目的:探讨长链非编码RNA微小RNA(miR)-17-92a-1基因簇宿主基因(MIR17HG)对耐奥沙利铂(L-OHP)结直肠癌细胞株SW480/L-OHP的调控及机制。方法:实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)测定MIR17HG含量。SW480/L-OHP中构建MIR17HG敲减组(sh-MIR17HG)和对照组(sh-NC)。细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞活性，流式细胞术检测凋亡。荧光素酶报告实验和蛋白质印迹法检测TOP/FOP比值和β-连环蛋白(β-catenin)等分子表达。CHIR99021处理细胞后检测细胞凋亡率。应用SPSS 20.0软件进行统计分析。结果:SW480/L-OHP中MIR17HG含量高于SW480(9.84±0.69比2.22±0.47， t＝15.893， P<0.01)。L-OHP刺激后sh-MIR17HG组细胞活性低于sh-NC组(0.715±0.024比0.877±0.015， t＝-9.802， P<0.01)，凋亡率高于sh-NC组[(25.65±2.85)%比(7.38±0.89)%， t＝10.592， P<0.01]。SW480/L-OHP细胞的TOP/FOP比值高于SW480细胞(9.51±1.13比3.67±0.80， t＝7.320， P<0.01)。sh-MIR17HG组TOP/FOP比值低于sh-NC组(2.85±0.87比9.17±1.76， t＝-5.564， P<0.01)，β-catenin水平也低于sh-NC组(8.95±2.07比26.09±2.61， t＝-8.908， P<0.01)。CHIR99021刺激组凋亡率低于未刺激组[(13.91±1.69)%比(22.99±3.13)%， t＝-4.426， P<0.05]。 结论:SW480/L-OHP中高表达的MIR17HG可激活Wnt/β-catenin通路，进而促进结直肠癌细胞对L-OHP的耐药性。

目的:探讨miR-20a-5p对神经母细胞瘤（neuroblastoma，NB）细胞系SH-SY5Y增殖、侵袭和迁移的影响及其调控机制。方法:将miR-20a-5p过表达及抑制基因分别转染至SH-SY5Y细胞，根据实验需要分为miR-20a-5p过表达组、NC过表达组、miR-20a-5p抑制组、NC抑制组，通过体外实验研究miR-20a-5p对NB细胞系SH-SY5Y的增殖、侵袭和迁移的影响。根据生物信息学预测软件初步预测NFKBIB（IκB β）可能为miR-20a-5p的下游靶基因，运用双荧光素酶报告实验、定量反转录PCR (qRT-PCR）、蛋白质印迹法（Western blot）验证miR-20a-5p靶向调控NFKBIB基因。通过细胞集落形成实验、CCK-8实验、细胞侵袭实验、细胞划痕实验、流式细胞术研究miR-20a-5p在SH-SY5Y细胞中增殖、侵袭和迁移的生物学功能。在mRNA水平上，运用qRT-PCR检测每组细胞中NFKBIB mRNA的表达量；用Western blot检测在每组细胞中NFKBIB、NF-κB蛋白的表达量。结果:细胞集落形成实验显示miR-20a-5p过表达组细胞集落形成数为（146±16）个，较NC过表达组（39±1）个显著增高，差异有统计学意义（ P<0. 01）。CCK-8实验结果显示miR-20a-5p过表达组较NC过表达组显著促进SH-SY5Y细胞增殖。细胞侵袭实验结果显示miR-20a-5p过表达组细胞侵袭数量为（117±5）个，较NC过表达组（55±2）个显著增多，差异有统计学意义（ P<0. 001）。细胞划痕实验结果显示miR-20a-5p过表达组细胞愈合率为（0. 56±0. 05）%，NC过表组细胞愈合率为（0. 40±0. 08）%，差异有统计学意义（ P<0. 05）。流式细胞术实验结果显示抑制miR-20a-5p后，SH-SY5Y细胞早期凋亡的细胞数较NC抑制组增多。抑制miR-20a-5p的表达后，上述实验结果与过表达miR-20a-5p时相反，差异均有统计学意义（ P<0. 05）。过表达miR-20a-5p后，qRT-PCR结果显示miR-20a-5p过表达组NFKBIB mRNA表达含量为（0. 36±0. 24），较NC过表达组（1. 00）显著降低；Western blot结果显示miR-20a-5p过表达组NFKBIB表达量为（1. 15±0. 30），较NC过表达组的表达量（1. 92±0. 31）显著降低；NF-κB表达量为（4. 17±0. 45），较NC过表达组的表达量（1. 64±0. 39）显著增加，差异均有统计学意义（ P< 0. 05）。 结论:miR-20a-5p促进NB细胞系SH-SY5Y的增殖、侵袭和迁移能力，可能是通过抑制NFKBIB的表达来激活NF-κB通路，或可作为促进NB细胞增殖、侵袭和迁移的潜在干预靶点。

目的:探讨miRNA-17～92（miR-17～92）基因簇及线粒体融合蛋白2（MFN2）蛋白在子宫内膜癌（EC）中的表达及其临床意义。方法:收集2008年1月至2014年12月山东第一医科大学第二附属医院72例EC、36例子宫内膜非典型增生患者子宫内膜病变组织及22例因子宫颈上皮内瘤变Ⅲ级行全子宫切除术的正常子宫内膜组织；同时收集所有患者蜡块组织。采用实时荧光定量聚合酶链反应检测各组织中miR-17～92表达水平，免疫组织化学SP法检测各蜡块组织中MFN2蛋白定位及表达水平。分析miR-17～92、MFN2蛋白与EC患者临床病理特征的关系；采用Kaplan-Meier法绘制miR-17～92、MFN2不同水平患者生存曲线，并行log-rank检验；应用Cox比例风险回归模型进行多因素生存分析。结果:miR-17～92在EC、非典型增生及正常子宫内膜组织中相对表达量分别为1.49±0.46、1.01±0.30、0.69±0.20；EC组织中miR-17～92的表达水平高于其他子宫内膜组织，差异均有统计学意义（均 P<0.01）。MFN2蛋白在EC、非典型增生、正常子宫内膜组织中的高表达率分别为20.8%（15/72）、39.4%（13/33）、85.0%（17/20）；EC组织中MFN2蛋白高表达率低于其他子宫内膜组织，差异均有统计学意义（均 P<0.012 5）。EC患者中，组织学类型Ⅱ型患者miR-17～92相对表达量高于Ⅰ型患者（ P<0.05），肌层浸润深度≥1/2患者miR-17～92相对表达量高于浸润深度<1/2患者（ P<0.05）；组织学类型Ⅰ型患者MFN2蛋白高表达率高于Ⅱ型患者（ P<0.05），国际妇产科联盟（FIGO）分级Ⅰ级患者MFN2蛋白高表达率高于Ⅱ、Ⅲ级患者（ P<0.05）。Kaplan-Meier生存分析显示，按EC患者miR-17～92中位相对表达量（1.421）分组时，低表达组（36例）中位总生存（OS）时间未达到，高表达组（36例）为36个月（95% CI 32～42个月），两组间OS差异有统计学意义（ P＝0.049）；MFN2蛋白高表达组（15例）中位OS时间未达到，低表达组（57例）为38个月（95% CI 33～41个月），两组间OS差异有统计学意义（ P＝0.046）。多因素Cox回归分析显示，miR-17～92、MFN2表达水平为EC患者生存的独立影响因素（ HR＝3.10，95% CI 1.36～7.07， P＝0.007； HR＝0.30，95% CI 0.09～0.99， P＝0.048）。 结论:EC组织中miR-17～92高表达、MFN2蛋白低表达，二者可能参与了EC的发生、发展，可作为判断EC患者预后的指标。

目的:探究N6-甲基腺苷（N6-methyladenosine，m6A）及其调节因子甲基转移酶3（METTL3）在子宫内膜癌非编码RNA中的作用。方法:定量检测浙江大学医学院附属第二医院临平院区2016年7月至2020年12月妇产科20例子宫内膜癌患者配对的癌和癌旁组织样本m6A及METTL3的表达水平。购自ATCC的HEC-1-A细胞系构建METTL3过表达及敲低的细胞。Western blot检测METTL3高表达和敲低细胞的METTL3、AKT/mTOR中关键分子的磷酸化水平；使用qRT-PCR定量检测METTL3高表达和敲低细胞的mRNA；使用RNA免疫共沉淀检测METTL3过表达及敲低细胞的m6A与其受体DGCR8的结合水平。结果:m6A RNA甲基化定量试剂盒检测结果表明，子宫癌组织中m6A（1.0 ± 0.15）vs（1.7±0.34）（ P<0.01）和METTL3（1.0± 0.13）vs（2.5±0.45）（ P<0.05）水平升高。过表达METTL3的miR-17-92细胞簇中，Western blot及qRT-PCR检测结果表明，METTL3过表达显著增加了pri-miR-17-92上的m6A修饰（ P<0.05），AKT/mTOR途径相关蛋白的磷酸化水平上调。此外，RIP检测结果表明DGCR8与pri-miR-17-92的结合显著提高。 结论:METTL3修饰m6A通过m6A/DGCR8依赖机制促进了pri-miR-1792加工成miR-17-92簇，进而激活了AKT/mTOR途径。

目的:探讨多发性骨髓瘤（MM）患者血浆微小RNA（miR）-17-5p的表达及其对肿瘤发生发展的作用。方法:纳入2013年4月至2018年4月在河南省肿瘤医院血液科就诊的意义未明单克隆丙种球蛋白血症（MGUS）患者、MM患者及20名健康志愿者，采用逆转录聚合酶链反应（qRT-PCR）法检测血浆循环miR-17-5p和骨髓单个核细胞中miR-17-5p的表达量。其中MM组患者分为初诊未治MM（NDMM）组、完全缓解MM（CRMM）组以及复发难治MM（RRMM）组。分析各组miR-17-5p的表达差异；用相关性分析评估NDMM患者的血浆miR-17-5p与血清M蛋白和骨髓浆细胞比例之间的关系；用受试者工作特征（ROC）曲线评估血浆miR-17-5p作为MM诊断相关的分子标志物的可能性；过表达或敲低miR-17-5p的表达后，细胞计数试剂盒（CCK-8）法检测miR-17-5P对MM细胞系增殖的影响，裸鼠皮下成瘤实验体内检测miR-17-5p对MM细胞增殖的影响。结果:纳入MGUS患者10例，其中男6例、女4例。MM患者92例，其中男54例、女38例；MM患者中，NDMM组22例、CRMM组11例、RRMM组59例。NDMM组和RRMM组骨髓单个核细胞中miR-17-5p的表达量高于健康对照组［1.37（0.47，4.87）、2.68（1.02，5.02）比1.00（1.00，1.00），均 P<0.05］，且血浆miR-17-5p的表达水平也高于健康对照组［1.85（0.92，3.51）、2.79（1.22，5.04）比1.00（1.00，1.00），均 P<0.05］；miR-17-5p在KMS-11、RPMI-8226、H929、MM-1R、U266B1等MM细胞系中的表达量均高于健康对照组的骨髓单个核细胞（3.96±0.68、1.58±0.32、3.51±0.55、5.08±0.76、3.22±0.75比1.00±0，均 P<0.05）；血浆miR-17-5p表达与血清M蛋白和骨髓浆细胞比例均呈正相关（ r=0.50， P<0.05； r=0.60， P<0.01）；ROC曲线显示血浆miR-17-5p作为诊断MM的相关分子标志物的特异度为0.591，灵敏度为0.900（ROC曲线下面积=0.74，cut-off值为0.491）；CCK-8结果提示miR-17-5p过表达使RPMI-8226和NCI-H929等MM细胞系72 h的增殖较对照组增高（1.37±0.11比1.07±0.09，2.14±0.09比1.82±0.11，均 P<0.05），miR-17-5p低表达使NCI-H929和MM-1R等MM细胞系72 h的增殖较对照组降低（1.38±0.09比1.83±0.11，1.45±0.10比1.73±0.09，均 P<0.05）。裸鼠皮下成瘤实验提示，miR-17-5p过表达组肿瘤体积大于对照组［（1 865±181）比（1 389±227）mm 3， P<0.05］，miR-17-5p低表达组肿瘤体积小于对照组［（1 006±171）比（1 389±227）mm 3， P<0.05］。 结论:miR-17-5p可能作为MM疾病发展状态相关的血浆分子标志物，在MM细胞系中起癌基因作用。

目的 探究长链非编码RNA(lncRNA)人类微小RNA17簇宿主基因(MIR17HG)调节微小RNA(miR)-214-3p/环指蛋白38(RNF38)信号轴对肝癌细胞恶性生物学行为的影响.方法 收集2022年5月至2023年10月于本院行手术切除的46例肝癌患者的癌组织及癌旁组织,检测lncRNA MIR17HG、miR-214-3p和RNF38的表达.体外培养HepG2、Bel-7402、SMMC-7721、HL-7702细胞,并比较lncRNA MIR17HG、miR-214-3p和RNF38的表达,选择Bel-7402细胞继续研究,随机分为sh-NC组、sh-MIR17HG组、anti-NC组、anti-miR-214-3p组和Bel-7402组.探究各组Bel-7402细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移情况,蛋白质印迹法分析RNF38、半胱天冬酶-3(caspase-3)、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、基质金属蛋白酶-2(MMP2)、基质金属蛋白酶-9(MMP9)蛋白表达,双荧光素酶验证lncRNA MIR17HG与miR-214-3p以及miR-214-3p与RNF38的关系.结果 肝癌组织中lncRNA MIR17HG、RNF38的mRNA表达较高,miR-214-3p的mRNA表达较低,RNF38的蛋白阳性表达率较高(P＜0.05).细胞SMMC-7721、HepG2、Bel-7402 中 lncRNA MIR17HG mRNA、RNF38 mRNA 和 RNF38 蛋白表达高于 HL-7702 细胞,miR-214-3p mRNA 表达低于HL-7702细胞(P＜0.05).与Bel-7402组、sh-NC组比较,sh-MIR17HG组OD450nm值、克隆细胞数、侵袭细胞数、迁移细胞数和 RNF38、MMP2、Bcl-2、MMP9 表达减少,凋亡率和 caspase-3 表达增加(P＜0.05);与 sh-MIR17HG 组、anti-NC 组比较,anti-miR-214-3p组OD450nm值、克隆细胞数、侵袭细胞数、迁移细胞数和RNF38、MMP2、Bcl-2、MMP9表达增加,凋亡率和caspase-3表达减少(P＜0.05).lncRNA MIR17HG 与 miR-214-3p 以及 miR-214-3p 与 RNF38 分别存在靶向关系.miR-214-3p+WT-MIR17HG 组荧光素酶活性低于 miR-NC+WT-MIR17HG 组(P＜0.05),miR-214-3p+WT-RNF38 组荧光素酶活性低于 miR-NC+WT-RNF38组(P＜0.05).结论 lncRNA MIR17HG可能通过调控miR-214-3p/RNF38轴促进肝癌细胞的恶性生物学行为.

目的:探讨温胆汤对急性冠状动脉综合征(acute coronary syndrome,ACS)患者术后焦虑症状和睡眠障碍的影响.方法:选择经皮冠状动脉介入(percutaneous coronary intervention,PCI)术后伴焦虑症状的患者94例为研究对象,采用随机数字表法将患者分为对照组和观察组各47例.对照组予氟哌噻吨美利曲辛治疗,观察组予温胆汤加减治疗,两组均治疗4周.观察两组治疗前后医院焦虑和抑郁量表(hospital anxiety and depression scale,HADS)、匹兹堡睡眠质量指数(Pittsburgh sleep quality index,PSQI)、感知压力量表(perceived stress scale-14,PSS-14)评分及血清5-羟色胺(5-hydroxytryp-tamine,5-HT)、去甲肾上腺素(norepinephrine,NE)、多巴胺(dopamine,DA)、谷氨酸(glutamate,GLU)、γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)和微小核糖核酸17-92(micro RNA-17-92,miR-17-92)mRNA表达水平.结果:治疗后两组HADS-A、HADS-D、PSQI、PSS-14评分和血清GLU表达水平均较治疗前降低(P＜0.05),且观察组上述指标表达水平均低于对照组(P＜0.05);治疗后两组血清5-HT、NE、DA、GABA和miR-17-92 mRNA表达水平均高于治疗前(P＜0.05),且观察组上述指标水平均高于对照组(P＜0.05).结论:温胆汤可减轻ACS患者PCI术后焦虑症患者的不良情绪,改善患者睡眠质量,降低患者压力感知,其作用机制可能与温胆汤调控5-HT、NE和DA能系统功能,调节miR-17-92 mRNA表达水平有关.

目的:研究microRNA-92a(miRNA-92a或miR-92a)在实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠中枢神经系统CD4+T细胞分化中的作用,以及miR-92a通过糖酵解途径调控T淋巴细胞分化的过程,并以哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)为下游关键分子靶点,探讨miR-92a影响EAE病理过程的分子机制.方法:利用C57BL/6J或miR-92a-/-小鼠成功构建EAE模型后,分离脊髓CD4+T细胞体外培养,采用流式细胞术检测1型辅助性T(Th1)细胞1、Th2、Th17和调节性T细胞(Treg)细胞比例,利用Seahorse能量代谢分析仪检测细胞糖酵解水平,利用RT-qPCR检测相关基因变化水平;诱导体外培养的初始CD4+T细胞分化为Th1或Treg细胞,在此基础上调控miR-92a水平并结合糖酵解激动剂或抑制剂,检测细胞分化比例;利用Western Blot检测C57BL/6J或miR-92a-/-小鼠CD4+T细胞中mTOR和磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)表达变化,用质粒转染过表达mTOR后,检测CD4+T细胞糖酵解水平和细胞分化水平.结果:miR-92a可导致EAE后CD4+T细胞分化比例失衡,即Th1和Th17细胞比例增加,Th2和Treg细胞比例减少;miR-92a通过促进糖酵解调控CD4+T细胞分化,抑制糖酵解后促进Treg细胞分化;miR-92a表达的增加能够通过激活mTOR信号通路提高细胞糖酵解水平,从而影响细胞分化.结论:miR-92a通过激活mTOR信号通路促进T淋巴细胞糖酵解,破坏CD4+T细胞分化平衡,从而参与多发性硬化(MS)和EAE的病理过程.

宫颈癌、子宫内膜癌及卵巢癌作为妇科最常见的三大恶性肿瘤,其发病率近年来在各年龄段中呈上升趋势,已严重威胁我国女性健康.尽管多种靶向药物的应用已使该类患者的生存期明显延长,但其仍是一类无法被精准诊断和治疗的疾病.miR-17-92基因簇作为最早被确定为癌基因的微小RNA(micro RNA,miRNA)家族,其作用机制一直被广泛关注.miR-20a是miR-17-92基因簇中的一员,可通过降低或上调表达的方式发挥转录后调控功能,进而影响下游基因通路,调控恶性肿瘤细胞的增殖、侵袭及转移,并最终实现恶性肿瘤的发生及进展.根据目前研究进展,miR-20a在宫颈癌、子宫内膜癌及卵巢癌中表达特异性升高通常与疾病的恶性进展有关,综述miR-20a在妇科常见三大恶性肿瘤发病机制中作用的最新研究.

目的 探讨环氧合酶-2(COX-2)、胃泌素17(G-17)、miR-92a表达及幽门螺杆菌(Hp)感染与结直肠息肉、结直肠癌发生的相关性.方法 选取2021年1月至2022年12月在四川绵阳四○四医院就诊的结直肠息肉患者62例(息肉组),结直肠癌患者48例(肿瘤组),检查两组组织COX-2、外周血G-17、粪便miR-92a表达以及幽门螺旋杆菌感染情况,分析其与结直肠息肉、结直肠癌发生的相关性.结果 肿瘤组COX-2阳性表达率和Hp感染率分别为68.75％和75.00％,明显高于息肉组(P＜0.05);肿瘤组G-17和miR-92a相对表达量分别为(25.56±7.76)pmol/L和(1.94±0.43),明显高于息肉组(P＜0.05);息肉最大直径≥10mm患者COX-2阳性表达率、G-17、miR-92a相对表达量和Hp感染率分别为41.94％、(22.42±5.28)pmol/L、(1.29±0.25)和38.71％,明显高于息肉最大直径＜10mm患者(P＜0.05);息肉多发患者COX-2阳性表达率、G-17、miR-92a相对表达量和Hp感染率分别为45.83％、(23.12±5.14)pmol/L、(1.33±0.23)和54.17％,明显高于息肉单发患者(P＜0.05);多发肿瘤患者G-17和miR-92a相对表达量分别为(30.72±6.00)pmol/L和(2.12±0.33),明显高于单发肿瘤患者(P＜0.05);TNM分期Ⅲ～Ⅳ期患者COX-2阳性表达率、G-17、miR-92a相对表达量和Hp感染率分别为100.00％、(29.60±6.80)pmol/L、(2.15±0.44)和100.00％,明显高于Ⅰ～Ⅱ期患者(P＜0.05);息肉组Hp感染患者COX-2阳性表达率、G-17和miR-92a相对变量分别为56.25％、(23.42±5.65)pmol/L和(1.34±0.21),明显高于无Hp感染患者(P＜0.05);肿瘤组Hp感染患者COX-2阳性表达率、G-17和miR-92a相对变量分别为83.33％、(27.12±5.109)pmol/L和(2.12±0.26),明显高于无Hp感染患者(P＜0.05).结论 COX-2、G-17、miR-92a表达及Hp感染与结直肠息肉、结直肠癌临床特征有关,同时Hp感染可提高COX-2、G-17、miR-92a 表达.