本研究从陕西留坝紫柏山采集的七叶树Aesculus chinensis根和茎中分离出一株具有高产七叶皂苷C的内生真菌,将其编号为EA-LIS80.利用ITS序列分析鉴定其种属并对其形态进行观察;采用紫外-可见分光光度计进行全波长扫描,确定其最大紫外吸收峰;采用HPLC测定七叶皂苷C的产量;采用滤纸片扩散法研究其发酵液提取物的抑菌活性;采用CCK-8法测定提纯后七叶皂苷对肺腺癌A549细胞的增殖抑制率,探究其生物活性.结果显示,该菌株FA-LIS80为曲霉菌属Aspergillus真菌,最大紫外吸收波长为230nm,测得提纯后七叶皂苷C的产量为9.23mg/mL.生物活性实验表明:菌株EA-LIS80的发酵液提取物对大肠杆菌Escherichia coli等4种致病菌有明显的抑菌效果;经CCK-8法测定,提纯后的七叶皂苷对肺腺癌A549细胞的增殖有明显的抑制作用.综上所述,菌株EA-LIS80具有产七叶皂苷活性,尤其是七叶皂苷C的产量较高,且其产生的七叶皂苷具有较高的生物活性,这对于改进七叶皂苷生产模式,提高生产效率具有重要意义,同时对于七叶皂苷C的进一步研究有一定的促进作用.

[目的]探讨马栗树籽提取物(迈之灵)对股骨骨折童龄SD大鼠血清白细胞介素-8(IL-8)、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(T NF-α)水平的影响.[方法]四周龄雄性SD大鼠70只,随机分为迈之灵组20只,云南白药组20只,模型组20只,正常组10只.采用开放性手术横行锯断股骨建造大鼠股骨骨折模型.迈之灵组:迈之灵20 mg/(kg·d)溶于蒸馏水,于制模前3 d至制模后1 d均早、晚各一次注射器胃管注入;云南白药组:云南白药135 mg/(kg·d)溶于蒸馏水,于制模前3 d至制模后1 d均分早、晚各一次注射器胃管注入;模型组:蒸馏水2mL/d制模前3d至制模后1d均分早、晚各一次注射器胃管注入;正常组:无干预喂养.骨折制模后2h、24 h检测迈之灵组、云南白药组、模型组、正常组(10只)血清IL-1β、IL-8、T NF-α水平;术后24 h评估伤口肿胀情况,取骨折部位骨骼肌做组织切片并观察组织形态及中性粒细胞的浸润情况.[结果]模型组伤口软组织肿胀评分为23分,明显高于迈之灵组的7分和云南白药组的8分(P<0.05);而迈之灵组和云南白药组伤口软组织肿胀评分比较差异无统计学意义(P >0.05).骨骼肌形态学:正常组肌纤维形态较一致,肌细胞呈束状平行紧密排列,细胞呈长梭形无肿胀,无中性粒细胞浸润;模型组可见部分肌纤维断裂、肿胀明显,大量中性粒细胞呈弥漫性浸润;迈之灵组及云南白药组肌纤维连续、轻度肿胀,创伤病灶中性粒细胞浸润少,密度明显低于模型组(P <0.05);迈之灵组和云南白药组伤口中性粒细胞浸润无明显差异(P >0.05).迈之灵组、云南白药组、模型组在股骨骨折后2 h、24 h血清IL-1β、IL-8、T NF-α水平较正常组明显升高(P <0.05);但迈之灵组、云南白药组股骨骨折后2 h、24 h血清IL-1β、IL-8、T NF-α值明显低于模型组(P <0.05),而迈之灵组与云南白药组比较差异无统计学意义(P >0.05).[结论]迈之灵能明显降低童龄SD大鼠血清IL-1β、IL-8、T NF-α水平,有助于减轻骨折时炎性细胞因子水平,从而减轻骨折时炎症损伤,发挥抗炎作用.

目的:建立娑罗子药材的高效液相色谱指纹图谱分析方法,检测不同产地娑罗子药材的化学成分,并进行聚类分析,为娑罗子药材的真伪鉴别和质量研究提供依据.方法:采用Agilent ZORBAX SB-C1s色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm),流动相为乙腈-0.2％磷酸水溶液,梯度洗脱;流速1.0 mL· min-1,检测波长220 nm,柱温30℃,进样量为10 μL;采用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2004A)”,对采集的36批娑罗子药材进行指纹图谱分析及相似度评价,并结合药材性状特征探讨品种鉴别方法;运用SPSS 19.0统计学软件对36批药材进行聚类分析.结果:建立了36批不同产地七叶树属植物药材的化学成分指纹图谱,相似度为0.657 ～0.994;将药材分为4大类,其中包括天师栗、七叶树、浙江七叶树以及混淆品种云南七叶树,用对照品指认了2个主要化学成分,分别为七叶皂苷A和七叶皂苷B;聚类分析将36批药材分为4类,与相似度分类结果完全一致.结论:该研究建立了娑罗子药材的HPLC指纹图谱分析方法,为其进一步质量研究提供理论依据.

欧洲七叶树种子隶属无患子目、七叶树科、七叶子属、欧洲七叶树(Aesculus hippocastanum L.)种,为欧洲七叶树的干燥成熟种子.欧洲七叶树种子、树皮、叶作为一种传统草药在欧洲已有数百年的应用历史,可用于解热、痔疮等疾病的治疗,现代研究表明欧洲七叶树以种子中活性成分最多、应用最广.娑罗子为《中华人民共和国药典》收载中药,是七叶树(Aesculus chinensis Bge.)、浙江七叶树(Aesculus Chinensis Bge.var.Chekiangensis(Hu et Fang)Fang)或天师栗(Aesculus Wilso-nii Rehd.)的干燥成熟种子,性温味甘,归肝、胃经,具有疏肝理气、和胃、止痛之功效,可用于肝胃气滞、胸腹胀闷、胃脘疼痛.本文基于英文文献数据库Web of Science(WoS)、PubMed以及中国知网(China National Knowledge Infrastructure,CNKI)通过检索欧洲七叶树种子和娑罗子的相关中、英文文献,从化学成分、药理作用、临床应用等方面对其进行对比总结分析.研究结果显示欧洲七叶树种子中含有皂苷、黄酮、酚类、脂肪酸等化学成分,具有抗炎、抗氧化、抗过敏、抗癌等多种药理作用,临床上多用于慢性静脉功能不全、心血管等疾病;娑罗子中化学成分与欧洲七叶树种子基本一致,也含有皂苷、黄酮等化合物,具有抗炎、胃肠道保护等药理作用,临床上用于脑出血、脑血栓、外伤肿胀等疾病,可见欧洲七叶树种子和娑罗子在药理作用及临床应用方面有所不同,推测其可能的原因是目前2者研究的侧重点不同,或者是2者在某种化学成分上存在一定的差异,具体原因有待于进一步的深入挖掘,本文将为欧洲七叶树种子在中国的引种、药用价值研究以及相关产品开发等方面提供一些参考.

七叶树是七叶树科七叶树属高大乔木,集药用与观赏于一身.七叶树种子是其主要的药用部位,主要有效成分为齐墩果烷型三萜皂苷类化合物七叶皂苷.为了解七叶树三萜化合物生物合成的分子基础,该研究采用Illumina Hi Seq 2000高通量测序获得七叶树种子与花的转录组数据,并对其代谢途径相关基因进行挖掘;使用Trinity软件实现unigene的de novo拼接;并将转录组的测序结果运用KEGG数据库进行注释,从而预测七叶树三萜代谢的具体途径.结果显示七叶树转录组共有2个三萜代谢途径相关数据集,分别为萜类物质前体代谢途径(途径编号为ko00900)和倍半萜与三萜代谢途径(途径编号为ko00909),对应的基因分别有47,27条.进一步根据催化酶与活性产物的总结比较分析发现萜类物质前体代谢途径相关酶共有8种,三萜代谢途径相关酶有3种.该研究首次在七叶树中解析出5条与三萜环化酶对应的基因,它们可能参与β-香树精合成进而形成七叶皂苷.通过种子与花的转录组表达差异分析显示,ko00900和ko00909途径相关的差异基因有33个;相对于花器官,种子中有17个unigenes表达量上调,16个unigenes表达量下调.该研究运用qRT-PCR实验对SQE(Unigene25806),HMGS(Unigene36710),β-AS(Unigene33291)3个差异显著的关键酶基因的表达进行了试验验证,实验结果qRT-PCR结果与转录组数据一致.该研究所发现的七叶树的三萜皂苷合成相关候选基因能对七叶树三萜代谢合成与调控方面提供理论依据.

七叶树属植物广布于世界各地,具有重要的园艺和药用价值.近年来,国内外学者对该属植物的种群遗传多样性、遗传结构和亲缘关系开展了广泛的研究,同时基于分子数据和化石证据探讨了七叶树科植物的生物地理演化历史.与此同时,一些研究集中在七叶树的药用化学成分及药理作用方面,以及相关的生物合成通路基因的挖掘和微生物工程应用.该文对这些前期研究进行全面的综述和总结,并对潜在未解决的问题进行探讨,以期为后续更加深入研究和应用七叶树属植物资源提供参考.

目的 对天师栗(Aesculus wilsonii Rehd.)干燥成熟种子中的黄酮类成分进行分离纯化,以期丰富其物质基础.方法 联合应用多种色谱学及波谱学技术对天师栗干燥成熟种子中的黄酮类化合物进行分离纯化和结构鉴定.结果 从体积分数70％乙醇提取物中分离得到了 12个黄酮类化合物,分别为山柰酚-3-O-[β-D-木糖基-(1→2)]-β-D-葡萄糖苷(1)、山柰酚-3-O-[2-O-β-D-木糖基-6-O-α-L-鼠李糖基]-β-D-葡萄糖苷(2)、槲皮素3-O-α-L-鼠李糖苷(3)、槲皮素-3-O-木糖基(1"→2"')葡萄糖苷(4)、芦丁(5)、槲皮素-3-O-β-(2G-O-β-木糖基-6G-O-α-鼠李糖基)葡萄糖苷(6)、槲皮素-3-O-β-木糖基-(1→2)-β-葡萄糖基-3'-O-β-葡萄糖苷(7)、quercetin-3'-O-β-D-glucopyranosyl-3-O-rutinoside(8)、aescuflavoside(9)、槲皮素-3'-甲氧基-3-O-β-D-芸香糖苷(10)、(-)-表儿茶素-5-O-β-D-葡萄糖苷(11)和2α,3α-环氧-5,7,3',4'-四羟基黄烷-(4β-8)-表儿茶素(12).结论 化合物2、6、8、11和12为首次从七叶树属植物中分离得到.