目的:探讨粉防己碱(TET)对胃癌耐药细胞锌指蛋白139(ZNF139)、多耐药基因1(MDR1)及谷胱甘肽S转移酶-π( GST-π) mRNA的影响.方法:选取胃癌细胞SGC7901 以及胃癌耐阿霉素细胞SGC7901/ADR,采用逆转录-聚合酶链反应和蛋白质印迹法检测两种细胞 ZNF139、MDR1、GST-πmRNA及蛋白表达,同时检测2.0 mg· ml-1TET 处理前后SGC7901/ADR 细胞ZNF139、MDR1、GST-π mRNA 及蛋白表达.结果:SGC7901/ADR细胞ZNF139、MDR1、GST-πmRNA相对表达量明显高于SGC7901细胞(P<0.05);SGC7901/ADR细胞ZNF139、MDR1、GST-π蛋白相对表达量明显高于SGC7901细胞(P<0.05);TET处理后SGC7901/ADR细胞ZNF139、MDR1、GST-πmRNA及蛋白相对表达量均较处理前明显降低(P<0.05).结论:TET能下调胃癌耐药细胞ZNF139、MDR1、GST-πmRNA和蛋白表达水平,从而在逆转胃癌多药耐药特性方面有重要作用.

目的 探讨锌指蛋白ZNF139在骨肉瘤细胞和组织中表达,及对骨肉瘤细胞143B增殖和转移的影响,并初步探讨其作用机制.方法 通过qRT-PCR和免疫蛋白印迹实验分析ZNF139在骨肉瘤细胞系和组织中的相对表达;转染pcDNA3.1(+)-ZNF139质粒(实验组)和pcDNA3.1(+)-Vector质粒(对照组)至143B细胞系中,免疫蛋白印迹实验验证ZNF139的过表达;通过CCK 8实验和细胞克隆实验分析ZNF139对细胞增殖的影响;transwell细胞迁移和侵袭实验分析ZNF139对细胞迁移和侵袭的影响;流式细胞周期和凋亡实验验证ZNF139过表达对细胞增殖的作用机制;免疫蛋白印迹实验验证ZNF139基因对p53信号通路的影响.结果 与正常成骨细胞和组织相比,ZNF139在骨肉瘤细胞和组织中的表达明显下调(P＜0.001),差异具有统计学意义;与对照组相比(100％),转染后24、48、72 h细胞活性受到明显的抑制(P＜0.05),实验组细胞克隆形成明显受到抑制(43.44％±5.55％)(P＜0.05);过表达ZNF139后细胞迁移和侵袭能力明显受到抑制(P＜0.001);流式细胞实验发现,实验组细胞明显阻滞于G1期(P＜0.001),同时实验组中细胞凋亡率明显升高(P＜0.001);过表达ZNF139后通过促进p53的表达及下游信号转导.结论 ZNF139在人骨肉瘤瘤组织中表达下调,通过促进p53信号通路参与骨肉瘤的进展.

目的 研究锌指蛋白139(ZNF139)、血管内皮生长因子(VEGF)在胃癌原发灶和区域淋巴结转移灶中的表达差异及其临床意义.方法 选择2019年2月至2020年8月在西安市长安区医院就诊的78例胃癌患者,共分离出78份癌组织和42份转移淋巴结组织,记录患者临床病理学特征.通过免疫组化法检测患者原发灶和区域淋巴结转移灶中ZNF139、VEGF表达率,采用Spearman相关性分析原发灶中ZNF139、VEGF表达与临床病理学特征的关系.结果 胃癌区域淋巴结转移灶ZNF139和VEGF表达率分别为78.57％、73.81％,明显高于其原发灶表达率的53.85％、50.00％,差异均有统计学意义(P<0.05);胃癌患者原发灶中ZNF139、VEGF表达率在不同肿瘤分化度、不同TNM分期、有无淋巴结转移患者间比较差异均有统计学意义(P<0.05);经Spearman相关性分析结果显示,胃癌患者原发灶中ZNF139、VEGF表达阳性率与肿瘤低分化、TNM高分期、淋巴结转移发生呈正相关(P<0.05).结论 ZNF139、VEGF在区域淋巴结转移灶表达水平较原发灶高,两者表达水平与胃癌病情进展密切相关.

锌指蛋白(Zinc-finger proteins,ZNFs)可能通过调控基因转录、翻译过程,参与肿瘤的发生发展.ZNFs可通过不同的功能性结构域、反式调控原件参与下游靶基因的转录调控,ZNFs可通过招募不同的染色体修饰因子、与不同伙伴蛋白相互作用抑制或促进基因的转录.乙酰化、磷酸化等ZNFs的翻译后修饰可通过影响ZNFs与染色体的结合,参与调控基因的翻译.ZNFs可通过多种途径,促进/抑制肿瘤的发生发展.ZKSCAN3、ZNF322A及ZNF304等ZNFs可通过促进周期蛋白D2、周期蛋白D1、整合素β1的表达等途径,促进结直肠癌、肺癌及卵巢癌、胃癌等肿瘤细胞的增殖;ZNF139、ZFX、ZEB1、ZNF395等ZNFs的过表达可促进胃癌、肝癌、Ewing瘤等肿瘤的转移和侵袭.ZNF545、ZNF24、ZNF668、ZHX1、ZNF395、Kaiso等ZNFs能够作为肿瘤抑制因子抑制肿瘤的增殖、转移.

目的:探讨ZNF139通过抑制miR-181a-5p表达增加胃癌细胞耐药性的机制.方法:检测ZNF139和miR-181a-5p在胃癌组织和细胞系中的表达情况,ZNF139-siRNA、miR-181a-5p模拟物或pcDNA-ZNF139转染MKN45、MKN45/ADR细胞系.MTT法测定细胞活性,Real-time PCR和Western blot分别检测ZNF139、miR-181a-5p和P-gp、GST-π、MRP-1、Bcl-2、TS和Bax等耐药相关基因mRNA和蛋白表达水平.ChIP和双荧光素酶活性试验验证ZNF139、miR-181a-5p之间的调控作用.结果:ZNF139 mRNA和蛋白相对表达量在胃癌组织和细胞系较癌旁组织升高(P<0.05),miR-181a-5p mRNA相对表达量降低(P<0.05).转染ZNF139-siRNA后,MKN45/ADR细胞中miR-181a-5p mRNA表达升高,化疗药物阿霉素(ADR)、5-氟尿嘧啶(5-FU)、奥沙利铂(L-OHP)处理后,MKN45/ADR细胞存活率降低(P<0.05).MKN45细胞系转染pcDNA-ZNF139后,ZNF139 mRNA和蛋白表达水平升高,miR-181a-5p mRNA表达水平下降,同时细胞对ADR、5-FU、L-OHP的耐药性增强(P<0.05).双荧光素酶活性试验表明,ZNF139抑制了miR-181a-5p启动子的转录活性(P<0.05).抑制ZNF139可降低MKN45/ADR细胞中P-gp、MRP-1、Bcl-2的表达(P<0.05);miR-181a-5p模拟物转染MKN45/ADR细胞后,P-gp、LRP和Bcl-2的表达降低(P<0.05).结论:ZNF139通过抑制-miR-181a-5p诱导胃癌中P-gp、MRP-1和Bcl-2的表达来增加细胞的耐药特性,有望成为防治胃癌细胞耐药的新的策略.

背景:酒精性股骨头坏死与饮酒具有高度的相关性,然而其具体发病机制尚不明确且存在一定的个体差异.目的:构建酒精性股骨头坏死的基因网络图谱,进一步探索酒精性股骨头坏死的潜在发病机制.方法:从广西中医药大学第一附属医院骨二科招募3例酒精性股骨头坏死患者和3名健康志愿者,通过对其外周血进行基因测序筛选具有差异表达的mRNA和lncRNA,通过预测lncRNA-miRNA和miRNA-mRNA的相互作用靶点,使用cytoscape软件构建竞争性内源RNA调控网络.结果 与结论:①通过差异表达分析从酒精性股骨头坏死样本中鉴定出了差异lncRNA 127个、差异mRNA 921个,通过靶基因预测共预测出了205个miRNA及5184个mRNA靶点,最终构建了包含3个lncRNA(SNHG3、MUC19、LINC00476)、5个miRNA(hsa-miR-146b-5p、hsa-miR-139-5p、hsa-miR-126-3p、hsa-miR-193a-3p、hsa-miR-135a-5p)和11个mRNA(PEX5、ACTR3B、CHMP4B、CSMD1、MTRF1、ZNF3、HTR7、NR5A2、SYT14、CASK、ING5)的ceRNA网络,涉及干细胞分化、炎症反应、神经内分泌、基因多态性等多种生物学过程.②结果表明,通过构建竞争性内源网络筛选出了一系列酒精性股骨头坏死潜在的生物标志物,为进一步研究其分子机制及治疗靶点提供了新思路.

目的 探究锌指蛋白139(zinc finger protein 139,ZNF139)在结直肠癌(colorectal cancer)组织中的表达及与临床病理参数及预后的关系.方法 选取2012年5月～2014年6月就诊于恩施土家族苗族自治州中心医院行手术治疗的67例结直肠癌患者的临床病理资料及癌组织、癌旁组织和正常黏膜组织进行研究.采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组织化学法染色检测ZNF139 mRNA及蛋白在结直肠癌组织中的表达情况,分析其与结直肠癌患者临床病理因素的关系;采用K-M生存曲线分析ZNF139表达对预后的影响;采用COX回归模型分析影响结直肠癌患者预后的风险因素.结果 结直肠癌病灶组织中ZNF139 mRNA(0.651±0.130)表达水平明显高于癌旁组织(0.217±0.070)和正常组织(0.201±0.052),差异有统计学意义(t=24.060,24.947,均P=0.001).结直肠癌组织中ZNF139蛋白阳性率(52.24％)明显高于癌旁组织(28.36％)和正常黏膜组织(19.40％),差异均有统计学意义(χ2=7.941,15.711;P=0.005,0.000).结直肠癌组织中ZNF139 mRNA及蛋白表达与肿瘤分化程度、浸润程度、TNM分期和有无淋巴结转移密切相关(t=4.447～10.964,χ2=16.613～35.850,均P<0.01).ZNF139阴性表达组患者5年总体生存率为75.0％,优于阳性组患者的51.4％(Log-rankχ2=3.391,P=0.047).ZNF139表达(HR:2.249,95％CI:1.359～3.712,P=0.003),临床TNM分期(HR:2.016,95％CI:1.230～3.327,P=0.006)和淋巴结转移(HR:2.125,95％CI:1.302～3.469,P=0.002)是影响结直肠癌患者总体预后的独立危险因素.结论 ZNF139在结直肠癌组织中高(阳性)表达,与结直肠癌的分化、浸润、TNM分期和有无淋巴结转移密切相关,是影响结直肠癌患者预后的独立危险因素之一,可作为临床诊断及评估预后的参考指标.

目的:探讨青蒿琥酯通过Toll样受体(TLR)4/核因子κB(NF-κB)信号通路抑制人胃癌裸鼠移植瘤生长及对增殖细胞核抗原(PCNA)和锌指蛋白(ZNF)139表达的影响.方法:40只BALB/c裸鼠接种人胃癌细胞株SGC7901建模,随机分为模型组(0.9％氯化钠溶液)、顺铂组(顺铂4 mg/kg)、青蒿琥酯组(注射用青蒿琥酯100 mg/kg)和联合组(顺铂4 mg/kg+注射用青蒿琥酯100 mg/kg),瘤体内注射给药,1周2次,持续4周.记录治疗期间裸鼠食欲、活动度和精神状态等情况以及肿瘤生长情况;采用苏木精-伊红染色法进行病理检测,噻唑蓝法(MTT)检测原代细胞生长,逆转录聚合酶链反应检测PCNA、ZNF139、TLR4、髓样分化因子(MyD88)和NF-κB mRNA表达水平,蛋白质印迹法检测相对蛋白表达水平.结果:与模型组比较,顺铂组、青蒿琥酯组和联合组平均瘤重明显降低;与顺铂组比较,青蒿琥酯组平均瘤重升高,抑瘤率降低;联合组平均瘤重低于顺铂组和青蒿琥酯组,抑瘤率高于顺铂组和青蒿琥酯组,差异均有统计学意义(P<0.05).培养48 h后,顺铂组、青蒿琥酯组和联合组吸光度(OD)值均低于模型组;联合组OD值低于顺铂组和青蒿琥酯组,抑制率高于顺铂组和青蒿琥酯组,差异均有统计学意义(P<0.05).与模型组比较,顺铂组、青蒿琥酯组和联合组PCNA2、ZNF139、TLR4、MyD88和NF-κB mRNA及相对蛋白表达水平均明显降低;顺铂组PCNA2、ZNF139、TLR4、MyD88和NF-κB mRNA及相对蛋白表达水平明显低于青蒿琥酯组;联合组PCNA2、ZNF139、TLR4、MyD88和NF-κB mRNA及相对蛋白表达水平明显低于顺铂组和青蒿琥酯组,差异均有统计学意义(P<0.05).结论:青蒿琥酯可能通过抑制TLR4/NF-κB信号通路,抑制人胃癌细胞的生长,同时能下调PCNA和ZNF139的表达,影响肿瘤增殖、侵袭和转移.