目的 探究乙酰紫草素对奥沙利铂耐药结肠癌HCT116细胞(HCT116/L-OHP)增殖、侵袭迁移的影响.方法 将HCT116/L-OHP细胞分为空白组、对照组和低、中、高剂量实验组.对照组用10 μmol·L-1奥沙利铂处理细胞;低、中、高剂量实验组分别用1.25、2.50和5.00 μmol·L-1乙酰紫草素和10 μmol·L-1奥沙利铂共同处理细胞;空白组给予常规培养.用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测HCT116/L-OHP细胞增殖情况,用流式细胞仪检测细胞凋亡情况,用Transwell实验法检测细胞迁移和侵袭能力,用蛋白质印迹法检测耐药侵袭相关蛋白P-糖蛋白(P-gp)、基质金属蛋白酶2(MMP2)、核因子κB(NF-κB)和缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)蛋白的表达情况.结果 空白组、对照组和低、中、高剂量实验组的细胞抑制率分别为0、(8.27±0.01)％、(10.53±0.02)％、(34.17±0.01)％和(48.47±0.05)％,细胞凋亡率分别为(0.13±0.02)％、(1.37±1.04)％、(9.73±0.87)％、(26.71±4.26)％和(40.75±4.70)％,侵袭细胞数分别为(130.70±9.81)、(127.10±9.21)、(71.83±3.57)、(28.83±1.87)和(19.63±6.11)个,迁移细胞数分别为(150.50±10.17)、(148.40±8.13)、(94.58±4.09)、(63.98±5.09)和(31.85±5.50)个,P-gp 蛋白相对表达水平分别为 0.91±0.01、0.89±0.02、0.75±0.04、0.61±0.07和0.25±0.03,MMP2蛋白相对表达水平分别为1.24±0.01、1.22±0.02、0.96±0.01、0.53±0.01 和 0.16±0.02,NF-κB-p65蛋白相对表达水平分别为 1.12±0.12、1.07±0.01、0.78±0.01、0.64±0.02 和0.31±0.03,HIF-1α 相对表达水平分别为 0.65±0.04、0.52±0.03、0.41±0.02、0.35±0.03和0.09±0.01.低、中、高剂量实验组的上述指标与空白组比较,在统计学上差异均有统计学意义(均P＜0.05).结论 乙酰紫草素联合奥沙利铂可显著抑制HCT116/L-OHP细胞的增殖、侵袭和迁移,诱导细胞凋亡,其机制可能与抑制P-gp、MMP2的表达及NF-κB/HIF-1α信号活化有关.

目的:探讨乙酰紫草素对人喉癌Hep-2细胞增殖和凋亡的影响及其相关的分子机制。方法:体外培养Hep-2细胞，按照处理因素不同，将实验对象分为时间处理组[以25 μmol/L(近IC 50值)乙酰紫草素分别处理细胞0，3，6，12，24 h)]及浓度处理组(以0、10、20、30、40、50 μmol/L乙酰紫草素处理细胞24 h)，细胞增殖与毒性实验(cell counting Kit-8，CCK-8)检测不同浓度乙酰紫草素对处理不同时间人喉癌HEP-2细胞的杀伤作用；流式细胞术检测乙酰紫草素处理后Hep-2细胞凋亡情况；Western blotting检测细胞凋亡相关蛋白和Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白的表达。 结果:不同浓度(10～50 μmol/L)乙酰紫草素能够以时间和浓度依赖性抑制喉癌Hep-2细胞的增殖；半数抑制浓度为(26.83±2.47) μmol/L；IC 50浓度乙酰紫草素处理Hep-2细胞3、6、12及24 h，细胞凋亡率分别为(15.25±1.74)%，(28.75±2.36)%，(36.51±3.78)%及(43.78±3.69)%，各处理组与对照组(0 h)相比，差异均具有统计学意义( F＝43.58， P<0.05)；乙酰紫草素能够通过上调Bax，Cyt-c，Caspase-3表达( F＝12.67、23.47、9.52, P值均<0.05)，下调Bcl-2，Caspase-9表达( F＝22.29、15.62, P<0.05)来诱导喉癌Hep-2细胞线粒体依赖性凋亡；乙酰紫草素能够降低Wnt1，β-catenin，c-myc和Cyclin D1蛋白的表达( F＝32.67、19.57、13.88、28.14, P值均<0.05)从而有效抑制喉癌Hep-2细胞中的Wnt/β-catenin信号通路。 结论:乙酰紫草素能够有效抑制人喉癌Hep-2细胞增殖，并能够有效诱导Hep-2细胞发生线粒体依赖性凋亡，其具体机制可能是通过调控Wnt/β-catenin信号通路来实现的。

目的:预测分析紫草的质量标志物,为构建和完善紫草的质量标准提供参考.方法:搜索CNKI、pubmed、Web of science、万方等数据库的文献资料,对紫草的化学成分及药理作用进行总结归纳,并从植物亲缘学与化学成分特有性证据、传统药性药效、配伍规律、临床新用途和化学成分可测性等方面对其质量标志物(Quality marker,Q-Marker)进行预测分析.结果:紫草中主要含有萘醌类、多糖类、单萜苯酚及黄酮类等多种化学成分,现代药理研究表明紫草具有抗炎、抗肿瘤、保肝护肝和免疫调节等药理作用,并发现紫草传统功效及临床新用途相关的活性成分主要为多糖类及苯丙素类成分,并初步预测紫草素、乙酰紫草素、β-乙酰氧基-异戊酰阿卡宁、异丁酰紫草素、β,β′-二甲基丙烯酰阿卡宁等成分可作为紫草的Q-marker的候选物.结论:初步预测出紫草相关Q-Marker,以期为紫草药材质量的深入研究及综合运用提供参考.

目的:建立同时测定新疆紫草中紫草素、乙酰紫草素、β,β-二甲基丙烯酰紫草素含量的方法.方法:采用反相高效液相色谱法,色谱柱为Kromasil100-5 C18,流动相为乙腈-0. 1％甲酸溶液(80:20,V/V),流速为1. 0 mL/min,检测波长为516 nm,柱温为25℃, 进样量为10μL.结果:紫草素、乙酰紫草素、β,β-二甲基丙烯酰紫草素检测质量浓度线性范围分别为0. 404~10. 100 μg/mL (r=0. 9998)、5. 350~107. 000 μg/mL(r=0. 9996)、2. 035~40. 700 μg/mL(r=0. 9998);定量限分别为0. 40、2. 91、1. 34 μg/mL,检测限分别为0. 12、0. 87、0. 40 μg/mL;精密度、稳定性、重复性试验的RSD＜2. 0％(n=6);加样回收率分别为99. 12％～104. 18％(RSD=1. 85％, n=6)、96. 51％~100. 21 ％(RSD=1. 43％, n=6)、98. 11％~102. 51 ％(RSD=1. 42％, n=6).结论:该方法操作简便,精密度、稳定性、重复性好,可用于新疆紫草中紫草素、乙酰紫草素、β,β-二甲基丙烯酰紫草素含量的同时测定.

目的:探究乙酰紫草素诱导急性髓系白血病HL-60 细胞发生铁死亡的作用及分子机制.方法:采用1 μg/mL、2 μg/mL、4 μg/mL和8 μg/mL的乙酰紫草素干预HL-60 细胞24h和48 h,CCK-8 实验检测乙酰紫草素对HL-60 细胞增殖活力的影响;Western blot检测铁死亡相关蛋白[转录调节因子p53、胱氨酸/谷氨酸反向转运体(XCT)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、膜蛋白转铁蛋白受体1(TFR1/CD71)、铁蛋白重链1(FTH1)]的表达水平;采用GSH/GSSG检测试剂盒检测不同浓度乙酰紫草素干预HL-60 细胞24 h后细胞内GSH、GSSG的含量变化;采用 4 μg/mL的乙酰紫草素和 0.1 μmol/L细胞铁死亡抑制剂(Fer-rostatin-1,Fer-1)共同干预HL-60 细胞24 h,Western blot检测铁死亡相关蛋白p53、XCT、GPX4、CD71、FTH1 的表达水平.结果:与对照组和DMSO组相比,不同浓度的乙酰紫草素对HL-60 细胞的增殖均具有较强的抑制作用;乙酰紫草素显著升高p53 和CD71 的表达水平,显著降低XCT、GPX4 和FTH1 的表达水平,其中4 μg/mL乙酰紫草素干预HL-60 细胞 24 h,各蛋白表达水平变化最明显;乙酰紫草素显著减少GSH的含量(P<0.000 1),显著提高GSSG/GSH的比值(P<0.000 1);Fer-1 将显著升高的p53 和CD71以及显著降低的XCT、GPX4 和FTH1 的表达水平逆转.结论:乙酰紫草素一方面可能通过上调p53 的表达,抑制XCT的表达,减少GSH含量,进而抑制GPX4 的表达,促进HL-60 细胞发生铁死亡;另一方面通过上调CD71(TFR1)的表达,下调FTH1 的表达,从而影响HL-60 细胞内铁稳态促进铁死亡的发生.