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circ_0001955靶向miR-149对前列腺癌DU145细胞系放射敏感性的实验研究
编辑人员丨4天前
目的:探讨circ_0001955对前列腺癌DU145细胞系放射敏感性的影响及分子机制。方法:将si-con、si-circ_0001955、miR-con、miR-149转染至DU145细胞中,分别记为si-con、si-circ_0001955、miR-con、miR-149组;将miR-149与pc-circ_0001955共转染至DU145细胞记为miR-149+pc-circ_0001955组,以未经任何处理的细胞作为空白对照组。实时荧光定量PCR检测circ_0001955和miR-149表达水平;MTT检测细胞活力;流式细胞仪检测细胞凋亡;Transwell检测细胞迁移和侵袭;蛋白质印迹法检测MMP-2、MMP-9、Cleaved caspase-3、Cleaved caspase-9、γ-H 2AX蛋白表达;细胞克隆形成实验检测细胞放射敏感性;双荧光素酶报告实验验证circ_0001955和miR-149的靶向关系。 结果:细胞中circ_0001955高表达,miR-149低表达。沉默circ_0001955或过表达miR-149后细胞活性、迁移和侵袭数降低,MMP-2、MMP-9表达水平降低,Cleaved caspase-3、Cleaved caspase-9表达水平升高,细胞凋亡率升高( P<0.05)。4 Gy X线照射后细胞中γ-H 2AX表达水平升高,细胞存活分数降低,敏感性比1.38。circ_0001955靶向调控miR-149,同时过表达circ_0001955和miR-149后细胞增殖活性、迁移和侵袭细胞数升高,细胞凋亡率、细胞存活分数升高,敏感性比0.72。 结论:沉默circ_0001955靶向上调miR-149抑制DU145细胞增殖、迁移、侵袭,诱导细胞周期阻滞,诱导细胞凋亡和增加细胞放射敏感性。
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编辑人员丨4天前
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circ_0001955/miR-188-3p轴影响肺癌细胞增殖、迁移和凋亡的分子机制研究
编辑人员丨2023/8/5
目的 探讨circ_0001955对肺癌细胞恶性行为的影响及可能机制.方法 RT-qPCR检测41例肺癌组织及癌旁组织中circ_0001955和miR-188-3p表达,分析肺癌组织中circ_0001955和miR-188-3p表达的相关性.体外培养肺癌细胞A549,双荧光素酶报告基因实验验证A549细胞中circ_0001955和miR-188-3p调控关系.构建干扰si-circ_0001955或过表达miR-188-3p的A549细胞,用CCK-8法和克隆形成实验、划痕实验、流式细胞术及蛋白质印迹法分别检测细胞增殖、迁移、凋亡及细胞中Bax和Bcl-2蛋白表达.结果 与癌旁组织比较,肺癌组织中circ_0001955表达升高(P<0.05),miR-188-3p表达降低(P<0.05).肺癌组织中circ_0001955和miR-188-3p的表达呈负相关(r=-0.978,P<0.05).circ_0001955可靶向结合miR-188-3p,且干扰circ_0001955促进A549细胞中miR-188-3p表达.干扰circ_0001955或过表达miR-188-3p降低了A549细胞集落形成数、划痕愈合率及细胞中Bcl-2蛋白表达(P<0.05),提高了细胞增殖抑制率、凋亡率及Bax蛋白表达(P<0.05).干扰miR-188-3p逆转干扰circ_0001955对A549细胞增殖、迁移和凋亡的影响.结论 干扰circ_0001955可能通过上调miR-188-3p阻碍肺癌细胞增殖和迁移,并促进细胞凋亡.
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编辑人员丨2023/8/5
