目的:基于沉默信息调节因子1/叉头转录因子O1(SIRT1/FoxO1)信号通路探讨高压氧(HBO)对脑缺血再灌注(CIR)大鼠血脑屏障(BBB)的保护作用。方法:选取雄性Wistar大鼠40只，按照随机数字表法将其分成假手术组(Sham组)、模型组(CIR组)、CIR+HBO组、CIR+HBO+ SIRT1抑制剂(EX527)组，每组10只。采用改良线栓法建立大鼠右侧大脑中动脉栓塞模型，Sham组大鼠不进行结扎和线栓导入，CIR+HBO组和CIR+HBO+EX527组予以HBO干预，CIR+HBO+EX527组在此基础上再予以EX527处理。CIR+HBO组和CIR+HBO+EX527组于再灌注1 h、9 h、21 h、45 h、69 h进入HBO舱，期间行HBO治疗5次。在处死动物前1 h，经尾静脉注射2%伊文思兰(EB)，采用比色法、逆转录-聚合酶链(RT-PCR)和Western blot法分别检测再灌注72 h大鼠海马区脑组织EB含量，SIRT1、FoxO1、ZO-1、Occludin、Claudin-5 mRNA及蛋白表达变化。结果:CIR 72 h，CIR组、CIR+HBO组和CIR+HBO+EX527组大鼠海马区脑组织EB含量均较Sham组明显增加( P<0.05)，CIR+HBO+XE527组大鼠海马区脑组织EB的含量较CIR+HBO组显著增加( P<0.05)。CIR 72 h，CIR组、CIR+HBO组和CIR+HBO+EX527组大鼠海马区脑组织SIRT1、FoxO1、ZO-1、Occludin、Claudin-5 mRNA表达及其相应蛋白表达较Sham组均显著降低( P<0.05)，CIR+HBO+EX527组大鼠海马区脑组织SIRT1、FoxO1、ZO-1、Occludin、Claudin-5 mRNA表达及其相应蛋白表达较CIR+HBO组显著降低( P<0.05)。 结论:HBO可以通过SIRT1/FoxO1通路增加紧密连接蛋白的表达，从而在CIR损伤中对BBB起到保护作用。

目的:探讨七氟烷对大鼠肾缺血再灌注损伤的影响及其作用机制。方法:选取6~8周龄、体质量（250±30）g雄性SD大鼠40只，按数字表法随机分成假手术组（Sham组）、肾缺血再灌注组（IR组）、七氟烷预处理组（Sev组）、七氟烷预处理+沉默信号调节因子1（SIRT1）抑制剂组（EX组）4组，每组10只。肾缺血再灌注损伤模型制备前2天和术前10 min，Sham组、IR组、Sev组大鼠腹腔注射1% 二甲基亚砜（DMSO）溶液（5 mL/kg），EX组腹腔注射含抑制剂EX-527（1 mg/mL）的1% DMSO溶液（5 mL/kg）。Sham组：切除右侧肾脏，暴露左侧肾脏但不夹闭肾蒂；IR组：切除右侧肾脏，制备左侧肾脏缺血再灌注模型；Sev组、EX组：先吸入七氟烷45 min后，再按IR组方法制备缺血再灌注模型。于制备缺血再灌注模型术后3 h，收集各组大鼠肾脏组织与左心室血液，取材后以颈椎脱位法处死大鼠。观察项目：（1）检测各组大鼠左心室血液血清肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）。（2）制备各组大鼠肾脏组织病理切片，光镜下观察肾组织病理变化，对肾小管按Paller评分标准进行评分，评估肾脏损伤情况。（3）采用原位末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP切口末端标记技术（TUNEL）检测各组大鼠肾脏组织细胞凋亡情况。（4）取各组大鼠肾脏组织病理切片，在透射电子显微镜下观察肾脏组织自噬情况。（5）采用蛋白质印迹法（Western blotting）检测各组大鼠肾脏组织SIRT1、叉头盒转录因子O3（FoxO3）蛋白，以及凋亡蛋白（BAX/Bcl-2）、自噬相关蛋白（Beclin1、LC3A/B）的表达水平。结果:（1）Sham组大鼠血清Scr和BUN分别为（50.74±5.91）μmol/L和（10.11±0.80）mmol/L，IR组分别为（90.18±11.22）μmol/L和（53.39±6.29）mmol/L，Sev组分别为（63.70±8.69）μmol/L和（27.68±3.41）mmol/L，EX组分别为（80.18±9.15）μmol/L和（33.20±3.57）mmol/L。与Sham组相比，IR组、Sev组、EX组血清Scr、BUN水平均升高；与IR组相比，Sev组、EX组血清Scr、BUN水平均下降；与Sev组相比，EX组血清Scr、BUN 水平均升高：差异均有统计学意义（ P值均<0.05）。（2）Sham组肾小球和肾小管形态结构基本正常；IR组肾小管上皮组织肿胀明显，肾小管细胞排列紊乱，大量细胞核固缩，大量中性粒细胞浸润；Sev组：肾小管上皮细胞轻中度肿胀，少见核固缩坏死，中性粒细胞浸润明显减少；EX组：肾小管上皮组织肿胀明显，细胞核固缩和溶解增多，中性粒细胞浸润较多。Sham组、IR组、Sev组、EX组肾小管Paller评分分别为（0.61±0.15）、（5.05±0.55）、（2.68±0.33）、（4.51±0.49）分。与Sham组比较，IR组、Sev组、EX组Paller评分均升高；与IR组比较，Sev组、EX组Paller评分均下降；与Sev组相比，EX组Paller评分升高：差异均有统计学意义（ P值均<0.05）。（3）Sham组、IR组、Sev组、EX组细胞凋亡率分别为8.71%±0.68%、38.15%±2.23%、14.51%±2.02%、32.55%±2.89%。与Sham组比较，IR组、Sev组、EX组细胞凋亡率均升高；与IR组比较，Sev组、EX组细胞凋亡率下降；与Sev组比较，EX组细胞凋亡率升高：差异均有统计学意义（ P值均<0.05）。（4）与Sham比较，IR组、Sev组、EX组大鼠肾组织自噬小体数量均增加；与IR组比较，Sev组、EX组自噬小体数量增加且体积增大；与Sev组比较，EX组自噬小体数量明显减少：差异均有统计学意义（ P值均<0.05）。（5）与Sham组比较，IR组和EX组大鼠肾脏组织FoxO3、Beclin1、LC3A/B蛋白、BAX/Bcl-2蛋白的相对表达量均升高，SIRT1的相对表达量均降低；Sev组SIRT1、FoxO3、Beclin1、LC3A/B、BAX/Bcl-2蛋白的相对表达量均升高：差异均有统计学意义（ P值均<0.05）。与IR组比较，Sev组SIRT1、Beclin1、LC3A/B蛋白的相对表达量均升高，FoxO3、BAX/Bcl-2蛋白的相对表达量均降低；EX组SIRT1蛋白的相对表达量升高，FoxO3、BAX/Bcl-2蛋白的相对表达量均降低：差异均有统计学意义（ P值均<0.05）。与Sev组比较，EX组SIRT1、Beclin1、LC3A/B蛋白的相对表达量均降低，FoxO3、BAX/Bcl-2蛋白的相对表达量均升高，差异均有统计学意义（ P值均<0.05）。 结论:七氟烷可通过促进自噬，抑制细胞凋亡，减轻大鼠肾缺血再灌注损伤，其机制可能与激活SIRT1/FoxO3信号通路有关。

目的:评价沉默信息调节因子1(SIRT1)/叉头框蛋白O1(FoxO1)信号通路在三叶苷减轻大鼠脑缺血再灌注损伤中的作用。方法:清洁级健康雄性SD大鼠80只，6～8周龄，体质量230～280 g，采用随机数字表法分为4组( n＝20)：假手术组(S组)、脑缺血再灌注组(CIR组)、三叶苷＋脑缺血再灌注组(T组)和三叶苷＋脑缺血再灌注＋SIRT1/FoxO1信号通路抑制剂EX527组(E组)。采用大脑中动脉栓塞法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型。T组和E组大鼠于缺血前3 d时开始灌胃给予三叶苷15 mg/kg，2次/d，连续3 d；E组大鼠每次灌胃前腹腔注射EX527 5 mg/kg。于再灌注24 h时采用改良Longa评分评估神经功能，随后处死大鼠取全脑组织，采用TTC染色确定脑梗死体积，流式细胞术检测海马神经元凋亡率和ROS水平，Western blot法检测SIRT1及乙酰化FOXO1(Ac-FOXO1)表达，ELISA法检测SOD和MDA含量，HE染色后光镜下观察海马CA1区病理学结果。 结果:与S组比较，CIR组Longa评分、脑梗死体积、海马神经元凋亡率、ROS和MDA水平升高，SOD含量降低，SIRT1表达下调，Ac-FOXO1表达上调( P<0.05)；与CIR组比较，T组Longa评分、脑梗死体积、海马神经元凋亡率、ROS和MDA水平降低，SOD含量升高，SIRT1表达上调，Ac-FOXO1表达下调( P<0.05)；与T组比较，E组Longa评分、脑梗死体积、海马神经元凋亡率、ROS和MDA水平升高，SOD含量降低，SIRT1表达下调，Ac-FOXO1表达上调( P<0.05)。 结论:三叶苷可能通过激活SIRT1/FoxO1信号通路，抑制海马氧化应激反应和神经元凋亡，减轻大鼠脑缺血再灌注损伤。

目的:探讨白藜芦醇通过上调1型糖尿病小鼠肾脏自噬水平减轻足细胞损伤的机制。方法:选取健康雄性无特定病原体级昆明小鼠28只，以8只健康昆明小鼠作为正常对照组（NC组），剩余20只小鼠给予链脲佐菌素建立1型糖尿病小鼠模型，将造模成功的18只小鼠随机分为糖尿病组（DM组， n=9）和白藜芦醇干预组（Res组， n=9）。12周末检测24 h尿蛋白、血清肌酐、尿素氮水平，采用实时荧光定量聚合酶链反应、免疫印迹法检测沉默信号调节因子1（SIRT1）、叉头状转录因子O1（FoxO1）、微管相关蛋白1轻链3Ⅱ（LC3Ⅱ）、自噬接头蛋白（P62）、裂孔膜蛋白肾病蛋白（nephrin）及足突蛋白（podocin）的表达水平及磷酸化FoxO1（p-FoxO1）/FoxO1。免疫组织化学法观察足细胞nephrin、podocin的表达，应用HE染色及电镜的方法观察肾小球形态及超微结构的变化。多组间比较采用方差分析，组内比较采用LSD- t法。 结果:与NC组相比，DM组肌酐、尿素氮、24 h尿蛋白升高（ t=-39.57、-28.17、-57.31，均 P<0.05），SIRT1、LC3Ⅱ、nephrin及podocin表达减少，P62表达增多（均 P<0.05），p-FoxO1/FoxO1升高（0.71±0.03比0.32±0.01， t=-38.81， P<0.05），光镜及电镜显示肾小球、基底膜及足细胞结构损伤。Res组与DM组相比，肌酐、尿素氮、24 h尿蛋白降低（ t=30.89、16.39、49.64，均 P<0.05），SIRT1、LC3Ⅱ、nephrin及podocin表达增高，P62表达减少（均 P<0.05），p-FoxO1/FoxO1降低（0.42±0.01比0.71±0.03， t=27.47， P<0.05），光、电镜显示以上损伤减轻。 结论:白藜芦醇通过激活SIRT1/FoxO1通路提高肾脏自噬水平，对糖尿病小鼠肾脏足细胞起保护作用。

目的 观察维甲酸相关孤核受体α(RORα)过表达病毒载体尾静脉注射对多柔比星(DOX)诱导小鼠心脏毒性(DIC)的影响,并探讨其可能的机制.方法 将80只雄性C57BL/6小鼠随机分为Con组、DIC组、DIC+RORα组、DIC+RORα+EX527组,每组20只.DIC+RORα组和DIC+RORα+EX527组经尾静脉注射过表达RORα基因的腺相关病毒9型(AAV9)载体,DIC组经尾静脉注射AAV9空白对照载体;AAV9载体注射3周后,除Con组外均采用尾静脉注射DOX的方法建立DIC小鼠模型;DIC+RORα+EX527组每次DOX注射后腹腔注射沉默信息调节因子(SIRT1)信号通路特异性阻断剂EX527.各组分组处理后4周,经胸超声心动图检查测算左心室射血分数(LVEF)和左心室缩短分数(LVFS),处死后取眼眶血和心肌组织.采用HE染色观察心肌组织病理情况,ELISA法检测血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)、肌钙蛋白I(cTnI)、白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α),TUNEL染色后计算细胞凋亡率,二氢乙锭法检测心肌组织活性氧(ROS)表达,比色法检测心肌组织超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)表达,免疫荧光染色观察心肌组织巨噬细胞浸润和NF-κB p65表达,Western blotting法检测心肌组织cleaved Caspase-3、RORα、SIRT1蛋白表达并计算Ac-NF-κB p65/NF-κB p65、Ac-Foxo1/Foxo1,实时荧光定量PCR法检测心肌组织RORα、SIRT1 mRNA表达.结果 与Con组比较,DIC组小鼠心肌纤维排列紊乱且断裂明显,心肌细胞空泡化显著;与DIC组、DIC+RORα+EX527组比较,DIC+RORα组小鼠心肌纤维断裂及心肌细胞空泡化均减轻.LVEF、LVFS及心肌组织SOD、GSH-Px:Con组>DIC+RORα组>DIC组、DIC+RORα+EX527组(P均<0.05).血清CK-MB、LDH、cTnI、IL-1β、IL-6、TNF-α及心肌组织细胞凋亡率、cleaved Caspase-3蛋白、ROS、MDA、巨噬细胞浸润、NF-κB p65:Con组DIC组(P均<0.05).SIRT1 mRNA及蛋白:Con组、DIC+RORα组>DIC组、DIC+RORα+EX527组(P均<0.05).Ac-Foxo1/Foxo1、Ac-NF-κB p65/NF-κB p65:Con组、DIC+RORα组

糖尿病肾病(DKD)是终末期肾脏病的主要原因.沉默信息调节因子1(SIRT1)蛋白在糖尿病肾病的发生发展过程中发挥关键作用.中药干预DKD表现出独特优势.本文围绕SIRT1信号通路及主要分子调节机制,梳理中药调控SIRT1在足细胞、氧化应激和炎症反应中作用,发现中药单体及中药复方可通过靶向SIRT1调控PGC-1α信号通路、Nrf2/ARE信号通路、AMPK信号通路、NF-κB p65信号通路及PI3K/AKT/FoxO1信号通路,发挥抑制细胞凋亡、改善线粒体自噬、抑制炎症反应等药理作用,从而干预DKD,可为相关研究提供参考.

目的:探讨沉默信息调节因子1(SIRT1)/叉头框蛋白O1(FOXO1)信号通路调控铁死亡对多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠卵巢颗粒细胞的影响.方法:将30只雌性SD大鼠分为对照组(皮下注射豆油)和PCOS组(皮下注射脱氢表雄酮).将对照组和PCOS组大鼠分离得到的卵巢颗粒细胞分为对照组、PCOS组,取一半PCOS组卵巢颗粒细胞为过表达SIRT1组(20 μmol/L SIRT1激活剂SRT 2183干预).RT-qPCR及Western blot检测细胞中SIRT1、FOXO1、溶质载体家族7成员11(SLC7A11)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、Bcl-2关联X蛋白(Bax)、半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)mRNA及蛋白表达.Hoechst染色检测细胞活性氧(ROS)及线粒体活性氧(mtROS)水平.ELISA检测细胞中谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)、Fe2+、卵泡刺激素(FSH)、睾酮(T)、黄体生成素(LH)水平.流式细胞术检测细胞凋亡情况.结果:与对照组比较,PCOS组卵巢颗粒细胞中SIRT1、FOXO1、SLC7A11、GPX4、Bcl-2 mRNA 及蛋白表达和 GSH、FSH 水平降低,Bax、Caspase-3 mRNA 及蛋白表达和MDA、ROS、mtROS、Fe2+、T、LH水平升高,卵巢颗粒细胞凋亡率增加(均P＜0.05).与PCOS组比较,过表达SIRT1组卵巢颗粒细胞中SIRT1、FOXO1、SLC7A11、GPX4、Bcl-2 mRNA及蛋白表达和GSH、FSH水平升高,Bax、Caspase-3 mRNA及蛋白表达和MDA、ROS、mtROS、Fe2+、T、LH水平降低.卵巢颗粒细胞凋亡率减少(均P＜0.05).结论:SIRT1/FOXO1通路在PCOS卵巢颗粒细胞中下调,激活该通路可能通过下调铁死亡抑制PCOS卵巢颗粒细胞凋亡.

目的 明确哺乳期营养过剩影响小鼠肥胖过程中,腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)/去乙酰化酶1(sirtuin1,SIRT1)-叉头框蛋白O1(forkhead box protein O1,FOXO1)信号通路蛋白翻译后修饰水平防治肥胖的新靶标及新策略.方法 C57BL/6刚出生雄性小鼠随机分为对照组(control,CON,8只/乳母)和小窝组(small litter control group,SC,5只/乳母),3周断乳后给与标准膳食喂养6周至成年,CON组和SC组小鼠分别被分为两组:CON和高脂对照组(high fat control,HFC),SC和小窝HFC(small litter HFC,SHFC)组.CON和SC组小鼠继续食用标准膳食,HFC和SHFC组小鼠高脂膳食诱导肥胖7周.分期处死小鼠取材,酶法测量血脂,Western blot法检测蛋白的表达,苏木精-伊红染色法进行病理学观察.结果 与CON或HFC相比,各阶段SC或SHFC组的体脂、体重、血清甘油三酯水平均升高(P＜0.05),高密度脂蛋白胆固醇水平降低(P＜0.05);16周末SHFC组小鼠肝细胞脂肪变性明显高于SC组.与CON或HFC、SC组比较,SC或SHFC组SIRT1、磷酸化AMPK蛋白持续降低(P＜0.05),乙酰化FOXO1蛋白持续升高(P＜0.05).结论 哺乳期营养过剩可通过AMPK/SIRT1-FOXO1信号通路的表观遗传学机制,持续降低AMPK蛋白的磷酸化,升高FOXO1蛋白的乙酰化,导致脂代谢紊乱,体脂积蓄和肥胖.

目的 探讨姜黄素(curcumin)调控沉默信息调节因子 1(silent mating-type information regulation 2 homolog 1,SIRT1)/叉头盒蛋白O1(forkhead box protein O1,FoxO1)信号通路防控非酒精性脂肪肝(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)的作用及机制.方法 采用脂肪酸诱导HepG2 细胞 24 h建立NAFLD体外模型,油红O染色后光镜下观察细胞内脂肪变性,透射电镜观察细胞内自噬体形成,比色法检测细胞内总胆固醇(total cholesterol,TC)、甘油三酯(triglyceride,TG)含量,免疫印迹法检测细胞内沉默信息调节因子 1(silent mating type information regulation 2 homolog 1,SIRT1)、乙酰化叉头盒蛋白O1(acetylated forkhead box protein O1,AC-FoxO1)、微管相关蛋白 1 轻链 3(microtubule-associated protein 1 light chain 3,LC3)、选择性自噬接头蛋白 1(sequestosome 1,SQSTM1/P62)、自噬相关蛋白 7(autophagy related protein 7,ATG7)蛋白质表达,免疫荧光观察细胞内SIRT1 和FoxO1 蛋白质共定位.结果 姜黄素可改善细胞内脂肪变性,自噬体增加,显著降低 TC、TG 含量及 AC-FoxO1、P62 蛋白质表达(P＜0.01),显著升高 SIRT1、ATG7 蛋白质表达及 LC3-Ⅱ/LC3-I比值(P＜0.01).干扰 SIRT1 表达显著影响了姜黄素对细胞的保护作用及相关蛋白质的调控(P＜0.05 或P＜0.01);姜黄素通过激活SIRT1,增强细胞中FoxO1 核定位.干扰SIRT1 表达,FoxOl大量迁入细胞质区,SIRT1 和FoxOl共定位减少.结论 姜黄素通过激活SIRT1 促进FoxO1 脱乙酰化,诱导自噬,改善肝细胞脂肪变性.

白藜芦醇(Resveratrol,RES)具有多种药理活性,是一种天然植物抗毒素多酚,主要通过Sirt1 蛋白介导FoxO3a蛋白、NF-κB/RANKL信号,Wnt/β-catenin、PI3K/AKT、MAPK信号通路、雌激素受体、AMPK、氧化应激反应影响成骨细胞分化,抑制破骨细胞生成,改善骨关节组织结构及机体骨质流失,改善骨质疏松,保护骨骼健康.白藜芦醇增加了老年人和绝经后人群的骨骼生长,减少骨质流失,未来可能成为治疗骨质疏松的新型潜力药物.该文通过CNKI、中华医学期刊全文数据库、万方数据库、PubMed、Web of Science数据库检索最近10 年关于RES防治OP的文献报道,多方面对RES防治OP的作用机制作一综述,以期为白藜芦醇在未来临床中的应用提供新的思路和方向.