酮+si-DIO3OS组、氯胺酮+si-DIO3OS+si-PTBP1组海马神经元中 DIO3OS mRNA表达均明显降低，差异均有统计学意义（ P<0.05）；与氯胺酮组相比，氯胺酮+si-DIO3OS组、氯胺酮+si-PTBP1组海马神经元中BDNF mRNA和蛋白表达均明显降低，差异均有统计学意义（ P<0.05）；与氯胺酮+si-DIO3OS组、氯胺酮+si-PTBP1组相比，氯胺酮+si-DIO3OS+si-PTBP1组海马神经元中BDNF mRNA和蛋白表达均明显增加，差异均有统计学意义（ P<0.05）。（6）与氯胺酮+DIO3OS+si-NC组相比，氯胺酮+DIO3OS+si-BDNF组海马神经元的细胞活力明显降低，LDH释放量明显增加，凋亡率明显增加，差异均有统计学意义（ P<0.05）。 结论:LncRNA DIO3OS在氯胺酮诱导的原代小鼠海马神经元中表达降低，而过表达DIO3OS可通过结合PTBP1调控BDNF的表达来缓解氯胺酮诱导的神经元细胞毒性。

目的:观察探讨聚嘧啶束结合蛋白相关剪接子（PSF）高表达对糖基化终末产物（AGEs）诱导下人视网微血管内皮细胞（hRMECs）氧化损伤的保护作用及相应分子机制。方法:将hRMECs分为正常组、空载组、PSF组、锌原卟啉（ZnPP）组及PSF+ ZnPP组进行实验。正常组细胞使用含有10％胎牛血清、青霉素/链霉素的DMEM培养基，置于37 °C、95％空气、5% CO 2的密闭恒温培养箱中培养。空载组细胞采用空载慢病毒感染。PSF组细胞采用过表达PSF慢病毒感染。ZnPP组细胞采用ZnPP （10 mol/L）处理2 h。PSF+ZnPP组细胞采用过表达PSF慢病毒感染后，再用ZnPP （10 mol/L）预处理2 h。后四组细胞辅以AGEs刺激，HE、Hoechst33258染色法和流式细胞法观察PSF高表达对细胞损伤的保护作用以及ZnPP对PSF的拮抗作用。采用Western blot检测细胞中血红素氧合酶-1 (HO-1)、磷酸化（p）细胞外调节蛋白激酶（ERK）、核因子2相关因子2 （Nrf2）的蛋白表达。引入ERK通路的特异性拮抗剂U0126，Western blot验证U0126对PSF蛋白所诱导的HO-1表达的逆转作用。 结果:HE染色和Hoechst33258染色结果显示，PSF组受损细胞核数较正常组明显增加，较PSF+ZnPP组明显减少，差异均有统计学意义（ F=27.5、38.7， P<0.05）。流式细胞法结果显示，PSF组细胞产生的ROS较正常组明显增加，较PSF+ZnPP组明显减少，差异有统计学意义（ F=126.4， P<0.05）。Western blot检测结果显示，PSF组HO-1蛋白表达量较正常组、空载组明显增加，差异均有统计学意义（ F=70.1， P<0.05）；AGEs处理30、60、120、240 min时pERK的蛋白表达量与15 min时比较，差异均有统计学意义（ F=474.0， P<0.05）；PSF+/U0126-组HO-1、Nrf2蛋白表达量较PSF-/U0126-组明显增加，PSF+/U0126＋组HO-1、Nrf2蛋白表达量较PSF+/U0126-组明显降低，差异有统计学意义（ F=30.2、489.4， P<0.05 ）。 结论:PSF高表达可以通过活化ERK通路，促进Nrf2转位入核进而诱导HO-1表达，从而保护hRMECs免受AGEs诱导的氧化损伤。

目的:明确多聚嘧啶序列结合蛋白(polypyrimidine tract binding protein, PTB)在正常人和骨质疏松大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells, BMSCs)成骨分化中的作用及其机制。方法:收集中国医学科学院整形外科医院收治的4例齿槽嵴裂患儿术后废弃骨髓血，原代分离培养人BMSCs并诱导分化为成骨细胞，RT-PCR和蛋白质印迹法检测PTB在诱导分化7 d和14 d的表达水平；应用shRNA技术对人BMSCs中PTB的表达进行敲减，茜素红染色和荧光定量PCR评价其对成骨分化的影响；体外分别应用浓度为10 ng/ml和40 ng/ml的肿瘤坏死因子α(TNF-α) 处理人BMSCs，荧光定量PCR和茜素红染色检测其对PTB表达及成骨分化能力的影响；流式细胞术检测人BMSCs经PTB敲减后细胞内活性氧(ROS)含量。10只6个月龄雌性SD大鼠采用随机数字表法随机分为卵巢切除骨质疏松模型组和假手术组，每组5只，荧光定量PCR检测其BMSCs中PTB的表达变化。各项定量数据以均值±标准差表示，2组间比较应用 t检验， P<0.05为差异具有统计学意义。 结果:BMSCs成骨诱导分化7 d和14 d PTB表达显著升高，敲减PTB并成骨诱导14 d后，成骨标志基因 RUNX2和 ALP相对表达量显著下降，分别为对照组的0.74±0.15和0.29±0.18倍( t＝3.490、 P＝0.039， t＝7.983、 P＝0.004)，且茜素红染色阳性的矿化结节形成减少。10 ng/ml TNF-α( t＝3.528, P＝0.039)和40 ng/ml TNF-α( t＝4.306, P＝0.023)均下调BMSCs中PTB表达，并抑制成骨分化。敲减PTB后BMSCs细胞内ROS含量(720.7±129.7)较对照组(1 204.0±300.1) 下降，差异具有统计学意义( t＝4.872, P＝0.040)。相比于假手术组(0.001 66±0.000 18)，卵巢切除骨质疏松模型大鼠BMSCs中PTB的相对表达量(0.001 25±0.000 12)显著降低( t＝3.217, P＝0.032)。 结论:PTB的表达可促进BMSCs成骨分化，PTB敲减介导的ROS含量下调是其调控BMSCs成骨分化的一个重要机制。

目的:检测多嘧啶序列结合蛋白1(PTBP1)在前列腺癌中的表达水平，并探究PTBP1对前列腺癌细胞增殖、迁移和上皮-间充质转化(EMT)的影响。方法:运用UALCAN数据库分析PTBP1基因在前列腺癌组织中的表达水平、PTBP1基因与前列腺癌患者总生存期(OS)的关系，收集前列腺癌及癌旁组织，采用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)和蛋白质印迹法(Western blot)技术检测前列腺癌及癌旁组织、正常前列腺上皮细胞及前列腺癌细胞中PTBP1 mRNA和蛋白质的相对表达水平。在前列腺癌PC3细胞中转染siRNA-PTBP1，将细胞分为转染组(si-PTBP1)和对照组(NC)，采用RT-qPCR和Western blot验证转染效率。利用细胞克隆形成实验和细胞计数盒(CCK-8)实验检测细胞增殖能力；利用Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力；利用Western blot检测β-连环蛋白(β-catenin)及EMT标志蛋白的表达水平；所有结果应用SPSS 26.0统计软件分析。结果:UALCAN数据库显示PTBP1基因在前列腺癌组织中表达水平升高( P<0.001)，患者总生存期(OS)与PTBP1表达水平呈负相关( P<0.05)；RT-qPCR和Western blot结果表明前列腺癌组织中PTBP1 mRNA和蛋白相对表达水平高于癌旁组织(mRNA：2.31±0.12比1.02±0.11， t＝14.343， P<0.05；蛋白：101.00±9.54比42.33±8.50， t＝7.951， P<0.05)，PC3和DU145细胞中PTBP1相对表达水平高于正常前列腺上皮细胞(mRNA：7.13±0.09比1.02±0.13、4.31±0.11比1.02±0.13， t＝66.578、33.310， P<0.05；蛋白：202.67±11.50比101.33±9.07、172.67±13.05比101.33±9.07， t＝11.979、7.773， P<0.05)；转染组细胞PTBP1 mRNA和蛋白相对表达水平低于对照组(mRNA：0.32±0.09比1.03±0.09， t＝9.040， P<0.05；蛋白：43.33±11.50比104.33±11.06， t＝6.621， P<0.05)；细胞克隆形成实验结果表明转染组细胞克隆形成数目低于对照组[(81.33±11.50)个比(181.00±12.00)个， t＝10.385， P<0.05]；CCK-8实验中，转染组细胞在48、72、96 h的增殖活性均低于对照组(48 h：0.40±0.09比0.62±0.11、72 h：0.63±0.11比1.01±0.09、96 h：0.85±0.11比1.65±0.09， t＝2.076、4.692、9.549， P<0.05)；Transwell迁移实验中，转染组细胞迁移数目低于对照组[(43.33±11.50)个比(131.33±10.59)个， t＝9.744， P<0.05]，侵袭实验中，转染组细胞侵袭数目低于对照组[(36.00±10.54)个比(91.67±8.62)个， t＝7.082， P<0.05]；此外，Western blot实验结果表明转染组细胞β-catenin、N-cadherin和Vimentin的蛋白表达水平低于对照组(β-catenin：99.33±8.02比24.33±8.02， t＝11.452， P<0.05；N-cadherin：101.67±8.50比21.33±7.51， t＝12.267， P<0.05；Vimentin：102.67±8.50比20.00±10.15， t＝10.813， P<0.05)，转染组细胞E-cadherin的蛋白表达水平高于对照组(100.67±7.51比189.33±8.50， t＝13.539， P<0.05)，以上差异均有统计学意义。 结论:PTBP1在前列腺癌组织和细胞中异常高表达，可促进前列腺癌细胞的增殖、迁移和EMT。

目的:观察多聚嘧啶序列结合蛋白相关剪接因子（PSF）对缺氧诱导的人视网膜微血管内皮细胞（hRMECs）功能的影响。方法:采用三质粒系统构建慢病毒颗粒（LV）-PSF。LV-PSF体外感染hRMECs后通过流式细胞计数法测定其感染效率。应用实时定量PCR （RT-PCR）检测经LV-PSF感染的hRMECs中PSF mRNA表达水平。将实验分为体内和体外两部分。体内实验：7日龄健康C57B/L6小鼠20只，采用随机数字表法分为正常组、氧诱导视网膜病变（OIR）组、OIR+LV-空载体（Vec）组和OIR+LV-PSF组，每组5只。除正常组外，其余3组构建OIR模型。OIR组除缺氧刺激外，不做其余处理。OIR+LV-Vec组和OIR+LV-PSF组小鼠分别玻璃体腔注射LV-Vec或LV-PSF。观察LV-PSF对视网膜新生血管（RNV）形成的影响。体外实验：将hRMECs分为正常组、缺氧组、空载组、PSF高表达组。正常组为正常体外培养的hRMECs；缺氧组为缺氧刺激3 h恢复正常培养条件24 h的hRMECs；空载组、PSF高表达组分别为用LV-Vec、LV-PSF感染48 h，再用缺氧刺激3 h恢复正常培养条件24 h的hRMECs。采用MTT比色法观察PSF对细胞增生能力的影响。采用细胞划痕实验和Transwell迁移实验观察PSF对缺氧刺激下细胞迁移能力的影响。采用RT-PCR观察各组细胞中HIF-1α、VEGF及PSF的mRNA表达。结果:成功构建可稳定高表达PSF的LV-PSF，流式细胞仪测定其感染效率为97%，RT-PCR测得经LV-PSF感染的hRMECs中PSF mRNA水平明显上调。体内实验：OIR组、OIR+LV-Vec组小鼠RNV面积较正常组明显增加（ t=18.31、43.71），OIR+LV-PSF组小鼠RNV面积较OIR组（ t=11.30）、OIR+LV-Vec组（ t=15.47）明显减小，差异均有统计学意义（ P <0.05 ）。体外实验：MTT比色法检测结果显示，缺氧组hRMECs增生能力较正常组明显增强（ t=2.57），PSF高表达组hRMECs增生能力较正常组、缺氧组、空载组明显降低（ t=5.26、5.46、3.73 ），差异均有统计学意义（ P<0.05 ）。细胞划痕实验结果显示，缺氧刺激3 h恢复正常条件24 h或48 h均可刺激缺氧组与空载组细胞明显迁移（ t=8.35、13.84， P<0.05 ）；而与缺氧组与空载组比较，PSF高表达组细胞迁移不明显（ t=10.99、18.27、9.75、8.93、26.94、7.01 ， P <0.05）。Transwell小室实验结果显示，正常组和空载组微孔膜上染色的细胞数较多，而PSF高表达组微孔膜上染色的细胞数明显减少（ t=9.33、6.15， P<0.05）。RT-PCR检测结果显示，与正常组比较，缺氧组、空载组hRMECs中HIF-1α、VEGF的mRNA表达明显增加（ t=15.23、21.09， P<0.05），PSF mRNA表达无明显变化（ t=0.12、2.15， P<0.05 ）；与缺氧组、空载组比较，PSF高表达组hRMECs中HIF-1α、VEGF的mRNA表达明显下降（ t=10.18、13.10， P<0.05），PSF mRNA表达明显增加（ t=65.00、85.79， P<0.05 ）。 结论:PSF可减少OIR模型小鼠RNV面积。PSF可能通过HIF-1α/VEGF信号通路抑制缺氧诱导的hRMECs增生和迁移。

目的：:研究原发性干燥综合征（PSS）相关干眼患者泪液中多聚胞嘧啶结合蛋白1（PCBP1）的表达水平及其与临床干眼指标之间的相关性。方法：:病例对照研究。选取2023年7—10月在浙江中医药大学附属第二医院眼科确诊为PSS伴干眼的患者6例（12眼）为SS干眼组，同期选取健康人6例（12眼）为正常组，选取同家医院非SS干眼患者6例（12眼）为非SS干眼组，分别完成3组研究对象的眼表疾病指数问卷（OSDI）、泪河高度（TMH）、非侵入式泪膜破裂时间（NIBUT）、角膜荧光素染色（CFS）、睑板腺缺失度评分（MGL）、眼红指数（ORI）、Schirmer试验（SIt）和泪液采集。ELISA检测3组泪液中PCBP1的表达水平，并分析其与临床干眼指标的相关性，采用单因素方差分析、Pearson相关分析、受试者工作特征曲线进行数据分析。结果：:OSDI评分：正常组<非SS干眼组非SS干眼组>SS干眼组，差异均有统计学意义（均 P<0.05）。CFS：正常组<非SS干眼组0.05）。ORI：正常组0.05）。受试者工作特征曲线分析显示，泪液PCBP1表达水平诊断PSS干眼症的曲线下面积为0.944，得到最大约登指数为0.817，最大阈值为1.201，此时灵敏度和特异度分别为0.956和0.861。ELISA定量测定泪液PCBP1结果显示正常组<非SS干眼组

目的:探讨Circ_0000291作为miR-326的分子海绵调控多聚嘧啶区结合蛋白1(PTBP1)对肝细胞癌(HCC)细胞增殖、凋亡和免疫逃逸的影响.方法:qRT-PCR检测Circ_0000291、miR-326、PTBP1在组织标本和细胞中的表达.双荧光素酶报告实验检测Circ_0000291和miR-326以及miR-326和PTBP1的靶向调控关系.CCK-8、Transwell、流式细胞术和ELISA分别检测细胞的增殖、侵袭、凋亡以及免疫调控相关因子TNF-α、IFN-γ的表达.结果:相对于正常组织和肝细胞,Circ_0000291和PTBP1在HCC组织标本和细胞中表达升高,而miR-326表达水平显著降低(均P<0.05).下调Circ_0000291可以抑制细胞的增殖、侵袭和免疫逃逸,诱导细胞凋亡(均P<0.05),转染miR-326后观察到与下调Circ_0000291类似的结果,但是上调Circ_0000291可以部分拮抗miR-326对细胞的作用(均P<0.05).在HCC中,Circ_0000291作为分子海绵调控miR-326表达,促进PTBP1表达.结论:Circ_0000291可以吸附miR-326从而上调PTBP1,促进HCC细胞的增殖、侵袭和免疫逃逸,抑制凋亡,从而促进HCC的发展.

目的 探索胃癌组蛋白 H3 第 4 位赖氨酸的三甲基化(trimethylation of lysine 4 on histone H3,H3K4me3)修饰相关长链非编码RNA(long non-coding RNA,LncRNA)特征,构建相关预后模型并预测胃癌免疫治疗疗效.方法 从癌症基因组图谱数据库下载胃癌相关转录组测序数据和对应的患者临床资料,通过构建 H3K4me3 相关调节因子基因与 LncRNA 的共表达网络识别H3K4me3 修饰相关LncRNA,并将癌症基因组图谱数据库中 370 例符合筛选标准的胃癌患者样本(整体组)按 1∶1 随机抽样划分为训练组(n=185)和验证组(n=185).随后基于单因素Cox回归、Lasoo回归分析构建H3K4me3 相关LncRNA预后风险评分模型并进行内部验证.Kaplan-Meier生存分析和受试者操作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC 曲线)被用于验证模型的预测性能.通过单因素和多因素Cox回归分析评估风险评分等临床指标的预后预测价值.结合风险评分、年龄和肿瘤TNM分期构建预测胃癌患者总生存率的列线图模型,ROC曲线与校准图被用于评估列线图的预测准确性.借助共识聚类识别异质性聚类亚群并进行免疫治疗疗效预测.结果 基于共表达网络关系识别了 14 个具有预后价值的H3K4me3 相关LncRNA并构建了相关风险模型及评价体系.根据训练组预后风险评分模型获得的中位风险评分将训练组、验证组和整体组胃癌患者划分为高、低风险,Kaplan-Meier生存曲线显示低风险患者的总体生存情况要优于高风险患者(P＜0.05).此外,该模型在训练组中预测胃癌患者 1、3、5 年总生存率的曲线下面积(area under curve,AUC)分别为0.708、0.730、0.770,在验证组中分别为 0.690、0.648、0.713,而在整体组中分别为 0.697、0.670、0.724.多因素Cox回归分析显示基于H3K4me3 相关LncRNA构建的风险评分模型是预测胃癌患者预后的独立因素(P＜0.001).构建的列线图预测胃癌患者 1、2、3 年总生存率的AUC分别为 0.727、0.780、0.717,且其校准曲线与理想曲线相接近.基于共识聚类算法进一步识别了 2 种具有异质性免疫特征的H3K4me3-LncRNA亚群,其中亚组Ⅱ具有更高的免疫细胞浸润水平和更强的免疫应答潜力,并对5-氟尿嘧啶、奥沙利铂等显示出更高的药物敏感性,而亚组Ⅰ则可能对磷脂酰肌醇 3-激酶特异性抑制剂具有更高的敏感性.结论 本研究构建了一个H3K4me3-LncRNA风险评分模型以预测胃癌患者的预后,并揭示了其异质性微观特征及在预测免疫治疗疗效方面的潜在价值.