目的:探讨多色流式细胞术（MFC）监测微小残留病变（MRD）在 CD19嵌合抗原受体T细胞（CD19-CAR-T 细胞）治疗后桥接异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）治疗难治、复发急性B淋巴细胞白血病（r/r B-ALL）患者过程中的意义和价值。方法:收集2019年1月至7月河北燕达陆道培医院收治的r/r B-ALL患者37例，年龄15（6，19）岁，其中男24例，女13例，均为经CD19-CAR-T细胞免疫治疗桥接allo-HSCT治疗的患者。采用多色流式细胞技术以胞浆CD79a抗体设B细胞门监测患者在CART治疗前第0天、治疗后第15天、第28天及移植后骨髓、脑脊液样本、组织样本的MRD值评估肿瘤细胞残存以及肿瘤累及位置，监测CD19阳性B细胞在移植前恢复情况及CD19阳性B细胞恢复距离CAR-T细胞回输天数评估CAR-T细胞实际杀伤效果，同时进行患者各时间点外周血CAR-T细胞计数等。采用Kaplan-Meier法及Log-rank检验分析单因素累积生存差异。结果:（1）37例患者中8例死亡，29例存活。5例患者移植后复发，其中复发患者4例死亡，1例存活。（2）死亡组患者在CAR-T细胞免疫治疗后到桥接移植前MFC-MRD阴性缓解率为5/8，低于存活组28/29（ χ 2=7.540， P=0.006）；回输第15天阴性缓解率为3/8，低于存活组24/29（ χ 2=6.512， P=0.011）；回输第28天阴性缓解率为3/8，低于存活组26/29（ χ 2=10.065， P=0.002）。而死亡组伴髓外MFC-MRD阳性肿瘤浸润率为（7/8）高于存活组（14/29）（ χ 2=3.931， P=0.047）。CAR-T细胞免疫治疗后，死亡组CD19阳性细胞恢复时间即CAR-T细胞可对CD19阳性细胞杀伤时间42.00（30.00，49.00）d短于生存组55.00（41.50，73.50）d（ Z=0.022， P=0.020）。 结论:利用多色流式细胞术检测B-ALL患者微小残留病变发现，在CD19-CAR-T细胞免疫治疗后到桥接allo-HSCT前、回输第15天、回输第28天等时间点，阳性结果均提示预后不良。这一结果为临床进行对症治疗提供一定指导意义。

T淋巴细胞受体(TCRs)在抗原识别免疫应答中作用重要,其多样性与宿主免疫反应及肿瘤预后判断密切相关.目的:采用高通量测序技术研究前列腺癌组织和癌旁组织中T细胞受体(TCR)克隆多样性及其克隆序列.方法:收集5例PC患者的癌组织和癌旁组织,提取DNA后经多重PCR技术对TCR β链CDR3区进行扩增.用Illumina MiSeq进行测序,经过数据处理和比对分析,比较前列腺癌组织TCR CDR3组库的组成特征.结果:前列腺癌组织具有更高程度的克隆百分比和较高的高度扩增克隆比HEC(HEC:频率＞样本总读数的0.5％的TCR克隆),并获得了24对在癌组织样本中差异表达的V-J基因组合、16对在癌旁组织样本中差异表达的V-J基因组合.结论:前列腺癌组织与癌旁组织均存在差异性的V-J基因组合以及高克隆表达的HEC,其中癌组织样品具有更高的HEC.PC发生发展对免疫学研究提供了新的数据,对PC免疫监视、T细胞受体变异标志等研究提供了参考,对以后继续研究打下了基础.

在乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染期间可见到广泛的免疫介导的肝损伤.HBV免疫清除的失败从而导致慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB),并大大增加肝硬化和肝细胞癌的风险.T淋巴细胞在HBV感染中的免疫反应起重要作用,尤其是调节性T细胞(regulatoryT cell,Treg)和辅助性T细胞17(helper Tcell 17,Thl7)失衡的问题,二者的平衡失调是HBV持续感染与肝脏炎性损伤的重要机制.为了更好地揭示潜在的机制,在本综述中,我们系统地回顾了Treg和Thl7,讨论了在HBV感染后Treg与Thl7两者之间的关系,并对特异性转录因子维甲酸相关核孤儿受体γt(retinoid-related orphan nuclear receptor γt,RORγt)和叉头/翅膀状螺旋转录因子3(forkhead/winged helix family transcription factor 3,Foxp3)两者之间的变化,随着近几年对HBV免疫靶向治疗研究的不断深入,Foxp3/Treg与RORγt/Thl7的平衡似乎对HBV的感染至关重要,以此为契机可以为CHB的治疗提供新的思路.

采用单克隆抗体及补体纯化正常人外周血T淋巴细胞，对纯化后富含表型为CD 3+、CD 4-、CD 8-T细胞的群体细胞，以有限稀释法进行克隆化培养，以 51Cr释放法和ABC法对细胞克隆进行细胞毒检测及表型分析。20个克隆中15个克隆为具有CD 3+、CD 4-、CD 8-、WT 31-和Anti-TCRδ 1+表型的TCRγ/δT细胞克隆，其中14个克隆在效靶比例为3：1时即体现较强大的LAK活性。8个具有LAK活性的TCRγ/δT细胞克隆在96孔板中采用部分细胞反复植入法进行实验性扩增，至38~45天细胞数均扩增至1 ×10 9以上，并保持其细胞毒性。结果表明：TCRγ/δT淋巴细胞可被纯化、克隆化及扩增，多数TCRγ/δT细胞克隆具有强大的LAK活性，有较大的研究及应用价值。

检测2型糖尿病(type 2 diabetes,D2M)大鼠主动脉组织中Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白以及晚期糖基化终末产物受体(receptor for advanced glycation end product,RAGE)表达水平,分析RAGE对Wnt/β-catenin信号通路的调节作用以及对大鼠主动脉病变的影响;检测血脂相关指标水平,分析血脂水平与糖尿病之间的关系.构建D2M大鼠模型,在第2、4、8、12周随机分组大鼠模型并设置空白对照组,检测空腹血糖、血清总胆固醇(serum total cholesterol,TC)、甘油三酯(triglyceride,TG)、高、低密度脂蛋白胆固醇(high density lipoprotein-chohsterol,HDL-C) (low density lipoprotein-cholesterol,LDL-C)、胰岛素等指标,HE染色观察主动脉组织病理结构;RT-PCR、Western blotting检测主动脉组织Wnt2、β-catenin、T 细胞因子4(Tcell factor 4,TCF4)、RAGE等相关指标mRNA及蛋白表达情况.结果 显示,与空白对照组相比,D2M大鼠TC、TG、LDL-C水平显著升高,HDL-C水平显著下降;D2M大鼠不同时间段与第2周相比,TC、TG、LDL-C水平显著升高,HDL-C水平显著下降(P＜0.01,P＜0.05).HE染色显示D2M大鼠主动脉局部内皮细胞发生不同程度的空泡变性或坏死.D2M大鼠在第2周与12 w内主动脉组织Wnt2和β-catenin mRNA及蛋白水平与空白对照组相比差异有统计学意义(P＜0.01),8 w后维持在较高水平;TCF4、RAGE水平较空白对照组持续上升(P＜0.05);分泌型卷曲相关蛋白2(secreted frizzled-related protein2,sFRP2)水平较对照组持续下降(P＜0.01).由此,RAGE通过调节Wnt/β-catenin信号通路影响D2M大鼠主动脉相关蛋白表达,可能对相关主动脉病变有保护作用.

T细胞受体(Tcell receptor,TCR)是T细胞识别抗原和诱导免疫应答的基础.在自身免疫病状态下,T细胞根据疾病特异性抗原可产生相应的特异性TCR库克隆扩增.通过高通量分子测序技术检测TCR序列,找出疾病状态下和健康人中TCR库的差异,可进一步探索疾病的发病机制,并为进一步通过诱导免疫耐受干预疾病的发生发展提供了可能.此文概述了近5年来TCR测序和自身免疫病之间的原始研究,并对相关研究进展进行了总结.